催乳素测定标准操作规程
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催乳素测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：催乳素测定（缩写PRL）；组合项目申请：女性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2.1 标本采集
2.1.1 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。
2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列标本为不合格标本
2.1.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2 标本保存
2.2.1 接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。
2.2.2 标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定2d，在-20℃最多可保存4周。避免反复冻融。
2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。
2.3 标本采集的注意事项
2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
3 方法原理
采用双抗体夹心酶联免疫发光分析原理。标本中PRL与包被在磁性微粒子上的抗PRL抗体结合，再与液相试剂中碱性磷酸酶标记的抗PRL抗体结合，形成微粒子-羊抗鼠 IgG-鼠McAb-hFSH-羊抗体-ALP夹心型免疫复合物。经磁性分离，洗涤洗去未结合
物质，加入Lumi-phos*530，经碱性磷酸酶的作用产生光子，光子的量与结合于微粒子上的酶结合物的量成正比，由多点校准曲线求得标本中PRL 的浓度。
4 试剂及其他用品
4.1 试剂：Access催乳素测定试剂包，由美国BECKMAN
COULTER公司出品，试剂盒产品号33530。未打开的试剂包保存于2～8℃可稳定至有效期，不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。
4.2 试剂盒组分
4.2.1 微粒子包被珠：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗PRL单克隆抗体复合物的磁性微粒子、含BSA的Tris缓冲液。
4.2.2 液体试剂：碱性磷酸酶标记的抗PRL抗体，含BSA的Tris缓冲液。。
4.2.3 试剂包即开即用，无须特殊准备。
4.3 其他试剂与用品：化学发光底物，清洗缓冲液等。
5 校准品与校准模式
5.1 校准品: 采用Access专用配套催乳素校准液，5个浓度。有校准卡片。校准结果可溯源至第三国际标准84/500。
5.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点。仪器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。
5.3 校准周期：在同一批号试剂使用期间校准曲线有效，但在间隔28d后需要重新校准。每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。
5.4 校准液重建方法：冻干校准液，用1mL蒸馏水复溶，复溶后的校准液于2～8℃保存最长不超过5周，或于-20℃最长保存10周。避免反复冻融。
6 质控品与室内质控规则
6.1 质控品采用自备混合血清。
6.2 质控液重建方法：液态质控液，即开即用，充分颠倒混匀，无需特殊准备。
6.3 质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。
6.4 质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。
6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。
7 适用仪器
美国BECKMAN COULTER公司的DxI 800自动发光免疫分析仪。
8 标本检测步骤
装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 → 标
本测定 → 结果复核 → 报告。
9 主要分析参数
无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本25µl。
10 结果计算
仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以mIU/L或ng/mL表示。换算公式：ng/mL＝mIU/L×0.047
11 检验结果的报告及范围
11.1 结果的报告
11.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
11.2 报告范围：6.36～4240 mIU/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。
12 操作性能
12.1 精密度：批内CV 1.9%～5.6%；批间CV 4.5%～8.1%。
12.2 分析范围：6.36～4240 mIU/L。
12.3 分析灵敏度：6.36 mIU/L。
12.4 方法的有限性及干扰因素：HGH（2.0 mIU/mL）、TSH（200µIU/L）、FSH（400 mIU/Ml）、hCG（250 IU/mL）在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。甘油三脂（56.5mmol/L）、血红蛋白（10g/L）或胆红素（3.42mmol/L）时对试验的干扰少于5%。催乳素的浓度大
于440 000mIU/L时，会出现前带效应。
13 参考范围及医学决定水平 参考范围：男性：56～278 mIU/L
女性：<50岁 71～566 mIU/L
>50岁 58～416 mIU/L
14 临床意义
14.1 催乳素是单链多肽激素，由垂体前叶产生，它的分泌受下丘脑的抑制与释放因子调节。催乳素对于乳汁分泌的激发和维持都有十分重要的作用，哺乳期女性循环中催乳素的浓度会生理性增高。
14.2 高泌乳素血症是男女不孕症或性功能失调的常见原因。血清泌乳素水平升高是垂体功能失调的重要证据。在无月经症和溢乳症患者中泌乳素水平升高也具有诊断意义。
14.3 病理性高催乳素血症主要见于甲状腺功能低下者和肾衰竭者；此外，高催乳素血症已知对两性的生育功能都有损伤，女性可能伴有停经，而男性可能表现为阳萎。
15 结果审核以及分析与相关项目的联系
15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。
15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。
15.3 相关项目：审核与其他女性激素等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。
16 有关引用程序与文件
16.1 DxI 800自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程。
16.2 免疫检验室内质控标准操作程序。
16.3 检验结果审核程序。
16.4 标本送检和接收程序。
17 参考文献
18 本SOP变动程序
任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本SOP作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。
19 本SOP涉及的记录与表单
19.1 剂装载记录表
19.2 质控记录
19.3 失控及失控处理记录
19.4 检验结果审校核记录
