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门冬氨酸氨基移换酶（AST）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆AST浓度测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】 ASTL-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸草酰乙酸+ L-谷氨酸MDH(苹果酸脱氢酶)草酰乙酸+ NADH +H+ L-苹果酸+ NAD+ + H2O【试剂】试剂1（R1）：L-天门冬氨酸试剂2（R2）：α-酮戊二酸试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
2.校准品：DiaSys TruCal U。
3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L DilutiR1 L DilutiR2Sec. ODMethod FirstLMeasuring Firs Last LMeasuring LastANo-Lag-Time: Onboard2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。
3.校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。
校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。
亦可将校准液复溶后分装保存于－20℃冰箱中，每周校准一次或更换试剂批次后进行校准。
上机校准程序：[1]入界面。
[2] 用光标键选欲校准项目，。
⽣化试剂SOP标准操作程序（魅⼒）ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒临床意义：本试剂盒适⽤于体外临床检验，⽤于测定⼈⾎清中丙氨酸氨基转移酶的活⼒。
临床上，有许多疾病会导致⾎清中丙氨酸氨基转移酶活⼒增⾼。
如肝胆类疾病：包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；⼼⾎管疾病：包括⼼肌梗塞、⼼肌炎、脑出⾎等。
⼀些药物和毒物也可以引起ALT活性升⾼：如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。
因此，⾎清丙氨酸氨基转移酶活⼒的测定可⽤于这些致病的诊断和监测，特别是⽤于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测⽅法原理：上海科华⽣物⼯程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采⽤两步法测定：丙氨酸氨基转移酶L-丙氨酸+ α-酮戊⼆酸-----------------------→丙酮酸+ L-⾕氨酸乳酸脱氢酶丙酮酸+ β-NADH + H+---------------→L-乳酸+ H2O + NAD+底物L-丙氨酸和α-酮戊⼆酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,⽣成丙酮酸和L-⾕氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,⽣成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.在⼀定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与⾎清中丙氨酸氨基转移酶活⼒成正⽐。
样本：病⼈准备：应空腹取⾎。
样本类型：新鲜⽆溶⾎现象的⾎清或EDTA抗凝⾎浆。
最少样品量：0.2ml。
样本稳定性：⾎清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使⽤冰冻保存的样本2。
仪器与试剂:仪器：魅⼒1800⽣化分析仪试剂：上海科华⽣物⼯程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒试剂准备：丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即⽤的液体双剂型，⽆需特殊准备。
试验⽤试管的直径在12～16mm。
试剂组份：参见试剂盒内说明书。
注意事项：1.此试剂为体外诊断⽤。
2.试剂有毒，不要⼊⼝，吞下有害，如误服（包括内部接触）应⽴即寻求医疗保护。
天门冬氨酸氨基转移酶测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】日立600全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH ）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH 的氧化，引起在波长340 nm 处吸光度下降，下降速率与血清中AST 活力成正比。
谷氨酸草酰乙酸酮戊二酸天门冬氨酸---L L AST +−−→−+α酮戊二酸苹果酸草酰乙酸-++-−−→−++++αNAD L H NADH MD H二、试剂1.试剂本科使用上海科华生物工程股份有限公司AST 试剂盒，为液体双试剂，各组分如分：R1：Tris 缓冲液、β-NADH 、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶（MEDH ）R2：L-天门冬氨酸、α-酮戊二酸2.校准要求输入理论因数或使用科华生物配套校准品。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
三、操作1.分析参数：详见参数表。
2.操作步骤：签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定1. 实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法，酶偶联反应式为：L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸A S T草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+MDH苹果酸脱氢酶L-苹果酸+NAD++H2O在340nm波长下，监测NADH的氧化速率，即吸光度的下降速率与AST活性呈正比。
2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<10%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定3个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：欧泰克AST测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH7.8 80mmol/LL-天门冬氨酸240mmol/LMDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/LLDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/La-酮戊二酸12mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用罗氏公司提供的复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理本试剂以国际临床化学联合会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。
⑴样本中的天门冬氨酸氨基转移酶催化L-天冬氨酸和α-氧代戊二酸氨基转移，生成草酰乙酸和L谷氨酸；⑵在还原型辅酶I（NADH+H+）和苹果酸脱氢酶（MDH）的存在下，草酰乙酸被还原为L-苹果酸，还原型辅酶I （NADH+H+）被氧化为辅酶I（NAD），从而使波长340 nm处的吸光度值下降。
通过对波长340 nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ MDH苹果酸脱氢酶L-苹果酸+NAD+3 标本3.1 病人准备：12小时禁食。
3.2 类型：血清。
3.3 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<10%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定3个月。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司AST试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：乳酸脱氢酶＞1365 U/L NADH 0.26mmol/ L-天冬氨酸300mmol/L Tris缓冲液 88mmol/L试剂2（R2）：苹果酸脱氢酶＞1635 U/L α氧代戊二酸36mmol/LTris缓冲液88mmol/L EDTA 5.0mmol/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
凤庆县人民医院质量管理体系文件生化室SOP文件编号：FQYY-LAB-SH-CZ-01~47第二版编制：鲁伟审核：李树荣批准：李树荣生效日期：2012年10月1日凤庆县人民医院检验科目录目录目录修订页临床标本采集程序1.目的:规范临床标本的采集，减少实验前的影响因素。
2.范围:适用于为协助疾病诊断和治疗而进行的临床生化样品采集活动。
临床样本包括血液、尿液、胸腹水等各种体液。
3.职责:临床生化实验室：指导临床各科室正确采集标本，提高实验结果的准确性。
4.程序:4.1 静脉血的采集：4.1.1 静脉血标本采集前病人应注意的问题：4.1.1.1 避免剧烈运动，一般主张抽血前24小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。
4.1.1.2 注意合理饮食。
除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12小时后空腹取血，延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会变化.饮酒对实验亦有影响。
4.1.1.3 药物的影响。
很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。
4.1.2 静脉血标本采集前医生、护士应注意的问题：4.1.2.1.检验申请单填写要求：检验申请单用钢笔或黑笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。
填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。
4.1.2.2 采用一次性真空采血管，多项化验时应首先将血注入血常规管，然后是抗凝管（注意要正确使用抗凝剂），最后是非抗凝管。
4.1.2.3 采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜，止血带使用应少于1分钟，以免引起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分的改变。
4.1.2.4 当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血，以降低对血糖、血钾等实验结果的影响。
4.1.2.5 血标本应防止溶血，影响溶血的因素有:使用止血带时间过长；抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡；容器污染；血液中泡沫注入试管；标本放置时间过长；突然受冷或受热及离心力过大等。
血清天门冬氨酸氨基转移酶标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清天门冬氨酸氨基转移酶(缩写AST)；组合项目申请：血生化中心肌酶谱、或肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。
-20℃保存稳定30天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3 标本采集的注意事项2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h 以上禁食空腹状态。
2.3.2 一般采用血清，也可以使用EDTA 、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。
3 方法原理测定反应以如下的原理进行：＋DH＋TA 酸＋NAD ＋NADH＋苹果草酰乙酸草酰乙酸谷氨酸酮戊二酸门冬氨酸−−→−+−−→−-+M S H α AST 催化L-天门冬氨酸的氨基转移至α-酮戊二酸，生成草酰乙酸和L-谷氨酸。
MDH 催化草酰乙酸还原的同时将NADH 氧化成NAD +。
前言为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。
本规程的编写遵循了ISO 15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T 227-2002《临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。
本规程从2007年5月2日起实施，每2年复审1次。
本规程由浙江伊利康生物技术有限公司编制。
本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。
本规程主要起草人：蒙凯、蔡其浩。
本规程首次起草。
目录1 检验申请 (3)2 标本采集与处理 (3)3 试剂及成份 (4)4方法原理 (4)5 仪器 (4)6 校准液及校准模式 (4)7质控品与室内质控规则 (4)8标本检测步骤 (5)9 结果计算 (5)10 操作性能 (5)11试剂使用的注意事项 (5)12参考范围及医学决定水平 (5)13检验结果的报告及范围 (5)14临床意义 (6)15结果审核分析以及相关项目的联系 (6)16威胁生命的“紧急值”及报告规定. (6)17有关引用程序与文件 (6)18参考文献附录A XXX型全自动生化分析仪参数天门冬氨酸氨基转移酶测定标准操作规程1.检验申请单独检验项目申请：血清天门冬氨酸氨基转移酶（Apartate Aminotransferase,缩写(AST/GOT）测定；组合项目申请：肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2.标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后。
体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2标本采集2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
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