彩色预染蛋白质分子量标准marker 说明书
- 格式:pdf
- 大小:632.74 KB
- 文档页数:1
38 第五章 分子量Marker50 bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0371 GeneRuler , 50bp(EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 50-1,031480MBI SM0372 GeneRuler , 50bp(EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 50-1,031 1900 MBI SM0373 GeneRuler , 50bp, Ready to use(EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 50-1,031 600 MBI SM1133 O ’GeneRuler , 50bp (与Xylene cyanol FF 和Orange G 染料混合) 50 ug0.1 ug/ul50-1,031 620 MBI SM0613O ’RangeRuler , 50bp (EB/SYBR Green I 染色检测)25 ug 0.05 ug/ul50-1,000670MBI100 bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0241 GeneRuler , 100bp (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 80-1,031 410 MBI SM0242 GeneRuler , 100bp (EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 80-1,031 1640 MBI SM0243 GeneRuler , 100bp, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 80-1,031 490 MBI SM0321 GeneRuler , 100bp plus (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 100-3,000 410 MBI SM0322 GeneRuler , 100bp plus (EB/SYBR Green I 染色检测)250 ug 0.5 ug/ul 100-3,000 1640 MBI SM0323 GeneRuler , 100bp plus, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.1 ug/ul 100-3,000 490 MBI SM1143 O ’GeneRuler , 100bp (与Xylene cyanol FF 和Orange G 染料混合) 50 ug 0.1 ug/ul 80-1,031 490 MBI SM1153 O ’GeneRuler , 100bp plus (与Xylene cyanol FF/ Or ange G 染料混合) 50 ug 0.1 ug/ul 100-3,000 490 MBI SM0623 O ’RangeRuler , 100bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 100-1,500 620 MBI SM0633 O ’RangeRuler , 200bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 200-3,000 620 MBI SM0643 O ’RangeRuler , 500bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测) 25 ug 0.05 ug/ul 500-6,000 620 MBI SM0653O ’RangeRuler , 100bp+500bp, ready-to-use (EB/SYBR Green I 染色检测)25 ug0.05 ug/ul100-6,000620MBIGeneRuler, 50bp LadderSM0371/2/3O'GeneRuler, 50bp LadderSM1133O'RangeRuler, 50bp LadderSM0613391kb bp DNA Ladders目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM0317 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 250-10,000 200 MBI SM0311 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 250 ug 0.5 ug/ul 250-10,000670MBI SM0312 GeneRuler , 1kb (EB/SYBR Gr een I 染色检测)1250 ug 0.5 ug/ul 250-10,000 2680 MBI SM0313 GeneRuler , 1kb, Ready to use (EB/SYBR Green I 染色检测) 250 ug 0.1 ug/ul 250-10,000 770 MBI SM0337 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测) 50 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 200 MBI SM0331 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测) 250 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 670 MBI SM0332 GeneRuler , Mix (EB/SYBR Green I 染色检测)1250 ug 0.5 ug/ul 100-10,000 2680 MBI SM0333 GeneRuler , Mix, R eady to use (EB/SYBR Gr een I 染色检测) 250 ug 0.1 ug/ul 100-10,000 770 MBI SM1331 GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus 5x50 ug 0.5 ug/ul 75-20,000 1100 MBI SM1332 GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus25x50 ug 0.5 ug/ul 75-20,000 4400 MBI SM1333GeneRuler™ 1kb DNA Ladder Plus, ready -to-use5x50 ug 0.1 ug/ul 75-20,000 1500 MBI SM1163 O ’Gene Ruler , 1 kb(与Xylene cyanol FF/ Orange G 染料混合) 250 ug 0.1 ug/ul 250-10,000 770 MBI SM1173O ’Gene Ruler , Mix(与Xylene cyanol FF/ Orange G 染料混合)250 ug0.1 ug/ul100-10,000770MBIGeneRuler, 100bp Ladder SM0241/2/3 GeneRuler,100bp Ladder PlusSM0321/2/3O'GeneRuler, 100bp LadderSM1143O'GeneRuler, 100bp Ladder PlusSM1153O'RangeRuler, 100bp adder SM0623O'RangeRuler, 200bp Ladder SM0633O'RangeRuler, 500bp LadderSM0643O'RangeRuler,100bp+500bp LadderSM065340定量Marker目录号产品说明规格 浓度 范围(bp) 价格 供应商 SM1103 FastRuler , low range 快速(8-14分钟)检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 50-1,500 500 MBI SM1113 FastRuler , middle range 快速(8-14分钟)检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 100-5,000 500 MBI SM1123 FastRuler , high range 快速(8-14分钟)检测目标片段大小和数量 2x500 ul 20 ug/ul 500-10,000 500 MBI SM0383 MassRuler , low range, ready-to-use 2x500 ul60.8 ug/ul80-1,031 770 MBI SM0393 MassRuler , middle range, ready-to-use 2x500 ul 42.2 ug/ul 1500-10,000 770 MBI SM0403 MassRuler , high r ange, ready-to-use2x500 ul103 ug/ul80-10,000850MBIGeneRuler, 1kb LadderSM0311/2/3GeneRuler, Ladder Mix SM0331/2/3MassRuler, Middle RangeSM0393MassRuler, Low Range SM0383MassRuler, High rangeSM0403FastRuler, low range ,Cat# S M1103FastRuler, middle range ,Cat# SM1113FastRuler, high range ,Cat# S M1123O'GeneRuler, 1kb LadderSM1163O'GeneRuler, DNA Ladder MixSM1173GeneRuler, 1kb, plusSM1331/2/3Marker制备DIY (Do-it-yourself)MBI提供36条高质量(通过层析柱纯化)的DNA片段,大小区间为10-20,000 bp。
蛋白Mark er可分为:一、未预染的Ma rker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Mar ker即单色预染和多色预染。
在wester n blot 过程中,分子量Mar ker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。
这个 Wester n Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白Ma rker也是west ern blot实验成功的必要条件之一。
总体来说,蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。
以下是关于蛋白分子量标准的小叙:一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准未染色的蛋白分子量标准是最简单,也是最准确的一种。
由于没有附带染料分子或者是标记分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是精确判断蛋白大小必须的。
现在的Mar ker多数都选用预混和的Mar ker,方便不同大小的蛋白比较。
预混的Mar ker通常有几条带加倍浓度作为指示,因为混合的条带越多,越不好记,谁知道哪条是那条!数到眼都花了。
所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。
不过要记得,小带通常都不那么容易看清楚的。
在选择上来说,当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好,越近越好。
如果你的蛋白不幸在两条跨度较大M arker条带之间,选别的Mar ker吧。
预混的Mar ker 使用上不如预染Marke r(pre-staine d)好用,因为电泳过程中完全看不到,要和目标蛋白一起等到最后染色才―开蛊‖,无法对实验起预示参照作用。
∙o Protocolso Standard Protocolo Manual/Datasheet∙Cat.# Product Size Note3450 Protein Molecular Weight Marker (Low) 200 lanes3451 Protein Molecular Weight Marker (High) 200 lanes3452 Protein Molecular Weight Marker (Broad) 200 lanesDescriptionProtein Molecular Weight Markers are designed for use in SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis. There are 3 kinds of Protein Molecular Weight Marker, Low (Molecular weight range : 14.3 - 97.2 kDa) , High (Molecular weight range : 44.3 - 200 kDa) and Broad (Molecular weight range : 6.5 - 200 kDa).Each protein is proportioned to yield uniform band intensities when perform staining Coomassie Brilliant Blue R-250 after run on SDS polyacrylamide gel.5µl of 20-fold diluted marker is loaded per lane of SDS-PAGE minigel for standard use. In this case, this marker is sufficient for 200 lanes.Electrophoresis ResultLow(Cat.# 3450) High(Cat.# 3451) Broad(Cat.# 3452)15% SDS-PAGE 7.5% SDS-PAGE 5-20% gradientSDS-PAGEStorageProtein Molecular Weight Marker, 1 MDTT: -20°C5×Loading Buffer : Store at room temperature after used.ComponentProtein Molecular Weight Marker 50 µl5×Loading Buffer1 ml1 M DTT 100 µlConcentration12 µg/µl (Cat.# 3450) 10 µg/µl (Cat.# 3451) 18 µg/µl (Cat.# 3452)Form50 mM Tris-HCl, pH6.81 mM EDTA200mMNaCl50% glycerolComponent Protein Low(Cat.# 3450)Protein Source M.W.(Da)Phosphorylase B Rabbitmuscle97,200Serum Albumin Bovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287Carbonic Bovine 29,000anhydraseTrypsin Inhibitor Soybean 20,100Lysozyme Hen eggwhite14,300High(Cat.# 3451)Protein Source M.W.(Da)Myosin Pig 200,000 β-galactosidaseE. coli116,000Phosphorylase B Rabbitmuscle97,200SerumAlbuminBovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287Broad(Cat.# 3452) < /TR>Protein Source M.W.(Da)Myosin Pig 200,000 β-galactosidase E. coli116,000 Phosphorylase B Rabbit muscle 97,200 Serum Albumin Bovine 66,409Ovalbumin Hen eggwhite44,287CarbonicanhydraseBovine 29,000 Trypsin Inhibitor Soybean 20,100Lysozyme Hen eggwhite14,300Aprotinin Bovinepancreas6,5005×Loading Buffer200 mM Tris-HCl , pH6.810% SDS 0.05%BPB50% GlycerolNote∙All products are intended to be used for research purpose only. They are not to be used for drug or diagnostic purposes, nor are they intended for human use. They shall not to be used products as food, cosmetics, or utensils, etc∙Takara products may not be resold or transferred, modified for resale or transfer, or used to manufacture commercial products without written approval from TAKARA BIO INC.∙If you require licenses for other use, please call at +81 77 543 7247 or contact from our website at ∙Please confirm the content about the license or patent used in this document that relates to the Takara Bio product by clicking the license mark.Moreover, please confirm the "Limited Use Label License" or "patent" concerning the product of another manufacturers or respective owners in their Web site/catalog etc.Page TOP。
1PH0304|宽分子量蛋白Marker (10-200kD)Catalog No :PH0304Size :☐20T (100ul)Storage :Store@-20℃
◆简介
本产品包含14种蛋白质混合物,分子量范围为10kD-200kD,经过SDS-PAGE 电泳,用考马斯亮蓝染色后可以得到14条带,可以用来判断SDS-PAGE 电泳后蛋白质的分子量。
◆保存
Store at -20℃;有效期12个月
◆使用参考
a 第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
b 取出分装后的Marker,常温融化,轻柔彻底混匀,管底不能见沉淀物。
注:此Marker 为即用型,溶化后直接上样,不要95℃处理!
c 上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。
一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker 上样量。
d 电泳结束后,染色,观察结果。
电泳结果如出现带型缺失现象或样品聚集在分离胶上沿,可在Marker 中加入终浓度为100mM 的DTT 后再上样。
12%分离胶电泳示意图
梳子尺寸:0.75mm*5mm
上样量:5ul。
marker标准蛋白Marker标准蛋白是一种用于标记和检测蛋白质的工具,它可以在生物学实验中起到非常重要的作用。
在实验室中,科研人员经常需要对蛋白质进行定位、检测和表达,而Marker标准蛋白则可以帮助他们更准确地进行这些操作。
本文将介绍Marker标准蛋白的基本概念、分类、应用和优势。
Marker标准蛋白是一种具有已知分子量和丰度的蛋白质混合物,通常由多种不同的蛋白质组成。
它的主要作用是作为分子量标准品,用于蛋白质电泳和免疫印迹等实验中的分子量校准。
Marker标准蛋白通常会在凝胶电泳或Western blotting实验中与待测样品一同进行分析,通过比较Marker标准蛋白的迁移位置和待测样品的迁移位置,可以准确地确定待测样品的分子量。
根据Marker标准蛋白的来源和性质不同,可以将其分为多种类型。
例如,有些Marker标准蛋白是从天然来源中提取的,如鱼肌蛋白、牛血清蛋白等;而另一些Marker标准蛋白则是通过基因工程技术人工合成的,如GST融合蛋白、His标记蛋白等。
此外,Marker标准蛋白还可以根据其分子量范围进行分类,通常分为低分子量、中分子量和高分子量三类。
Marker标准蛋白在生物学实验中具有广泛的应用价值。
首先,它可以用于验证蛋白质电泳实验的准确性和可重复性,通过观察Marker标准蛋白在凝胶上的迁移情况,可以评估电泳实验的质量。
其次,Marker标准蛋白还可以用于Western blotting实验中的分子量校准,帮助研究人员准确地确定待测蛋白的分子量。
此外,Marker标准蛋白还可以作为蛋白质表达和纯化实验的内标,用于评估蛋白质表达水平和纯度。
与传统的分子量标准品相比,Marker标准蛋白具有许多优势。
首先,它的成本相对较低,可以满足实验室日常实验的需要。
其次,Marker标准蛋白的稳定性较好,不易受到环境因素的影响,可以长期保存和重复使用。
另外,Marker标准蛋白的分子量范围广,可以满足不同实验的需求,具有较高的通用性。
中分子量蛋白Marker I使 用 说 明 书包 装 量:浓 度:每种蛋白约0.1-0.2mg/ml 在1×loading Buffer储运温度:收到产品后分装冻存,避免反复冻融降解蛋白,-20℃ (长期保存请置于-70℃ )(用于小胶5µl/次可用20次 用于大胶10µl /次 可用10次)制品说明:本产品是由6种蛋白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液,分子量范围为14KD -94KD ,经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳后,用考马斯亮蓝R -250(Coomassie Blue R-250)染色后可得清晰的7条蛋白带。
建议使用分离浓度为12%~15%。
适用胶浓度:最优适用于12% (37.5:1 丙烯酰胺:双丙烯酰胺)的聚丙烯酰胺凝胶。
该Marker 也可用于8-15%的胶。
胶浓度为8-10% 时蛋白Marker 中低分子量的蛋白易于同染料前沿跑在一条线上不易区分,在12-15%的胶上及梯度电泳中,所有的条带都能锐利清晰分开。
推荐上样量:上样量胶厚度大小 5µl 0.75mm thick mini 10µl1.5mm thick mini 0.75mm thick large 20µl 1.5mm thick large操作步骤:1.室温融解Marker 或37- 40°C 温浴几分钟使之融解,混匀均一,不要高温加热。
2.为避免污染最好分装保存以备使用,取所需体积的Marker 置于一干净离心管中并封好口。
3. 上样并进行 SDS-PAGE 电泳。
4.该Marker适用于考马斯亮蓝, 银染或其他蛋白染色方法。
注意:银染比考马斯亮蓝染色敏感度高10~100 倍,相应的银染需要减少用量。
5.变性蛋白Marker储存于-20°C。
6.在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中不要使用该Marker,因为在该Marker的储存缓冲液中存在SDS。
换个姿势了解蛋白质Marker!蛋白分子量标准,常称之为蛋白Marker。
在免疫印迹(Western blot)试验中,分子量Marker虽不起眼,但意义重大,是阳性对照,是大小的标准,是必须的。
只有Marker精确无误了,实验结果才有说服力。
除此之外,蛋白Marker还能够提示电泳是否正常,转移是否成功等信息。
在实验中经常会说“跑”电泳我们可以用“团队障碍跑”来描述蛋白质在凝胶中的运动体型大的阻碍大,跑的慢体型小的阻碍小,跑的快对于未知蛋白组我们可以根据它的停止时位置分析和区分其中蛋白质的大小这就要求我们设置一个特殊的赛道“Marker组”让具有指示性的蛋白质组(Marker)一起移动在相同的时间内与蛋白质“裁判”跑一样距离的其分子大小也是一致的Marker组的分子大小我们是知道的就可以根据目的蛋白的大小进行筛选再对目的蛋白进行后期的分离与检测蛋白质电泳示意图蛋白Marker可分为两大类:1、未预染的Marker按照包含的蛋白质分子量大小来区分,又可以分为:宽分子量蛋白Marker、高分子量蛋白Marker以及低分子量蛋白Marker2、预染的Marker按照染料颜色的多少可以分为:单色预染和多色预染。
【未预染的Marker】这是最简单,也是最准确的一种。
由于没有附带染料分子或者是标记分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是精确判断蛋白大小所必须的。
1、宽分子量蛋白Marker如果从实验室总体考虑的,就选范围尽量宽,条带分布比较均匀的,这样你的蛋白无论在哪个区间都容易判断,避免落在一段空白区域中。
不过条带越多,每次上样量也就越大。
拿到Marker后,如果买的是大包装,就应该考虑分装,尽量避免反复冻融。
另外,宽分子量蛋白Marker不一定每一条都能够看到,特别是小分子量蛋白。
如果侧重大蛋白,那小的可能就已经跑掉了。
2、高分子量蛋白Marker通常在检测大分子量蛋白时使用高分子量蛋白Marker。
3、低分子量蛋白Marker在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低分子量蛋白Marker,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可用作粗略的定量。
标准蛋白marker蛋白marker,又称蛋白质分子量标准,是一种广泛应用于蛋白质电泳和免疫印迹等实验中的生物学试剂。
它的主要作用是用于估算待测蛋白的分子量,以及判断蛋白电泳实验中蛋白分离情况的好坏。
标准蛋白marker是一种重要的实验试剂,在生物学研究中有着广泛的应用。
蛋白marker的种类繁多,不同的实验需要使用不同类型的蛋白marker。
一般来说,蛋白marker可以分为预染色和后染色两种类型。
预染色蛋白marker通常被染成蓝色或紫色,可以直接在凝胶中可见,方便实验操作。
后染色蛋白marker则需要在电泳后进行染色才能观察到。
根据实验需要,选择适合的蛋白marker对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
在选择蛋白marker时,需要考虑几个关键因素。
首先是蛋白marker的分子量范围,不同的实验需要使用不同范围的蛋白marker来进行分析。
其次是蛋白marker的稳定性和可重复性,优质的蛋白marker应该具有稳定的性能和可靠的重复性。
最后是蛋白marker的灵敏度,对于少量蛋白的检测,需要选择灵敏度较高的蛋白marker来进行实验。
除了以上几点考虑因素外,还需要注意蛋白marker的存储条件和使用方法。
一般来说,蛋白marker应该存储在干燥、阴凉的环境中,避免阳光直射和高温。
在使用时,需要根据实验要求稀释适量的蛋白marker,并严格按照说明书中的操作步骤进行实验操作,以确保实验结果的准确性。
总之,蛋白marker作为一种重要的生物学试剂,在蛋白质电泳和免疫印迹等实验中发挥着重要作用。
选择合适的蛋白marker对于实验结果的准确性和可靠性至关重要,因此在选择和使用蛋白marker时需要仔细考虑各种因素,并严格按照说明书中的操作步骤进行实验操作。
希望本文能够对您在蛋白marker的选择和使用上提供一些帮助,祝您实验顺利,取得理想的结果。