医学基础技能操作汇总

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一、观察人的口腔上皮细胞

(一)、制作临时装片的操作顺序

1.用洁净的纱布或擦片纸等把载玻片和盖玻片擦拭干净。

2.注意一定要漱口

3.在载玻片的中央滴一滴生理盐水。

4.用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下。

5.把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片上的生理盐水滴中涂抹几下。

6.用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的生理盐水滴,然后缓缓地盖在水滴上。注意避免盖玻片下面出现气泡。

7.在盖玻片的一侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。(二)、用显微镜观察

1、先在低倍镜下观察——找到希望观察的目标

2、将其移到视野的中央——如何移动

3、观察细胞的结构

4、绘图:左眼看目镜,右眼画绘图形(注意:名称规范的标识

二、分光光度计的使用方法

主体内容:1.使用仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前,应该对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固。通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源开关。仪器在使用前先检查一下,放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧),如受潮变色,应更换干燥的蓝色硅胶或者

倒出原硅胶,烘干后再用。2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。3.开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。4.打开试样室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上试样室盖,将比色皿架置与蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。5.如果显示不到“100.0”,则可适当增加微电流放大器的倍率档数,但尽可能置低倍率档使用,这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。6.预热后,按(4)连续几次调整“0”和“100%”,仪器即可进行测定工作。7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为“.000”,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。8.浓度C的测量:选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,即可读出被测样品的浓度值。9.如果大幅度改变测试波长时,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“0”和“100%”即可工作。10.每台仪器所配套的比色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。11.本仪器数字表后盖,有信号输出0~1000MV,插座1脚为正,2脚为负接地线。吸收池(即比色杯)使用注意事项:①要彻底清洗,尤其是盛过蛋白质等溶液,干后形成一层膜,不易洗去,通常杯子不用时可放在1%洗洁净液中浸泡,去污效果好,使用时用水冲洗干净,要求杯壁不挂水珠,还可以用绸布丝线或软塑料制作一个小刷子清洗杯子。

②严禁用手指触摸透光面,因指纹不易洗净。严禁用硬纸和布擦拭透光面,只能使用镜头纸和绸布。③严禁加热烘烤。急用干的杯子时,可用酒精荡洗后用冷风吹干。决不可用超声波清洗器清洗。④吸收池的校正:要固定参比杯和样品杯,可在杯的毛玻璃面上写上记号。用盛有参比液的参比杯和样品杯测定吸光度“A0”,样品杯换上样品液后测定的吸光度为“A1”,则校正后的实际吸光度A为:A= A1-A0

分光光度计的使用方法一、实验原理吸光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法。其理论基础是光的吸收定律——朗伯-比尔定律:A=Kdc当液层厚度d 以cm,吸光物质浓度c 以mol?L-1 为单位时,系数就以ε表示,称为摩尔吸光系数。朗伯-比尔定律表示为:A=εdc 二、仪器介绍吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度,特别适合于微量组分的测量。吸光光度法操作简便、快速、适用范围广,在分析化学中占有重要的地位。吸光光度法的主要仪器是分光光度计,其主要结构如下:光源单色器比色皿光电元件输出装置7220型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。以碘钨灯为光源,光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm,波长精度2nm,波长重现性为0.5nm,单色光带宽6nm,吸光度显示范围为0~1.999,吸光度的精度为0.004(A=0.5),试样架可置四个吸收池。

1、样品室门

2、显示窗

3、波长显示窗

4、波长调节旋钮

5、电源开关

6、操作键区

7、样品池拉手操作键区面板从左至右:1、方式选择打印三、仪器使用方法1、开机安装好仪器后,检查样池位置,使其处在光路中(拉动拉手应感应到每档的定位),关好样品室门,打开仪器电源开关,预热10分钟,即可进行测量。2、打开样品室门,将方式定于透过率档,按0%T 进行机械调零。3、从蒸馏水中取出比色皿,擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿内注入少量试液,润洗三次,然后注入3/4至4/5的试液,用滤纸片擦干外壁所挂水珠。将比色皿按顺序放入样品池。注意光面对光源。4、在样品池中放置空白液与样品5、按需要调节波长旋钮,使显示窗显示所需波长。6、使空白溶液位于光路中,按

方式选择键使吸光度指示灯亮,按100%T 键调100%,至窗口显示100%。7、打开样品室门,将功能调于透射比档,观察显示是否为0.0,若否则按0%T 键调零。调零后再放回吸光度档。8、重复上两步,直至仪器稳定。9、将样品置入光路,从显示屏上读取吸光度。用7220型分光光度计可以直接测出样品浓度。测定采用工作曲线法,曲线由仪器自动生成,并自动给出样品浓度。

注意事项

①拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。

②清洗比色皿时,一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1∶2)浸泡片刻,再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。

每次做完实验时,应立即洗净比色皿。

③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干,以保护透光面。

④测定有色溶液吸光度时,一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。

⑤在实际分析工作中,通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。

三吸量管的使用

使用移液管或吸量管移取溶液的方法是:(1) 洗涤。使用前移液管和吸量管都要洗涤,直至内壁不挂水珠为止。方法与洗涤滴定管一样,先用洗液洗,再用自来水冲洗,最后用蒸馏水洗涤干净。(2) 润洗。为保证移取溶液时溶液浓度保持不变,应使用滤纸将管口内外水珠吸去,再用被移溶液润洗三次,置换移液管或吸量管内壁的水分。润洗后的溶液应该弃去。

(3) 吸取溶液。吸取溶液时,用右手大拇指和中指拿在管子的刻度上方,插入溶液中,左手用吸耳球将溶液吸入管中(预先捏扁,排除空气)。吸管下端至少伸入液面1cm,不要伸入太多,以免管口外壁沾附溶液过多,也不要伸入太少,以免液面下降后吸空。用洗耳球慢慢吸取溶液,眼睛注意正在上升的液面位置,移液管应随容器中液面下降而降低。当液面上升至标线以上,立即用右手食指按住管口。(一般不用大拇指操作,大拇指操作不灵活。)随后右手食指稍稍抬起,让液面缓慢下降到凹液面与刻度正好相切即可。(4)放出整管溶液。将移液管放入锥形瓶或容量瓶中,将锥形瓶或容量瓶略倾斜,管尖靠瓶内壁,移液管垂直。管尖放到瓶底是错误的。松开食指,液体自然沿瓶壁流下,液体全部留出后停留15秒(移液管上标有“快”,应该不停留),取出移液管。留在管口的液体不要吹出,因为校正时未将这部分体积计算在内(移液管上标有“吹”,应该将留在管口的液体吹出)。使用吸量管放出一定量溶液时,通常是液面由某一刻度下降到另一刻度,两刻度之差就是放出的溶液的体积,注意目光与刻度线平齐。实验中应尽可能使用同一吸量管的同一区段的体积。注意事项:1、