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电磁辐射对原代培养海马神经元的损伤效应及其机制探讨左红艳;王德文;彭瑞云;王水明;高亚兵;胡文华;董波;张志毅;张飒【期刊名称】《生物物理学报》【年(卷),期】2007(23)1【摘要】研究X带高功率微波、S带高功率微波及电磁脉冲辐射对原代培养海马神经元的损伤效应并探讨其机制.通过体外培养原代海马神经元,建立电磁波辐照细胞模型.采用Annexin V-PI双标记、流式细胞术检测细胞凋亡与坏死,原子力显微镜检测细胞膜表面形态,Fluo-3-AM荧光探针负载、激光扫描共聚焦显微镜测定胞内[Ca2+]i.结果表明,辐射后海马神经元凋亡与坏死均增加,其中坏死增加明显;细胞膜表面粗糙度加大,膜穿孔增多;胞内[Ca2+]i明显升高.且以上变化均以X带高功率微波组最重,S带高功率微波组次之,电磁脉冲组最轻.提示细胞膜穿孔增多,膜通透性增加,导致胞外Ca2+内流增加,甚至胞内钙超载是辐射致海马神经元凋亡与坏死的机制之一;三种电磁辐射对海马神经元的损伤程度与照射频率呈正相关.【总页数】7页(P47-53)【作者】左红艳;王德文;彭瑞云;王水明;高亚兵;胡文华;董波;张志毅;张飒【作者单位】军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;国家生物医学分析中心,北京,100850;国家生物医学分析中心,北京,100850【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.电针血清对β淀粉样蛋白损伤原代培养大鼠海马神经元的保护作用 [J], 朱晶;邵水金;崔国红;田金鑫;陆萍萍;牟芳芳;国海东2.电磁辐照致原代培养大鼠海马神经元损伤过程中线粒体功能的变化 [J], 屈明玥;南新中;廖远祥3.氯吡硫磷染毒撤除对原代培养大鼠海马神经元细胞毒性的延迟效应 [J], 吴春燕;闫长会;傅风华;关勇彪4.人脐带间充质干细胞条件培养液对Aβ损伤原代海马神经元凋亡的影响 [J], 刘莎;张玲燕;孙爽;崔鑫;施兵奇;刘增娟;侯艳宁5.电磁辐射对原代培养海马神经元的损伤效应及其机制探讨 [J], 左红艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
、摘要大脑中的海马组织具有自发和诱发的电生理特性，并且在学习、记忆和癫痫发病中具有起搏点的作用，因此海马脑片成为人们在神经生理学和神经药理学领域常用的实验对象。
本文针对离体海马脑片诱发场皇焦进行了分析，开发了一个适用于神经电生理实验的自动信号分析系统。
它可以自动、快速地测出海马脑片诱发场电位的时域参数，如：幅度、面积、潜伏期等，同时也可以对信号进行频域分析和处理。
此外，系统还具有统计功能，可以方便的对实验数据进行统计，并以图形表示出来，具有良好的人机界面。
该系统不仅适用于离体脑片实验，同时也可以对在体脑部信号进行分析检测，可以做为神经电生理实验的辅助工具。
应用本系统，我们以离体海马脑片为实验对象，对咝的毽鲎塞控作用进行了研究，结果表明，酸枣仁粗提物中的皂甙Ａ可以减小群蜂电位（ＰＳ）的幅度和场电位的上升斜率，增加ＰＳ的潜伏期。
具有一定的抑制性作用。
实验表明本系统可以用于评价药物和进行药物作用机理的研究。
ＡｂｓｔｒａｃｔＨｉｐｐｏｃａｍｐａｌｓｌｉｃｅｓｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔａｎａｔｏｍｉｃｐａｒｔａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙａｎｄｔｈｅｐａｃｅｍａｋｅｒｏｆｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｓｏｍｏｓｔｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔａｎｄｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔｆｏｃｕｓｔｈｅｉｒｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋｏｎｉｔ．Ｉｎｍｙｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋ，ｆｉｅｌｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓｈａｓｂｅｅｎａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄ．Ｉａｌｓｏｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｏｆｔｗａｒｅ，ｗｈｉｃｈｃａｎａｕｔｏｍａｔｉｃａｌｌｙｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｔｉｍｅｄｏｍａｉｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｆｉｅｌｄｐｏｍｎｔｉａｌｆｒｏｍｔｈｅｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓ，ｓｕｃｈａｓａｍｐｌｉｔｕｄｅ，ａｒｅａ，ｌａｔｅｎｃｙｅｔｃ，ｉｔＣａｌｌａｌｓｏｐｅｒｆｏｒｍｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙ－ｄｏｍａｉｎａｎａｌｙｓｉｓ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｉｓａｎｏｔｈｅｒｆｅａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｓｏｆｌｗｖａｌ＇ｅ，ｔｈｉｓｍａｋｅｉｔｖｅｒｙｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．ＴｈｉｓｓｏｆｔｗａｒｅｈａｓａｎｉｃｅＧｒａｐｈｉｃＵｓｅｒＩｎｔｅｒｆａｃｅ，ｖｅｒｙｅａｓｙｔｏｕｓｅ．Ｉｔａｌｓｏｉｎｃｌｕｄｅｓｍａｎｙｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｇｅｎｅｒａｌｉｎｔｅｒｅｓｔｔｏｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔｓ，ａｎｄｃ４１ｎｂｅｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｓｉｇｍａｒｅｃｏｒｄｅｄｆｒｏｍｔｈｅ／ｎｖ／ｒｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｕｓｉｎｇｔｈｉｓｓｙｓｔｅｍ。
氟西汀对海马神经元生长的影响【关键词】氟西汀;细胞培养;海马神经元;大鼠氟西汀是5-羟色胺（5-HT）再摄取抑制剂之一，是应用较广的抗抑郁药。
氟西汀除有抗抑郁作用外，尚可治疗其他中枢神经系统疾病。
有研究表明，氟西汀对海马的神经保护作用是其发挥抗抑郁效应的机制之一［1］。
关于氟西汀对体外培养的海马神经元生长的影响未见报道，本研究初步探讨了氟西汀对原代培养的海马神经元生长的影响。
1 材料与方法新生大鼠海马神经元的分离和培养技术方法在参考文献［2］基础上加以改进。
取出生24 h内的新生SD大鼠（东南大学医学院动物实验中心提供），无菌分离出双侧海马，用显微剪剪碎，D-Hank’s液清洗2或3次，将剪碎的海马组织转移至离心管中，加入等量%的胰酶（美国Sigma公司），37 ℃消化30 min，中间振摇1或2次，加入10%的 DMEM/F12（美国Gibco公司）5 ml，轻轻吹打15次，然后1 000 r · min-1离心5 min，制成单细胞悬液，置于CO2 培养箱（德国Heraeus公司产品）中，差速贴壁30min，去除成纤维细胞，吸取未贴壁的细胞，并用200目的不锈钢滤过滤，收集过滤后的单细胞悬液于培养皿中，然后至离心管中，取一滴单细胞悬液进行计数，并用DMEM/F12将细胞密度调到1×106ml-1，然后接种于200 μg·ml-1多聚赖氨酸（美国Sigma公司）包被的6孔培养板中，转移至培养箱内培养，4 h后换为无血清培养基，即含2% B27的Neurobasl培养基（美国Gibco公司），以后每3天半量换液1次。
使用培养 6 d的神经元进行染色鉴定。
大鼠海马神经元的鉴定烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色取培养6 d 6孔培养板中的盖玻片进行神经元特异的NSE免疫组织化学染色。
弃去培养液，4%多聚甲醛室温固定1 h ，加入 % H2O2甲醇去除内源性过氧化氢酶，% TritonX-100破膜，10%绵羊血清封闭，加入一抗1∶200 兔抗鼠 NSE 抗体，4 ℃湿盒过夜，mmol ·L-1PBS清洗，加入二抗1∶200生物素化的山羊抗兔IgG，放入37 ℃温箱孵育60 min; mmol · L-1 PBS 清洗，滴加SABC过氧化物酶复合物，37 ℃温箱中孵育 60 min，mmol · L-1PBS清洗，滴加 DAB显色液作用3～10 min，自来水冲洗后，常规脱水，透明封片。
冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流的影响赵亚飞;吴嘉思;童宇;睢婉婉;时政【期刊名称】《成都中医药大学学报》【年(卷),期】2024(47)3【摘要】目的:探索冬凌草甲素是否对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流有影响。
方法:采用Autodock软件对冬凌草甲素与P2X7蛋白进行分子对接;采用全细胞膜片钳记录冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体激动剂Bz-ATP激发电流的影响。
结果:冬凌草甲素与P2X7蛋白的结合能为-5.86 kcal/mol,可与P2X7蛋白的Lys592残基形成氢键,与Tyr550残基形成疏水作用;Bz-ATP能激发海马CA1区星形胶质细胞的电流反应,且1000μmol/L Bz-ATP激发的电流反应较强;10μmol/L冬凌草甲素溶液孵育1 h后,海马CA1区星形胶质细胞对谷氨酸能受体激动剂NMDA和AMPA溶液的电流反应无明显变化;对Bz-ATP的电流反应降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:冬凌草甲素可与P2X7蛋白对接形成稳定的复合物,具有较好的亲和力;冬凌草甲素可抑制海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流。
【总页数】4页(P8-11)【作者】赵亚飞;吴嘉思;童宇;睢婉婉;时政【作者单位】成都中医药大学针灸推拿学院;成都大学临床医学院/成都大学附属医院【正文语种】中文【中图分类】R281【相关文献】1.β-淀粉样蛋白31-35及25-35片段对海马CA1细胞兴奋性和抑制性受体通道电流的影响2.电针百会、神庭穴对缺血再灌注损伤大鼠学习记忆能力及海马CA1区嘌呤受体P2X7表达的影响3.琥珀酸在大鼠海马 CA1区对离子型 Glu受体介导的兴奋性突触后电流的调节作用4.尼古丁对海马CA1区星形胶质细胞K^+电流和烟碱型受体的影响5.海马CA1锥体神经元NMDA及非NMDA受体介导的兴奋性突触后电流的生后变化(英文)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中华行为医学与脑科学杂志 2020年 11 月第 29卷第 11 期Chin J Behav M e d Brain Sci，N o v e m b e r 2020，V〇1. 29，No. 11•971••基础研究•3xTg-AD小鼠海马突触可塑性与钙离子跨膜流动特征李奕颖1原丽2闫旭东1武美娜11山西医科大学生理学系，细胞生理学教育部重点实验室，太原 030001 ;2山西长治医学院生理教研室，长治 046000通信作者：武美娜，Email: wmna@ 163. com【摘要】目的观察3xTg-A D小鼠海马突触可塑性与钙离子跨膜流动特征。
方法根据基因型不同，将6月龄小鼠分为APP/P S l/t a u三转基因AD(3xTg-A D)模型小鼠和野生型（WT)对照组小鼠两组，每组13只。
每组随机选取6只小鼠进行在体电生理记录，给予测试刺激记录其海马CA1区场兴奋性突触后电位（field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)、配对脉冲刺激记录双脉冲易化(paired-pulse facilitation，P P F)、高频刺激（high frequency stimulation,H FS)诱导长时程增强（long-termpotentiation，LTP)。
每组剩余的 7 只小鼠采用非损伤微测技术（non-invasive micro-test technology,陋T)，检测海马CA1区脑片神经元的跨膜钙内流和钙外排情况。
3xTg-A D小鼠在电生理和NM T实验中各损失1只,最终人组电生理实验5只,NM T实验6只。
采用SPSS 18.0对所有数据进行统计学分析，两组间比较使用两独立样本f检验。
结果（1)在体电生理实验中，给予测试刺激后30 min内，3xTg-A D小鼠和W T小鼠的fE P S P斜率均比较稳定，其平均fE P SP斜率分别为[(97. 8±2. 3)%]和[(92. 6± 12.6) %],两组之间差异无统计学意义（0.9105);给予配对脉冲刺激后,3xTg-A D小鼠和W T小鼠的P P F值分别为（1.58±0. 69)和（1.74±0. 17),两组间差异无统计学意义（t=0. 50,P>0.05);给予 HFS后 30 min和60 m in,3xTg-AD小鼠的 LTP值分别为[(104. 9±丨0. 9)%]和[(98. 0士10.8)%]，明显低于 WT小鼠的[(156. 5±21. 3)%] (j=4. 43，P<0. 01)和[(162. 5± 19.7)%] (« =5.92,P<0. 01)。
北京市朝阳区2023~2024学年度第一学期期中质量检测高三生物（考试时间90分钟满分100分）第一部分（答案在最后）一、选择题：本部分共15题，每题2分，共30分。
在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。
1.马达蛋白可通过沿细胞骨架的定向运动（如图）参与细胞内的物质运输。
相关叙述错误的是（）A.细胞中合成马达蛋白的场所是核糖体B.马达蛋白定向运动需要ATP水解供能C.运动中马达蛋白随空间结构改变失活D.该过程循环进行利于物质远距离运输【答案】C【解析】【分析】细胞骨架是真核细胞中维持细胞形态、保持细胞内部结构有序性的网架结构，细胞骨架由蛋白质纤维组成。
【详解】A、马达蛋白属于蛋白质，细胞中合成马达蛋白的场所是核糖体，A正确；B、ATP水解可为马达蛋白定向运动提供能量，B正确；C、运动中马达蛋白空间结构改变，但并未失活，C错误；D、该过程循环进行，为物质远距离运输提供能量，D正确。
故选C。
2.水稻叶片衰老的过程中，叶绿体结构的改变如下图所示。
以下叙述错误．．的是（）A.叶绿体基粒是光合作用光反应的场所B.由图中可以看出类囊体是双层膜结构C.叶片衰老过程中类囊体排列逐渐疏松D.推测衰老过程中叶片的光合能力下降【答案】B【解析】【分析】叶绿体具有双层膜，内含基粒，基粒由类囊体构成，可增大膜面积，类囊体上分布有与光反应有关的色素和酶，是光反应的场所。
【详解】A、叶绿体类囊体薄膜是光反应的场所，类囊体构成了基粒，A正确；B、类囊体是单层膜结构，B错误；C、根据图示分析，叶片衰老的过程中，类囊体逐渐疏松，C正确；D、叶片衰老，类囊体疏松，光反应可能减慢，光合作用能力下降，D正确。
故选B。
3.研究者检测拟南芥叶片在光-暗转换条件下（CO2吸收量的变化，每2s记录一个实验数据并以点的形式呈现在下图中。
相关叙述正确的是（）A.拟南芥在光照时只进行光合作用，在黑暗时只进行呼吸作用B.200s内拟南芥的光合速率在0.2-0.6μmol•m-2•s-1范围C.在300s时拟南芥的呼吸速率可达到2.2μmol•m-2•s-1D.转入黑暗条件下100s后，拟南芥CO2释放量逐渐增加【答案】C【解析】【分析】植物的二氧化碳吸收量是净光合量，总光合作用量是净光合量＋呼吸量。
1.成年大鼠海马神经元的培养●步骤1.获得海马细胞◆大鼠乙醚麻醉，断头处理；◆迅速解剖海马组织，置于含有2ml 4℃的HibernateA/B27的35mm的培养皿中；◆随后将其移入含有同上培养基的培养皿，去除脑膜及多余的脑白质（？）；◆将海马移入组织切碎机冷处理台面上事先用HibernateA/B27润湿的滤纸上，沿海马长轴将组织切成0.5mm的薄片，随后将其移入含有5ml4℃的HibernateA/B27的离心管中；◆30℃震荡8min。
◆大吸管将其移入含有木瓜蛋白酶（预热至30℃）的离心管，置于170rpm的旋转平台（保持组织片悬浮状态），30℃水域温育30min；◆将海马组织切片移入15ml含有2mlHibernateA/B27的离心管中，30℃温育5min，吸管吹打10次（30s），静置2min，将上清移入另一离心管，重复上述步骤2次；2.梯度分离◆将细胞悬液加入Nycoprep gradient（4ml）的上方，室温，1900rpm，离心15min；去除最上方的碎片；吸管收集含有细胞的部分；用5mlHibernateA稀释；第三层富含神经元；将第四层用2 ml B27:NeurobasalA重悬，1100rpm离心1min；3.盖玻片处理：50ug/mL多聚-D-赖氨酸（无菌水溶解）包被过夜，吸去多余的多聚赖氨酸，无菌水漂洗一次，自然干燥1h；4.◆细胞接种：以目标密度稀释于B27:NeurobasalA，以每盖玻片60到120 Ul 接种，置于5% CO2:9% O2中孵育1h；◆将盖玻片移入24孔培养板中,每孔以0.4ml 37℃B27/NeurobasalA漂洗一次，去除未贴壁细胞及细胞碎片；改用0.4ml的生长培养基；◆培养后4天，每3-4天更换一半培养基；新的培养基中的FGF2含量是远培养基的2倍；1.培养器皿的准备：1）溶液瓶——装配各种溶液——输液瓶；2）螺口瓶——血清或培养基；3）培养瓶——细胞培养——一般采用带螺口的，清洗时注意防止盖子中垫片的丢失；4）培养皿——细胞组织的分离、培养、染色——包括直径为30mm、60mm、120mm5）血球细胞计数板——细胞计数6）移液管——连接上手动（吸耳球）或电动负压吸取装置——在移液管尾部塞入少量脱脂棉；7）离心管——分离、漂洗、收集细胞——一般选用螺口带盖的；Eppendorf ——塑料尖底带盖的离心管8）磁力搅拌器：用于神经细胞的分离机溶液的配置；最好配合使用可调温度的加热装置；可用高压蒸汽消毒。
[简答题生理]生理学简答题大全答：胸内压等于肺内压减去肺回缩力，是一个负压。
吸气时，肺扩张，回缩力增大，胸内负压更负；呼气时，肺缩小，肺的回缩力减小，胸内负压也相应削减。
2．胸腔内负压有何生理意义？答：（1）对肺有牵拉作用，使肺泡保持充盈气体的膨隆状态，不致于在呼气之末肺泡塌闭；（2）对胸腔内各组织器官有影响，可促进静脉血和淋巴液的回流；（3）作用于全身，有利于呕吐反射。
3．肺表面活性物质有何生理功能？答：肺泡表面活性物质可降低肺泡的表面张力。
（1）能动态地对肺泡容量起稳定作用。
吸气时，可避开因吸气而使肺容量过分增大；呼气时，可防止因呼气而使肺泡容量过小。
（2）防止肺泡积液，保持肺泡内相对“干燥”的环境。
4．肾小球的滤过作用受哪些因素的影响？答：（1）滤过膜的通透性。
滤过膜通透性的转变可明显影响生成原尿的量和成分。
（2）滤过压。
构成有效滤过压的三种（肾小球毛细血管血压、血浆胶体渗透压、肾小球囊内压）力气中，任一力气的转变都将影响肾小球的滤过作用。
5．大量饮清水后尿量为什么增加？答：大量饮清水后，血液被稀释，血浆晶体渗透压降低，抗利尿激素释放量削减，肾脏重汲取水分减弱，使多余水分以稀释尿形式排出，尿量增多。
6．简述肾脏有哪些生理功能。
答：（1）肾脏是机体最重要的排泄器官，通过生成尿液，将机体代谢终产物排出体外。
（2）对机体的渗透压、水和无机盐平衡调整起重要作用。
（3）分泌促红细胞生成素。
7．机体如何维持正常体温？答：畜禽正常体温的维持有赖于体内产热和散热两者保持平衡。
体内一切组织细胞活动时，都产生热，同时机体随时都在不断地向外界散热，以保持产热与散热之间的平衡。
机体的产热和散热过程受神经和内分泌系统调整，使两者在外界环境和机体代谢常常变化的状况下保持动态平衡，实现体温的相对稳定。
8．什么叫基础代谢？应在什么条件下测定动物的基础代谢？答：基础代谢是指动物在维持基本生命活动条件下的能量代谢水平。
测定动物的基础代谢的条件是：（1）糊涂；（2）肌肉处于宁静状态：（3）相宜的外界环境温度；（4）消化道内食物空虚。
