2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证

2型糖尿病大鼠模型研究概况【摘要】目的：综述近年来2型糖尿病(T2DM)大鼠模型的研究进展及对其优缺点进行评价和未来同类模型的展望。

方法：主要对T2DM大鼠模型的建立技术和方法进行综合性评价。

结果：T2DM大鼠模型目前可以分为自发性T2DM 和实验性T2DM模型,且仍有较大发展空间。

结论：经过综合评价研究，认为各种建模方法均有优缺点，目前较认可的是实验性T2DM大鼠模型，因价格低廉，造模方便而广受欢迎，但仍缺乏一定的造模标准。

【关键词】2型糖尿病；动物模型；研究概况随着经济社会的发展，人们的饮食结构、生活方式等发生了很大改变，糖尿病发病率显著上升，尤其T2DM占了较高比例，大概占了糖尿病发病率的90%。

T2DM是因人体胰岛素分泌相对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低继而引发糖、蛋白质、脂肪和水电解质等代谢紊乱所导致的疾病。

患者典型表现为三多一少，即多饮、多食、多尿表现，同时还伴有身体消瘦、疲乏、烦躁、口渴等临床症状。

选择一些合适的动物模型进行动物试验成了我们研究糖尿病的良好途径，我们可以从中比较一些糖尿病药物的作用效果以及其药动学的特点，在临床用药上对评价某套治疗方案的可行性及预后等具有十分重要的参考意义。

目前研究的临床T2DM动物模型主要集中在大鼠上，这可能是由于大鼠作为T2DM动物模型相对较稳定且与人T2DM表现相似的优点。

因此我们在下面综述近几年来国内外有关临床T2DM大鼠模型研究的情况。

总体上来说，目前临床T2DM研究的大鼠模型主要分为两类，一类是自发性T2DM大鼠模型，另一类则是实验性T2DM大鼠模型，考虑到成本及方便程度，目前以后者居多。

1 实验性T2DM大鼠模型1.1 单纯高脂高糖引发的T2DM 在试验中，通过较长时间给予大鼠过量的高糖高脂饮食，发现能够诱导出较满意的T2DM大鼠模型，从而能为进一步研究奠定良好的基础。

目前认为其机理可能是高糖高脂饲料会导致胰岛B细胞超负荷，进而使胰岛细胞发生损伤、萎缩甚至死亡，胰岛的功能因此下降，继而建立起伴胰岛素抵抗的T2DM模型。

Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立及其活体代谢的改变卢镜宇㊀李㊀秀㊀商可心㊀黎㊀宁(江南大学食品学院㊀无锡㊀２１４１２２)㊀㊀[摘要]利用高脂饲料诱导联合地塞米松注射建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,采用实验动物全面监测系统对大鼠的活动和代谢状态进行２４h全程监测,并检测血液中甘油三脂㊁胆固醇㊁胰岛素和血糖等参数的变化.结果与对照组相比,模型组甘油三酯㊁胆固醇㊁胰岛素抵抗指数以及０㊁０．５㊁２h 血糖值和血糖曲线下面积极显著升高(P＜０．０１);模型组呼吸交换率明显变低,能量消耗升高,活动量极显著下降(P＜０．０１).结论:高脂饲料联合地塞米松能够引起大鼠脂代谢和糖代谢紊乱,成功诱导出Ⅱ型糖尿病模型.Ⅱ型糖尿病大鼠具备消瘦㊁呼吸交换率低㊁热量消耗增加和活动量减少等临床症状,且揭示糖尿病动物较偏向脂肪代谢㊁生活需氧量增加㊁生活状态萎靡和生物节律错乱.㊀㊀关键词:Ⅱ型糖尿病;活体代谢率;实验动物;实验动物监测系统㊀㊀糖尿病是一组以慢性血葡萄糖水平增高为特征的代谢性疾病群[１],糖尿病患者长期高血糖,造成体内蛋白质㊁脂肪和糖类的代谢紊乱,导致各种组织,特别是眼㊁肾㊁神经㊁心脏㊁血管等组织的慢性损害及功能障碍,危害极大.２０１１年国际糖尿病联盟调查结果表明:全世界糖尿病患者已达３．６６亿[２].糖尿病主要分为四大类型,即Ⅰ型糖尿病㊁Ⅱ型糖尿病㊁其他特殊类型糖尿病和妊娠期糖尿病[３].Ⅱ型糖尿病(T２D M)原名成人发病型糖尿病,可在任何年龄段发病,但大多数患者在３５岁到４０岁之后发病,是一种临床常见病,其患病率随着人民生活水平的提高㊁人口老龄化㊁生活方式的转变而呈逐渐增长趋势[４].近１０多年来,我国糖尿病患病率迅速增加,其中Ⅱ型糖尿病患者约占糖尿病患者群体的９０％以上[５].因此对Ⅱ型糖尿病患发生和发展规律的研究变得尤其迫切和重要.诱导Ⅱ型糖尿病大鼠模型是采用化学药物人为破坏胰腺细胞,或者摄入过量能量使胰岛β细胞处于高糖负荷状态从而诱发胰岛功能受损,可在一定程度上模拟出环境因素对于糖尿病发生和发展的影响,常用的方法为饮食诱导法㊁化学药物诱导法和两者结合法[６].本文采用两者结合法,即高脂饲养联合地塞米松注射成功诱导出Ⅱ型糖尿病动物[７].并利用实验动物全面监测系统对大鼠２４h 活动状态和呼吸代谢率进行监测,以期进一步了解糖尿病动物的代谢和生理状态.C L AM S监测系统集合了呼吸交换率㊁能量代谢和活动量监测３个子系统[８Ｇ１０],通过记录每只大鼠O２消耗量和C O２生成量来计算呼吸交换率和能量消耗量,通过在水平和垂直方向上的光束被切断的次数表示活动量.每次试验前每只大鼠首先在各自的代谢笼里面适应１d,第２天的监测数据被用来作进一步统计分析.１㊀材料与方法１．１㊀材料１．１．１㊀试验动物:６周龄清洁级雄性W i s t a r大鼠３０只(１３０~１５０g),购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,生产许可证号码S C X K(沪)２０１２ ０００２,合格证编号２０１５０００５１４６１７.试验前环境适应和检疫观察以及动物饲养均在本校实验动物中心屏障设施[S Y X K(苏)２０１２ ０００２]内进行.实验动物饲养条件㊁饮用水㊁饲料应符合国家标准和有关规定(G B１４１９２５㊁G B５７４９㊁G B１４９２４．１㊁G B１４９２４．２㊁G B１４９２４．３).动物实验方案获得江南大学实验动物管理与动物福利伦理委员会批准,审批编号J N N o．２０１６０４０１Ｇ０５２３[１７].１．１．２㊀仪器和试剂:酶标仪(B i o t e k)㊁血糖仪(R o c h e)㊁天平(M e t t l e r t o l e d o)㊁实验动物全面监测系统(C o l u m b u s i n s t r u m e n t s)㊁地塞米松磷酸钠注射液㊁葡萄糖㊁血糖测定试纸㊁胰岛素㊁甘油三酯㊁总胆固醇测定试剂盒.１．１．３㊀高脂饲料配方:猪油１０％㊁蔗糖１５％㊁蛋黄粉１５％㊁酪蛋白５％㊁胆固醇１．２％㊁胆酸钠０．２％㊁碳酸氢钙０．６％㊁石粉０．４％㊁鼠维持料５２．６％[１１].１．２㊀试验方法１．２．１㊀高脂喂养联合地塞米松注射诱导胰岛素抵抗糖\脂代谢紊乱模型[１１]:购入健康雄性W i s t a r大鼠,随机分为２组,即１个对照组㊁１个模型组,每组１５只.在屏障设施检疫室内预饲养５d后,禁食４h,不限制饮水.称量动物体重作为该批次动物基础值.对照组不作处理,给予维持饲料饲养;模型组更换高热能饲料,喂食３周后,在高热能饲料基础上给予地塞米松０．８m g/k g B W腹腔注射(０．００８％地塞米松注射量１m L/１００g体重),１次/d,连续１２d.试验结束,各组动物禁食４h,检测空腹血糖㊁血清胰岛素及胆固醇㊁甘油三脂水平.１．２．２㊀实验动物活体代谢率:地塞米松注射第１２天,每组随机挑选６只,严格按照实验动物全面监测系统用户手册说明,将实验大鼠放入训练笼,进行２４h适应性训练,期间自由采食和饮水.训练结束后称重,转移到实验笼中进行２４h呼吸交换率(R E R)㊁热量消耗和活动量监测.１．３㊀数据处理㊀㊀数据以平均值ʃ标准差表示(xʃS D),利用S P S S１７．０S t u d e n t＇s t t e s t进行组间显著性差异分析.P＜０．０５表示差异显著,P＜０．０１表示差异极显著,Pȡ０．０５表示差异不显著.２㊀结果２．１㊀高脂联合地塞米松对大鼠体重的影响㊀㊀如表１所示,在实验初期,两组大鼠体重无显著性差异(Pȡ０．０５);模型组经过５周高脂饲料喂养和后２周地塞米松注射,实验结束时,平均体重和平均增重极显著低于对照组(P＜０．０１).表１㊀高脂联合地塞米松对大鼠体重的影响㊀㊀(单位:只㊁g)组别动物数初始体重终末体重增重对照组１５１９６．８９ʃ６．８２３５４．６１ʃ９．３４１５７．７２ʃ７．９２模型组１５１９６．３９ʃ９．４９２８６．７４ʃ２２．３９∗∗９０．３５ʃ１９．２６∗∗注:同一列模型组与空白组相比,∗表示P＜０．０５,∗∗表示P＜０．０１,下同２．２㊀脂代谢紊乱模型成立的鉴定㊀㊀由表２可见,模型组血清胆固醇和甘油三酯与对照组相比极显著升高(P＜０．０１),表明脂代谢紊乱模型成立.表２㊀脂代谢紊乱模型成立的鉴定㊀㊀(单位:只㊁m m o l/L)组别动物数甘油三脂胆固醇对照组１５１．１１ʃ０．４０１．４８ʃ０．３１模型组１５１．８６ʃ０．４０∗∗５．４２ʃ１．２９∗∗２．３㊀胰岛素抵抗成立的鉴定㊀㊀由表３可见,与对照组相比,模型组胰岛素抵抗指数极显著升高(P＜０．０１).表３㊀胰岛素抵抗成立的鉴定㊀㊀(单位:只㊁m m o l/L)组别动物数胰岛素抵抗指数对照组１５１１．７８ʃ３．２６模型组１５２１．９０ʃ２．８３∗∗２．４㊀糖代谢紊乱模型成立的鉴定㊀㊀由表４可见,经口给予葡萄糖后,模型组血糖曲线下面积升高,与对照组比较,差异极显著(P＜０．０１),表明糖代谢紊乱成立.表４㊀糖代谢紊乱模型成立的鉴定㊀㊀(单位:只㊁m m o l/L)组别动物数血糖值０h０．５h２h血糖曲线下面积对照组１５３．８９ʃ０．１７５．８２ʃ０．５４４．５４ʃ０．４０１０．２０ʃ０．５３模型组１５６．６７ʃ０．３１∗∗１２．９２ʃ１．０６∗∗８．９２ʃ０．６６∗∗２１．２８ʃ２．３７∗∗２．５㊀高脂联合地塞米松对大鼠呼吸交换率的影响㊀㊀C L AM S实验动物全面监测系统实时记录大鼠C O２产生量和O２消耗量,并生成两者间比值即R E R 值,用来间接判定动物体内的供能物质.当R E R 值越趋近于１．０,表示实验动物目前主要依靠碳水化合物提供能量;R E R值越趋近于０．７,表示实验动物目前主要依靠脂肪氧化提供能量[１２].由图１可见,糖尿病大鼠R E R值均比对照组低,且夜间R E R值差异极显著(P＜０．０１);对照组昼夜间R E R 值差异极显著(P＜０．０１),模型组昼夜间无显著性差异(Pȡ０．０５).图１㊀糖尿病大鼠呼吸交换率的变化A:２４h内R E R的动态监测图;B:昼夜R E R的平均值㊀注:图标上标∗或∗∗表示与对照组相应时间段差异显著或极显著;不标,差异不显著.同组昼夜间∗或∗∗表示差异显著或极显著;不标,差异不显著.下同２．６㊀高脂联合地塞米松对大鼠活体热量消耗的影响㊀㊀C L AM S实验动物全面监测系统可以监测大鼠热量消耗的情况.热量消耗(H e a t),指单位体重单位时间内实验动物消耗的卡路里,公式如下:H e a t ＝(３．８１５＋１．２３２ˑR E R )ˑV O ２[１３].由图２可见,全天几乎所有时刻糖尿病大鼠热量消耗均高于对照组,但白天和黑夜平均值均未达到显著性差异(P ȡ０．０５);两组昼夜间热量消耗均差异极显著(P ＜０．０１).图２㊀糖尿病大鼠能量消耗的变化A :２４h 内H e a t 的动态监测图;B :昼夜H e a t 的平均值２．７㊀高脂联合地塞米松对大鼠活动量的影响㊀㊀C L AM S 系统的每个监测笼子外部还配备了能够监测实验动物在X 轴及Z 轴方向上活动情况的红外传感活动监测梁[１４].监测梁监测到的活动量(L o c o m o t o rA c t i v i t y )能够反映出实验动物在监测笼内的运动情况,在本论文中主要为实验动物总运动次数.由图３可见,糖尿病大鼠几乎每个时间段的活动量均低于对照组,昼夜活动量均值均极显著低于对照组(P ＜０．０１);对照组夜间活动量极显著高于白天(P ＜０．０１),模型组昼夜间活动量无显著性差异(P ȡ０．０５).图３㊀糖尿病大鼠活动量的变化A :２４h 内活动量的动态监测图;B :昼夜活动量的平均值３㊀讨论㊀㊀Ⅱ型糖尿病目前仍是一种终生性疾病,尚无法根治,药物治疗风险高[１５].目前用于相关研究的糖尿病动物模型主要有四类,即胰腺部分切除动物模型㊁自发性遗传动物模型㊁诱导型动物模型和转基因动物模型[１６].胰腺部分切除动物模型主要用于Ⅰ型糖尿病模型(胰岛素缺少)的研究;自发性遗传动物模型种类少,且价格昂贵;单靠基因敲除这项技术制造出的转基因动物模型还很难揭示胰岛素抵抗和糖尿病发生的根本机制[１７Ｇ１８].因此本文主要讨论诱导Ⅱ型糖尿病模型的建立方法及其引起的能量和活动量的变化.本文采用高脂饲料诱导(５周)联合低剂量地塞米松注射(１２d )的方法诱导Ⅱ型糖尿病大鼠,造模结束后,模型组大鼠体增重明显低于正常组,血液中甘油三脂㊁胆固醇和胰岛素抵抗指数极显著高于正常组,模型组０㊁０．５㊁２h 血糖值和血糖曲线下面积均极显著高于正常组,表明Ⅱ型糖尿病大鼠糖代谢和脂代谢紊乱模型成立,成功诱导出Ⅱ型糖尿病大鼠模型[１１].这与Ⅱ型糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,以糖代谢紊乱为特征但异质性较强的综合征,脂代谢紊乱普遍存在相吻合[１９],与王艳莉等[２０]㊁黄颂等[２１]的研究结果相似.实验动物全面监测系统实时监测结果表明,糖尿病大鼠呼吸交换率(R E R )较低,更接近０．７,较偏向依靠脂肪氧化提供能量,这与模型组动物体增重较小这一现象相一致;而活体热量消耗均高于正常组,这同样增加了动物的能耗,导致实验动物体重减轻,同时说明糖尿病大鼠需要氧气量较多,这与患糖尿病人群容易出现呼吸费力或者气不够用等胸闷现象相对应[２２].从动物活动量上看,糖尿病大鼠组的活动量极显著低于正常组,且白天和黑夜均值也存在极显著差异,这与糖尿病患者出现的精神状态萎靡㊁活动量和生活力下降这一症状相吻合.从昼夜节律上来看,正常组动物昼夜节律明显,不管是呼吸交换率㊁活体热量消耗,还是活动量,白天和黑夜间均有极显著性差异,这与啮齿类动物正常的昼伏夜出生活习性相一致[２３].而糖尿病大鼠,除热量消耗外,呼吸交换率和自主活动昼夜间均无显著性差异,说明了糖尿病大鼠不光糖代谢和脂代谢紊乱,正常生活节律也已经错乱.参考文献[１]叶仁高,陆再英．内科学[M]．６版．北京:人民卫生出版社,２００４:７９７Ｇ７９８．[２]刘烨,张琳,洪天配．２０１１年糖尿病学领域的研究进展和热点回顾[J]．中国医学前沿杂志,２０１１,３(６):２７Ｇ３１．[３]杨柳．１型糖尿病?２型糖尿病?双重糖尿病?－－附非典型糖尿病分类病例２例报道[D]．山东:山东大学,２０１３:１Ｇ３．[４]寿升芸,魏骏骏,何晓芬,等．低频电针对２型糖尿病神经痛大鼠D R GP２X３受体的抑制作用[J]．中国实验动物学报,２０１７,２５(１):５４Ｇ５９．[５]中华医学会糖尿病学分会．中国２型糖尿病防治指南(２０１０讨论稿)[S]．北京:人民卫生出版社,２０１０:１Ｇ７．[６]刘倩,李霞辉,张学梅．２型糖尿病小鼠模型的研究进展[J]．中国临床药理学与治疗学,２０１３,１８(１０):１１９６Ｇ１２００．[７]中华人民共和国卫生部．保健食品检验与评价技术规范[S]．北京:中华人民共和国卫生部,２００３．[８]WA N G X,X U Y,T A N GJ,e t a l．I n t e r a c t i o n o fMA G E D１w i t h n u c l e a rr e c e p t o r sa f f e c t sc i r c a d i a n c l o c k f u n c t i o n [C]．全国时间生物医学学术会议,２０１１:１３８９Ｇ１４００．[９]C H E N G 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93第18卷 第8期 2016 年 8 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 18 No. 8 Aug .，20162型糖尿病病证结合动物模型研究进展周方圆，杨宇峰，石岩（辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110847）摘 要：目的：综述近年来2型糖尿病病证结合动物模型的几种建立方法。

方法：主要对2型糖尿病病证结合动物模型的方法进行综述和评价。

结果：2型糖尿病病证结合动物模型主要可分为肾阴虚证2型糖尿病动物模型、脾阴虚证2型糖尿病动物模型、肾阳虚证2型糖尿病动物模型、脾气虚证2型糖尿病动物模型、血瘀证2型糖尿病动物模型、气阴两虚证2型糖尿病动物模型、阴阳两虚证2型糖尿病动物模型7种。

结论：上述7种动物模型先使用高脂饲养联合STZ 的方法来建立2型糖尿病动物模型，在此基础上使用化学药物、中药制剂和物理刺激等方法建造病证结合动物模型，并从临床表现、特异性指标和方剂反证三个方面进行综合评价，判断建造病症结合动物模型具有可行性。

关键词：2型糖尿病；病证结合；动物模型；综述中图分类号：R587.1 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2016) 08- 0093- 03收稿日期：2016-01-22基金项目：国家科技部“十一五”国家科技支撑计划项目（2007BAI20B103）作者简介：周方圆（1992-），女，辽宁东港人，硕士研究生，研究方向：中医临床内分泌。

通讯作者：石岩（1963-），男，湖北崇阳人，教授，博士研究生导师，博士，研究方向：中医内科学的临床与科研研究。

E-mail：shiyan@。

Research about “Combination of Disease and Syndrome”Animal Models of Type 2 Diabetes MellitusZHOU Fangyuan，YANG Yufeng，SHI Yan（Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110847，Liaoning，China）Abstract：Objective ：To introduce some establishing methods of the“combination of disease andsyndrome”animal models of type 2 diabetes mellitus. Methods ：The established methods for the “combination of disease and syndrome”animal models of type 2 diabetes mellitus are summarized. Results ：The methods for the“combination of disease and syndrome”animal models of type 2 diabetes mellitus can meanly be divided into seven aspects：the animal model of type 2 diabetic kidney Yin deficiency syndrome，the animal model of type 2 diabetic spleen Yin deficiency syndrome，the animal model of type 2 diabetic kidney Yang deficiency syndrome，the animal model of type 2 diabetic spleen Qi deficiency syndrome，the animal model of type 2 diabetic blood stasis syndrome，the animal model of type 2 diabetic Qi and Yin deficiency syndrome，the animal model of type 2 diabetic Yin and Yang deficiency syndrome. Conclusion ：The above seven kinds of animal models that are duplicated with high-fat diet and injection of streptozotocin to set up type 2 diabetic model，then we adopt the chemical medicine，traditional Chinese medicine preparation and physical stimulation to the“combination of disease and syndrome”animal models of type 2 diabetes mellitus. The clinical manife stations，specificity index and prescription verification can be used to evaluate and judgment that is feasible to found combination of syndrome and disease animal models.Keywords：type 2 diabetes mellitus；combination of disease and syndrome；animal models；review 糖尿病（DM）是一种以代谢紊乱为特点的临床常见病，属于中医消渴范畴，其中2型糖尿病占糖尿病整体的90%以上。

不同2型糖尿病肾病模型建立方法及成模特点比较闫永恒;李渐鹏;刘战伟;徐志祥;王新春;徐同成;邱斌;刘振华;杜方岭【摘要】综述不同的2型糖尿病肾病建模方式并进行比较,以方便实验者根据实验目的、实验室条件及经验等,从中选择出适合的建模方式,为2型糖尿病肾病的预防和治疗提供科学依据.【期刊名称】《中国食物与营养》【年(卷),期】2016(022)001【总页数】5页(P65-69)【关键词】2型糖尿病肾病;动物模型;链脲佐菌素【作者】闫永恒;李渐鹏;刘战伟;徐志祥;王新春;徐同成;邱斌;刘振华;杜方岭【作者单位】山东省农业科学院农产品研究所,济南250100;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271000;山东省农业科学院农产品研究所,济南250100;济南诚汇双达化工有限公司,济南250101;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271000;山东农业大学食品科学与工程学院,山东泰安271000;山东省农业科学院农产品研究所,济南250100;山东省农业科学院农产品研究所,济南250100;山东省农业科学院农产品研究所,济南250100;山东省农业科学院农产品研究所,济南250100【正文语种】中文糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)常见的微血管并发症，病因和发病机制目前尚不明确，研究成果提示为代谢紊乱、炎性反应机制、氧化应激、血流动力学改变、细胞因子、遗传因素及自噬等多种因素共同导致了糖尿病肾病的发病［1］。

糖尿病肾病发病不可逆，在服药之外需要医学营养治疗的有效辅助，即通过调整营养素结构来起到控制血糖、维持理想体重和预防营养不良发生的作用。

根据2013年版《中国2型糖尿病防治指南》，中国患病人群中2型糖尿病占90.0%以上［2］。

由于我国城市化进程加快、老龄化水平上升、国民生活方式转变加之肥胖和超重的比例上升，短期内我国糖尿病患病率急剧增加，对社会医疗卫生服务成本造成巨大压力，因此对于2型糖尿病预防与治疗手段的完善进程亟需加快。

大鼠2型糖尿病模型建立方法讨论专业：药理班级：六班姓名：刘畅学号：150517摘要：据国际糖尿病联合会（InternationalDiabetesFederation，IDF）估计，现在全球约8.3%的成年人患有糖尿病。

到2035年，该病患者人数预计会上升至5.92亿。

在2013年，全球约有3.82亿成年人患有糖尿病，中国的糖尿病患者人数居全球之首，调查统计人数为1.14亿。

糖尿病导致约510万人死亡，平均大约每6秒钟就有1人死于糖尿病。

2012年1月9日，中国健康教育中心公布的“中国慢病监测及糖尿病专题调查”结果显示，我国18岁及以上居民糖尿病患病率为2。

6%，60岁以上老年人患病率高达19.6%。

因此，为治疗糖尿病建立简单、稳定、经济的动物模型非常重要。

因2型糖尿病患者人数占糖尿病患病人数的90%以上，本文主要综合讨论高糖高脂饲料联合链脲佐菌素大鼠2型糖尿病模型的建立方法和注意事项。

得出结果为：使用体重在190g ~240g之间的雄性SD大鼠，通过连续两次腹腔注射小剂量链脲佐菌素并辅以去抗氧化剂处理，合理饲养并通过尾静脉采血方法建立的2型糖尿病模型较理想。

关键词：2型糖尿病，SD大鼠模型，链脲佐菌素STZ，糖尿病（diabetes）是一种以胰岛素分泌缺陷和胰岛素作用不足所致的以高血糖为特征的葡萄糖、蛋白质、脂质代谢紊乱的综合征，基本治疗方案包括饮食治疗、运动治疗、药物治疗、糖尿病监测及糖尿病教育。

病因主要有遗传因素、病毒感染、肥胖等，临床表现为“三多一少”即多尿、多饮、多食和体重减轻。

长期的高血糖最终会引起很多严重的并发症，包括心脑血管疾病、糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变，糖尿病肾病、糖尿病足、感染、糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷等[1]。

糖尿病分为1型糖尿病（Type 1 diabetes）和2型糖尿病（Type 2 diabetes）两种，1型患者因自身免疫β细胞破坏所致，每日胰岛素分泌量非常少，空腹基值及糖刺激后峰值均明显低于正常值，表现为绝对分泌不足。

型糖尿病动物模型的构建一、概述型糖尿病动物模型的构建在生物医学研究中占据重要地位，其目的在于模拟人类型糖尿病的发病过程，以揭示其病理机制、评估治疗效果以及推动新药的研发。

型糖尿病的主要特征是胰岛细胞的自身免疫性破坏，导致胰岛素生产的缺乏，进而引发一系列代谢异常。

构建能够准确反映这些特征的动物模型，对于深入理解型糖尿病的发病机理以及开发有效的治疗策略具有重要意义。

动物模型的选择对于研究结果的准确性和可靠性至关重要。

常用的型糖尿病动物模型包括自发性模型和诱导性模型两大类。

自发性模型主要依赖于遗传因素，通过选择具有特定遗传背景的动物，使其在自然条件下发生型糖尿病。

这类模型能够较好地模拟人类型糖尿病的自然发病过程，但发病时间和疾病严重程度往往难以控制。

诱导性模型则是通过手术、化学药物或病毒等手段人为诱导动物发生型糖尿病。

这类模型具有发病时间和疾病严重程度可控的优点，但可能无法完全模拟人类型糖尿病的发病机理。

在构建型糖尿病动物模型时，需要充分考虑模型的稳定性、可重复性以及实验伦理等因素。

稳定性是指模型在实验过程中能够保持稳定的疾病状态，以便进行长期观察和评估。

可重复性则是指不同实验室或不同研究者使用相同方法构建的模型应具有一致性，以确保研究结果的可靠性。

实验伦理也是不可忽视的重要因素，应确保在构建和使用动物模型的过程中遵循相关的伦理规范，尊重动物的生命权和福利。

型糖尿病动物模型的构建是一项复杂而重要的工作，需要综合考虑多种因素。

通过选择合适的动物模型，我们可以更好地研究型糖尿病的发病机理、评估治疗效果以及推动新药的研发，为人类战胜这一顽疾贡献力量。

1. 型糖尿病概述：定义、发病机制、临床特点及治疗现状。

又称为胰岛素依赖型糖尿病，是一种慢性代谢性疾病，主要特点是胰腺细胞的自身免疫性破坏，导致胰岛素分泌减少或缺失。

发病机制方面，遗传因素和环境因素共同作用于个体，使得细胞受到损害，进而引发胰岛素分泌障碍。

遗传因素在型糖尿病的发病中占据重要地位，多个基因与型糖尿病的易感性相关。

内容提要糖尿病是一类由遗传、环境、免疫等因素引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。

近年来发病率显著上升，2003年国际糖尿病联盟(IDF)报告全球糖尿病病人已超过1.94亿，预计到2025年这个数字将增加近一倍(3.33亿)。

其中2型糖尿病的发生，在国外占整个糖尿病比例的85%~95%以上，而国内则更高，达98%以上。

因此，建立比较理想的2型糖尿病动物模型对于糖尿病防治药物的研究具有十分重要的意义。

本研究采用先高脂喂养实验动物一段时间再给予链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病动物模型。

研究结果表明：高脂喂养SD大鼠28天后一次性腹腔注射链脲佐菌素 40mg/kg，可以建立稳定的具有高血脂和胰岛素抵抗为特征的2型糖尿病大鼠模型；高脂喂养ICR小鼠21天后一次性腹腔注射链脲佐菌素100mg/kg，可以建立稳定的具有高血脂和胰岛素抵抗为特征的2型糖尿病小鼠模型；在链脲佐菌素和高脂饮食协同作用下可肝脏、肾脏和胸腺等器官指数发生改变；综合分析用大鼠比用小鼠建立糖尿病动物模型更有优势。

因此，本研究已经成功建立了2型糖尿病动物模型，并且筛选出最佳的实验动物。

关键词：糖尿病；动物模型；大鼠；小鼠；链脲佐菌素；血糖；胰岛素英文缩写DM糖尿病NIDDM非胰岛素依赖性糖尿病IDDM胰岛素依赖性糖尿病STZ链脲佐菌素TC总胆固醇TG甘油三酯LDL低密度脂蛋白HDL高密度脂蛋白ip腹腔注射iv静脉注射sc皮下注射IR胰岛素抵抗INS胰岛素敏感指数GFR肾小球滤过率Ccr肌酸清除率ESRD终末期肾病DN糖尿病肾病DR 糖尿病性视网膜并发症SCH 慢性持续性高血糖症IDF 国际糖尿病联盟目录引言 (1)第一部分2型糖尿病大鼠模型的建立 (12)实验器材与方法 (12)结果 (17)第二部分2型糖尿病小鼠模型的建立 (20)实验器材与方法 (20)结果 (23)讨论 (27)结论 (36)参考文献 (37)附图 (42)中文摘要 (1)ABSTRACT (4)致谢导师及作者简介引言糖尿病是一类由遗传、环境、免疫等因素引起的以高血糖为特征的代谢性疾病。

糖脉康颗粒对2型糖尿病气阴两虚夹瘀证大鼠CRP及脏器指数的影响陈群;苏傲蕾;黄正团【摘要】目的探讨糖脉康对2型糖尿病气阴两虚夹瘀证大鼠模型CRP及脏器指数的影响.方法构建筛选得到18只2型糖尿病气阴两虚夹瘀证大鼠,随机分成模型组(9只)与糖脉康组(9只),测量血糖、胰岛素、CRP、脏器指数等指标,研究和观察糖脉康对模型大鼠CRP指标及脏器指数的影响.结果糖脉康干预后,实验大鼠CRP指标、脏器指数有下降,组间差异有统计学意义(P<0.01).结论中医理论指导下使用糖脉康对2型糖尿病气阴两虚夹瘀证大鼠CRP、脏器指数等指标有改善.【期刊名称】《光明中医》【年(卷),期】2017(032)023【总页数】4页(P3393-3396)【关键词】消渴;2型糖尿病;中药;C-反应蛋白(CRP);脏器指数【作者】陈群;苏傲蕾;黄正团【作者单位】航空总医院药学部北京 100012;广西卫生职业技术学院医学基础部南宁 530023;广西中医药大学实验动物中心南宁 530001【正文语种】中文2型糖尿病又称非胰岛素依赖糖尿病(noninsulin-dependent diabetes mellitus，NIDDM)，约占全部糖尿病患病人数的90%以上。

近年来，血管内皮损伤是被共认为糖尿病并发症的重大诱发原因之一，其损伤的程度与并发症的发病时间、发病程度存在十分密切的关系。

本实验以气阴两虚夹瘀证作为中医药防治糖尿病的出发原点，构建筛选出具有典型气阴两虚夹瘀证候特征的2型糖尿病大鼠，使用糖脉康对模型进行口服给药干预。

深入分析糖脉康对2型糖尿病发病早期CRP指标及脏器指数的影响，为中医提前防治糖尿病及其并发症提供中医理论支持和实践治疗基础。

1.1 实验动物 SPF级SD雄性大鼠30只，体质量为160～180 g，实验动物由湖南史莱克实验动物公司提供。

普通饲料和高脂饲料分别由上海史莱克实验动物公司和广西中医研究院提供。

《梓醇对2型糖尿病大鼠骨骼肌AMPK-GLUT4信号通路调控的机制研究》梓醇对2型糖尿病大鼠骨骼肌AMPK-GLUT4信号通路调控的机制研究一、引言2型糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其特征在于胰岛素抵抗和血糖水平异常升高。

骨骼肌作为体内主要的胰岛素作用靶点，对于维持正常的血糖稳态具有至关重要的作用。

近年来，AMPK （腺苷酸活化蛋白激酶）和GLUT4（葡萄糖转运蛋白4）信号通路在调节骨骼肌对葡萄糖的摄取和利用中发挥着关键作用。

梓醇作为一种天然植物提取物，被认为具有改善胰岛素抵抗和调节糖代谢的潜力。

本研究旨在探讨梓醇对2型糖尿病大鼠骨骼肌AMPK/GLUT4信号通路的调控机制。

二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验选用2型糖尿病模型大鼠，将其随机分为梓醇治疗组、模型对照组和正常对照组。

2. 药物处理梓醇治疗组大鼠给予梓醇灌胃治疗，模型对照组和正常对照组分别给予相应剂量的生理盐水。

3. 样本采集与处理各组大鼠在实验结束后进行安乐死，取其骨骼肌组织进行后续的分子生物学分析。

4. 实验方法利用Western blot、RT-PCR等技术检测各组大鼠骨骼肌中AMPK、GLUT4等关键分子的表达水平及磷酸化程度，分析梓醇对AMPK/GLUT4信号通路的调控作用。

三、结果1. 梓醇对AMPK/GLUT4信号通路的影响与模型对照组相比，梓醇治疗组大鼠骨骼肌中AMPK的表达水平及磷酸化程度显著提高，GLUT4的表达也呈现上升趋势。

这表明梓醇能够激活AMPK信号通路，进而促进GLUT4的表达和功能。

2. 梓醇对胰岛素敏感性的改善作用梓醇治疗组大鼠的血糖水平和胰岛素抵抗指数均较模型对照组有所降低，说明梓醇能够改善2型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性。

3. 梓醇对骨骼肌葡萄糖摄取的影响通过体外实验发现，梓醇能够促进骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用，进一步证实了梓醇对AMPK/GLUT4信号通路的调控作用。

四、讨论本研究结果表明，梓醇能够激活2型糖尿病大鼠骨骼肌中的AMPK信号通路，提高GLUT4的表达水平，从而改善胰岛素抵抗和血糖水平。

改良2型糖尿病大鼠模型的构建*袁鑫1，2，蔡雪洲1，2，谢航1，丁未尧1，蔡飞1，2＊＊（1．湖北科技学院药学院，湖北咸宁437100；2．湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室）摘要：目的构建一种大鼠2型糖尿病模型制作的改良方案。

方法诱导饲料与维持饲料交互喂养的方式联合低剂量链脲佐菌素（STZ25mg/kg）诱导2型糖尿病大鼠模型，正常组给予等体积的柠檬酸盐缓冲液，将空腹血糖值≥11．1mmol/L的大鼠定为糖尿病大鼠模型。

结果与正常组相比，实验组的大鼠血糖值明显增高，实验组的大鼠体重值明显下降。

结论低剂量链脲佐菌素联合诱导饲料与维持饲料交互喂养建立2型糖尿病模型方法简单、且模型稳定。

关键词：大鼠；糖尿病；链脲佐菌素；血糖中图分类号：Ｒ587文献标识码：A文章编号：2095-4646（2014）06-0472-03The Construction of the Improved Type2Diabetic Model ofＲatsYUAN Xin，CAI Xue-zhou，CAI Fei，et al（School of Pharmacy，Hubei University of Science and Technology，Xianning Hubei437100，China）ABSTＲACT：Objective To construct the improved type2diabetic model of rats．Methods The rat model of type2diabetes was established by alternate ways of induction and maintenance of feed combined with low-dose streptozotocin（STZ25mg/kg），and the normal group received an equal volume of citrate buffer．A diabet-ic rat model was successfully established when the fasting plasma glucose was greater than11．1mmol/L in rats．Ｒesults Compared with the normal group，blood glucose level was significantly higher and body weight of rats was significantly decreased in the experimental group of rats．Conclusion Alternate ways of induction and main-tenance of feed combined with low-dose STZ may be a simple and stability model of type2diabetes．KEY WOＲDS：Ｒat；Diabetes；Streptozotocin；Serum glucose据流行病学资料显示，1980年至今的糖尿病的患病率为0．7%。

SD大鼠2型糖尿病模型的建立及相关指标的测定陈嘉;张永斌;桑传兰;陈苑;高欣;董浩然;曹崇波【摘要】通过链脲佐菌素(STZ)结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病大鼠模型.30只健康雄性SD大鼠随机分为模型组(20只)、空白组(10只).模型组喂饲高糖高脂饲料4周后,用STZ 30 mg/kg一次性左下腹腔注射.检测试验第1周、第4周,注射STZ后第1周、第4周、第8周、第12周空腹体重、血清葡萄糖(BG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、胰岛素(INS)、葡萄糖依赖性促胰岛素释放肤(GIP)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)等指标,进行统计分析.处死大鼠,取胰腺进行病理切片检查.动物成模率为75％.试验第4周,模型组TG、TC 值明显升高,与空白组比较,P＜0.01.注射STZ后第1、4、8、12周,模型组BG、TG、TC值均明显升高,与空白组比较,P＜0.01；ISI均明显降低,与空白组比较,P＜0.01.注射STZ后第1、4、8周,模型组的GLP-1、IGF-1值明显降低,与空白组比较,P＜0.01.注射STZ后第12周,模型组的GLP-1、GIP、IGF-1值明显降低,与空白组比较,P＜0.01.试验结果表明,STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食可成功诱导2型糖尿病大鼠模型.GIP、IGF-1、GLP-1等细胞因子参与了2型糖尿病的病理发生.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2012(033)006【总页数】5页(P91-95)【关键词】2型糖尿病;链脲佐菌素;动物模型【作者】陈嘉;张永斌;桑传兰;陈苑;高欣;董浩然;曹崇波【作者单位】广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405;广州中医药大学实验动物中心,广东广州510405【正文语种】中文【中图分类】S852.3糖尿病是严重危害人类健康的慢性疾病之一，目前全球糖尿病患者超过7亿，其中90%为非胰岛素依赖型糖尿病，即2型糖尿病。

伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立作者：孙兆峰王利张玲李大伟夏作理【摘要】目的制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型。

方法选择40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组12只和实验组28只，对照组以标准大鼠饲料饲喂，实验组以高脂高盐饲料喂养，两组均饮用大鼠专用去离子水，16 w进行正糖钳实验，确定胰岛素抵抗，腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造成2型糖尿病。

实验过程中每周测食量、水量和体重，每4 w测血糖和尾动脉血压，实验16 w时取血测空腹血浆胰岛素。

结果饲喂高脂高盐饲料16 w后，与对照组相比，实验组尾动脉血压明显升高，差异显著（P＜0.01）；实验组空腹胰岛素浓度明显高于对照组（P＜0.01）；与对照组相比，实验组葡萄糖输注速率明显降低，两组差异有统计学意义；STZ注射后实验组血糖明显升高，达到了糖尿病的诊断标准。

结论高脂高盐饮食配合STZ腹腔注射可成功诱导出伴高血压2型糖尿病大鼠模型。

【关键词】2型糖尿病；高血压；高脂肪高盐饮食；高胰岛素正常血糖钳夹实验高血压是糖尿病患者极为常见的共患病，总体上糖尿病伴高血压的患病率约在20%～50%左右。

以往研究多集中于单纯2型糖尿病或单纯高血压，对2型糖尿病合并高血压的实验研究相对较少，而后者的实验结论往往对临床则有更高的指导意义。

长期食用以脂肪为代表的高热量饮食可导致胰岛素抵抗(IR)，而高盐饮食则和高血压的发生有关，新近已有学者〔1，2〕采用不同配比的高脂高盐饲料喂养建立代谢综合征(MS)大鼠模型。

本研究旨在以高脂肪高盐饮食诱导配合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立一种伴高血压的2型糖尿病大鼠模型。

1 材料与方法1.1 实验动物选用SPF级雄性Wistar大鼠40只，体质量（140±20）g，购于山东中医药大学实验动物中心，合格证号：SCXK(鲁)20050015。

动物饲养于半透明IVC盒内，自由饮食进水，明暗周期12 h，单笼饲养。