2型糖尿病大鼠模型制备实验研究-陆少君

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2型糖尿病大鼠模型的建立与评价

高胰岛素 - 正常血糖钳夹实验 [ 2 ] :取对照组和高脂组大鼠各 6 只 , 禁食不禁水 12 h 后称重 , 以 0156 mol/L 水合氯醛 ( 013 m l/100 g) 腹腔注射麻醉。将大鼠仰位固定于恒温手术台上 (保持体温在 37℃左右 )剪开左颈部皮肤 ,分离左颈外静脉 ,结扎
远心端 ,切口 ,近心端方向插入 PE50 导管 (插管中预先注入 5 ×104U /L 肝素生理盐水溶液 ) ,结扎固定后连接一个三通管 ,出口端与静脉导管相接 ,一进口端与输注胰岛素的蠕动泵 (进口端接 40 U /L 的胰岛素 )相连 ,另一进口端与微量注射仪的注射器 (内装 0156 mol/L 葡萄糖溶液 )相接。剪开右颈部皮肤 (近中线 ) ,分离颈总动脉 ,结扎远心端 ,动脉夹夹住近心端后 ,切口 ,于近心端方向插入 PE50导管 (插管中预先注入 5 ×104 U /L 肝素生理盐水溶液以润滑插管 ) ,结扎固定后亦连接一个三通管以取血样 ,两个进口端用肝素帽封闭。静置 30 m in后先测定基础血糖值 (BB G) ,然后以 8 mU / ( kg·m in) 恒速输注胰岛素 , 6 mg / ( kg·m in)输注 0156 mol/L 葡萄糖溶液 , 10 m in后取血测定血糖值 (用 1 m l盛有 012 m l的 1 ×106 U /L 肝素钠注射器从右侧三通管的一个进口端回抽 014 m l血后 ,用注射器从另一进口端取一滴血用于纸片法测血糖 , 然后将回抽的 014 m l血连同肝素钠推入体内 ) ,调整葡萄糖输注率 ,使血糖维持在 BB G ±015 mmol/L ,每 8 m in测定血糖 1次 ,当连续 3次血糖值均在上述范围时 ,即达到稳定状态。达到稳态后 ,每 5 m in测血糖一次 ,记录稳态下最后 6次葡萄糖灌流速度 ( GIR )的平均值作为 GIR [m g / ( kg·m in) ]。 1. 2. 3 腹腔注射小剂量 STZ联合 CFA 高脂组大鼠 ( n = 64只 )空腹 6 h后腹腔注射 STZ 12 mg / kg, 次日腹腔注射 CFA 015 m l/ kg[ 3 ] , 7 d后尾静脉采血用血糖仪测定随机血糖 ,以随机血糖 > 1111 mol/L 为 T2DM 成模标准 [ 4 ] ,血糖不达标的重复上述步骤 , 3次仍不达标者 ,退出该实验。空白对照组仅注射等量枸橼酸缓冲液。 1. 2. 4 指标检测生化法测 TG、FB G,化学发光法测 F Ins。 1. 3 统计学处理用 SPSS 1110 软件进行统计学处理实验数据 ,数据用 x ±s表示 ,计量资料的两组间比较采用两样本 t检验 , F Ins和胰岛素敏感指数 ( ISI)呈非正态分布 ,进行自然对数转换后比较 , ISI

2型糖尿病肾病大鼠模型制备研究

１材料与方法
电仪器有限公司生产的Ｓ８Ｎ６２型放射免疫计数器。血标本采集予氯氨酮７ｇｋ麻醉，０ｍ／ｇ心脏采血检测血糖、血胰岛素、血甘油三酯（Ｇ）血胆固醇（Ｃ）。Ｔ、Ｔ等全自动仪检测血肌酐（ｒ、Ｇ、Ｃ及尿Ｃ、Ｃ）ＴＴｒ尿微量蛋白。
于其他组（Ｐ＜００）大鼠肾脏病理形态变化最明显。结论：联法组较好地模拟了人类２型糖尿病的发病过程，．５，三并出现了早期肾脏病变。关键词糖尿病．２型糖尿病肾病动物模型
目前我国糖尿病的发病率呈升高趋势，但发病机制尚未完全阐明，预防和治疗方面仍不完善，立在建理想的动物模型对进一步研究糖尿病具有重要的意义。国内外研究２型糖尿病肾病多采用高糖高脂饮而食配合小剂量链脲佐菌素（Ｔ）］ＳＺＥ的动物模型。本实１验采用新的方法（三联法）制备２型糖尿病肾病模型，即先予以切除大鼠右肾，继而高糖高脂饮食诱导，再小剂量ＳＺ腹腔注射部分破坏大鼠的胰岛Ｂ细胞，Ｔ使大鼠出现糖尿病肾病的早期改变如肾小球高滤过、微量白蛋白尿等。讨此方法制造２型糖尿病肾病大探鼠模型的可行性。
１判断标准２型糖尿病肾病大鼠需具备以下条．３件：１随机血糖 ≥１ｏ／伴胰岛素敏感性下降；（）６ｍｍｌＬ，（）２糖尿病肾病早期肾脏肥大，肌酐清除率（ｃ）加Ｃｒ增或出现微量白蛋白尿。１数据处理用ＳＳ００软件进行分析，果以．４ＰＳ１．结均数 ±标准差（ｓ表示。 ± ）

2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代谢特征分析

引言：
2型糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其发病率逐年上升。该病的发生与遗传、环境、生活方式等多种因素有关。为了深入研究2型糖尿病的发病机制和治疗方法，建立可靠的动物模型是至关重要的。大鼠作为常用的实验动物，具有易饲养、易繁殖、费用低等优点，被广泛应用于医学研究中。
在本次演示中，我们通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型，并对其糖代谢特征进行分析。
谢谢观看
实验组（n=18）360±406.5±0.810.6±2.7*
注：与对照组比较，*P<0.05。
3、胰岛素抵抗与胰岛细胞功能
与对照组相比，实验组大鼠的HOMA-IR显著升高（P<0.05），而ISI显著降低（P<0.05），表明实验组大鼠存在胰岛素抵抗和胰岛细胞功能受损。结果如表2 所示。
与对照组相比，实验组大鼠的体重和血糖水平均显著升高（P<0.05），而对照组大鼠的体重和血糖水平无明显变化（P>0.05）。结果如表1所示。
表1：两组大鼠体重与血糖水平比较（x±s）
组别体重（g）FPG（415±355.0±0.67.8±1.9
表2：两组大鼠胰岛素抵抗与胰岛细胞功能比较（x±s）
组别HOMA-IRISI
对照组（n=19） 1.9±0.416.4±3.8
实验组（n=18）3.6±0.89.5±2.7
注：与对照组比较，*P<0.05。
4、讨论
本研究成功建立了2型糖尿病大鼠模型，并发现模型大鼠的体重、血糖水平和胰岛素抵抗指数均显著高于对照组，而胰岛细胞功能指数显著低于对照组。这些结果表明，建立的2型糖尿病大鼠模型符合临床2型糖尿病的特征，为研究该病的发病机制和治疗提供了可靠的动物模型。然而，建模过程中可能受到某些因素影响，如STZ剂量、注射途径等。

Ⅱ型糖尿病神经病理性痛大鼠模型的建立

（ｘｅｍｅｔｒｕ，ｉｈｆｔｎｉｈｇｕｏｅｇｏｐｎ＝５）Ｔｅｒｔｉｒｕｗｅｅｆｄｏｏｍａｉｔｅｐｒｎｏｐｈｇａｄｈｇｌｃｓｒｕ，ｉｇａ０．ｈａｓｎｇｏｐＡｒｅｎｎｒｌｅｄ
Ａｂｔａｔ０ｊｔｅＴｓｂｉｅｍｏｅｏｐｉｅｃｅｒｐｔｃａｔ．ｔｏｓ６Ｄｓｃｂｅｉ：ｏｅｔｌｈｔｄｌｆｙｅ２ｄａｔｕｏａｉｐｉｉｒｓＭｅｄ：０Ｓｒｃｖａｓｈｔｂｉｎｈｎｎａｈ
ＬＡＮＱｉ — ｕｎＩｎＱａｇ
（ｐｒｍｅｔｆｅｔｅｉｌｇ，ｈｅｏｄＡｆｌｔｄＨｏｐｔｌｆｅｚｏｄｃｌｌｇ；ａｎＩｓｉ — ＤｅａｔｎｓｓｏｙｔｅＳｃｎｆｉｅｓｉｎｈｕＭｅｉａＣｏｌｅＰｉｔｕｏＡｎｈｏｉａａｏＷｅｎｔｔ，ｅｚｏｄｃｌｌｇ，ｎｈｕ３５２）ｅＷｎｈｕＭｅｉａＣｏｌｅＷｅｚｏ，２０７ｅ
组，即普通饲料组，ｎ＝１）Ｂ组（０，实验组，即高脂高糖组，ｎ＝５）组以普通饲料喂养，０。Ａ８周后单
次空腹腹腔注射柠檬酸缓冲液。Ｂ组高脂高糖喂养８周诱发胰岛素抵抗，以不同剂量链脲佐菌素继（ｒｐｏｏｏｉ，Ｔ，０／、５／ｇ４ｇｋ）ｓｅｔｚｔｃＳＺ３ｋ３ｋ、０ｍ／ｇ腹腔注射１，不同时间点分别测体重、ｔｎｍｇｇｍｇ次于血糖、胰岛素，计算胰岛素敏感性、机械缩足闽值和热缩足潜伏期的变化。结果：瞻高糖饮食８周，型高模组大鼠体重明显增加，空腹胰岛素浓度升高，岛素敏感性下降，胰机械缩足阈值和热缩足潜伏期无

2型糖尿病早期肾病大鼠模型制备及二甲双胍干预作用

ｉｐ）腹腔内注射，７２ｈ后测定空腹血糖，血糖值大于１６．６７ｒｍｎｏｌ／Ｌ的大鼠即为建立的２型糖尿病大鼠模型。将这些大鼠随机分为
两组，每组１０只大鼠：模型组，喂养二甲双胍组（２５０ｍｇ／ｋｇ）。对照组和模型组都填喂相等的蒸馏水，二甲双胍（２５Ｏｍｇ／ｋｇ）是胃内给药同时这两个模型和二甲双胍组的大鼠继续喂养高脂肪和糖饮食。治疗８周后，取血测定观察胰岛素的含量，ＦＳＧ、
含量：光镜下观察肾脏病理学变化。结果模型大鼠血糖值明显高于正常对照组（尸＜０．０１）；ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ — Ｃ值明显高于正常对照组（Ｐ＜００１）、ＨＤＬ～Ｃ尿蛋白含量、血肌酐、尿素氮含量亦明显升高（＜（）．０１）；肾脏组织病理性损伤明显．．用二甲双胍治疗８周后．经高脂喂养联合低剂量链脲霉素诱导的２型糖尿病早期肾病大鼠的ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ值降低，尿蛋白含量、血肌酐
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０３１＆Ｃｈｉｎ，ａ＂Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＡＮＰＪｉｎｇｑｉａｎｇ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｊｑ５６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｉｎ．ｃｎ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｍｅｔｆｏｒｍｉｎＯｌｌｅａｒｌｙｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｉｎｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｍｏｄｅｌ

2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证

ｍｏｄｅｌ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ
ｇｒｏｕｐｏｆｒａｔｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｌｏｏｄ
Ｓ１．ｅｏｓｅ，ｉｎｓｕｌｉｎ
ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｆｒｏｍｔｈｅｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｉｎｄｉｃｅｓ
ａｎｄ
ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ
ｔｈｅ
ｍｏｄｅｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｒａｔｅｉｓ
Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒａｔ
征，表现为胰岛素敏感性降低和胰岛素反应性降低№Ｊ。临床和流行病学研究表明，通常胰岛素抵抗是启动２型糖尿病发生的初始原因¨Ｊ。本研究将高糖高脂饲料喂养和药物干预相结合，采用成年ＳＤ大鼠高糖高脂饲料喂养一段时间后产生胰岛素抵抗，再给予小剂量的ＳＴＺ，诱导出病理、生理改变都接近于人类２型糖尿病的动物模型。
Ｍａｌｅ
ＳＤａｄｕｌｔ
ｒａｔｓ
ｆｅｄ
ｈｉｓｈ一
ｍｏｎｔｈ，ｉｎｄｕｃｅｄＴｅｓｔ
ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｇｉｖｅｎ
ｌｏｗ—ｄｏｓｅ
ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ（ＳＴＺ，２５ｍｇ／ｋｇ，ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ），ｓｅｔ
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ
ｕｐｉｎｔｙｐｅ２ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｓｕｇ－
具有高度的异质性（有许多不同的病因），因此无论是自胰岛素发性遗传性、诱导性还是转基因动物模型，都难以完全模拟出人类２型糖尿病的复杂性。本模型具有很多与２
两组大鼠胰岛素敏感性、胰岛素水平
敏感指数（ＩＳＩ）结果显示模型组胰岛素降低，胰岛素
敏感性降低，与对照组相比，差异具有统计学意义。
见表３。
表３糖尿病模型大鼠与正常大鼠血清胰岛素及胰岛素敏感指数｛；４－ｓ）

2型糖尿病大鼠模型制备实验研究

2型糖尿病大鼠模型制备实验研究陆少君;曾伟斌;臧林泉【摘要】目的探究建立2型糖尿病大鼠模型的主要影响因素,为制备2型糖尿病大鼠动物模型提供方法参考.方法根据不同的高糖高脂饲料（HDF）配方、喂养周期及STZ注射剂量（35 mg/kg和40 mg/kg）,将90只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（NC组）及8个模型组（A-H组）,每组各10只.STZ注射5 d后检测各组大鼠空腹血糖（FBG）,首次空腹血糖测定后各组大鼠眼眶采血测定血清中总三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及空腹血清胰岛素（FINS）水平.第8周处死大鼠取肝脏、肾脏、脾脏、胰腺,称质量并计算脏器系数.结果与正常对照组比较,各模型组的血糖值显著升高（P〈0.01）,TG、TC及LDL-C水平和肝、肾、胰腺等脏器系数都有不同程度升高且胰岛素敏感指数显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,成功建立2型糖尿病大鼠模型;大鼠注射STZ 35 mg/kg较40 mg/kg存活率大、存活时间长,血糖值差异无统计学意义（P〉0.05）;喂养周期为8周后注射STZ的大鼠较4周大鼠死亡率高.结论 HDF喂养4周后注射35 mg/kg STZ是建立2型糖尿病大鼠模型的较合适方法.【期刊名称】《广东药科大学学报》【年(卷),期】2017(033)005【总页数】5页(P624-628)【关键词】2型糖尿病高糖高脂饲料 STZ剂量 SD大鼠【作者】陆少君;曾伟斌;臧林泉【作者单位】[1]广东药科大学实验动物中心,广东广州510006 [2]广东药科大学药学院,广东广州510006;;[1]广东药科大学实验动物中心,广东广州510006 [2]广东药科大学药学院,广东广州510006;;[1]广东药科大学实验动物中心,广东广州510006 [2]广东药科大学药学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R332糖尿病是严重危害人类健康的慢性疾病之一，属于临床上常见的代谢性疾病。

SD大鼠Ⅱ型糖尿病模型制备的改进及其肾脏细胞凋亡的研究

SD大鼠Ⅱ型糖尿病模型制备的改进及其肾脏细胞凋亡的研究发布时间：2021-05-10T04:01:13.552Z 来源：《中国科技人才》2021年第7期作者：顾玉姣李学英张睿毛佳泉樊军佑寇炜[导读] Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏细胞过度凋亡，细胞凋亡的增多可能是糖尿病肾病发展的原因之一。

西北民族大学医学院甘肃兰州 730030摘要：目的不同浓度梯度链脲佐菌素（Streptozotocin, STZ）联合高糖高脂喂养建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型并观察糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的变化。

方法正常对照组、模型组喂饲常规啮齿类动物饲料1周后，模型组更换喂饲高脂高糖饲料，正常对照组继续喂饲常规啮齿类动物饲料。

2周后，模型组大鼠腹腔注射不同浓度链脲佐菌素(35mg/kg、45mg/kg、60mg/kg、70mg/kg)并继续高脂饮食，正常对照组等体积腹腔内注射枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液并继续正常饮食。

诱导2周后建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型。

空腹血糖大于等于7.8mmol/L即视为造模成功。

生化分析仪检测大鼠血脂中TG（甘油三酯）、LDL-C（低密度脂蛋白胆固醇）、HDL-C（高密度脂蛋白胆固醇）、ALT（丙氨酸氨基转移酶），血糖试纸测定空腹血糖，BP-300A全自动大鼠无创血压测量系统测量大鼠尾动脉血压等参数的变化。

TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡，计算细胞凋亡面积。

结果与对照组相比，模型组平均体重、空腹血糖值显著低于对照组（P<0.01），TG、LDL-C显著升高（P<0.01），HDL-C极显著降低（P<0.01），胰岛素低于对照组（P<0.05），血压极显著升高（P<0.01），肾脏细胞凋亡面积极显著增高（P<0.01）。

模型组1（）成模型率为60%；模型组2成模型率为100%；模型组3、4大鼠全部死亡。

结论 SD大鼠采用高脂高糖配方饲料结合低剂量链脲佐菌素腹腔注射可成功制备Ⅱ型糖尿病大鼠动物模型。

2型糖尿病大鼠模型的制备与评价

[ J]. 高血压杂志, 2004, 12( 2) : 483~ 486 [ 2] 顾东风, JiangH e, 吴锡桂, 等 1 中国成年人高血压患病率、知晓率、
治疗和控制状况 [ J] . 中华预防医学杂志, 2003, 37( 2 ): 84~ 89 [ 3] 全国血压抽样调查协作组 1 中国高血压的患病率、知晓率及治疗
面对成都地区中老年人群高血压流行的现状, 高血压防治工作仍需进一步加强。应尽快建立全民血压监测计划, 大幅度提高知晓率; 应加大投入, 特别是在农村地区的投入, 吸引受过良好训练的医生到基层去, 到农村去, 这样才能提高农村老年高血压患者的管理水平, 提高高血压的控制率。
参考文献:
[ 1] 中国高血压防治指南修订委员会 1 2004年中国高血压防治指南
和控制状况: 1991年抽样调查结果 [ J] 1 高血压杂志, 1995, 3: 14~ 18 [ 4] 黄晓波, 胡蓉, 乐庆荣, 等 1 重庆市城乡居民高血压患病及影响因素分析 [ J] 1 中国公共卫生, 2009, 25( 1 ): 25~ 27 [ 5] 王建, 蒋璐 1 上海市某社区老年高血压患病率与管理现况的调查 [ J] 1 上海预防医学杂志, 2002, 14( 8 ) : 391~ 392 [ 6] 阮蕾, 秦方, 阎亚非, 等 1 高血压病现状及问题 1 成都 7288 例人群分析 [ J] 1 高血压杂志, 2002, 10( 1 ) : 87~ 90
M ed ical University, Shanghai 200433, China
= Ab stract> O bjective T o estab lish an anim a lmode l sim ilar to the m etabo lic abno rm alities o f hum an type 2 d iabe tesm e-l litus w ith insu lin resistance. M ethods 120 m ale SD ra ts w ere random ly d iv ided into con tro l group and exper im enta l group. Ex-

实验性2型糖尿病大鼠模型的建立和评价(Ⅰ)——体重、血糖和肝糖原的变化

ｆｏｏｂｎｄｗｔｌｗ —ｄｓＴｏｐｏｙｗｉｔ，ｆｔｇｐａｍｌｃｓｎｅａｉｇｃｇｎｗｒｏｄｃｍｉｉｏｅｈｏｅＳＺｇｕ．Ｂｄｅｈｓａｉｌｓａｇｏｅａｄｈｐｔｙｏｅｅｅｒｇｓｎｕｃｌ
［ｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｓｂｉｎｖｌａｙｅ２ｄａｅｃｒｔｏｅｉｄｃｄｂｉｉｉｏｅｄｎＡｓｃ］ｒｊｃｉ：ｏｅｔｌｈａｄｅａｕｔｔｐｉｂｔａｍｄｌｎｕｅｙｈｇｌｄｆｄｆｅｉｇｖａｓｅｉｈｐｓｏ
ｃｍｉｅｉｏ —ｄｓｔｐｏｏｉ（ＴｏｂｎｄｗｔｌｈｗｏｅｓｅｔｚｃｎＳＺ）ｉｔｐｒｏｅｌｉｅｔｎＭｅｈｄ：Ｗｉａａｅｅｒｎｏｙｒｎａｅｔｎａｎｃｉ．ｒｉｊｏｔｏｓｓｒｒｔｗｒａｄｍｌｔｓ
ｌｖｌｎｅａｃｇｙｏｅｏｔｎｅｅｄｈｐｔｌｃｇｎｃｎｅｔａｉ
ＺＡＧＲ — ｘｅＪＺｅｇ — ｐｎ，ＷＡＧＪａ，ｅａ．（ｌｉａＰａｍｃＫｙｉｉｌｅｏｔｔＨＮｕｕ，ＩｈｎＡｉｇＮｕｎｔ１ＣｉｃｌｈｒａｙｅＤｓｐｉｆＳａｎｃｎｅＡｍｎｓａｏｆｒｄｔｎｌｈｎｓｄｉｅａｚｏｅｅａＨｏｐｔ，ＬｎｈｕＣｍｍｎ，Ｌ７０５）ｄｉｉｒｔｎｏａｉｏａＣｉｅｅＭｅｉｎ，ＬｎｈｕＧｎｒｌｓｉｌａｚｏｏａｄＰＡ，３００ｔｉＴｉｃａ

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广东药科大学学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
２型糖尿病大鼠模型制备实验研究
陆少君１ ꎬ曾伟斌２ ꎬ臧林泉２
( 广东药科大学１.实验动物中心ꎻ ２.药学院ꎬ广东广州５１０００６)
摘要: 目的探究建立２型糖尿病大鼠模型的主要影响因素ꎬ为制备２型糖尿病大鼠动物模型提供方法参考ꎮ 方法根据不同的高糖高脂饲料( ＨＤＦ) 配方、喂养周期及ＳＴＺ注射剂量(３５ｍｇ / ｋｇ和４０ｍｇ / ｋｇ) ꎬ 将９０只雄性ＳＤ大鼠随机分为正常对照组( ＮＣ组) 及８个模型组( Ａ￣Ｈ组) ꎬ每组各１０只ꎮ ＳＴＺ注射５ｄ后检测各组大鼠空腹血糖 ( ＦＢＧ) ꎬ 首次空腹血糖测定后各组大鼠眼眶采血测定血清中总三酰甘油 ( ＴＧ) 、总胆固醇( ＴＣ) 、高密度脂蛋白胆固醇( ＨＤＬ￣Ｃ) 、低密度脂蛋白胆固醇( ＬＤＬ￣Ｃ) 及空腹血清胰岛素( ＦＩＮＳ) 水平ꎮ 第８周处死大鼠取肝脏、肾脏、脾脏、胰腺ꎬ称质量并计算脏器系数ꎮ 结果与正常对照组比较ꎬ各模型组的血糖值显著升高( Ｐ<０.０１) ꎬＴＧ、ＴＣ及ＬＤＬ￣Ｃ水平和肝、肾、胰腺等脏器系数都有不同程度升高且胰岛素敏感指数显著降低( Ｐ< ０.０５ꎬＰ< ０.０１) ꎬ成功建立２型糖尿病大鼠模型ꎻ大鼠注射ＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇ较４０ｍｇ / ｋｇ存活率大、存活时间长ꎬ血糖值差异无统计学意义( Ｐ>０.０５) ꎻ喂养周期为８周后注射ＳＴＺ的大鼠较４周大鼠死亡率高ꎮ 结论ＨＤＦ喂养４周后注射３５ｍｇ / ｋｇＳＴＺ是建立２型糖尿病大鼠模型的较合适方法ꎮ 关键词: ２型糖尿病ꎻ 高糖高脂饲料ꎻ ＳＴＺ剂量ꎻ ＳＤ大鼠中图分类号: Ｒ－３３２文献标志码: ＡＤＯＩ: １０.１６８０９ / ｊ.ｃｎｋｉ.２０９６－３６５３.２０１７０６２３０４
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍａｉｎｉｎｆｌｕｅｎｃｅｆａｃｔｏｒｓｏｎｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｓａｎｄｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｍｏｄｅｌ. ＭｅｔｈｏｄｓＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈｉｇｈｓｕｇａｒａｎｄｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔＨＤＦｆｅｅｄｉｎｇｃｙｃｌｅａｎｄｉｎｊｅｃｔｉｏｎｄｏｓｅｏｆＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇａｎｄ４０ｍｇ / ｋｇｎｉｎｅｔｙｍａｌｅＳＤｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐＮＣｇｒｏｕｐａｎｄ８ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｓｇｒｏｕｐＡ￣Ｈ . ＦｉｖｅｄａｙｓａｆｔｅｒＳＴＺｉｎｊｅｃｔｉｏｎｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｆａｓｔｉｎｇｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅＦＢＧａｎｄｓｅｒｕｍｔｏｔａｌｇｌｙｃｅｒｉｄｅ
２
广东药科大学学报
பைடு நூலகம்
ｔｈｅｄｏｓａｇｅａｔ４０ｍｇ / ｋｇｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓａｇｅｓｏｆＳＴＺｔｒｅａｔｍｅｎｔＰ>０.０５ . Ａｆｔｅｒ８ｗｅｅｋｓｏｆｆｅｅｄｉｎｇｔｈｅｍｏｒｔａｌｉｔｙｒａｔｅａｆｔｅｒＳＴＺｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆ４ｗｅｅｋｓ. ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆＳＴＺａｔ３５ｍｇ / ｋｇａｆｔｅｒ４ｗｅｅｋＨＤＦｆｅｅｄｉｎｇｉｓａｂｅｔｔｅｒｗａｙｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｍｏｄｅｌｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｓ. Ｋｅｙｗｏｒｄｓｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｈｉｇｈｓｕｇａｒａｎｄｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔＳＴＺｄｏｓｅＳＤｒａｔｓ
收稿日期: ２０１７￣０６￣２３基金项目: 广东省科技计划项目( Ｎｏ２０１５Ａ０２０２１１０２８) 作者简介: 陆少君(１９８８—) ꎬ女ꎬ２０１５级在读硕士研究生ꎬ主要从事药理学研究ꎬＥｍａｉｌ:３１６７４４０８８＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者: 臧林泉(１９６５—) ꎬ博士ꎬ硕士生导师ꎬ主要从事药理学研究ꎬＥｍａｉｌ:ｚａｎｇｌｑ＠１６３.ｃｏｍꎮ 网络出版时间: 2017-10-12 10:30:5 9网络出版地址: /kcms/detail/44.1733.R.20171012.1030.002.html
ＴＧｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＴＣｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＨＤＬ￣ＣｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＬＤＬ￣ＣａｎｄｆａｓｔｉｎｇｓｅｒｕｍｉｎｓｕｌｉｎＦＩＮＳｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ. Ｅｉｇｈｔｈｗｅｅｋｓｌａｔｅｒａｌｌｒａｔｓｗｅｒｅｓａｃｒｉｆｉｃｅｄａｎｄｔｈｅｌｉｖｅｒｋｉｄｎｅｙｓｐｌｅｅｎａｎｄｐａｎｃｒｅａｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｎｄｗｅｉｇｈｔｅｄａｎｄｔｈｅｏｒｇａｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄ. ＲｅｓｕｌｔｓＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＦＢＧｉｎａｌｌｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄＰ<０.０１ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＴＧＴＣａｎｄＬＤＬ￣ＣａｎｄｔｈｅｏｒｇａｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗｅｒｅａｌｌｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｕｔｔｈｅｉｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｄｅｘｄｅｃｒｅａｓｅｄＰ<０.０５Ｐ<０.０１ . Ｔｈｅｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ. Ｔｈｅｒａｔｓｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈ３５ｍｇ / ｋｇＳＴＺｄｉｓｐｌａｙｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｒｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｔｈａｎ
饲料１( ＨＦＤ￣１) 配方:猪油１０％、蔗糖１５％、蛋黄粉１５％、酪蛋白５％、胆固醇１.２％、胆酸钠０.２％、碳酸氢钙０.６％、石粉０.４％、鼠维持料５２.６％ꎻ高糖高脂饲料２( ＨＦＤ￣１) 配方:基础饲料５８.５％ꎬ胆固醇１％ꎬ 蛋黄粉１０％ꎬ蔗糖２０％ꎬ猪油１０％ꎬ胆酸钠０.５％ꎮ １.２实验方法１.２.１动物分组及饲养９０只雄性ＳＤ大鼠适应性喂养７ｄ后按体质量随机分为９组ꎬ每组１０只ꎮ 正常对照组( ＮＣ组) ꎬ普通饲料喂养ꎻＡ组:ＨＦＤ￣１喂养４周＋ＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻＢ组:ＨＦＤ￣１喂养４周＋ＳＴＺ４０ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻＣ组:ＨＦＤ￣２喂养４周＋ＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻＤ组:ＨＦＤ￣２喂养４周＋ＳＴＺ４０ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻ Ｅ组:ＨＦＤ￣１喂养８周＋ＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻＦ组:ＨＦＤ￣１喂养８周＋ＳＴＺ４０ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻ Ｇ组: ＨＦＤ￣２喂养８周＋ＳＴＺ３５ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎻ Ｈ组: ＨＦＤ￣２喂养８周＋ＳＴＺ４０ｍｇ / ｋｇ腹腔注射ꎮ 实验期间动物房环境温度 (２３.０±２.０) ℃ ꎬ相对湿度４０％ ~ ７０％ꎬ换气次数 > １５次 / ｈꎬ１２ｈ照明 / １２ｈ黑暗ꎬ明暗交替ꎮ 每天观察动物状态ꎬ每周称量体质量１次ꎮ １.２.２ＳＴＺ配置及注射方法２.１ｇ柠檬酸和２.９４ｇ柠檬酸钠分别溶解于１００ｍＬ蒸馏水中ꎬ柠檬酸和柠檬酸钠按照１ ∶１.３２的比例混合ꎬ调ｐＨ值为４.２ ~ ４.５即为柠檬酸缓冲液ꎮ 注射前把ＳＴＺ溶解至柠檬酸缓冲液中ꎬ配制成０.３５％及０.４％的ＳＴＺ溶液ꎬ置于冰盒中ꎮ 大鼠禁食不禁水１２ｈ后ꎬ正常对照组根据空腹体质量腹腔注射柠檬酸缓冲液ꎬ模型组根据空腹体质量腹腔内注射相应剂量ＳＴＺ溶液ꎬＳＴＺ溶液配成后需避光并在３０ｍｉｎ内注射完毕ꎮ ＳＴＺ注射后密切观察动物的一般情况( 毛发、精神状态、活动次数、气味、垫料潮湿程度等) ꎬ将一次性注射ＳＴＺ５ｄ后空腹血糖≥１１.１ｍｍｏｌ / Ｌ作为成模标准[７] ꎮ １.２.３血糖及生化指标检测Ａ￣Ｄ组大鼠ＨＤＦ喂养４周ꎬＥ￣Ｈ组大鼠ＨＤＦ喂养８周且在ＳＴＺ注射后第５天禁食不禁水１２ｈꎬ所有动物剪尾取尾静脉血检测空腹血糖 ( ＦＢＧ) 水平ꎬ 统计以喂养周期、ＨＤＦ配方及ＳＴＺ剂量为影响因素的死亡率ꎮ 首次空腹血糖检测后ꎬ各组大鼠眼眶内眦静脉采血３５００ｒ /
糖尿病是严重危害人类健康的慢性疾病之一ꎬ 属于临床上常见的代谢性疾病ꎮ 其主要临床表现为多饮、多食、多尿及体质量减轻的“ 三多一少”ꎬ同时伴随高血糖和高尿糖状态[１] ꎮ 据统计ꎬ我国糖尿病人群数量在过去的几年里增长迅速ꎬ２０１０年就有男性糖尿病患者５０２０万例ꎬ女性４２２０万例ꎬ合计高达９２４０万例[２] ꎮ 其中ꎬ糖尿病人群又以２型糖尿病( Ｔ２ＤＭ) 患者居多ꎬ 占糖尿病发病率的９０％以上[３] ꎮ ＷＨＯ预测ꎬ到２０３０年ꎬ全球糖尿病患病人数将高达３. ６６亿ꎬ 其中２型糖尿病患者将高达９５％[４] ꎬ因此ꎬ有关糖尿病方面的研究将更加广泛和深入ꎬ建立合适的２型糖尿病动物模型对于２型糖尿病研究也显得尤为重要ꎬ目前国内外对２型糖尿病的研究[５￣６] 绝大多数通过高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗后再通过注射低剂量链脲佐菌素( ＳＴＺ) 损伤胰岛 β 细胞导致胰岛素分泌缺陷引起血糖升高来模拟制备２型糖尿病大鼠模型ꎬ虽然造模过程上大同小异ꎬ但模型制备方法上所用的高糖高脂饲料及饲养周期、ＳＴＺ注射剂量并没有统一的标准ꎮ 因此本试验以这３个要素为造模条件ꎬ旨在探讨制备２型糖尿大鼠模型的合适方法ꎮ