质谱分析法--定性与定量_图文

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质谱分析法定性与定量

Ø 扫描速度
ü色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
Ø 分辨率
质谱仪主要性能指标
质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格：对两个相等强度的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时，则认为两峰已经分开，其分辨率：
磁质谱中，R不随m/z变化，在测定小分子时有优势 eg. R=5000，500与500.1 5000与5001
用碎片离子色谱图进行质谱测定时，分子离子最好是一个选择的检测离子。选择的检测离子并不一定要源于分子的同一部分。每个检测离子的信噪比应≥3︰ 1
二、定性（确证）方法
相对离子丰度最大容许偏差
相对丰度（%基峰）
EI-GC-MS（相对）
CI-GC-MS、GC-MSn、LCMS、LC-MSn（相对）
> 50%
FT-ICR
各种离子化方法的使用范围
Ionic
ESI or MALDI
APCI/APPI
选择的依据
挥发性热稳定性极性
Analyte Polarity
GC/MS
Neutral
101
102
103
104
105
Molecular Weight
质谱仪主要性能指标
Ø 质量范围
ü 质谱仪所能测定的离子质荷比的范围 ü 不同仪器 ü 不同应用
±10%
±20%
> 20% to 50%
±15%
分辨率
Ø有机质谱仅要求50％峰谷刚刚分开就算分开（这时称为有机质谱的单位质量分辨） Ø简化为用单峰法表示，即测定一个峰半峰高处的全峰宽Full width half Maximum（简写为 FWHM）
eg. FWHM=0.25

毒物分析方法概述

形态学方法——外观性状鉴别
通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别形状：根、茎、叶、花、果实、种子等大小：大小、长短、粗细等颜色：表面和内部的色泽表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、毛茸等质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等折断面：平整－粗糙、致密－疏松、断面纹路及颜色。
形态学方法——显微形态鉴别
分析方法类别
方法类别
常用毒物分析方法
方法类别
方法原理
方法特点
形态学方法
利用检材外观形态或显微形态特征进行辨认、比对
简便、快速，能在一定程度上起到筛选和鉴别的作用，为侦查或检验提供线索
动物试验法
利用毒物的毒性及毒理作用机制，通过观察染毒试验动物是否死亡或其中毒表现，初步判断检材中是否含有剧毒物质或可能含有哪种毒物
色谱法
根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征信息的质谱分析法。各类质谱法及多级色质联用法
质谱分析法（mass spectrometry MS）
Mass Spectrometry: A Tool with Increasing Analytical Potentials
利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。细胞种类: 纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。后含物: 如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。
动物试验(animal test)
大多毒性大，且具有较强的生理活性和特殊的中毒症状。体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某类毒物存在。
分析方法概述（第一部分）
定性分析与定量分析
定性分析目的确定检材是不是某种药毒物，或确定检材中是否含有某种或某几种药毒物。过程探查方向初步判断确证方法要求 Ø灵敏 Ø 具有一定的选择性

质谱法简介—质谱法基本原理(分析化学课件)

m/z 123 －CH3
－CO 108
80
m/z 80 离子是由分子离子经过两步裂解产生的，而不是一步形成的
质谱法基本原理
4.同位素离子
大多数元素都是由具有一定自然丰度的同位素组成。化合物的质谱中就会有不同同位素形成的离子峰，由于同位素的存在，可以看到比分子离子峰大一个质量单位的峰M+1；有时还可以观察到M+2，M+3。通常把由同位素形成的离子峰叫同位素峰。
离子子还可能进一步裂解成更小的碎片离子，在裂解的同时也可能
发生重排。
质谱法基本原理
3.亚稳离子（m*）
在离子源中形成的碎片离子没有进一步裂解，而是在飞行进入检测器的过程中发生自行的裂解，这样所形成的低质量的离子叫亚稳离子。形成过程 m1 (母离子) m2 (子离子) 中性碎片
表观质量 m m22
37
(a+b)n=(3+1)2=9+6+1
即三种同位素离子强度之比为9:6:1。这样，如果知道了同位素的元素个数，可以推测各同
位素离子峰强度之比。同样，如果知道了各同位素离子强度之比，可以估计
出分子中是否含有S、Cl、Br原子以及含有的个数。
质谱法基本原理四、质谱法的特点与主要用途
❖ 特点： ❖ 1．样品用量少。灵敏度高，精密度好。 ❖ 2．分析速度快。 ❖ 3．分析范围广，适合联机。 ❖ 4．能够同时给出样品的精确分子质量和结构信息
色谱-质谱联用分析法气质联用（GC-MS）的应用领域：
气质联用已经成为有机化合物常规检测中的
必备工具。环保领域的有机污染物检测，特别是
低浓度的有机污染物；药物研究生产质控的进出
口环节；法庭科学中对燃烧爆炸现场调查，残留

第三章定性和定量分析

差就较大，因此采用峰高乘平均峰宽法。 A=1/2h（W0.15＋W0.85）
式中W0.15和 W0.85分别为峰高0．15倍和0．85倍处的峰宽。
35
（3）对于同系物-峰高乘保留时间法在一定操作条件下，同系物之间存在半峰宽规律： W1/2=btR+a
对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），
组分X
18
［例］图19-15为某组分在阿皮松L柱上的流出曲线（柱温100℃）。测得调整保留时间以记录纸距离表示为310.0mm。又测得正庚烷和正辛烷的调整保留时间分别为174.0mm，373.4mm，求组分X的保留指数并判断是什么组分。解: 已知Z=7
lg 310.0 lg174.0 I x 100 [7 ] 775.6 lg 373.4 lg174.0
16
保留指数的测定
将被测组分与相邻两正构烷烃混合在一起（或分别进行），在相同色谱条件下进行分析，测出保留值，按上式计算出被测组分保留指数Ix。将测定出的Ix值与文献值对照定性。
17
［例］图19-15为某组分在阿皮松L柱上的流出曲线（柱温100℃）。测得调整保留时间以记录纸距离表示为310.0mm。又测得正庚烷和正辛烷的调整保留时间分别为174.0mm，373.4mm，求组分X的保留指数并判断是什么组分。
从文献上查得，在该色谱条件下，乙酸乙酯保留指数为 775.6，再用纯乙酸乙酯对照实验，可以确认该组分是乙酸乙酯。在与文献值对照时，一定要重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知组分进行验证。
19
保留指数的应用特点

保留指数仅与柱温和固定相性质有关，与色
谱操作条件无关。不同的实验室测定的保留指数的重现性较好，精度可达±0.03个指数单位。所

质谱定性分析及图谱解析

实验步骤与操作
1. 样品准备
选择合适的溶剂将待测样品溶解，并调整至适当的浓度。
2. 质谱仪调试
打开质谱仪，调整仪器参数，如离子源电压、质量分析器参数等，以确保仪器处于最佳工作状态。
3. 样品进样
将准备好的样品通过进样系统注入到离子源中。
4. 质谱图获取
启动数据采集系统，记录质谱图。根据需要，可以选择不同的扫描范围和扫描速度。
峰检测与识别
利用算法对预处理后的数据进行峰检测，识别出质谱图中的各个峰，并记录其质荷比（m/z）和强度信息。
峰对齐与校正
对多个样本的质谱数据进行峰对齐操作，确保相同物质在不同样本中的峰能够对应起来。同时，进行峰校正，消除由于仪器误差等因素引起的峰偏移。
峰匹配与注释
将检测到的峰与已知的化合物数据库进行匹配，对峰进行注释，明确各个峰所代表的化合物。
重金属污染物检测
通过质谱技术可以准确地检测环境中的重金属污染物，如铅、汞、镉等，为环境治理提供依据。
大气颗粒物分析
质谱技术可用于分析大气颗粒物的化学组成和来源，为大气污染防控提供科学支持。
食品安全检测中的应用
农药残留检测
质谱技术可用于检测食品中的农药残留，保障食品的安全性和消费者的健康。
食品添加剂检测
质谱定性分析及图谱解析
汇报人：文小库
2024-01-20
CONTENTS
• 质谱技术概述 • 质谱定性分析方法 • 图谱解析方法 • 质谱定性分析实验设计 • 质谱定性分析数据处理与结果
展示 • 质谱定性分析应用实例
01
质谱技术概述
质谱技术原理
离子化过程
将待测样品转化为气态离子，常见的方法有电子轰

第六章蛋白质定量和定性分析

5.0
5.0
摇匀，室温下放置10分钟
Folin-酚试剂乙/ml 0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
摇匀，在30℃保温（或室温下放置）30分钟
A 500nm
0
• 2.样品中蛋白的测定
•
取2支试管，分别加入0.2毫升样品(待测)稀
释液，再加入0.8毫升蒸馏水使样品体积达到1毫
升。
•
将样品的光吸收值在标准曲线上查出相应的
(2)测定快速,简洁,只需要加一种试剂.完成一个样品的测定,只要5分钟左右 .由于染料与蛋白质结合的过程,大约只要2分钟即可完成,其颜色可以在1小时内保持稳定,且在5分钟至20 分钟之间,颜色的稳定性最好.
三氨的吸收
1 、蒸馏器洗净后,从G加入小瓷片数粒,开放水龙头和P3使瓷片随水流入A,水放至A球颈处即可.
2 、取150ml锥形瓶,加入2%硼酸20ml(内加2~3滴混合指示剂),将锥形瓶置于M下并使管口接触至硼酸溶液底层.
3 、准确吸取稀释消化液5ml,由漏斗D注入蒸馏器,少量蒸馏水冲洗漏斗,加入30%NaOH约5ml,再用少量蒸馏水冲洗, 夹紧螺旋夹并水封,使氨气不会从漏斗处流失.
e.一般消化至透明后,继续消化30min即可,但对于含有特别难以消化的氮化合物的样品,如赖氨酸、组氨酸、色氨酸等时,需适当延长消化时间.有机物如分解完全,消化液呈蓝色或浅绿色,但含铁量多时,呈较深绿色.
f.硼酸吸收液的温度不应超过40℃,否则对氨的吸收作用减弱而造成损失.
g.蒸馏完毕后,应先将冷凝管下端提离液面,再蒸2min 后关掉热源,否则可能造成吸收液倒吸。
第六章蛋白质定量和定性分析
(Qualitative and quantitative analysis of protein)

GC-MS数据处理和定性定量分析(共42张PPT)

• GC／MS和GC／MS／MS联用方法常被作为定量
检测的最终确证方法。因此质量保证／质量控
制(QA／QC)是定量分析不可缺少的重要环节
(二)定量方法
• GC／MS联用分析常用的定量方法和色谱一样，
有归一化法、外标法、内标法等。各有其优缺点和使用范围，不适当的运用必然造成较大的误差。
• 根据不同要求正确选择定量方法十分重要。定量方法中响应值的计算可以用峰高法也可以用峰面积法，要看在线性范围内哪一个测量的准确性和重复性更好。
将样品中所有组分含量之和作为100，计算各个组分的相对百分含量，称为归一化法。缺点为：样品制备很耗时；
二、质量色谱法的应用
• (2)目标化合物追踪 • 邻苯二甲酸酯类是常见的增缩剂，在分析试验
室中几乎无所不在，各种塑料包装、塑料瓶盖、样品预处理用的一些试剂、硅胶、树脂等都含有此类化合物
• 它们的沸点较高，容易残留在色谱柱中，柱温升高到200℃以上就会流出。往往在GC／MS分析前做
量。尤其用同位素标记化合物做内标进
行定量分析更是GC／MS联用技术的独
到之处。
三、GC/MS定量分析
• GC／MS联用技术定量分析的特点是先定性，后定量
• 对于一个化合物，首先根据其保留时间和质谱图特征离子鉴定，确认它是目标化合物之后再进行定量，因而避免假阳性检出。其次，GC／
MS联用定量一般不用总离子流色谱图，而是用特征离子的离子流图。因为离子流图相对稳定而且不受干扰，定量结果更可靠。
一、质谱图的提取
• 质谱库检索和谱图解析都需要获得好的质谱图。质谱图的提取不仅要保证谱图的质量，还要不丢失可鉴定的组分，包括共流出组分的分离。背景扣除没有固定的要求
• 例如：是取色谱峰顶对应的一张质谱图还是几张质谱图平均，需不需要扣除背景，是扣除前面还是后面的谱图等。主要的是根据出峰情况，结合样品信息和实验条件进行判断。知识和经验的积累是必需的。

第10章-质谱分析法

分析本领由下面这些因素决定：
１、离子通道半径２、加速器和收集器的狭缝宽度３、离子源
1000以下为低分辨率
三、质谱仪的基本结构
质谱仪须有进样系统、电离系统 ( 离子源或电离室）、质量分析器和检测系统。为了获得离子的良好分析，必须避免离子损失，因此凡有样品分子及离子存在和通过的地方，必须处于真空状态。
有机化合物受高能作用时会产生各种形式的分裂，一般强度最大的质谱峰相应于最稳定的碎片离子，通过各种碎片离子相对峰高的分析，有可能获得整个分子结构的信息。碎片离子并不是只由M+一次碎裂产生，还可能会断裂或重排产生，因此要准确地进行定性分析最好与标准图谱进行比较。
有机化合物中，C－C键不如C－H键稳定，因此烷烃的断裂一般发生在C－C键之间，且较易发生在支链上。各类有机化合物分子离子的稳定性次序为：芳香烃>共轭多烯烃>环状化合物> 羰基化合物>醚>酯>胺>醇>支链烷烃。
质谱过程
撞击
高速电子
气态分子
顺序谱图
按质荷比m/z
得到
阳离子
导入
质量分析器
峰位置
峰强度
定性结构
定量分析
进样系统
1.直接进样 2.间接进样
离子源
质量分析器
1.电子轰击 2.化学电离 3.电喷雾电离 4.激光解吸
1.单聚焦 2.双聚焦 3.飞行时间 4.离子阱 5.四极杆
检测器
质量分析器
•
质谱仪的质量分析
I17/I16=0.011。而在丁烷中，出现一个13C的几率是甲烷的4倍，则分子离子峰m/z=59、58的强度之比
I59/I58 =0.044。同样，在丁烷中出现M+2(m/z=60) 同位素峰的几率为0.00024，即I60/I58＝0.00O24，非常小，故在丁烷质谱中一般看不到(M＋2)+峰。

gc-ms分析方法如何定性定量

gc-ms分析⽅法如何定性定量质谱仪种类很多，不同类型的质谱仪主要差别在于离⼦源。

离⼦源的不同决定了对被测样品的不同要求，同时，所得信息也不同。

质谱仪的分辨率同样⼗分重要，⾼分辨质谱仪可给出化合物的组成式，对于未知物定性⾄关重要。

，在进⾏质谱分析前，需要根据样品状况和分析要求选择合适的质谱仪。

今天我们⼀起来学习GC-MS如何进⾏定性与定量的知识。

GC-MS定性分析⽬前，⾊质联⽤仪数据库中，⼀般贮存有近30万个化合物标准质谱图。

因此，GC-MS最主要的定性⽅式是库检索。

由总离⼦⾊谱图可以得到任⼀组分的质谱图，由质谱图可以利⽤计算机在数据库中检索。

检索结果，可以给出⼏种最可能的化合物。

包括：化合物名称、分⼦式、分⼦量、基峰及可靠程度。

下图是由计算机给出的某未知物谱图检索结果。

某未知化合物检索结果利⽤计算机进⾏库检索是⼀种快速、⽅便定性⽅法，但是，在利⽤计算机检索时应注意如下⼏个问题：数据库中所存质谱图有限，如果未知物是数据库中没有的化合物，检索结果也给出⼏个相近的化合物。

显然，这种结果是错误的。

由于质谱法本⾝的局限性，⼀些结构相近的化合物其质谱图也相似，这种情况也可能造成检索结果不可靠。

由于⾊谱峰分离不好以及本底及噪⾳的影响，使得到的质谱图质量不⾼，这样所得到的检索结果也会很差。

因此，在利⽤数据库检索之前，应⾸先得到⼀张很好的质谱图，并利⽤质量⾊谱图等技术判断质谱中有没有杂质峰；得到检索结果之后，还应根据未知物的物理、化学性质以及⾊谱保留值、红外、核磁谱等综合考虑,才能给出定性结果。

GC-MS定量分析GC-MS定量分析⽅法类似于⾊谱法定量分析，由GC-MS得到的总离⼦⾊谱图或质量⾊谱图，其⾊谱峰⾯积与相应组分的含量成正⽐，若对某⼀组份进⾏定量测定，可以采⽤⾊谱分析法中的归⼀化法、外标法、内标法等不同⽅法进⾏。

这时，GC-MS法可理解为将质谱仪作为⾊谱仪检测器。

其余均与⾊谱法相同，与⾊谱法定量不同的是，GC-MS法除了可利⽤总离⼦⾊谱图进⾏定量之外，还可利⽤质量⾊谱图进⾏定量，这样做可最⼤限度去除其它组份的⼲扰。

质谱定性分析及谱图解析

第三十九页，共100页
MS
有机化合物的质谱分析，最常应用电子轰击源作离子源，但在应用这种离子源时，有的化合物仅出现很弱的，有时甚至不出现分子离子分子峰，这样就使质谱失去一个很重要的作用。为了得到分子离子峰，可以改用其它一些离子源，如场致电离源、化学电离源等。
第四十页，共100页
在场致电离的质谱图上，分子离子峰很清楚，碎片峰则较弱，这对相对分子质量测定是很有利的，但缺乏分子结构信息。为了弥补这个缺点，可以使用复合离子源，例如电子轰击-场致电离复合源，电子轰击-化学电离复合源等。
质谱图的纵坐标表示离子强度，在质谱中可以看到几个高
低不同的峰，纵坐标峰高代表了各种不同质荷比的离子丰度-
离子流强度。
第十六页，共100页
MS
离子流强度有两种不同的表示方法:
（1）绝对强度（2）相对强度
（1）绝对强度绝对强度是将所有离子峰的离子流强度相加作为总离子
流，用各离子峰的离子强度除以总离子流，得出各离子流占
总离子流的百分数(总离子流是100％)。
第十七页，共100页
MS
（2）相对强度以质谱峰中最强峰作为100％，称为基峰（该离子的丰度
最大、最稳定），然后用各种峰的离子流强度除以基峰的离子流强度，所得的百分数就是相对强度。
现在一般的质谱图都以相对强度表示，并以棒图的形式
画出来。
第十八页，共100页
2. 进样系统 1）气体扩散
2）直接进样
3）气相色谱
第八页，共100页
MS
3. 电子源电子轰击、化学电离、场致电离、高频火花电离、热电离、激光电离、表面电离
被分析的气体或蒸气首先进入仪器的离子源，转化为离子。图8-5为常用的电子轰击离子源。

质谱定性分析及谱图解析..共103页

1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
质谱定性分析及谱图解析..
21、没有人陪你走一辈子，所以你要适应孤独，没有人会帮你一辈子，所以你变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之首，因为这种德性保证了所有其余的德性。--温斯顿．丘吉尔。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的，它只是让人们的脚放上一段时间，以便让别一只脚能够再往上登。

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GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范食品理化检测 “如果检测结果用回收率进行校准，应在原始记录的结果中明确说明并描述校准公式”
三、定量方法
2. 内标法
Ø 单点校正法 Ø 内标标准曲线法
三、定量方法
2. 内标法
内标物要满足以下要求：（a）试样中不含有该物质；（b）与被测组分性质比较接近；（c）不与试样发生化学反应；（d）出峰位置应位于被测组分附近。
ESIESI+
m/z- 179→79.9 m/z + 202→122
甜蜜素
SN/T 1948-2007 进出口食品中环己基氨
基磺酸钠的检测方法
应研究样品基质和检测器性能引起的图谱改变
化合物麻黄碱伪麻黄碱
保留时间（min）
6.9
8.0
定性离子对
166/148 166/133 166/148 166/133
•C7H6N2O2 8.50 0.72 0.45
化合物 C7H11N4
M+1 9.25
C8H6 O3 8.36
C8H8NO2 9.23
C8H11N2O 9.61
C8H12N3 9.98
二、定性（确证）方法
1. 基本原则
Ø质谱法只有在与色谱分离在线或脱机联用时才能作为确证方法 Ø在分析仪器上的进样顺序是：空白溶剂、阴性控制样品、要确证的样品、阳性控制样品再进样，最后是阴性控制样品
Ø 扫描速度
ü色谱峰的数据点数目和峰宽、扫描时间有关
Ø 分辨率
质谱仪主要性能指标
质谱仪主要性能指标
分辨率
磁质谱的分辨率定义最为严格：对两个相等强度的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高10%时，则认为两峰已经分开，其分辨率：
磁质谱中，R不随m/z变化，在测定小分子时有优势 eg. R=5000，500与500.1 5000与5001
二、定性（确证）方法
质量碎片类型和识别点的关系
MS技术低分辨质谱（LR）
LR-MSn母离子 LR-MSn子离子高分辨质谱（HR） HR-MSn母离子 HR-MSn子离子
每种离子的识别点数 1.0 1.0 1.5 2.0 2.0 2.5
ü 每个离子计算一次 ü EI-GC-MS、CI-GC-MS作为不同的技术计算 ü 用不同反应得到的衍生物，可增加识别点数 ü 包括二级离子和多级离子 ü 可最多结合三种不同的技术确定最小识别点数
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到系列基质标准工作液
ØGB/T 21312-2007 动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法 ØGB/T 22969-2008 奶粉和牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 水果、蔬菜中啶虫脒残留量的测定液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 21313-2007 动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
以空白样品提取液配制标准工作溶液
ØGB/T 23409-2009 蜂王浆中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法 ØGB/T 23408-2009 蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定液相色谱-质谱/质谱法 ØGB/T 22986-2008 牛奶和奶粉中氢化泼尼松残留量的测定液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 22978-2008 牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定液相色谱-串联质谱法
1-Cl 2-Cl
1-Br 2-Br
3-Br 4-Br
Beynon 表例如： M=150
•化合物 M+2
•C6H14NOCl 0.38
M+1 8.15
M+2 0.49
•C6H14O4 0.95
6.86 1.0
•C7H2O4 0.78
7.75 1.06
•C7H4NO3 0.61
8.13 1.06
三、定量方法
a: 以纯溶剂配制标准溶液，测定的峰面积Aa b: 以空白样品的提取液配制标准溶液，测定的峰面积 Ab c: 在空白样品加入标准溶液，提取后得到基质标准溶液，测定的峰面积Ac
绝对回收率 Ac/Aa，包含提取效率和基质效应提取回收率 Ac/Ab，不包含基质效应绝对回收率 = 提取回收率*绝对基质效应
“采用M+1的准分子离子的色谱峰面积做单点校正定量”
三、定量方法
Ø单点校正法
以空白样品提取液配制标准工作溶液
ØGB/T 21320-2007 动物源食品中阿维菌素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法
Ø“分别取适量试样溶液和相近浓度的基质添加标准工作溶液，做单点校正”，“对标准工作液和样品溶液等体积参插进样进行测定”
定量离子对 166/148 166/148
Fragmento r（V） 80
80
CE（V）
10 20 10 20
三、定量方法
外标法内标法标准加入法基质效应
三、定量方法
1. 外标法
Ø 单点校正法 Ø 外标标准曲线法
三、定量方法
Ø 单点校正法
单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的另一个点，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不通过原点），单点校正法的误差较大
内标标准曲线法
内标标准曲线定量方法
配制系列标准溶液，分别加入等量的内标物,混合后进行色谱分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积（或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程）
在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时等量的内标物，用样品与内标物峰面积（或峰高）的比值，在标准曲线上查出被测组分的浓度或用线形方程计算
±10%
±20%
> 20% to 50%
±15%
±25%
ห้องสมุดไป่ตู้
> 10% to 20%
±20%
±30%
≤ 10%
±50%
±50%
二、定性（确证）方法
Ø2002/657/EC规定：
Ø要确证指令 96/23/EC 附录I-A 组所列的物质，最少需要4 个识别点，包括具有促合成作用和其他未允许的化合物，如二苯乙烯类化合物及其衍生物、盐、酯等、抗甲状腺剂、甾醇、二羟基苯甲酸内酯如玉米赤霉醇、β-受体激动剂等 Ø要确证指令 96/23/EC附录I-B 组所列的物质，最少需要3 个识别点，包括兽药和污染物，兽药如抗菌药、驱虫药、抗球虫药、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、镇静药、非甾体抗炎药等；其他环境污染物如有机氯、有机磷、真菌毒素、染料等
一、质谱基础及相关术语
术语
质谱峰类型 Ø分子离子
• 必须是化合物谱图中质量最高的离子 • 必须是奇电子离子、符合氮规则 • 必须能通过丢失合理的中性离子，产生谱图中高质量区的重要离子
Ø准分子离子 Ø碎片离子 Ø同位素离子
• 由于天然同位素的存在，因此在质谱图上出现M+1，M+2等峰，由这些同位素所形成的峰称之为同位素峰
例如：要区分以下离子，分辨率要达到 CO+ 27.9949 N2+ 28.0061
ArCl+
74.9312
As+ 74.9216
举例：
üatto摩尔级的灵敏度； ü优于2 ppm的MS质量准确度 ü优于5 ppm的MS/MS质量准确度 ü线性动态范围可以达到五个数量级； ü质量分辨率至20,000 ü高速数据采集能力（每秒获得10张MS/MS谱图），更好地兼容超快速液相色谱 ü宽质量范围：m/z范围从25～20,000 u
分辨率
Ø有机质谱仅要求50％峰谷刚刚分开就算分开（这时称为有机质谱的单位质量分辨） Ø简化为用单峰法表示，即测定一个峰半峰高处的全峰宽Full width half Maximum（简写为 FWHM）
eg. FWHM=0.25 m/z=100，R=400 m/z=1000，R=4000
分辨率
三、定量方法
Ø外标标准曲线法
Ø以纯溶剂配制标准工作溶液
ØGB/T 22260-2008 饲料中甲基睾丸酮的测定高效液相色谱串联质谱法 ØGB/T 22955-2008 河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中苯并咪唑类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法 ØGB/T 21324-2007 食用动物肌肉和肝脏中苯并咪唑类药物残留量检测方法
三、定量方法
Ø单点校正法
以纯溶剂配制标准工作溶液
ØGB/T 21317-2007 动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法
“根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液”，“对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定”
ØGB/T 22147-2008 饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定
二、定性（确证）方法
关于保留时间的讨论
ØGBT 16631-2008 高效液相色谱法通则：同样条件下重复试验的保留数据的分散性，RSD≤3% ØJJG705-2002 液相色谱仪检定规程：定性测量重复性（6次测量）RSD≤1.5% ØJJF（闽）1032－2010 液相色谱-质谱联用仪校准规范：定性重复性 RSD≤2% ØJY/T 021—1996 分析型气相色谱方法通则：整机重复性保留时间RSD≤5％
二、定性（确证）方法
3. 质谱检测
Ø全扫描 scan Ø选择离子监测 SIM ØMS-MSn技术，如多反应监测 MRM
二、定性（确证）方法
3. 质谱检测
Ø全扫描 scan 用记录全扫描质谱图进行质谱测定时，在标准
品参考图谱中所有相对丰度>10%（分子离子、分子离子的特征加成物、特征碎片离子、同位素离子等）的特征离子都必须检测 Ø选择离子监测 SIM

质谱分析法--定性与定量_图文

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