光合细菌G3菌固定化保存方法
- 格式:ppt
- 大小:2.72 MB
- 文档页数:25
菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下,以便长期保存并用于研究或应用。
菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失,以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。
下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下,一般为-80℃或液氮温度。
这种方法比较简单,操作方便,且保存效果较好。
首先,将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中,然后用无菌冻存管将菌液分装好,经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。
在需要使用菌株时,只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。
二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后,能够在相对湿度较低的条件下长期保存。
这种保存方法主要适用于真菌,特别是产生分生孢子的真菌。
首先,从培养基上接种分生孢子,培养出菌丝后进行枯燥处理。
一般采用短暂的枯燥处理,依靠菌丝中的水分进行干燥。
然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存,放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。
三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中,以保持菌株的活力。
这种方法适用于较短时间的菌种保存。
首先,将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中,待培养基中的水分被干燥剂吸收后,将菌株封存在密封袋或密封瓶中。
干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片,确保环境的干燥程度。
四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下,一般为4℃至10℃之间。
这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中,然后在低温条件下保存。
需要使用时,只需从低温保存中取出,接种到新的培养基中即可。
总结起来,菌种保藏是一项重要的科研工作,不同的菌种可以采用不同的保藏方法。
冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存,真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存,气干法适用于较短时间的保存,冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌种保存操作方法
菌种的保存操作方法主要包括以下几个步骤:
1. 预处理:将菌种转接到适宜的培养基上,并培养出适量的细胞。
2. 选择保存方法:根据菌种特性和保存时间的要求,选择合适的保存方法,常见的方法有低温保存、冷冻保存和冷冻干燥保存。
3. 低温保存:将菌种接种在石蜡或冰芯样管中,并将其放入冷藏库中保存。
一般保存温度在4以下,可以延长菌种的保存时间,但菌种仍然会有某些代谢活动。
4. 冷冻保存:菌种培养后,用无菌培养基或添加防护剂的无菌培养基冻结培养基培养的菌株。
将菌株和培养基混合后,迅速冷冻至-70以下,并将其存放在液氮罐中。
这种保存方法可以延长菌种的保存时间,并防止细胞活力的丧失。
5. 冷冻干燥保存:将菌种培养后,将菌株和保护剂混合,制成细胞悬浮液,用真空冷冻干燥仪将其冷冻干燥。
干燥后,将其密封在干燥剂中保存,可以在室温下保存数年甚至数十年,且菌种仍然具有一定的活力。
需要注意的是,在保存菌种时要注意保持无菌条件,并在保存前对菌种进行鉴定和纯化,以确保保存的菌种是纯种菌株。
此外,保存后的菌种要定期检查其存活
率和纯度,必要时进行保存方法的更替。
光合细菌保存方法光合细菌是一类能够通过光合作用将太阳能转化为化学能的微生物。
它们广泛存在于自然界中的水体、土壤、沉积物以及它们与其他生物共生的环境中。
由于光合细菌具有广泛的应用价值,例如在环境修复、食品加工、医学和能源等领域,因此对于光合细菌的保存方法的研究显得尤为重要。
1.冷冻保存冷冻保存是保存光合细菌最常用的方法之一、先将光合细菌培养物进行预冷冻处理,将培养液中的细菌转移到含有10-20%甘油或乙二醇的冷冻缓冲液中,然后将其迅速冷冻至-80℃或更低温度。
冷冻后的细菌样品应尽快转移到液氮保存,确保细菌的长期安全保存。
2.干燥保存干燥保存是另一种常见的光合细菌保存方法。
将培养物中的光合细菌通过离心分离出来,然后置于干燥的环境中。
可以在无菌条件下使用冷冻干燥机或真空泵等设备将菌液中的水分去除,使细菌进入休眠状态。
这种方法可以大大延长细菌的保存时间,但在复苏时需要与适当的培养基进行培养以恢复其活性。
3.冷冻酒精保存冷冻酒精保存是一种简单有效的方法。
将培养物中的光合细菌转移到含有20-40%无水乙醇或甲醇的缓冲液中,然后在冷藏条件下保存。
这种方法的优点是简单易行,无需昂贵的设备,适用于一般细菌的保存。
4.液氮保存液氮保存是保存光合细菌最常用的方法之一、将培养物中的细菌转移到液氮中保存,确保细菌的长期安全保存。
在保存之前,应首先将光合细菌培养物进行预冷冻处理,将培养液中的细菌转移到含有10-20%甘油或乙二醇的冷冻缓冲液中,然后将其迅速冷冻至-80℃或更低温度。
5.遗传物质存储目前,一些光合细菌的遗传物质已经成功保存在冷冻存储的条件下。
例如,通过将光合细菌的核酸提取并纯化后,在低温条件下保存。
这种方法能够保存光合细菌的遗传物质,以备将来的研究和应用。
综上所述,光合细菌的保存方法包括冷冻保存、干燥保存、冷冻酒精保存、液氮保存以及遗传物质存储等。
选择合适的保存方法是根据实验需要、资源条件以及光合细菌特性进行评估的。
微生物菌种保藏方法
微生物菌种的保藏是非常重要的,因为这些菌种可能用于各种实验和研究中。
以下是一些常见的微生物菌种保藏方法:
1. 冷冻保存:将菌种在液氮或-80的冰箱中冷冻保存。
这是最常见的保藏方法,能够长期保存菌株并保持其遗传稳定性。
2. 干燥保存:将菌种在无菌室中取出,用无菌纸或吸水纸吸干,然后放入无菌瓶中密封保存。
干燥保存适用于某些孢子或芽孢的微生物,比如放线菌、链霉菌等。
3. 明胶斜培养基保存:将菌种接种在含有明胶的固体培养基上,然后密封保存。
这种方法适用于某些菌株,如革兰氏阳性菌和厌氧菌。
4. 低温保存:将菌种保存在4的冰箱中。
这种保存方式可以在短时间内保持菌株的活性,但不能长期保存。
5. 液氮保存:将菌种在锅内预冷冷冻过的无菌玻璃管中加入10%甘油或蔗糖,然后立即在液氮中保存。
这种方法适用于大多数微生物,并且可以长期保存。
菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度,为后续的研究提供保障。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻干管吸取菌液。
将冻干管放入液氮中,冷冻至-80℃,待冻干后,将管子密封,保存在-80℃的冰箱中。
冻干菌株可以保存多年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入液氮中,冷冻至-196℃,保存在液氮罐中。
静态液氮保存的菌株可以保存数十年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将冻存管放入4℃的冰箱中保存。
冷藏法保存的菌株可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
活体保存法可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
每隔一段时间,将菌株转移到新的培养基上进行培养,以保持菌株的纯度和稳定性。
总之,菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
保存菌种最好的方法是菌种是微生物学研究中非常重要的实验材料,其保存质量直接影响着后续实验的结果。
因此,科学家们一直在探索最好的菌种保存方法。
下面我们将介绍一些常见的菌种保存方法,希望对您有所帮助。
首先,冷冻保存是最常见的菌种保存方法之一。
将菌种悬浮液加入到含有冻存剂的冻存管中,然后迅速冷冻至-80℃或更低的温度。
这种方法可以有效地延长菌种的保存时间,但需要注意的是,冷冻过程中应尽量避免冻存剂与菌体接触过久,以免对菌体产生不利影响。
其次,干燥保存也是一种常用的菌种保存方法。
将菌种培养在适当的培养基上,然后用干燥剂将菌落中的水分去除,最后将干燥的菌落保存在干燥的环境中。
这种保存方法适用于一些耐干燥的菌种,可以有效地延长菌种的保存时间。
另外,液氮保存也是一种被广泛应用的菌种保存方法。
将菌种悬浮液直接浸入液氮中保存,可以将菌种保存时间延长到数年甚至数十年。
但是,使用液氮保存菌种需要注意安全问题,液氮具有极低的温度,操作时务必小心谨慎,以免造成意外伤害。
除了上述常见的保存方法外,还有一些新型的菌种保存技术也在不断涌现。
比如,冷冻干燥技术可以将菌种在低温下冷冻,并在真空环境下将水分去除,从而达到保存的目的。
此外,一些生物技术公司还开发了各种特殊的保存方法,如超低温保存、冷冻干燥和冷冻复苏等,这些方法在一定程度上提高了菌种的保存质量和保存时间。
总的来说,选择合适的菌种保存方法需要根据具体的菌种特性和实验需求来决定。
在保存菌种的过程中,需要注意保存环境的清洁和干燥,避免细菌和真菌的污染。
另外,定期检测保存菌种的活力和纯度也是非常重要的,及时更换保存方法或重新分装菌种,以确保菌种的保存质量。
综上所述,菌种的保存方法多种多样,选择合适的保存方法可以有效地延长菌种的保存时间,保证实验结果的准确性。
希望本文介绍的方法对您有所帮助,谢谢阅读!。
微生物菌种保藏方法菌种是一种重要的生物资源,菌种保藏是重要的微生物基础工作。
菌种保藏就是利用一切条件使菌种不死、不衰、不变,以便于研究与应用。
(一)常规保藏方法1 目的1.1 了解菌种保藏的基本原理1.2 掌握几种常用的菌种保藏方法。
2 原理菌种保藏的方法很多。
其原理却大同小异,不外乎为优良菌株创造一个适合长期休眠的环境,即干燥、低温、缺乏氧气和养料等。
使微生物的代谢活动处于最低的状态,但又不至于死亡,从而达到保藏的目的。
依据不同的菌种或不同的需求,应该选用不同的保藏方法。
一般情况下,斜面保藏、半固体穿刺,石蜡油封存和砂土管保藏法较为常用,也比较容易制作。
3 材料3.1菌株待保藏的适龄菌株斜面3.2培养基肉汤蛋白胨斜面,半固体及液体培养基。
3.3 试剂10%HCl无水氯化钙、石蜡油、五氧化二磷。
3.4 器具用于菌种保藏的小试管(10*100毫米)数支、5毫升无菌吸管、l毫升无菌吸管等、灭菌锅、真空泵、干燥器、冰箱无菌水、筛子(40目、120目)、标签、接种针、接种环、棉花、牛角匙等等。
4 流程斜面保藏→半固体穿刺保藏→石蜡油封存→砂土管保藏5 步骤5.1斜面保藏5.1.1流程标记试管→接种→培养→保藏5.1.2步骤5.1.2.1贴标签取无菌的肉汤蛋白胨斜面数支。
在斜面的正上方距离试管口2-3厘米处贴上标签。
在标签纸上写明接种的细菌菌名、培养基名称和接种日期。
5.1.2.2斜面接种将待保藏的细菌用接种环以无菌操作在斜面上作划线接种。
5.1.2.3培养置37恒温箱中培养48小时。
5.1.2.4保藏斜面长好后,直接放入4℃的冰箱中保藏。
这种方法一船可保藏三个月至半年。
5.2半固体穿刺保藏5.2.1流程标记试管→穿刺接种→培养→保藏5.2.2 步骤5.2.2.1贴标签取无菌的半固体肉汤蛋白等直立柱数支,贴上标签,注明细菌菌名、培养基名称和接种日期。
5.2.2.2穿刺接种用接种针以无菌方式从待保藏的细菌斜面上挑取菌种,朝直立柱中央直刺至试管底部,然后又沿原线拉出。
光合细菌的保存方法
光合细菌生长繁殖除营养条件外,还与光照和温度有关。
温度适宜,即使光照不足,也会生长,只是速度缓慢;温度较低,即使光照充足,也很难生长甚至停止生长;温度过高,则会老化而死。
因此保存菌液,温度是关键。
成品菌液应存放在温度较低的地方,15°C以下为最佳,并保持一定的光照(每天不低于2小时)。
这是因为光合细菌在营养、光照、温度都适宜的情况下,形成,一定速度的生长态势,即“生长惯性”。
处在生长高峰期的光合细菌,其生长惯性很强,此时如果突然失去光照或光照很弱,5〜10天后,会出现生长旺盛的光合细菌因光合作用失衡,而导致菌体细胞大量死亡,使菌液发黑,并有恶臭。
刚开始发黑时,施以适当光照即能缓解。
所以,刚培养好的菌液应尽量降温,逐步减少光照,以减弱生长惯性。
到了生长惯性很弱或没有的时候,光合细菌就进人稳定期(保存期),此时阴凉避光保存会延长保存期,一般可保存6个月左右。
一般情况下,用户在生产过程中,对菌液的保存无须作特别处理。
气温高的季节,在阳光下培养,成熟的菌液仍置于阳光下,不必避光,保存期2〜3个月,在此期间可反复培养续种。
秋天气温下降后,培养好一批菌液过冬,冰冻前移至室内避光保存,保存期可达8个月左右。
光合细菌保存期的长短,主要取决于温度的高低。
温度越低,保存期越长,反之越短。
在夏季高温季节,若暂时不使用需要保存菌种,最好在中途进行适量的培育续种,这时一般用保存时间不超过3个月的菌种续种为好,然后将培育的菌液保存,或将少量菌液放入冰箱保鲜室进行长期保种。
保存菌种的方法
保存菌种是微生物学研究中非常重要的一项工作。
菌种可以通过不同的方法进行保存,以保证其长期的存活和保持其特性。
以下是几种常见的保存菌种的方法:
1. 冷冻保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将细菌悬液添加到含有冷冻保护剂的离心管中,将其置于-80℃的冰箱中冷冻保存。
这种方法可以长期保存菌株,但需要注意冻存液的配制以及冷冻和解冻的操作。
2. 干燥保存:将菌株在富含营养物的培养基上生长,将其转移到无菌纸片上,然后在室温下晾干并密封保存。
这种方法不需要低温保护,但需要在干燥的条件下保存,并且菌株的保存时间较短。
3. 防冻干保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将其转移到无菌滤纸片上,在防冻干剂的条件下进行干燥处理,并在干燥后密封保存。
这种方法可以在室温下保存菌株,并且可以长期保存,但需要注意干燥和密封的条件。
4. 长期冷藏保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后在4℃的冰箱中长期保存。
这种方法简便易行,但保存时间较短,通常不超过6个月。
需要注意的是,保存菌株的方法应根据不同的菌株和实验需求来选择。
保存菌株时也需要注意无菌操作,选择适当的保存容器和保存条件,并及时更新保存记录,以保证菌株保存的质量和可靠性。
菌种保藏的几种方法基本原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。
病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5.冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6.冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。
有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。
保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。
保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
三、器材细菌、酵母菌,放线菌和霉菌;肉膏蛋白胨斜面培养基,灭菌脱脂牛乳,灭菌水,化学纯的液体石蜡,甘油,五氧化二磷,河沙,瘦黄土或红土,冰块、食盐,干冰,95%酒精,10%盐酸,无水氯化钙;灭菌吸管,灭菌滴管,灭菌培养皿,管形安瓿管,泪滴形安瓿管(长颈球形底),40目与100目筛子,油纸,滤纸条(0.5×1.2cm),干燥器,真空泵,真空压力表,喷灯,L 形五通管,冰箱,低温冰箱(-30℃),液氮冷冻保藏器。