2019届高考生物一轮复习第十二单元生物技术实践随堂真题演练40微生物的培养与应用

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随堂真题演练 40 微生物的培养与应用

(2016 ·高考全国卷Ⅰ ) 空气中的微生物在重力等作用下， 可以必然程度地沉降。 某研究小

组欲用平板收集教室空气中的微生物，以认识教室内不相同高度空气中微生物的分布情况。实

验步骤以下：

①配制培养基 ( 成分：牛肉膏、蛋白胨、 NaCl、 X、 H2O)；

②制作无菌平板；

③设置空白比较组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于 37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答以下问题：

(1) 该培养基中微生物所需的氮本源于 ______________________________________________ 。

若要完成步骤②，该培养基中的成分 X 平时是 ________。

(2) 步骤③中，实验组的操作是 __________________________________________________

________________________________________________________________________ 。

(3) 若在某次检查中， 某一实验组平板上菌落平均数为 36 个 / 平板，而空白比较组的一个平板

上出现了 6 个菌落，这种结果说明在此次检查中出现了 ________现象。若将 30( 即 36－ 6) 个/

平板作为本组菌落数的平均值，该做法 ________( 填“正确”或“不正确” ) 。

解析： (1) 牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物， 都可以作为氮源； 观察菌落需利用固体

培养基， 因此可推知若要完成步骤②， 该培养基中的成分 X 平时是凝固剂， 如琼脂。 (2) 实验

组的各组构成对照实验，设计要依照单一变量原则，结合实验目的：欲用平板收集教室空气

中的微生物，以认识教室内不相同高度空气中微生物的分布情况，可知步骤③中，实验组的操

作是将各实验组平板分别放置在教室不相同高度的地址上， 开盖裸露一段时间。 (3) 若在某次调

查中，某一实验组平板上菌落平均数为 36 个/ 平板，而空白比较组的一个平板上出现了 6 个

菌落，这种结果说明在此次检查中出现了污染现象。该污染菌可能对空气中的其他微生物的

生长无影响也可能有影响， 因此将 30( 即 36－6) 个 / 平板作为本组菌落数的平均值， 该做法不

正确。

答案： (1) 牛肉膏、蛋白胨 琼脂

(2) 将各实验组平板分别放置在教室不相同高度的地址上，开盖裸露一段时间

(3) 污染 不正确

(2015 ·高考全国卷Ⅰ ) 已知微生物 A 可以产生油脂， 微生物 B可以产生脂肪酶。 脂肪酶和

油脂可用于生物柴油的生产。回答相关问题：

(1) 显微观察时， 微生物 A 菌体中的油脂平时可用 ________染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发，可采用 ________( 填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法” ) 从菌体中提取。

(2) 为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐化物的

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土壤中取样，并应采用以 ________为碳源的固体培养基进行培养。

(3) 为了确定微生物 B 产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在 35 ℃、 40 ℃、

45 ℃温度下降解 10 g 油脂所需酶量依次为 4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中， ________℃

条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

解析： (1) 生物组织中的油脂能被苏丹Ⅲ ( 或苏丹Ⅳ ) 染成橘黄色 ( 或红色 ) 。 (2) 为了优选出能

产生脂肪酶的微生物 B 的单菌落，我们应采用只能让该菌落生长的选择性培养基，因此只能

采用以油脂作为唯一碳源的固体培养基。 (3) 温度影响酶的活性，在三个温度中，45 ℃时需

酶量最高，说明酶活性最低；在三个温度实验中 40 ℃时所需酶量最少， 35 ℃时和 45 ℃时

所用酶量多，说明酶的最适温度介于 35 ℃和 45 ℃之间，因此应围绕 40 ℃设计不相同温度梯

度，进行后续实验。

答案： (1) 苏丹Ⅲ ( 或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2) 油脂

(3)45 40

( 高考全国卷Ⅱ ) 为了检查某河流的水质情况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含

量，并进行了细菌分别等工作。回答以下问题：

(1) 该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。 在涂布接种前， 随机取若干灭菌后的

空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 _____________________________________ ；

尔后，将 1 mL 水样稀释 100 倍，在 3 个平板上用涂布法分别接入 0.1 mL 稀释液；经合适培

养后，3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为 ________。

(2) 该小组采用平板划线法分别水样中的细菌。 操作时， 接种环经过 ________灭菌，在第二次

及今后的划线时，总是以前一次划线的尾端开始划线。这样做的目的是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________ 。

(3) 表示图 A 和 B 中， ________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后获得的结果。

(4) 该小组将获得的菌株接种到液体培养基中并混匀， 一部分进行静置培养， 另一部分进行振

荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。解析其原因是：振荡培

养能提高培养液中 ________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 ________的利用

率。

解析： (1) 为了确定培养基的灭菌可否合格， 微生物学实验一般会设置空白比较： 随机取若干

灭菌后的不接种的培养基在相同条件下培养一段时间，观察培养基上可否有菌落生成，若无

菌落生成说明灭菌合格； 0.1 mL稀释液中平均有 (39 ＋ 38＋ 37)/3 ＝ 38 个活菌， 则每毫升稀释

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液中活菌的数目为 38/0.1 ＝ 380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为 380×100＝3.8 ×10 4，

则每升水样中活菌数目为 3.8 ×10 4× 1 000 ＝3.8 ×10 7。 (2) 接种时接种环需要灼烧灭菌；在

第二次及今后每次划线时，总是以前一次的尾端开始划线，这样做的目的是经过划线次数的

增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便获得单个菌落。 (3) 由题图可知， B 图菌落分

布相对平均，应为稀释涂布平板法接种的结果。 (4) 振荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，

促进好氧型微生物的生长，别的振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的

利用率。

答案： (1) 检测培养基平板灭菌可否合格 3.8 ×10 7

(2) 灼烧 将齐聚的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落

(3)B (4) 溶解氧 营养物质

[ 课时作业 ]

1．(2018 ·武汉调研 ) 如表所示为培养某种微生物的培养基配方，请回答相关问题：

MgSO· KHPO Na HPO 4 葡萄糖 尿素 蒸馏水

2 4 2 4

7H2O

1.4 g

2.1 g

0.2 g 10.0 g 1.0 g 定容至

1 000 mL

(1) 该培养基只赞同分解尿素的细菌生长， 这种培养基称为 ________培养基。该培养基会控制其他种类微生物生长，其原因是该培养基

________________________________________________________________________ 。

(2) 若要经过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数， 上述培养基中还需要增加的成分是

________，接种时应采用 ________________ 法，该方法接种培养后的菌落，不可以能是图中的

________。

(3) 从土壤中分别出分解尿素的细菌后，要对其做进一步的判断，可在上述培养基中加入

________指示剂， 培养该菌后， 若是指示剂变 ________，可初步判断该种细菌可以分解尿素。

(4) 某同学用 0.1 mL稀释液在稀释倍数为 106 的平板中测得菌落数的平均值为 163，则每毫升

样品中的细菌数是 ________个。

答案： (1) 选择 以尿素为唯一的氮源

(2) 琼脂 稀释涂布平板 D

(3) 酚红 红

(4)1.63 ×10 9

2．(2018 ·黑龙江大庆中学模拟 ) 回答与微生物实验室培养相关的问题：

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