高考生物一轮复习 第11单元 生物技术实践 第38讲 微生物的培养与应用名师公开课省级获奖课件(选修1)

第32讲 微生物的应用与传统发酵技术

A组 基础题组

考点一 微生物的培养与应用

1.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )

①都需要用固体培养基 ②都需要使用接种针进行接种

③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用菌落数来计数活菌

A.①② B.①③ C.②④ D.③④

2.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( )

A.培养基分装到培养皿后进行灭菌

B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D.培养过程中每隔一周观察一次

3.下列有关微生物实验的叙述,不正确．．．的是( )

A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染

B.平板划线法可用于微生物的计数

C.分离不同的微生物要采用不同的稀释度

D.观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定

4.从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计,下列流程正确的是( )

A.土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落

B.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落 C.土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落

D.土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落

5.(2017北京石景山期末)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板

B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上

C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h

D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

6.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有( )

①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照

A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②③④

1．(2018·湖北宜昌市一中月考)利用葡萄汁生产的葡萄酒、葡萄醋深受市场欢迎。某校一生物实验小组尝试使用罐头瓶在常温(21±3 ℃)下制作葡萄酒。请回答：

(1)开始时，向消毒的罐头瓶中加入新鲜的葡萄汁作为酵母菌的液体培养基，培养基一般含有______________和无机盐。葡萄汁装入瓶中要留出大约1/3的空间。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气的目的是______________。在以后的过程中，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的目的是____________________。

(2)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌，常使用的接种方法是________和________两种。若计数酵母菌活菌的个数，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在________之间、适于计数的平板。也可在显微镜下用____________直接计数。

(3)分离纯化出的酵母菌在－20 ℃长期保存，菌液中需要加入一定量的________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。

答案 (1)水、碳源、氮源 提高酵母菌的数量 排出CO2，防止杂菌污染

(2)平板划线法 稀释涂布平板法 30～300 血细胞计数板

(3)甘油

解析 (1)微生物分离与培养的培养基成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐；葡萄汁装入瓶中要留出大约1/3的空间。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭，通气的目的是让酵母菌进行有氧呼吸，从而大量繁殖，提高酵母菌的数量。在酒精发酵过程中，酵母菌无氧呼吸会产生酒精和二氧化碳，为了排出CO2，防止杂菌污染，需要每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧。

(2)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌，常使用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法两种；若计数酵母菌活菌的个数，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板；也可在显微镜下用血细胞计数板直接计数。

第38讲 微生物的培养和利用

考点题型练习

考点一 微生物的分离和培养

1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述，不正确的是( )

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( )

A．操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板

D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置

3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( )

A．接种环、手、培养基 B．高压锅、手、接种环

C．培养基、手、接种环 D．接种环、手、高压锅

考点二 某种微生物数量的测定

4．能够测定样品活菌数的方法是( )

A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．质量法 D．比浊法

考点三 培养基对微生物的选择作用

5．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( )

①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌

A．④②③ B．①②③ C．①③④ D．只有③④

创新突破 大题冲关

6．我国生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37 ℃、24 h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

(1)用三角瓶取水样前，可采用________________(填灭菌方法)对三角瓶灭菌；取水池的水龙头用酒精擦拭后，再通过________的方法灭菌；在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________和渗透压等条件。

第2课时 微生物的培养技术与应用 目标要求 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。

考点一 微生物的基本培养技术

1．培养基的配制

(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

(2)类型：按物理状态分类

培养基种类 特点 用途

液体培养基 不含凝固剂，呈液体状态 工业生产

固体培养基 含凝固剂(如琼脂)，呈固体状态 微生物的分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏

(3)成分

成分 含义 作用 来源

碳源 提供碳元素的物质 构成生物体的细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、牛肉膏等

氮源 提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸等物质 无机氮源：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：蛋白胨等

无机盐 为微生物提供除碳、氮之外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素 为微生物提供无机营养，调节培养基的pH等 无机化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等

水 生物体含量最高的无机化合物 良好的溶剂，参与化学反应等 培养基、代谢产物

特别提醒 除了上述主要营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或微碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 2．无菌技术

(1)目的：获得纯净培养物。

(2)关键：防止外来杂菌的入侵。

(3)区别：消毒与灭菌的比较

比较项目 条件 结果 常用方法 应用范围

消毒 较为温和的物理或化学方法 杀死物体表面或内部的部分微生物 煮沸消毒法 日常用品

巴氏消毒法 不耐高温的液体

化学药物消毒法 操作空间、操作者的衣物和手等

紫外线消毒法 接种室、接种箱或超净工作台

灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 高压蒸汽灭菌法 培养基、容器等