实验一：鸡血细胞融合

一、背景鸡血细胞融合实验是一种重要的生物技术手段，在动物遗传育种、疾病治疗等方面具有广泛的应用前景。

然而，由于实验过程中涉及到多种生物安全风险，因此制定一套完善的安全预案至关重要。

二、目的为保障鸡血细胞融合实验的顺利进行，确保实验人员、动物及环境的安全，特制定本安全预案。

三、适用范围本预案适用于所有从事鸡血细胞融合实验的研究机构、企业及个人。

四、安全组织与职责1. 实验室主任负责全面负责实验室的生物安全管理工作，确保实验安全。

2. 生物安全负责人负责具体实施实验室的生物安全管理工作，对实验人员进行安全培训。

3. 实验人员应严格遵守本预案，做好个人防护，确保实验安全。

4. 实验室管理人员负责实验设备的维护和保养，确保设备安全运行。

五、安全措施1. 实验室生物安全等级根据鸡血细胞融合实验的生物安全风险，实验室应达到二级生物安全实验室标准。

2. 实验室设施与设备（1）实验室内应配备生物安全柜、高压灭菌器、离心机、超净工作台等设备。

（2）实验室内应配备个人防护用品，如防护服、手套、口罩、护目镜等。

3. 实验操作规范（1）实验人员进入实验室前应穿戴个人防护用品，确保自身安全。

（2）实验操作应在生物安全柜内进行，避免直接接触实验材料。

（3）实验操作过程中，应严格遵守无菌操作规程，防止交叉污染。

4. 实验废弃物处理（1）实验废弃物应分类收集，严格按照相关规定进行处理。

（2）锐器类废弃物应放入锐器盒，不得与其他废弃物混放。

（3）实验废弃物应在实验室内进行初步消毒，然后交由专业机构进行处理。

5. 实验动物管理（1）实验动物应定期进行健康检查，确保实验动物的健康。

（2）实验动物饲养环境应符合国家相关规定，确保动物福利。

（3）实验动物使用完毕后，应进行无害化处理。

六、应急处理1. 实验过程中，如发生生物安全事故，实验人员应立即停止操作，并向实验室主任报告。

2. 实验室主任应立即启动应急预案，组织人员进行现场处理。

3. 对受伤人员，应立即进行现场急救，并送往医院进行治疗。

鸡血细胞的体外融合【实验目的】1．掌握聚乙二醇（PEG ）诱导体外细胞融合的基本原理。

2．通过PEG 体外诱导鸡血细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合的基本方法。

【实验原理】细胞融合(cell fusion ）又称体细胞杂交，是指用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞，随后，异核体同步进入有丝分裂，核膜崩溃，来自两个亲本细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞(hybrid cell ）。

细胞融合技术是研究细胞遗传、基因定位、细胞免疫、病毒和肿瘤的重要手段。

显微镜下的细胞融合过程融合过程中两个细胞膜的变化过程依据融合过程采用的助融剂的不同，细胞融合可分为：（1）病毒诱导的细胞融合，如：仙台病毒（hemagglutinating virus of Japan，HVJ）；（2）化学因子诱导的细胞融合，如：聚乙二醇（polyethyleneglycol，PEG）；（3）电场诱导的细胞融合；（4）激光诱导的细胞融合。

PEG是乙二醇的多聚化合物，存在一系列不同分子质量的多聚体。

PEG可改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处脂类分子发生疏散和重组，引起细胞融合。

该方法应用分子质量为400—6000的PEG溶液引起细胞的聚集和粘连，产生高频率的细胞融合。

融合的频率和活力与所用PEG的分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。

【方法与步骤】1. 鸡血细胞的获得：从家鸡的翼根静脉用注射器采血，注入试管后，迅速加入肝素（100U 肝素/ 5ml全血）混合，制成抗凝全血。

2. 鸡血细胞储备液的制备：在抗凝全血的试管中，加入4倍体积的0.85 %NaCl溶液，制成红细胞储备液，置于4℃冰箱内可供一周内使用。

3. 鸡血细胞悬液的制备：取鸡血细胞储备液1ml，加入4ml 0.85 %NaCl溶液，混匀后，1200rpm离心5min，弃去上清液，再加入5ml 0.85 %NaCl溶液按上述条件离心一次。

鸡血细胞融合实验报告鸡血细胞融合实验报告引言细胞融合是一种重要的实验技术，通过将两种或多种细胞融合在一起，可以研究细胞间的相互作用、基因表达调控以及细胞发育等方面的问题。

在本次实验中，我们选择了鸡血细胞作为研究对象，通过融合不同类型的鸡血细胞，探究其对细胞功能和特性的影响。

实验材料与方法1. 实验材料：- 鸡血细胞样本：从鸡体内提取鲜血样本，分离出鸡血细胞。

- 细胞培养基：含有适宜的营养物质和生长因子，维持细胞生长和分裂。

- 细胞培养器具：培养皿、离心管、移液器等。

2. 实验方法：- 细胞培养与扩增：将鸡血细胞接种于含有细胞培养基的培养皿中，放置于恒温培养箱中，控制适宜的温度和湿度，使细胞能够正常生长和分裂。

- 细胞融合：选取两种不同类型的鸡血细胞，分别标记为A和B。

将细胞A和细胞B分别收集，离心沉淀后，用细胞培养基将其悬浮于一起。

利用电融合或化学融合等方法，使细胞A和细胞B融合为一个细胞群体。

- 细胞观察与分析：观察融合后细胞的形态变化、生长速率、基因表达等特性，并与原始细胞进行对比分析。

实验结果与讨论通过实验观察和数据分析，我们得到了以下结果和结论：1. 细胞融合后形态变化融合前的细胞A和细胞B在形态上存在明显的差异。

然而，经过细胞融合后，新形成的细胞群体呈现出一种中间状态，既保留了细胞A和细胞B的一些特征，又具有自身的特点。

这表明细胞融合可以导致细胞形态的重塑和变异。

2. 细胞融合后生长速率我们观察到，在细胞融合后的细胞群体中，生长速率明显高于单独培养的细胞A和细胞B。

这可能是由于融合后细胞的互补性增强，使得细胞能够更有效地利用培养基中的营养物质和生长因子。

3. 细胞融合后基因表达通过实时荧光定量PCR等技术，我们检测了融合后细胞中一些关键基因的表达水平。

结果显示，融合后细胞的基因表达模式发生了明显的变化，一些基因的表达水平显著上调或下调。

这表明细胞融合可以影响基因的转录水平，从而影响细胞的功能和特性。

PEG介导的鸡血细胞融合实验
1．鸡翼下静脉采血，血液用D-Hank’s液，稀释10-20倍。

2. 实验时取约0.5 ml鸡血保存液于EP管中。

1500rpm离心10min 弃去上清，可见血细胞沉淀。

3.用手轻弹管底，使沉淀松散，加入D-Hank’s 约0.25ml制成悬液。

然后放入38℃水浴中预热10min。

4.吸取预热在38℃水浴锅中的50%PEG 0.25 ml在38℃水浴锅中于1min内沿离心管壁逐滴加入离心管中至离心管0.5 ml 刻度处（融合过程应在水浴锅内进行），边加边摇动离心管，使之与细胞混匀，38℃水浴中保温。

5.保温15~20min 后轻轻混匀，取细胞液制备涂片。

6.自然干燥后，甲醇固定10 分钟，晾干。

7. Giemsa扣染10分钟，小水流冲片后干燥，显微观察。

在上第5点细胞融合过程中，可在不同融合时间取细胞液制备涂片后，并加入少量Giemsa 染色，用牙签混匀，3min后，显微镜下观察细胞融合情况。

（注意：1.细胞液不能多2.显微镜观察只用40×观察。

PEG诱导鸡血细胞融合实验方法比较PEG（聚乙二醇）介导的鸡血细胞融合实验是一种常用的细胞学实验方法，用于研究细胞融合、基因转移、病毒感染等现象。

在这个实验中，PEG起到促进融合的作用。

本文将对常用的PEG诱导鸡血细胞融合实验方法进行比较。

1.直接混合法：直接混合法是最简单直接的方法，将两种不同细胞类型的细胞直接混合，加入PEG处理后，通过细胞的融合产生融合细胞。

实验步骤：a.将两种不同类型的鸡血细胞分别培养至对数生长期。

b.将细胞收集、洗涤后，按照一定比例混合在一起。

c.在混合细胞悬液中加入PEG，进行处理。

d.处理后的细胞悬液进行培养。

优点：简单快捷，操作方便。

缺点：融合效率低，融合细胞的纯度较低，难以鉴定融合细胞。

2.等渗处理法：等渗处理法使用PEG使两个细胞类型的渗透压基本相等，减小由于渗透压差带来的融合细胞死亡的可能性。

实验步骤类似于直接混合法，不同之处在于在混合前要将细胞分别处理加入等量的PEG。

优点：可以减少融合细胞死亡的可能性。

缺点：融合效率仍然较低，难以确保融合细胞的纯度。

3.高瓶底法：高瓶底法是一种间接融合法，将两种细胞性的细胞分别培养到八倍增生指数时接种于两个高菌瓶内，将角质层去除，用高菌瓶口与高速离心的纺棉花轻摩转盘瓶底，离心至指定g数。

因离心后双方菌瓶接触，菌体外膜断裂，细胞在瓶壁内微小空间聚集，有利于融合。

实验步骤：a.将两种不同类型的鸡血细胞分别培养至八倍增生指数。

b.将细胞收集后接种于两个高菌瓶内。

c.去除角质层，将高菌瓶口与高速离心的纺毛轻摩转盘瓶底。

d.将菌瓶离心至指定g数。

优点：融合效率较高，融合细胞纯度较高。

缺点：操作复杂，需要使用专用设备。

4.电熔法：电熔法是利用电场将两种细胞融合的方法。

通过电熔法可以达到融合效率较高的效果。

实验步骤：a.将两种不同类型的鸡血细胞分别培养至对数生长期。

b.将细胞收集后接种于电熔腔中。

c.设置一定的电场参数，通过电场产生的作用使细胞融合。

鸡血细胞融合实验报告鸡血细胞融合实验报告引言：细胞融合是生物学领域中的一个重要研究课题，通过将两种或多种细胞融合在一起，可以产生新的细胞，从而探索细胞的特性和功能。

本实验旨在通过将鸡血细胞进行融合，观察融合细胞的形态特征和生理功能，以期对细胞融合的机制和应用进行深入研究。

材料与方法：1. 实验动物：选取健康成年鸡作为实验对象。

2. 细胞培养：从鸡体内提取血液样本，分离出鸡血细胞，并进行细胞培养。

3. 细胞融合：选择适当的融合剂，将两种不同来源的鸡血细胞进行融合。

4. 观察与记录：通过显微镜观察融合细胞的形态特征，记录细胞的大小、形状、颜色等信息。

结果与讨论：通过实验观察，我们发现融合细胞在形态上与原始细胞有所不同。

融合细胞的大小较原始细胞更大，形状也更加不规则，颜色也呈现出混合的特征。

这表明细胞融合可能导致细胞的形态改变，从而影响其生理功能。

为了进一步验证融合细胞是否具有新的生理功能，我们进行了一系列实验。

首先，我们检测了融合细胞的代谢活性。

结果显示，融合细胞的代谢活性明显增强，相比于原始细胞，其能够更快地吸收营养物质并释放代谢产物。

这表明细胞融合可能导致代谢途径的改变，从而增强细胞的生理功能。

接下来，我们对融合细胞进行了增殖实验。

结果显示，融合细胞的增殖速度明显加快，相比于原始细胞，其能够更快地分裂并形成新的细胞。

这表明细胞融合可能导致细胞增殖机制的改变，从而增强细胞的生长能力。

此外，我们还对融合细胞进行了细胞凋亡实验。

结果显示，融合细胞的凋亡率明显降低，相比于原始细胞，其更容易存活并继续进行细胞分裂。

这表明细胞融合可能导致细胞凋亡途径的改变，从而增强细胞的生存能力。

综上所述，通过鸡血细胞融合实验，我们发现融合细胞在形态特征和生理功能上与原始细胞有所不同。

细胞融合可能导致细胞形态的改变、代谢活性的增强、增殖速度的加快以及凋亡率的降低。

这些发现为细胞融合的机制和应用提供了新的线索，有望在组织工程、再生医学等领域发挥重要作用。

一、实验目的1. 学习并掌握动物组织切片的基本原理和操作技术。

2. 观察鸡血细胞的结构特点，了解细胞核、细胞质等基本结构。

3. 培养观察和描述实验现象的能力。

二、实验原理动物组织切片是生物学研究中的重要技术之一，通过将组织切成薄片，可以观察到细胞和细胞器的微观结构。

本实验采用石蜡切片法，将鸡血组织切成薄片，经过染色处理后，在显微镜下观察其结构。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡血、石蜡、二甲苯、酒精、盐酸、苏木精、伊红等。

2. 实验仪器：切片机、显微镜、解剖剪、镊子、刀片、离心管、离心机、烧杯、试管等。

四、实验步骤1. 取材：取新鲜鸡血，用生理盐水制成10%的悬液。

2. 固定：将鸡血悬液加入固定液（10%甲醛溶液）中，室温固定24小时。

3. 脱水：将固定后的鸡血悬液依次浸泡在70%、80%、90%、95%、100%酒精中，各30分钟。

4. 透明：将鸡血悬液浸泡在二甲苯中，透明30分钟。

5. 包埋：将透明后的鸡血悬液滴加石蜡，制成石蜡块。

6. 切片：将石蜡块切成5-10微米的薄片，贴附在载玻片上。

7. 染色：将切片放入染色液中，依次进行苏木精染色、盐酸酒精分化、伊红染色、水洗。

8. 封片：将染色后的切片放入封片液中，封片。

五、实验结果与分析1. 显微镜观察：在显微镜下观察鸡血切片，可见细胞核、细胞质、细胞膜等结构。

2. 细胞核：鸡血细胞核呈圆形或椭圆形，核膜明显，核仁清晰可见。

3. 细胞质：细胞质呈淡蓝色，细胞质内有红细胞和白细胞。

4. 红细胞：红细胞呈双凹圆盘状，无细胞核，内含血红蛋白。

5. 白细胞：白细胞呈圆形或椭圆形，细胞核呈蓝色，细胞质呈红色。

六、讨论1. 鸡血细胞融合实验是一种常用的细胞学技术，可以用于研究细胞核、细胞质等结构的变化。

2. 鸡血细胞核的融合可以观察到细胞核的形态、大小和染色质分布等方面的变化。

3. 鸡血容易获取，且量多，是进行细胞学实验的良好材料。

4. 在鸡血细胞融合实验中，PEG作为一种细胞融合剂，可以促进细胞核的融合。

动物细胞融合实验实验报告
实验目的：1、了解动物细胞融合的常用方法
2、学习化学融合的基本操作过过程
3、观察动物细胞融合过程中的细胞行为和变化
实验材料：鸡血红细胞、50%PEG溶液、0.85%氯化钠溶液、显微镜、离心机、载玻片、盖玻片等
实验原理：聚乙二醇（PEG）能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。

在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分
子层的互相亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。

实验步骤：1、取鸡血，离心后去除上清液，以0.85%氯化钠溶液制成5%~10%的悬液
2、加入GKN液4ml，混匀
3、加入14滴PEG液，静置3~5min后混匀，放于显微镜下观察
实验结果：显微镜下可观察到有些细胞发生质膜融合
分析与讨论：细胞融合的应用有微生物原生质体融合构成新菌株、利用原生质体融合和培养技术培育新植物、细胞杂交瘤技术与单克隆抗体、用于基因定位和绘制人类基因
图谱、用于生产树突状细胞抗肿瘤疫苗、用于动物育种、用于细胞疗法等。

实验十一细胞融合【实验目的】掌握细胞融合原理、应用PEG融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。

【实验用品】一、材料鸡红细胞二、器材和仪器：显微镜、离心机、水浴箱、刻度离心管、试管、载玻璃片、盖玻片三、试剂 50％PEG(MW4,000)、Hanks液(pH7.4)【实验内容】一、原理细胞融合(Cell fusion)，即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。

人工诱导的细胞融合，在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。

由于它不仅能产生同种细胞融合，也能产生种间细胞的融合，因此细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生物学和医学研究的各个领域。

细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和电脉冲。

目前应用最广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。

PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重排。

二、方法(1)取新鲜鸡血以0.85％生理盐水制成10％的悬液。

(2)称取0.5克PEG(MW=4,000)放入试管内，在酒精灯上融化之，迅速加入0.5ml预热的Hanks液混匀制成50％的PEG溶液。

放入37℃水浴中待用。

(3)取上述10％的鸡红细胞悬液1ml放入离心管中，再加入5ml Hanks液混匀，然后以1,000rpm离心5分钟，小心弃去上清，用指弹法将细胞团块弹散。

(4)取上述50％PEG溶液0.5ml，在1分钟内滴加到鸡红细胞悬液，边加边轻轻摇动混匀。

待PEG全部加入后静置1分钟左右。

此全部过程都要求在37℃水浴内进行。

山东大学细胞生物学实验报告聚乙二醇（PEG ）法诱导的动物细胞融合实验2012/9/11实验目的：了解细胞融合技术的发展过程和主要方法的基本原理，用聚乙二醇(PEG)化学诱导法进行鸡血红细胞的融合实验，掌握实验的基本操作，观察鸡血红细胞融合的不同时期。

实验原理：1. 细胞融合的概念两个或两个以上的细胞或原生质体在自然或人为诱导的情况下细胞质膜相互融合，细胞质相互混合成为一个整体杂合细胞的现象被称为细胞融合。

细胞融合可以发生在同种细胞之间也可以在不同物种间实现。

2. 细胞人工融合的主要方法及基本原理细胞体外融合的主要方法分为病毒诱导，化学诱导和物理诱导。

1953年，M. Kuroya 在临床中第一次分离到仙台病毒（HVJ ）[1]。

1958年，日本学者Okada 发现仙台病毒（HVJ ）能诱导动物细胞融合[2]，其基本原理是仙台病毒的衣壳上有细胞表面受体的结合位点，可以诱导不同细胞凝集，最终使不同细胞的细胞膜相互融合。

1974年，加拿大学者高国楠发明了细胞的聚乙二醇（Polyethyleneglycol ，PEG ）化学融合法，由于该方法对实验条件要求极低，试剂易得，操作简单，成为应用最广泛的细胞融合方法。

化学诱导细胞融合的基本原理是PEG 等化学物质能够诱导细胞膜磷脂分子的极性基团发生结构重排，相互接触的细胞在细胞膜恢复过程中借助磷脂分子的亲和作用和表面张力实现融合。

比之于仙台病毒诱导法，PEG 诱导法的效率提高了几百倍。

80年代，科学家发明了细胞电融合法[4, 5]，电融合法将细胞融合的产率提高到了50%-80%。

电融合法的建立是基于细胞膜表面带电荷的性质。

当在细胞悬液周围加入特定方向的电场时，细胞表面会发生极化现象，相邻的细胞将吸附在一起。

这时突然提高电场强度，细胞间彼此接触的细胞膜会被击穿，细胞膜修复时受到磷脂分子间的亲和作用和细胞膜表面张力的作用将会发生融合。

图2. 以电融合方法得到的3T3-C2融合细胞 （引自J. Teissie 等，1982 )。

细胞融合实验报告【实验题目】动物细胞融合【实验目的】1.了解动物细胞融合的常用方法。

2.学习化学融合的基本操作过程。

3.观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。

【实验材料与用品】1、材料鸡血红细胞2、试剂50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。

3、器材倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。

【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。

目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。

1、病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。

用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。

2、化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。

这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。

在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。

化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。

PEG是广泛使用的化学融合剂。

3、电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。

其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。

电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。

【实验步骤】在本次实验中采用的是化学诱导融合的方法，利用PEG使鸡血红细胞发生融合。

具体实验步骤如下：1、取鸡血2ml+2mlAlsever液，再加入6mlAlsever液，混匀后制悬液（4℃保存）【老师已做好，可直接使用】2、取（1）中悬液1ml+4ml的0.85%的NaCl溶液，进行以下三次离心处理： 1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml； 1000-1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml；1000-1200r/min下离心7min【因时间关系此次实验只离心一次】3、将离心后的沉降血球（去上清后约0.1-0.2ml）加入GKN至1-2ml，使之成为10%的细胞悬液；4、取上述10%的血球悬液1ml,加入3mlGKN液，使每毫升含血球xxxx个；5、分别取（4）1ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+1.0ml50%PEG，2-3min后，显微镜下观察。

细胞融合Cell Fusionxx 201100140120 同组者：xx 2013年3月14号【实验目的】1、了解动物细胞融合的常用方法Learn common methods of cell fusion2、学习用PEG进行细胞融合的基本操作过程Use PEG to induce cell fusion3、注意动物细胞融合的过程中细胞的行为和变化Pay attention to the action and change of cells during the process of cell fusion【实验原理】细胞融合是指把相同或不同类型的两个或多个细胞融合成一个具有共同细胞质和单一、连续细胞膜的细胞。

Cell fusion is that two or more cells ，of same or different types，be fused by certain technique to produce one cell with a common cytoplasm and a single continuous cell membrane.目前用于细胞融合的有以下三种常用的方法：1、Virus 病毒2、PEG 聚乙二醇3、Electric shock 电击通过结合化学和电击的方法，可以使细胞融合率高达70%Up to 70% cell fusion efficiencies by combining both chemical and electrical fusion protocols.细胞融合率=已融合的细胞核总数/所有细胞的细胞核总数*100%Cell fusion efficiency is the ratio of the total number of fused nucleus over that of all the cells in the vision，usually shown as percentage.除了诱导剂外，其他因素，如细胞类型和性质、温度、PH值、离子强度等也会影响细胞融合率。

一、实验目的1. 了解PEG诱导细胞融合的基本原理。

2. 通过细胞融合实验，初步掌握细胞融合技术。

3. 观察鸡细胞融合过程中的细胞行为与变化。

二、实验材料与用品1. 实验材料：鸡红细胞、Hanks液、PEG（聚乙二醇）。

2. 实验用品：生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、试管、离心管、滴管、酒精灯、载玻片、盖玻片、生理盐水、剪刀、镊子等。

三、实验方法1. 准备鸡红细胞悬液：取新鲜鸡血，用生理盐水稀释至10%的悬液。

2. 制备PEG溶液：称取0.5克PEG（分子量4000）放入试管内，在酒精灯上融化，迅速加入0.5ml预热的Hanks液混匀，制成50%的PEG溶液。

放入37℃水浴中待用。

3. 处理鸡红细胞：取10%的鸡红细胞悬液1ml放入离心管中，加入5ml Hanks液混匀，以1000rpm离心5分钟，小心弃去上清，用指弹法将细胞团块弹散。

4. 诱导细胞融合：取上述50%的PEG溶液0.5ml，在1分钟内滴加到鸡红细胞悬液中，边加边轻轻摇动混匀。

待PEG全部加入后静置1分钟左右。

此过程均在37℃水浴中进行。

5. 终止PEG作用：缓慢滴加9ml Hanks液以终止PEG的作用，在37℃水浴中静置5分钟。

6. 离心弃上清：离心弃去上清，取一滴融合后的细胞悬液滴片，加盖片镜检。

四、实验结果与分析1. 镜检观察：在显微镜下观察，可见鸡红细胞融合后的细胞呈现球形，细胞膜较厚，细胞质较为均匀。

2. 实验结果分析：本实验成功诱导鸡红细胞融合，说明PEG诱导细胞融合技术在鸡细胞融合实验中具有可行性。

鸡红细胞融合后的细胞形态较为规则，细胞膜完整，细胞质均匀，说明细胞融合过程较为顺利。

五、讨论1. 鸡红细胞融合实验的成功，为细胞融合技术的研究提供了实验依据。

本实验采用PEG诱导细胞融合技术，具有操作简便、效果显著等优点。

2. 鸡红细胞融合实验过程中，PEG的浓度、处理时间等因素对细胞融合效果有较大影响。

实验中，PEG浓度为50%，处理时间为1分钟，能够获得较好的融合效果。