细胞膜的制备
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体验制备细胞膜的方法1、原理:细胞吸水涨破――→离心获得细胞膜。
2、选材①人和其他哺乳动物成熟的红细胞。
②原因:没有细胞核和众多的细胞器,这可使得到的细胞膜更为纯净。
3、过程4、注意事项①红细胞要用生理盐水(质量分数为0.9%)稀释,这样既可以使红细胞分散开,不易凝集成块,又能使红细胞暂时维持原有的形态。
②注意盖盖玻片的方法,防止出现气泡。
③用吸水纸吸引时,注意不要把细胞吸走。
④滴蒸馏水操作在载物台上进行,载物台应保持水平,否则易使蒸馏水流走。
⑤实验中持续观察细胞的变化与引流前观察到的细胞形态形成对照。
考点一:选择哺乳动物成熟红细胞进行实验例一、.若要获取人体细胞膜的纯净物,其材料来源应选择( )A . 精细胞B . 成熟的红细胞C . 肌细胞D . 骨细胞考点二:实验方法--吸水涨破法例一、下列有关细胞膜制备及观察的叙述,正确的是()A.家鸡的红细胞是最佳的实验材料B.若选用洋葱鳞片叶表皮细胞应先用蛋白酶去除细胞壁C.制备细胞膜应先利用吸水涨破法,再利用差速离心法获取D.可以用高倍镜直接进行观察考点三实验的基本操作例一、在“体验制备细胞膜的方法”实验时,下列操作步骤中不正确的是()A.制成红细胞临时装片B.先低倍镜后高倍镜观察C.在盖玻片的一侧滴生理盐水D.在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引易错点一:选择动物细胞进行实验的原因:动物细胞无细胞壁易错点二:选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器(膜),可以得到较纯净的细胞膜。
易错点三:细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜:将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细胞膜。
易错点四:如何获得植物细胞膜:先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体;再将原生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;最后经过离心分离得到植物细胞膜。
易错点五:稀释及稀释的时候用生理盐水的原因:稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。
人工合成细胞膜研究及其在生物学中的应用近年来,人工合成细胞膜的研究成为了生物学领域的一个热点,它为生物学研究提供了新的方法和思路。
本文将从人工合成细胞膜的概念、制备和应用三个方面进行论述。
一、概念细胞膜是生命体的基本结构之一,它是由脂质双层和蛋白质组成的半透膜。
细胞膜在生命体内起着关键的作用,它可以控制物质的进出、传递信号、维持离子平衡等。
因此,对细胞膜的研究一直是生物学研究的热点。
人工合成细胞膜是指通过一系列化学方法将脂质和蛋白质等生物分子组装成与自然细胞膜类似的结构。
它可以用来模拟自然细胞膜的性质和功能,并且可以控制组成成分,从而为生物学研究提供新的工具。
二、制备人工合成细胞膜的制备主要涉及到两个方面:脂质双层的制备和蛋白质的插入。
1. 脂质双层的制备脂质双层是细胞膜的主要组成部分,它由两层脂质分子相互排列而成。
人工合成细胞膜的制备开始于脂质分子的选择和混合。
常见的脂质有磷脂、胆固醇等,根据实验需要可以选择不同种类的脂质。
将不同种类的脂质按照一定比例混合,加入水溶液中,使其形成脂质片层。
然后将脂质片层转移到固体或液体基质表面,使其形成脂质双层结构。
2. 蛋白质的插入细胞膜中的蛋白质是细胞信号传递、物质进出的关键分子。
因此,制备人工合成细胞膜时,将蛋白质插入其中是十分必要的。
蛋白质的插入有多种方法,比较常见的是膜蛋白的自组装和某些蛋白质的插入过程。
自组装是指蛋白质在脂质双层中自行组合形成功能性的蛋白复合物,而插入过程则是将预先制备的蛋白质溶液加入到脂质双层中,让其自行插入双层结构中。
三、应用人工合成细胞膜的应用范围比较广泛,目前主要涉及到以下几个方面:1. 药物研发药物研发是人工合成细胞膜比较重要的应用方向之一。
通过制备含有特定膜蛋白的人工合成细胞膜,可以用来研究药物与膜蛋白的结合和作用机制,从而加速药物研发。
2. 生命科学研究生命科学研究是人工合成细胞膜另一个重要的应用方向。
人工合成细胞膜可以用来研究细胞膜的物理化学性质、生物学功能及其与其他细胞分子的相互作用等。
人工合成细胞膜的构建及其应用人类对于细胞膜的研究有着深厚的历史。
随着科学技术的不断发展,人工合成细胞膜逐渐成为科学界和工业界的热门领域,这一技术的成功应用将会为生命科学、医疗健康、环境工程等多个领域带来改变。
一、人工合成细胞膜的构建目前,人工合成细胞膜可分为两种:一种是单层膜,另一种则是双层膜。
单层膜是由一种或多种脂质分子组成的薄层膜,可以在液体内部或液体和气体的交界处形成。
它的构建方法包括自组装、模板法、电荷诱导等多种方法。
双层膜则是由两层互相对称的单层膜组成,其中间是一个水相区域。
它的构建方法大多数是通过前体分子进行膜融合。
目前,人工合成细胞膜主要是基于脂质的材料,其中包括磷脂类、甘油三酯、烷基酰胺以及其它复杂的脂质分子等。
这些脂质分子的结构和功能各不相同,可以通过选择并组合不同的脂质分子实现构建不同结构、不同功能的人工细胞膜。
二、人工合成细胞膜的应用1、生命科学领域在生命科学领域中,人工合成细胞膜的应用十分广泛。
当我们将不同的细胞膜融合在一起时,会产生不同的生物学效应,如细胞融合、细胞信号传导等。
目前尝试将这一技术应用于药物筛选和分离酶等蛋白质的研究上。
同时,人工合成细胞膜的构建也为生物仿生和人造细胞等领域的研究打下了基础。
借助人工合成细胞膜技术,研究者们已经成功构建出了一些具有结构功能与自我复制机制的小型细胞。
2、医疗健康领域人工合成细胞膜技术的应用还涉及到医疗健康领域。
在医疗用途上,通过模拟细胞膜,吸附药物等活性分子,可以实现高效率的传递,并减轻毒副作用。
与传统药物相比,通过人工合成细胞膜技术制备的药物具有更明显的药效,更小的药剂量,更少的毒副作用等优点。
实际上,人工合成细胞膜技术在癌症治疗、抗菌剂研究等方面得到了广泛应用。
此外,在生物识别、基因传递等研究中,人工合成细胞膜也起到了关键的作用。
3、环境科学领域人工合成细胞膜技术的应用还延伸到了环境科学领域。
利用该技术,可以构建可控、高效的水处理膜,如水处理、污染物的吸附和分离等方面,有着不容忽视的作用。
细胞膜的制备方法实验一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。
预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。
(2) 在单层细胞上加 1% 的胶原酶溶液,在37℃ 保温 30 分钟,偶尔摇动。
1% 胶原酶:IV 型胶原酶(Sigma ) 溶解在含1 mmol/L CaCl2的1% 的BSA/HBSS 溶液中,含 Mg2 ,配成 1%的胶原酶溶液。
溶液经过滤除菌并保存在 -20℃ 直到使用,避免反复冻融。
(3) 加 1 mol/L EDTA 钠盐(pH 8)。
使终浓度为 5~10 mmol/L。
保温到细胞变圆,通常需要 30 分钟。
(4) 用临床台式离心机 250 g 温和离心 2~3 分钟以收集细胞。
室温也可以接受,但最好在4℃ 进行。
开始分离细胞膜之前至少用HBSS/EDTA 溶液洗涤细胞一次再将细胞均匀地悬浮在小体积(1~2 ml) 的第 2 步中所描述的细胞膜包被缓冲液(PMCB) 中。
2. 准备下列溶液:30% 的阳离子硅胶贮存液可以根据 Chaney 和 Jacobson (1983) 的方法制备。
3. 取刚刚洗涤过的至少含5x106个细胞的来自第一步的单细胞悬液。
4. 用临床台式离心机 900 g 离心 2~3 分钟沉淀细胞,最好在4℃,温和地将细胞重新悬浮于 1 ml PMCB 缓冲液中。
防止细胞破裂。
从此刻到第9 步,如果发生了细胞破裂,细胞器和细胞碎片可能会与细胞膜一同被分离,这是最大的污染源。
5. —滴一滴地将细胞悬浮液加到 5 ml 1% 的阳离子硅胶 PMCB 溶液中,同时在一个50 ml 的锥形离心管中轻轻混旋溶液。
注意是细胞加到阳离子硅胶中而不是硅胶加到细胞中。
所有细胞加完后,用PMCB 缓冲液稀释二氧化硅包被的细胞悬浮液到 20 ml。
6. 900 g 离心 3 分钟沉淀硅胶包被的细胞。
制备细胞膜的方法
一、离心法。
离心法是一种常用的制备细胞膜的方法。
首先,将需要制备细胞膜的细胞悬浮液进行低速离心,去除细胞核和细胞碎片。
然后,将上清液进行高速离心,沉淀细胞膜。
最后,收集沉淀物并进行洗涤,即可得到较纯净的细胞膜。
二、超声破碎法。
超声破碎法是另一种常用的制备细胞膜的方法。
在超声波作用下,细胞膜会发生破裂,释放出细胞膜囊泡。
然后,通过差速离心或密度梯度离心,可以分离出细胞膜囊泡。
最后,对分离得到的细胞膜囊泡进行洗涤,即可得到较纯净的细胞膜。
三、离子交换法。
离子交换法是一种较为温和的制备细胞膜的方法。
通过离子交换树脂的作用,可以将细胞膜上的蛋白质和其他成分与树脂结合,然后用盐溶解离子交换树脂,释放出与细胞膜结合的蛋白质和其他
成分。
最后,对释放得到的物质进行纯化和分离,即可得到较纯净的细胞膜。
四、胆固醇去除法。
胆固醇去除法是一种用于制备细胞膜的特殊方法。
通过使用含有甲醇和氯仿的混合溶剂,可以使细胞膜上的胆固醇发生沉淀并去除。
经过胆固醇去除后的细胞膜可以更好地用于一些特定的实验研究。
综上所述,制备细胞膜的方法有多种多样,选择合适的方法取决于实验的具体要求和研究目的。
希望本文介绍的方法能够对您的实验研究有所帮助。
实验二体验制备细胞膜的方法一、实验目的要求1、体验用哺乳动物红细胞制备细胞膜的方法和过程2、熟悉并掌握显微镜的使用二、实验原理1、动物细胞没有细胞壁,不但省去了去除细胞壁的麻烦,而且没有细胞壁的支持和保护,细胞易吸水涨破。
2、哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和具有有膜的细胞器,可以避免细胞膜与其它膜结构混在一起。
3、红细胞放入清水中,细胞吸水膨胀直至胀破,细胞内的物质流出,从而得到细胞膜。
三、实验材料及用具1、实验材料:新鲜的鸡血(自己的血)2、实验试剂:肝素或柠檬酸钠,生理盐水,蒸馏水或清水3、实验用具:离心机,离心管,滴管,吸水纸,载玻片,盖玻片,显微镜四、教师实验准备准备一定量的新鲜鸡血,在冰箱中静置一昼夜。
用滴管将上清液吸去,再吸取1ml的沉淀物,放入离心管中,加入生理盐水2ml,在2000r/min条件下离心五分钟。
去除上清液,在沉淀物中加入生理盐水2ml,再离心一次,去除上清液,留沉淀物备用。
五、学生实验步骤1、取一个小烧杯,加入生理盐水1-2ml。
2、用滴管吸取沉淀下层的一小滴血细胞,滴入小烧杯的生理盐水中。
3、制片:用另一个滴管吸取少量红细胞稀释液,滴一小滴到载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片。
4、观察:先在低倍镜下找到红细胞,再转换成高倍镜,直至清晰地看到正常状态下的红细胞形态。
5、滴水:往载物台上盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸小心吸引,边吸引边观察红细胞的形态变化。
当红细胞体积逐渐变大,变得非常膨胀,在视野中可以找到少量涨破的红细胞,它们已失去完整的边缘。
六、实验结果看到近水的部分红细胞发生变化:凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物流处。
(一)鸡的血细胞(正常情况)(二)鸡的血细胞(吸水涨破)(三)人的血细胞七、注意事项1、制作临时装片时,红细胞必须得稀释,而且取红细胞的量要少2、在高倍镜下观察,待观察物清晰时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸吸引。
制备细胞膜的方法
制备细胞膜的方法有多种不同的方法,以下是其中几种常见的方法:
1. 利用离心法制备细胞膜:首先,将细胞培养物通过离心将细胞沉淀下来。
然后,使用适当的缓冲液洗涤细胞沉淀,去除细胞外的杂质。
最后,将细胞沉淀悬浮于适当的缓冲液中,用高速离心使细胞溶解,分离出细胞膜。
2. 利用化学溶解法制备细胞膜:首先,将细胞收集起来,然后使用适当的化学药物或酶处理细胞,使细胞膜溶解,释放出细胞膜。
随后,通过离心或过滤等方法将溶解的细胞膜分离出来。
3. 利用超声法分离细胞膜:首先,将细胞收集起来,然后使用超声波处理细胞,破碎细胞膜释放出细胞膜。
最后,通过离心或过滤等方法将细胞膜分离出来。
4. 利用凝胶过滤法制备细胞膜:首先,将细胞培养物经过适当的处理后,用适当的溶液悬浮细胞。
然后,将细胞悬浮液通过具有合适孔径的凝胶过滤膜,使细胞膜滤过膜孔,而其他细胞成分被滞留在过滤膜上面,从而分离出细胞膜。
以上是制备细胞膜的几种常见方法,具体使用哪种方法应根据实验目的和需要选择合适的方法。
红细胞膜的制备一、引言红细胞膜是红细胞的外膜,由磷脂、蛋白质和糖组成。
它起着保护红细胞内部结构的稳定性、调节物质的通透性和参与细胞信号传导等重要作用。
本文将介绍红细胞膜的制备方法及相关实验步骤。
二、制备方法红细胞膜的制备方法可以分为以下几个步骤:血液采集、红细胞分离、红细胞膜的破碎和纯化等。
2.1 血液采集从新鲜的动物血液中采集红细胞。
可选择采血针加入抗凝剂的血集管进行采血。
注意采集过程要严格按照实验室的安全操作规程进行,确保实验的可靠性和安全性。
2.2 红细胞分离将采集到的血液离心,分离出红细胞。
可以使用离心机进行离心分离,设置适当的离心力和离心时间。
分离后,将上清液倒掉,保留红细胞。
2.3 红细胞膜的破碎将红细胞加入到低渗透溶液中,通过渗透压差使红细胞膜破碎。
可以选择一定浓度的糖溶液,使红细胞膜受到渗透压的影响发生破裂。
2.4 红细胞膜的纯化通过离心和洗涤等步骤,将红细胞膜纯化。
将破碎的红细胞溶液进行离心,将上清液去除,保留红细胞膜的沉淀物。
然后用缓冲溶液进行洗涤,去除余下的杂质。
重复离心和洗涤步骤,直至获得纯净的红细胞膜。
三、实验步骤以下为一般实验步骤,具体操作时需要根据实验室的要求进行调整。
1.准备实验所需材料和试剂,包括采血针、血集管、抗凝剂、离心机、离心管、缓冲溶液等。
2.按照实验室操作规程,进行血液采集。
注意采集前要进行必要的安全防护措施。
3.采集的血液放置一段时间,等待血液凝固,形成血块。
4.将血块放入离心机中,设置适当的离心力和离心时间,离心分离出红细胞。
5.丢弃上清液,保留红细胞。
6.将红细胞加入糖溶液中,使红细胞膜发生破碎。
7.将破碎的红细胞溶液进行离心分离,保留红细胞膜的沉淀物。
8.使用缓冲溶液对红细胞膜沉淀物进行洗涤,去除杂质。
9.重复离心和洗涤步骤,直至获得纯净的红细胞膜。
四、实验注意事项1.在实验过程中,要注意遵守实验室的操作规程,保证实验的安全性和可靠性。
2.采集血液时,应避免受到污染,并及时进行后续实验步骤。
第1节细胞膜——系统的边界一、细胞膜的成分1.细胞膜的制备(1)原理:细胞吸水涨破――→离心获得细胞膜。
(2)选材①人和其他哺乳动物成熟的红细胞。
②原因:没有细胞核和众多的细胞器,这可使得到的细胞膜更为纯净。
(3)过程(4)注意事项①红细胞要用生理盐水(质量分数为0.9%)稀释,这样既可以使红细胞分散开,不易凝集成块,又能使红细胞暂时维持原有的形态。
②注意盖盖玻片的方法,防止出现气泡。
③用吸水纸吸引时,注意不要把细胞吸走。
④滴蒸馏水操作在载物台上进行,载物台应保持水平,否则易使蒸馏水流走。
⑤实验中持续观察细胞的变化与引流前观察到的细胞形态形成对照。
2.细胞膜的成分(1)细胞膜的主要成分:脂质和蛋白质,还有少量糖类。
(2)细胞膜成分的特点:组成细胞膜的脂质中,磷脂含量最丰富,功能越复杂的细胞膜,蛋白质的种类和数量越多。
(1)细胞膜的主要成分是蛋白质、磷脂和多糖()(2)细胞膜中不含胆固醇()(3)细胞膜中的糖主要是纤维素()(4)哺乳动物成熟的红细胞中没有除细胞膜之外的其他膜结构()答案(1)×(2)×(3)×(4)√1.我们常用猪的成熟的红细胞作为细胞膜制备的材料,可否用鸡的红细胞做细胞膜的制备实验呢?提示不可以。
鸡不是哺乳动物,其红细胞内含有细胞核和众多的细胞器,不易获得较纯净的细胞膜。
2.哺乳动物的红细胞在发育成熟过程中,核逐渐退化,为携带氧的血红蛋白腾出空间。
成熟的红细胞一般不含细胞器且取材方便,是研究细胞膜的好材料。
请根据材料回答问题:(1)将红细胞放入________中,一段时间后细胞将破裂。
(2)红细胞破裂后,流出细胞外的物质主要是________。
(3)再用________法获得纯净的细胞膜,将膜成分分离提纯后,用________试剂可检测其中的蛋白质,具体现象是______________________。
提示(1)清水(2)血红蛋白(3)离心双缩脲溶液变成紫色归纳总结细胞膜成分的实验鉴定细胞膜成分鉴定试剂(方法) 结果磷脂脂溶剂处理细胞膜被溶解磷脂酶处理细胞膜被破坏脂溶性物质透过实验脂溶性物质优先通过蛋白质双缩脲试剂紫色蛋白酶处理细胞膜被破坏二、细胞膜的功能、细胞壁1.细胞膜的功能(1)将细胞与外界环境分隔开,保障了细胞内部环境的相对稳定。
细胞膜的制备教案教案标题:细胞膜的制备教案教案目标:1. 了解细胞膜的结构和功能。
2. 学习制备细胞膜的方法。
3. 培养学生的实验技能和科学思维。
教学资源:1. 教材:包含细胞膜结构和功能的相关内容。
2. 实验室设备:玻璃容器、洗涤瓶、试管、移液器等。
3. 实验材料:蛋黄、植物油、洗涤剂、酒精等。
教学过程:引入:1. 向学生介绍细胞膜的重要性和功能,以及细胞膜在生物体中的作用。
2. 引导学生思考如何制备一个模拟细胞膜的实验。
实验步骤:1. 准备实验材料:蛋黄、植物油、洗涤剂、酒精等。
2. 将一颗鸡蛋分离出蛋黄,并将蛋黄放入一个玻璃容器中。
3. 向玻璃容器中加入适量的植物油,代表细胞膜的脂质双层。
4. 加入少量的洗涤剂,搅拌均匀,代表细胞膜上的蛋白质。
5. 加入适量的酒精,搅拌均匀,代表细胞膜上的其他成分。
6. 观察实验结果,并与细胞膜的结构进行对比和讨论。
实验讨论:1. 引导学生观察实验结果,了解细胞膜的模拟制备过程。
2. 与学生一起讨论实验结果与细胞膜结构的相似之处和差异之处。
3. 解释细胞膜的结构和功能对细胞的重要性。
拓展活动:1. 鼓励学生设计其他模拟细胞膜的实验方法,并进行实验验证。
2. 探究不同条件下细胞膜的稳定性和透性变化。
3. 引导学生进一步了解细胞膜的研究领域和应用。
评估方式:1. 实验结果的观察和记录。
2. 学生对实验结果的分析和讨论。
3. 学生参与拓展活动的表现和成果。
教学反思:1. 教师应提前准备好实验材料,确保实验顺利进行。
2. 在实验讨论环节,教师应引导学生积极参与,激发他们的思考和探究兴趣。
3. 针对不同学生的实验水平和兴趣,教师可提供不同难度的拓展活动,以满足学生的需求。