小鼠视网膜新生血管模型的建立及特征(OIR)

氧诱导视网膜新生血管模型中基质细胞衍生因子1的表达及机制研究袁非;陈向武【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)001【摘要】目的:观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)在氧诱导视网膜新生血管(OIR)模型中的表达情况,并初步研究其在OIR模型中的促新生血管生长机制.方法:30只C57BL/6J新生小鼠随机分为2组.其中15只小鼠置于氧浓度为75%的容器内饲养5 d,再转移至正常空气下饲养5 d,作为高氧诱导组;另15只小鼠一直在正常空气中饲养,作为正常对照组.免疫组织化学方法检测视网膜SDF-1、CD14蛋白的定位及含量,real-time PCR法检测视网膜SDF-1 mRNA的表达.结果:与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目明显增多(P<0.01),血管分支减少,大血管扩张、迂曲.两组小鼠视网膜神经上皮均可见SDF-1和CD14阳性染色,但高氧诱导组的SDF-1和CD14含量明显高于正常对照组(均P<0.01).并且视网膜SDF-1与CD14的蛋白含量存在正相关(r=0.898,P<0.01).视网膜SDF-1 mRNA 表达在高氧诱导组也明显高于正常对照组(P<0.01).结论:OIR模型小鼠视网膜SDF-1表达增高,其促新生血管功能可能与CD14+细胞有关.【总页数】6页(P139-144)【作者】袁非;陈向武【作者单位】复旦大学附属中山医院眼科,上海,200032;复旦大学附属中山医院眼科,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.凉血活血药物对氧诱导小鼠视网膜新生血管模型中VEGF的影响 [J], 周绿绿;王明芳;李晟;王万杰;张玲;汪辉2.凉血活血药物对氧诱导小鼠视网膜新生血管模型中VEGF的影响 [J], 周绿绿;李晟;王万杰;张玲;汪辉;王明芳3.小鼠氧诱导视网膜新生血管形成中EphA2与 VEGF 的表达及相关性研究 [J], 黄文志;李倩庆;高宗银N1在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的表达及意义 [J], 底煜;张轶欧;杨飏;陈晓隆5.YAP在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的表达及意义 [J], 杨军;周佳莹;董德坤;刘盈因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

广东医学2020 年丨丨月第 41 卷第 22 期Guangdong Medical Journal Nov. 2020, V〇l. 41，No. 22•2287 •TLR4"-抑制小鼠氧诱导视网膜新生血管生成的作用机制孙玉莹、肖欧2,黄春雨中山大学肿瘤防治中心’防癌体检中心、3内镜科（广东广州510060); 2中山大学中山眼科中心眼底内科（广东广州510060)【摘要】目的通过建立氧诱导视网膜血管病变（OIR)模型，探讨Toll样受体4(TLR4)在视网膜新生血管中的作用及其机制：方法使用7日龄新生TLR4基因敲除（TI.,R4…）C57BL/6J小鼠和7日龄新生C57BL/6J小鼠建立01R模型。

分别于小鼠第12天（P12)、17天（P17)和21天（P21)时通过小鼠视网膜荧光灌注铺片观察新生血管面积，评估新生血管情况：通过免疫荧光染色，观察TLR4在小鼠视网膜中的表达情况_.通过Real - Time PCR检测两组0IR小鼠P12和P丨7视网膜组织中核因子-k B(N F- k B)、血管内皮细胞生长因子（VEGF)和促炎因子白细胞介素-6(I L-6)的mRNA表达水平结果在0IR模型中，通过视网膜荧光灌注铺片发现P12两组小鼠视网膜出现无血管区，P17均出现无血管区和新生血管簇，而且新生血管面积达到最高峰。

P12、P17和P21时，TLR4——0]R小鼠中的视网膜新生血管面积均明显比正常0IK小鼠减少，差异有统计学意义（f<0. 05).,通过免疫荧光检测发现TLR4在小鼠视网膜上广泛表达，与未建立0IR模型的正常小鼠相比，在P17时正常0IR小鼠视网膜的TLR4表达明显升高对比正常0IR小鼠，TLR4 一OIR小鼠视网膜组织的N F-k B、VEGF和促炎因子I L-6的表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05)._.结论TLR4在视网膜新生血管形成过程中起到重要作用，TLR4基因缺失通过抑制NF - k B信号通路，减少血管生成因子和炎性因子的释放，抑制0丨R小鼠视网膜新生血管的生成..，【关键词】T oll样受体4;视网膜新生血管；（)m动物模型；T L R4基因敲除小鼠；炎性因子【中图分类号】R774. 1;R364.3 【文献标志码】ADOI ： 10. 13820/j. cnki. gdyx. 20202040Mechanism of inhibitory effect of TLR4 on oxygen -induced retinal neovascularization in mice. SUN Yu -ying, XIAO Ou, HUANG Chun - yu. Cancer Prevention Center，Sun Yat - Sen University Cancer Center，Guangzhou 510060, Guangdong y ChinaCorresponding author：HUANG Chun -y u^E-m a i l：hiuingchy@ sysucc. org. cn.【Abstract】Objective To investigate the role and mechanism of TLR4 in retinal neovascularization by establishinga model of oxygen - induced retinal angiopathy (O IR). Methods The OIR model was established by using 7 - day - oldFI.K4 gene knockout C57BL/6J mice as the experimental gioup and 7 — day -old C57B iy6J mice as the control group.The area of neovascularization was observed by retinal fluorescence perfusion on the 121'1day (P12) , 171,1day ( P17) and21、丨day ( P21 ). The expression of TLR4 in mouse retina was observed by immunofluorescence staining. The mRNA ex­pression levels of NF —k B, V EG F' and pro — inflammatoiT factor IL —6 in PI2 and P I7 retinas of the two groups were de­tected by real - time PCR. Results In the OIR m odel, through the method of fluorescence perfusion retinal preparation,we found that the retina of P I2 mice showed non - vascular area, on V\1showed non - vascular area and neovasculariza­tion cluster, and the neovascularization area reached the peak. On P I2 and P21 , the area of retinal neovascularization inTLR4 OIH mice was significantly lower than that in normal OIR mice. Through immunofluorescence detection, it wasfound that TLR4 was widely expressed in the retina of mice. Compared with the normal mice without OIR, the expressionof TLR4 in the retina of nomial OIR mice was significantly increased on P17. Compared with normal OIR m ice, the ex­pression levels of NF -k B, VEGF and pro - inflammatoiy factor IL -6in retina of TLR4 knockout OIR mice were signifi­cantly reduced. Conclusion TLR4 plays an important role in retinal neovascularization. TLR4 inhibits the formationof retinal neovascularization in OIH mice hv inhibiting N F"-k B signal pathway and reducing the release of angiogenic fac-△通信作者：黄春雨，E -mail:*******************.cn• 2288 •广东医学2〇2〇年丨 1月第4丨卷第 22 期Guangdong Medical Journal Nov. 2020, Vol. 41 , No. 22 tors and inllammaton factors. This will provide a new strategy for the prevention and treatment of retinal neovascular disea­ses.【Key words】toll — like receptor 4; retinal neovascularization;01R animal m odel; TLR4 gene knockout mic.e; in-nammatorv factors视网膜新生血管形成是多种视网膜血管病变如 视网膜静脉阻塞、增殖型糖尿病性视网膜病变、早产 儿视网膜病变等共有的病理改变，是导致视力损害 的主要原因之一、1：■新生血管形成涉及到多种机 制，其中免疫炎症反应是当前备受关注的研究领域。

GPER抑制星形胶质细胞活性减少OIR小鼠视网膜新生血管生成的机制研究王璇;叶剑;刘玮【期刊名称】《陆军军医大学学报》【年(卷),期】2024(46)12【摘要】目的探究在氧诱导下的新生小鼠视网膜缺血模型(oxygen-induced retinopathy,OIR)中,G蛋白偶联雌激素受体(G proteincoupled estrogen receptor,GPER)减少OIR小鼠视网膜新生血管生成的机制。

方法42只新生小鼠采用随机数字表法分为4组:常氧对照组(n=11)、OIR组(n=11)、G-1(GPER激动剂)组(n=10)和溶剂对照组(n=10)。

出生后17 d(P17)时,眼球冰冻切片免疫荧光染色观察常氧对照组小鼠GPER在视网膜分布情况。

G-1组和溶剂对照组在P12~P15时分别腹腔注射给予G-1[50μg/(kg·d)]或玉米油溶剂,P17时视网膜铺片免疫荧光染色观察视网膜血管标志物(IB4)、星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glia fibrilary acidic protein,GFAP)表达,蛋白免疫印迹法定量检测视网膜血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、GFAP、炎症因子TNF-α、IGF-1、IL1-β蛋白表达情况。

结果GPER存在于小鼠视网膜全层,在视网膜神经节细胞层与星形胶质细胞标志物GFAP共染。

与常氧对照组相比,OIR 组小鼠视网膜出现新生血管与无血管区,且GPER、VEGFA和GFAP表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05);与溶剂对照组相比,G-1组视网膜新生血管生成减少,VEGFA、GFAP、TNF-α、IGF-1、IL1-β蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论GPER能抑制星形胶质细胞活性,减少VEGFA、炎症因子释放,减少OIR小鼠视网膜新生血管生成。

oir小鼠模型原理
OIR小鼠模型是一种用于研究视网膜疾病和血管异常的实验动物模型。

OIR是“缺氧性视网膜病变”的缩写，它模拟了早产儿视网膜疾病的特征，如增殖血管生成和视网膜缺血再灌注损伤。

OIR小鼠模型的建立在胚胎发育阶段进行。

首先，小鼠妊娠期特定日龄的妊娠小鼠被置于低氧环境中，这导致胎鼠暴露在缺氧的条件下。

接着，小鼠在适当的时间点被转移到正常氧气水平的环境中，模拟了早产儿出生后视网膜缺血再灌注的情况。

这个过程通常持续一到两周。

在OIR小鼠模型中，最主要的特征是新生血管生成。

在低氧环境下，视网膜中的缺氧和细胞损伤促使血管增殖因子（如VEGF）的释放增加。

这些血管增殖因子刺激了视网膜内新生血管的生长，形成异常的血管结构。

然而，这些新生血管并不稳定，容易发生渗漏和出血，最终导致视网膜功能的损害。

OIR小鼠模型还可以通过观察和评估视网膜的形态学和组织学变化来研究视网膜疾病的发病机制。

例如，通过染色和显微镜观察，可以检测到新生血管的形成、视网膜厚度和细胞损伤等重要指标。

此外，还可以使用各种生物学和分子生物学方法来研究与视网膜疾病相关的信号通路和分子机制。

总的来说，OIR小鼠模型是研究视网膜疾病和血管异常的有效工具，通过模拟早产儿视网膜疾病的特征，可以更好地理解相关疾病的发病机制，并为新药的研发提供实验基础。

改良的可定量氧诱导法建立视网膜新生血管小鼠模型潘琪琦;周容;刘晓铃【期刊名称】《中华实验眼科杂志》【年(卷),期】2008(026)007【摘要】目的建立简单的、成模效率高的可定量氧诱导视网膜新生血管C57BL/6小鼠模型.方法 89只C57BL/6乳鼠随机分为3组,分别用传统法和两种改良法建立模型,12只作为正常对照组.比较各组母鼠死亡率、乳鼠存活率和成模率.随机取1只眼行视网膜石蜡切片苏木精-伊红染色,另1只眼行ADP酶法视网膜铺片,进行染色观察和定量分析.结果与传统法相比,两种改良法母鼠死亡率低,乳鼠存活率和成模率较高.改良Ⅰ组视网膜平均每张切片突破内界膜增生细胞数和无灌注区相对面积比其他两组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).改良Ⅱ组与改良Ⅰ组比较,乳鼠存活率高,细胞增生和无灌注区明显且程度适中.结论两种改良法简单、稳定且高效,均能构建典型的可定量氧诱导视网膜新生血管模型,改良法Ⅱ是适合视网膜新生血管发生机制及药物干预研究的一种方法.【总页数】4页(P486-489)【作者】潘琪琦;周容;刘晓铃【作者单位】325003,温州医学院附属眼视光医院眼底病中心;325003,温州医学院附属眼视光医院眼底病中心;325003,温州医学院附属眼视光医院眼底病中心【正文语种】中文【中图分类】R774【相关文献】1.腹腔内注射L-精氨酸诱导法建立急性胰腺炎小鼠模型的评价 [J], 魏国丽;郑学宝;刘强;周宇2.氧诱导的视网膜病变小鼠模型建立方法的改良 [J], 丁小燕;梁小玲;谢素贞;朱晓波;唐仕波3.建立可定量的视网膜新生血管小鼠模型的探索 [J], 刘昳;梁晓玲;许传超;谢素贞;邝文辉;刘祖国4.定量氧致SD大鼠视网膜新生血管模型的制备 [J], 曾莉;王惠英5.四氧嘧啶诱导的实验性高血糖小鼠模型建立及其稳定性 [J], 陈琳;王宁;张琨;赵小伟;陈卫;何丽;欧阳康乐;司远仁;李超英;乐凯;茹琴;田香;熊琪;马宝苗;刘璐;吴日辉;邢俊俏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高氧诱导的小鼠视网膜新生血管动物模型研究【摘要】目的：探讨用c57bl小鼠建立高氧诱导的早产儿视网膜病变（rop）动物模型，为研究该病的发病机制及治疗提供成熟的研究对象。

方法：鼠龄为7天的新生c57bl小鼠随机分组，每组20只小鼠，将实验组小鼠置于密闭氧仓中饲养，氧仓连接氧浓度测量仪，保持氧箱内氧浓度为75±2%，5天后将小鼠取出置于常氧环境中饲养。

对照组小鼠置于普通空气中饲养。

两组小鼠均在出生后17天将小鼠处死，行眼球病理切片he染色、视网膜新生血管细胞核计数及apd染色视网膜铺片，了解视网膜新生血管的形成情况。

结果：正常对照组小鼠的视网膜组织切片中，内界膜清晰、连续，突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核极少，平均每张切片中为1.2±0.75个。

实验组鼠视网膜组织切片中显示视网膜表面高低不平，较多突破内界膜的血管内皮细胞核，平均每张切片中新生血管内皮细胞核数为34.58±6.15个，与对照组相比，差异有非常显著的统计学意义。

在视网膜铺片中对照组的视网膜血管发育成熟，自视盘发出向周边呈放射状均匀分布，血管形态及管径正常，分支血管发育良好。

实验组可见视网膜血管迂曲变细，分布紊乱、周边大量无灌注区及新生血管芽形成。

结论：高氧诱导的小鼠可成功形成视网膜新生血管，可以作为早产儿视网膜病变研究的成熟动物模型。

【关键词】高氧，早产儿视网膜病变，视网膜新生血管，动物模型【中图分类号】r774.1 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）12-0023-02早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity， rop）是指新生儿视网膜血管异常增殖所致的一类疾病，是导致新生儿失明的最重要原因。

[1，2]目前，该病的发病机制仍不明确。

目前国内外对于rop的最佳治疗仍局限于对阈值或阈值前病变进行光凝或冷凝，尽管如此仍有10%～15%的重症患儿最终失明[3，4]。

oir小鼠模型原理当我们谈论OIR（Oxygen-Induced Retinopathy，氧诱导性视网膜病变）小鼠模型时，我们指的是一种用于研究视网膜血管发展和病理性视网膜血管增生的动物模型。

视网膜是人类眼睛中充血血液的供应者，而OIR小鼠模型被广泛地用于研究因过氧化氢引起的新生血管生成。

在该模型中，小鼠在出生几天后被暴露在高氧环境中，导致其视网膜中的血管发育异常。

高氧环境刺激下，正常的视网膜血管发育停止，在眼底形成了一种中心性的虚拟缺血。

通常情况下，眼底组织会释放大量休克蛋白、细胞因子和生物标志物，该刺激会引起一系列可控制的生物化学和分子改变。

当小鼠再次处于正常的氧含量环境中时，虚拟缺血部位的缺氧诱发了新生血管的生成，与人类视网膜病变相关。

该模型的主要优点之一是它能够模拟人类视网膜病变的发展和治疗。

视网膜是人眼中最内层的光敏结构，也是感光细胞所在的位置。

然而，由于视网膜的特殊结构，它对氧气含量的要求非常高。

在OIR小鼠模型中，通过改变小鼠最初的氧气含量，模拟了新生婴儿视网膜在过度氧化应激下的发育过程。

这种模拟有助于研究与致盲性疾病相关的病理生理学和分子机制。

此外，OIR小鼠模型还具有可重复性和可控性的优势。

通过控制小鼠在高氧环境中的暴露时间和氧气浓度，可以实现对小鼠视网膜的一致损伤，并在相同的条件下进行多次试验。

这种可重复性有助于研究人类视网膜病变的不同方面，包括血管异常和新生血管生成。

然而，OIR小鼠模型也存在一些限制。

首先，该模型不能直接反映人类视网膜病变的所有特征。

尽管高氧暴露可以诱导视网膜的缺血和新生血管生成，但人眼中的视网膜疾病通常是多个因素的结果。

因此，研究人员需要结合其他实验方法和模型来更全面地研究视网膜病变的机制。

此外，OIR小鼠模型对条件的严格要求可能使其在实际应用中有一定局限性。

包括控制小鼠环境、氧气浓度和次数等几个因素，而且模型中所用仪器设备较为复杂，需要专业的操作技术。

氧诱导视网膜病变小鼠模型中微小RNA表达分析的内参基因优选
作者：薄其玉， 周玉， 李筱荣， 张琰， 王飞， Bo Qiyu， Zhou Yu， Li Xiaorong， Zhang Yan， Wang Fei
作者单位：薄其玉,李筱荣,张琰,王飞,Bo Qiyu,Li Xiaorong,Zhang Yan,Wang Fei(300384,天津医科大学眼科医院天津医科大学眼科研究所 天津医科大学眼视光学院)， 周玉,Zhou Yu(644000,宜宾市第一人民医院眼科)刊名：
中华实验眼科杂志
英文刊名：Chinese Journal of Experimental Ophthalmology
年，卷(期)：2015,33(2)
引用本文格式：薄其玉.周玉.李筱荣.张琰.王飞.Bo Qiyu.Zhou Yu.Li Xiaorong.Zhang Yan.Wang Fei氧诱导视网膜病变小鼠模型中微小RNA表达分析的内参基因优选[期刊论文]-中华实验眼科杂志 2015(2)。

小鼠视网膜新生血管模型的建立及特征2008-09-28 作者：张敏作者单位：（200233）中国上海市，上海交通大学附属第六人民医院眼科【摘要】目的：建立可靠稳定的视网膜新生血管动物模型，为今后探究视网膜新生血管疾病的发生机制和治疗方法奠定模型基础。

方法：将24只新生C57BL/6J小鼠随机分为正常组和模型组，每组各12只。

将模型组小鼠于生后第7d置于750mL/L 氧浓度环境，生后第12d返回正常空气中；正常组小鼠始终置于正常空气环境喂养。

至小鼠生后第17d进行心脏荧光素灌注造影视网膜铺片以及眼球连续切片苏木精 伊红（H E）染色，观测视网膜新生血管生成情况。

结果：模型组小鼠心脏荧光素灌注造影结果显示视网膜中央区域呈无灌注缺血，另外视网膜血管有迂曲扩张、荧光渗漏等异常表现。

眼球连续切片发现模型组小鼠突出视网膜内界膜的血管内皮细胞核数为48.65±6.24个/片/眼，而正常组小鼠平均为0.38±0.21个/片/眼，两组比较差异有显著统计学意义（P<0.01）。

结论：氧诱导的视网膜缺血模型可成功诱导小鼠产生视网膜新生血管，可作为探究视网膜新生血管疾病发生机制和治疗方法的可靠动物模型。

关键词：视网膜新生血管；氧诱导；小鼠【关键词】视网膜新生血管氧诱导小鼠0引言视网膜新生血管是众多疾病如早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity, ROP）、糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）等发生的共同病理改变；其造成的渗出、出血和增生等一系列变化最终会导致视力丧失的严重后果。

新生血管形成是机体对慢性缺血作出的一种适应性代偿反应。

组织的缺血、缺氧以及血流对血管壁切应力的改变均可触发炎性细胞在血管壁周围聚集，引起血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的增殖、分化和迁移，导致血管出芽并最终形成新的血管网。

针对其缺血、缺氧的主要病理改变，我们选择建立氧诱导下的小鼠视网膜缺血（oxygen induced ischemic retinopathy，OIR）模型，并通过心脏荧光素灌注造影、视网膜铺片和眼球连续切片苏木精 伊红（hematoxylin/eosin，H E）染色分别检测视网膜新生血管生成情况从而观测该模型的成模情况，为今后探究视网膜新生血管疾病发生机制和治疗方法奠定可靠稳定的模型基础。