结核分枝杆菌IgG抗体TB检测试剂盒

人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T10pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）水平。

用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA），再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）浓度。

标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB）一、T-SPOT.TB产品介绍我国是世界上仅低于印度的第二大结核病国家。

受限于检测手段，中国的结核感染率较难准确统计，2009年流行病调查结果为总人口的44.5% （因采用PPD检测，假阳性较多）。

而年新发活动性结核患者超过107万人次，年死亡人数达13万。

结核病的早期快速诊断已经成为制约结核病控制的关键因素。

目前，常规结核感染实验室检测方法诊断检出率不到50％。

2011年7月20日，世界卫生组织（WHO）发出正式声明，要求禁止将血清学检测方法用于肺结核和肺外结核的诊断。

因此，开发特异、敏感、快速、简便的结核病感染的诊断方法已经成为全球共识。

结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB））是由英国Oxford Immunotec 公司研发生产的体外诊断产品，用于结核感染的筛查，结核病辅助诊断及疗效评价等。

它改变了以往的结核检测方法特异性低，敏感度差，耗时长的缺点。

作为当前全球最先进的结核感染诊断产品，该产品已经成为发达国家结核感染检测的首选方法，获得欧盟CE 认证、美国FDA认证。

美国CDC、美国胸科学会、英国及欧洲的结核病防治指导原则中，均已将本试剂盒方法列为结核感染诊断的推荐实验室诊断标准，并已经在欧洲（英国、德国、法国、意大利、瑞士、西班牙、爱尔兰、荷兰、丹麦、挪威、瑞典）、北美洲(加拿大、美国)、非洲（南非）、澳大利亚、亚洲（韩国、新加坡、日本、中国）等国家均已上市销售，并写入部分国家的诊疗指南中。

T-SPOT.TB用于结核感染的诊断与鉴别诊断具有独特优势：高灵敏度和特异性:特异性达到97.1％（美国FDA临床研究数据），敏感度达到95.6％（美国FDA临床研究数据），不受环境分枝杆菌感染和卡介苗（BCG）接种影响基本不受机体免疫抑制影响，适用于HIV感染和免疫抑制剂治疗人群简单的实验室血液检查，24小时快速报告结果结核感染T细胞检测试剂盒（T-SPOT.TB）应用的方法学为酶联免疫斑点技术（ELISPOT）。

结核杆菌(TB)核酸扩增检测试剂盒说明书(PCR-荧光探针法)【名称】通用名：结核杆菌(TB)核酸检测试剂盒说明书英文名：Mycobacterium Tuberculosis Fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction(PCR)Diagnostic kit汉语拼音：jie he fen zhi gan jun he suan kuo zeng jian ce shi ji he【目的】本试剂盒适用于检测疑似患者痰液、血液、及乳液或肺脏组织等样本中结核分支杆菌(TB)DNA，用于结核分支杆菌(TB)感染的辅助诊断及流行病学调查。

其检测结果仅供参考。

【原理】本试剂盒选取一对结核分支杆菌(TB)一段高保守区域特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法提取DNA，后者在耐热DNA聚合酶（Taq酶）作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对结核分支杆菌(TB)进行扩增，从而达到快速实时定量检测之目的。

【组成】名称数量规格核酸提取液B4管500μl/管Taq酶系1管80μl/管TB PCR MIX1管960μl/管TB-阳性质控品1管50μl/管(1×107Copies/ml)阴性质控品1管500μl/管【标本采集、保存和运输】1.适用标本：血液、痰液、乳液或肺脏组织等。

2.标本采集：血液：无菌注射器抽取待检者静脉血2-3ml，置于EDTA2Na抗凝管中，充分混匀，密闭送检。

痰液：无菌条件下取受检者深部痰液2-3ml，置入5ml离心管，密闭送检。

3.保存和运输：上述处理后的标本可保存于-20℃，保存期为6个月，-70℃可长期保存。

运送应采用0℃冰壶。

【适用仪器】主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM7300、LightCycler等毛细管的仪器，MJ Opticon系列或取得资格认证的定量PCR仪。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）结核分枝杆菌相关γ-干扰素（TB-IGRA）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被结核分枝杆菌相关γ-干扰素（TB-IGRA）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌相关γ-干扰素（TB-IGRA）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

结核杆菌IgG抗体检测试剂盒（酶免ELISA法）结核杆菌概述：结核分枝杆菌（M.tuberculosis）,简称结核杆菌,此菌主要引起肺结核病，肺结核是一种通过呼吸道传染、具有强烈传染性的慢性消耗性疾病。

肺结核的诊断方法主要以细菌学痰涂片显微镜检查，而免疫血清学对结核杆菌IgG抗体水平检测，可辅助诊断结核病，并为结核病监测提供有力的手段。

产品简介：结核杆菌IgG抗体检测试剂盒采用了间接ELISA法定性检测人血清/脑脊液/胸积水样本中的结核分枝杆菌IgG抗体水平，适用于结核病的辅助诊断及结合临床症状该病情发展IgG抗体水平的监测。

试剂盒组成：1、含纯化TB-IgG抗原包被的酶标反应板2、样品稀释液1瓶3、TB-IgG酶结合物试剂1瓶4、浓缩洗涤液(25×)1瓶5、TB-IgG阴性对照液和TB-IgG阳性对照液各1瓶6、显色剂A和显色剂B各1瓶7、终止液1瓶8、自封袋2个、封板膜2片、说明书1份产品相关信息：灵敏度：阳性血清最大稀释比例≤1:800。

精密度：试验内精密度CV＜10%，试验间精密度CV＜15%。

适用仪器：450nm波长测读的酶标仪包装规格：48/96T（盒）储存有效期：2-8℃保存，有效期12个月。

生产企业：广州市标健生物科技有限公司结果的计算与判断：壹：记录质控品及各样本的吸光度值，取复孔的平均值进行结果判定。

贰：在白色的背景下观察各孔的显色，有明显黄色且显色深于临界对照品者为阳性。

叁：在450nm波长的酶标仪测读，结果的判断以临界对照品为标准:1、阳性:[样本的吸光值]/[临界对照品的吸光值]≥1.22、阴性:[样本的吸光值]/[临界对照品的吸光值]≤0.803、灰区:0.80<[样本的吸光值]/[临界对照品的吸光值]＜1.2注：对于灰区样本，应对同一血清进行重复试验，重测以确定其阴阳性，如仍落在灰区范围内则报告阳性或是对同一病人2-4周后再留取血清标本进行检测。

质量控制：每块酶标板均采用阳性，阴性和临界对照品进行质量控制，以确保测定结果的可靠性。

结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】通用名称：康珠生物结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】1人份/袋，10人份/盒，20人份/盒，50人份/盒，100人份/盒。

【预期用途】本产品用于体外定性检测人血清、血浆或抗凝指尖末梢血中的结核分枝杆菌IgG抗体。

在临床诊断中作为结核分枝杆菌感染的辅助诊断试剂。

结核分枝杆菌（MTB）是结核病的致病菌，属分枝杆菌属，是一种特殊的圆杆状细菌，细胞壁富含脂类，抗酸染色，又叫抗酸杆菌。

MTB的宿主是人，主要通过结核病人含有该细菌的气溶胶（aerosol）进行传播。

人体除毛发外几乎全身所有组织都可以感染结核病，如肠结核、骨结核、淋巴结核等。

由于结核病主要经呼吸道进行传播，因此肺结核的感染率比其他器官高，占人体结核病的90%，其余组织感染的结核病统称为肺外结核。

常用的细菌学检查方法包括：（1）痰涂片镜检法。

（2）痰结核菌常规培养法。

（3）分枝杆菌菌种鉴定。

（4）痰结核菌快速培养系统等。

【检验原理】本试剂盒是采用胶体金法免疫层析技术原理，在硝酸纤维素膜上的T线包被重组TB抗原，在C线包被羊抗鼠IgG抗体，在金标垫上包被胶体金标记的鼠抗人IgG单抗。

用于定性检测血清（浆）样本中的结核分枝杆菌IgG抗体。

检测阳性样本时，样本中的结核分枝杆菌IgG抗体可与胶体金标记的鼠抗人IgG单抗结合，形成免疫复合物，由于层析作用复合物及样本在硝酸纤维素膜内部向前流动。

当复合物经过T线时与包被的重组TB抗原结合，形成“胶体金标记鼠抗人IgG单抗--TB--IgG--重组抗原”而凝聚显色。

若样本中不含结核分枝杆菌IgG抗体，致使不能形成免疫复合物，（T）线不显色。

无论结核分枝杆菌IgG抗体是否存在于标本中，胶体金标记的鼠抗人IgG扩散到质控线（C）区域被羊抗鼠抗体捕获，在质控区（C）内部都会出现一条红色条带。

质控区（C）内所显示的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

结核杆菌TBPCR荧光扩增检测说明书【正文】结核分枝杆菌（TB）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒说明书 Operation Introduction for Mycobacterium tuberculosis(TB) PCR Fluorescence Diagnostic Kit 前言本试剂盒采用一对PCR引物和一个荧光双标记的探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，从而将PCR技术和荧光检测技术结合起来，实现了对TB 核酸的自动化检测。

检测灵敏度为10个TB菌/毫升。

试剂盒在PCR循环结束后无需开盖。

试剂盒中采用了dUTP-UNG酶防污染系统。

本品可用于可疑结核病患者经处理的痰液标本结核分枝杆菌核酸的定性检测，可用于结核病的辅助诊断。

试剂盒组成※ 贮存条件及有效期本试剂盒贮存于-20℃的条件下有效期为一年（请于有效期内使用）。

自备试剂 4％ NaOH、灭菌生理盐水样本采集、存放及运输1．采集：以清晨第一口痰为宜。

先用清水漱口，嘱患者用力咳出深部的痰于无菌样本保存管，密封，即可送检。

2．存放：待测样本在2-8℃保存不应超过24小时；-20℃保存不超过三个月；-70℃以下长期保存。

应避免反复冻融。

3．运输：采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。

适用仪器 1．BIO-RAD iCycler荧光PCR检测仪、PE Gene Amp 7700荧光PCR检测仪 2．Roche LightCycler荧光PCR检测仪 3．其它荧光PCR检测仪，如PE-5700、PE-7000、基因公司Rotor-Gene、MJ公司Opticon Monitor、大和Line-Gene荧光定量PCR检测仪等使用方法1．样本处理（样本处理区）1.1. 首先对痰液样本进行目测，若样本中唾液占绝大部分，则需重新采集样本。

1.2. 目测合格后，在样本中加入2～3倍体积4%的NaOH溶液，置于摇床上，在150rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr，使其充分液化（无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化完全；若液化不完全，可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化完全）。

人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T 10pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）水平。

用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA），再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

结核分枝杆菌（TB）核酸检测试剂盒(PCR-荧光法) 说明书【产品名称】通 用 名 称：结核分枝杆菌（TB）核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)【包装规格】32人份/盒【预期用途】本试剂盒用于定性检测患者痰液中结核分枝杆菌核酸,可作为临床结核分枝杆菌检测的辅助手段。

适应症：由结核分枝杆菌感染引起的肺结核、肠结核、结核性腹膜炎等疾病。

【检验原理】本试剂盒选用结核分枝杆菌保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Tap酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，既能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对结核分枝杆菌核酸的自动化检测。

【主要组成成份】组成 组成成分 规格核酸提取液 含0.5％Triton-100、5％Chelex-100 1.8mL×1TB反应混合液 含Tris-HCl、KCl、MgCl2、dNTP、引物、荧光探针 1.2mL×1Taq酶含TapDNA酶及抗体 14μL×1阳性对照品 主要成分为含TB基因组DNA（重组克隆）人工构建的质粒100μL×1阴性对照品 主要成分为TE Buffer 100μL×1注：不同批号试剂盒中各组份不可以互换。

【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月，未使用完的试剂继续冷冻保存不影响其稳定性，但试剂反复冻融不得超过三次。

【适用仪器】具有FAM荧光通道的ABI 7300 、ABI 7500 荧光PCR扩增仪。

【样本要求】1.标本：人痰液。

2. 采集：将患者用力咳出肺深部的痰液采集于无菌样本保存管，密闭送检。

采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。

3. 存放：2-8℃保存，不超过24小时；-20℃下保存，不超过3个月；-70℃下长期保存，但应避免反复冻融。

结核杆菌IgG抗体检测试剂盒实验操作流程
1、标本的采集：采集指尖血；
2、洗涤液的配制：
在2-8℃贮存的洗涤液（浓缩）可能在瓶底形成结晶，用500ml容器将整瓶浓缩洗涤液充分溶解于480ml蒸馏水或去离子水中。

3、检验方法：
1、指尖血采集后，使用生理盐水进行1:10稀释，配成稀释指尖血；
2、取出冷藏试剂盒，平衡至室温；
3、每次实验预设空白对照1孔，阴性对照1孔，阳性对照1孔，各加
100ul阳性、阴性对照。

在样品孔中分别加入100ul样品稀释液，
每孔加稀释指尖血上清液25ul。

混匀后置37℃孵育30分钟
4、取出反应板，甩尽板中液体，用200—300μl洗涤液洗5次，每次均需
拍干；
5、每孔加酶结合物两滴或100μl，空白孔不加，置37℃30分钟；
6、取出反应板，甩尽板中液体，洗5次，每次拍干；
7、每孔加显色液A和显色液B各一滴或各50μl，充分混匀，置37℃10分
钟。

8、每孔加终止液1滴（50μl）轻拍混匀，用酶标仪（450nm波长）以空白
对照调零，测定各孔OD.值。

【正文】结核分枝杆菌（TB）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒说明书Operation Introduction for Mycobacteriumtuberculosis(TB) PCR Fluorescence Diagnostic Kit前言本试剂盒采用一对PCR引物和一个荧光双标记的探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，从而将PCR技术和荧光检测技术结合起来，实现了对TB核酸的自动化检测。

检测灵敏度为10个TB菌/毫升。

试剂盒在PCR循环结束后无需开盖。

试剂盒中采用了dUTP-UNG酶防污染系统。

本品可用于可疑结核病患者经处理的痰液标本结核分枝杆菌核酸的定性检测，可用于结核病的辅助诊断。

试剂盒组成※贮存条件及有效期本试剂盒贮存于-20℃的条件下有效期为一年（请于有效期内使用）。

自备试剂4％NaOH、灭菌生理盐水样本采集、存放及运输1．采集：以清晨第一口痰为宜。

先用清水漱口，嘱患者用力咳出深部的痰于无菌样本保存管，密封，即可送检。

2．存放：待测样本在2-8℃保存不应超过24小时；-20℃保存不超过三个月；-70℃以下长期保存。

应避免反复冻融。

3．运输：采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。

适用仪器1．BIO-RAD iCycler荧光PCR检测仪、PE Gene Amp 7700荧光PCR检测仪2．Roche LightCycler 荧光PCR检测仪3．其它荧光PCR检测仪，如PE-5700、PE-7000、基因公司Rotor-Gene、MJ公司Opticon Monitor、大和Line-Gene荧光定量PCR检测仪等使用方法1．样本处理（样本处理区）1.1. 首先对痰液样本进行目测，若样本中唾液占绝大部分，则需重新采集样本。

1.2. 目测合格后，在样本中加入2～3倍体积4%的NaOH溶液，置于摇床上，在150rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr，使其充分液化（无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化完全；若液化不完全，可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化完全）。