不规则抗体筛选

BioVue不规则抗体筛查操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：不规则抗体筛查2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。

具有已知抗原的人红细胞将与血浆中相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。

将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。

三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue －poly Cassettes3．包装规格：400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4．试剂成分：抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗－lgG(兔)抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD＆C1＃蓝色染料FD＆C5＃黄色染料5．试剂的储存与效期：储存方法：2～25℃环境保存。

请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。

并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。

效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。

含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。

标本采集后应尽快进行检测。

如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。

六、试剂准备：抗人球蛋白(IgG,C3b/C3d)检测卡为即用型产品。

每一微柱中含有仅适用于一个测试的试剂。

不规则抗体筛查流程步骤下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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不规则抗体筛选操作规程一．试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白（IgG）单特异检测试剂卡。

2.上海血液生物医药有限公司3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二．标本收集与处理1．血清或血浆都可以使用。

2．如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。

三．操作步骤1．取出试剂卡，平衡至室温；使用前离心确保无气泡和断层。

2．观察卡的反应液面高度，确保试剂液面高于凝胶平面3mm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请于1小时内进行下面操作。

3. 分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。

注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。

4．再分别向反应柱内加入10ul 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。

5．观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹几下微柱充分，使反应物混匀。

6．在孵育仓中37℃孵育15分钟。

7．用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。

8. 从微柱正反两面判读并记录结果。

四．结果判读阳性结果（＋）：红细胞凝集为阳性结果。

阴性结果（－）：无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。

溶血会导致玻璃珠上方呈粉红色或红色。

如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56℃水浴30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。

4 + 反应：红细胞在柱中玻璃珠上面凝集，并形成一个环形带。

3 + 反应：发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。

2 + 反应：发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。

1 + 反应：大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。

阴性反应：所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。

五.注意事项1. 试剂卡应保存在2～25℃，请勿冷冻保存；请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不要放在离热源很近或阳光直射的地方。

不规则抗体筛选一、试验原理：利用不规则抗体筛选红细胞试剂对血清进行血型不规则抗体检测。

在任何介质中，只要任何单组或多组筛选红细胞产生凝集或溶血反应，则试验为阳性，表明血清中存在与筛选细胞中抗原相对应的抗体。

若抗筛试验为阳性，建议用谱细胞来检测抗体特异性。

一、注意事项：1. 建议在使用血型卡前重新离心后再应用。

2. 若凝胶卡封口开裂、孔中凝胶干涸或有气泡时，不可使用。

3. 撕开凝胶卡的封口膜时，不能用力过猛，以免造成凝胶微孔间的交叉污染。

4. 红细胞悬液的浓度为0.5~0.8%，浓度过高或过低会影响检测结果。

5. 血浆标本必须充分离心去除纤维蛋白，否则会在微柱凝胶中阻止红细胞沉淀，呈现假阳性反应。

6. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，一定要认真分析并向上级主管技术人员报告并讨论。

7. 某些药物、疾病可导致正定型结果弱阳性反应或正反定型不相符，应进一步检查以明确原因。

8. 溶血性疾病、巨球蛋白血症、输注大分子血浆扩容剂如右旋糖酐等可能会影响实验结果。

9. 人源血液样本存在潜在的传染性，凝胶卡使用后按医疗生物垃圾废弃物处理。

二、设备及材料试剂：1、LB-3000医用低速离心机2、LB-C02-1免疫微柱孵育器3、加样枪：10μl, 25μl, 50μl 和 1000μl4、广谱抗人球蛋白卡（抗-IgG+C3d）5、不规则抗体筛选红细胞试剂三、操作流程：1、取广谱抗人球蛋白卡（抗-IgG+C3d）一张，按规定检查符合要求后，进行标记（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，受检者姓名或编码）。

2、红细胞悬液配制：不规则抗体筛选红细胞悬液：取不规则抗体筛选红细胞试剂中的I号、II号、III号红细胞，稀释4倍（1份红细胞和3份生理盐水）。

3、加样：①第1,2,3及第6孔加入受检者红细胞悬液50μl。

②第4孔加入A1型反定型试剂红细胞悬液50μl③第5孔加入B型反定型试剂红细胞悬液50μl。

不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。

2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。

3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。

这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。

当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。

4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。

每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。

5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。

每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。

5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。

5.4.致敏红细胞（质控细胞）。

5.5.0.9%生理盐水。

5.6.Coombs微柱凝胶卡。

6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。

7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。

7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。

7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。

如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。

不规则抗体筛选在临床输血中的应用效果
不规则抗体是指在特定体系中出现的特异性抗体，因此与临床输血相关的不规则抗体通常是指与红细胞表面抗原相关的抗体。

不规则抗体筛选是指通过试管反应方法检测患者血清中的不规则抗体种类与滴定价，以确定临床输血可能出现的危险性，从而进行安全有效的输血治疗。

不规则抗体筛选的重要性在于其促进了安全有效的输血，特别是在有意外意义的输血反应发生前，防止了与受体不匹配的输血。

不规则抗体筛选可帮助鉴定输血者和受体之间的兼容性，包括ABO血型、Rh因子和其他不规则抗体。

在不规则抗体筛选的过程中，人类白细胞抗原（HLA）的检测也变得越来越重要。

HLA 分子在免疫系统中起着重要的作用，因此HLA抗体的产生会增加半衰期，从而增加输血反应发生的风险。

不规则抗体筛选同时也促进了合理利用临床资源。

由于不规则抗体筛选可以在给予输血前即检测到患者体内存在的抗体种类和滴定价，因此可以针对特异性问题有效开展输血治疗。

这有助于优化患者的治疗方案，提高输血的安全性和有效性。

总的来说，不规则抗体筛选在临床输血治疗中具有显著的应用效果。

该方法可以检测不规则抗体的种类和滴定价，并可以鉴定输血者和受体之间的兼容性，有效防止输血反应与不良事件发生并优化治疗。

此外，对HLA的分子检测让不规则抗体筛选更加完善，从而提高了输血治疗的精准度和安全性。

不规则抗体筛选操作规程一．试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白（IgG）单特异检测试剂卡。

2.上海血液生物医药有限公司3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二．标本收集与处理1．血清或血浆都可以使用。

2．如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。

三．操作步骤1．取出试剂卡，平衡至室温；使用前离心确保无气泡和断层。

2．观察卡的反应液面高度，确保试剂液面高于凝胶平面3mm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请于1小时内进行下面操作。

3. 分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。

注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。

4．再分别向反应柱内加入10ul 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。

5．观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹几下微柱充分，使反应物混匀。

6．在孵育仓中37℃孵育15分钟。

7．用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。

8. 从微柱正反两面判读并记录结果。

四．结果判读阳性结果（＋）：红细胞凝集为阳性结果。

阴性结果（－）：无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。

溶血会导致玻璃珠上方呈粉红色或红色。

如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56℃水浴30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。

4 + 反应：红细胞在柱中玻璃珠上面凝集，并形成一个环形带。

3 + 反应：发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。

2 + 反应：发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。

1 + 反应：大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。

阴性反应：所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。

五.注意事项1. 试剂卡应保存在2～25℃，请勿冷冻保存；请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不要放在离热源很近或阳光直射的地方。

不规则抗体筛查操作方法抗体筛查是一种常用的实验技术，用于检测人体中是否存在某种特定的抗体。

不规则抗体指的是那些不符合正常免疫反应模式的抗体，其产生可能与某些疾病或异常情况相关。

本文将介绍一种不规则抗体筛查的操作方法，包括前处理、抗原标记、试剂制备、试管操作等环节。

1. 前处理：首先，需要准备样本，通常是血液或血浆样本。

将样本离心分离血细胞和血浆，取出血浆备用。

如果需要检测特定器官或组织的抗原，还需进行相应的前处理，如组织细胞抗原的制备。

2. 抗原标记：将待检测的抗原标记。

标记可采用放射性同位素、酶标记、荧光标记、金标记等方法。

标记时需要注意选择合适的标记物，以确保标记效果稳定和信号强度足够。

3. 试剂制备：制备抗体和其他试剂。

抗体可通过动物免疫、杂交瘤细胞技术等方法获得，然后纯化和浓缩。

其他试剂包括缓冲液、辅助试剂等。

制备试剂时需要严格控制操作条件，避免交叉污染和分装误差。

4. 试管操作：a. 将样本和标记的抗原加入试管中，混匀，使抗原与抗体充分结合。

b. 对于各类试管进行不同的操作，如剥夺试验、沉淀试验、凝集试验、间接荧光试验等。

具体操作时需要根据试管类型选择合适的剂量和条件。

c. 通过观察试管内的反应情况，判断是否存在不规则抗体。

不规则抗体的存在可通过沉淀、荧光、凝集等形式观察到，如试管内有沉淀物形成、荧光强度异常高或低、凝集抗体间距不均匀等。

5. 结果分析：根据试管内的反应结果，可判断是否存在不规则抗体。

如果需要进一步确认，还可进行其他检测方法，如免疫组织化学、免疫电镜等。

同时，还需要将结果与临床资料结合，分析不规则抗体是否与某种疾病或异常情况相关。

总结：不规则抗体筛查操作方法主要包括前处理、抗原标记、试剂制备和试管操作等环节。

通过对样本和标记抗原进行混合、加热、冷却等处理，观察试管内的反应情况，可以判断是否存在不规则抗体。

这项技术在疾病诊断和研究中具有重要意义，能够帮助医生确定病情和制定合适的治疗方案。

不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。

二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。

三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。

四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。

2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。

3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。

5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。

五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。

六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。

2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。

3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。

4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。

5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。

不规则抗体筛选在临床输血中的应用效果随着医学技术的不断发展，临床输血已经成为救治危重病患和手术患者的常见治疗手段之一。

但是在输血过程中可能会出现不规则抗体导致输血反应，给患者带来不良影响。

对不规则抗体的筛选和识别，对于确保输血的安全性和有效性至关重要。

本文将着重探讨不规则抗体筛选在临床输血中的应用效果。

我们先来了解一下什么是不规则抗体。

不规则抗体是指存在于受血者血液中的、通过特异抗原诱导产生的抗体，它可以识别某些特定的抗原。

当这些抗体与相应的抗原结合时，会引起输血反应，严重时会危及受血者的生命安全。

及早发现并排除这些不规则抗体对于临床输血的安全性非常重要。

不规则抗体筛选是通过实验室检验的方法来鉴定受血者血浆中的不规则抗体类型和性质。

传统的不规则抗体筛选方法主要是采用直接抗人球蛋白试验（DAT）、抗人球蛋白间接试验（IAT）等技术，通过检测红细胞表面的抗原种类和数量来确定血液类型和不规则抗体情况。

这些方法的操作步骤繁琐，需要较长的操作时间，且容易出现误差，限制了其在临床上的应用效果。

为了克服这些问题，近年来不规则抗体筛选技术得到了较大的改进和发展。

目前，流式细胞术和分子生物学技术已经被广泛应用于不规则抗体筛选中。

流式细胞术通过检测受血者血浆中不规则抗体与红细胞结合的情况，能够准确快速地识别出不规则抗体的类型和特异性。

分子生物学技术主要是利用多聚酶链反应（PCR）和序列分析等方法，对受血者的基因组进行分析，以确定其携带的不规则抗体基因类型和表达情况。

这些新技术的应用，不仅大大提高了不规则抗体筛选的准确性和灵敏度，而且能够大幅缩短筛检时间，从而更好地满足了临床输血的紧急需求。

与传统的不规则抗体筛选方法相比，新技术在临床输血中的应用效果明显更优。

新技术的应用能够帮助临床医生更快速、更准确地确定受血者的血液类型和不规则抗体情况，为输血治疗提供了更为可靠的依据。

新技术能够减少不必要的输血反应和并发症的发生，提高了输血的安全性和成功性。

2024年浅谈不规则抗体的筛查1. 不规则抗体定义不规则抗体（Irregular Antibodies）是指在ABO血型系统之外的抗体，也称为意外抗体或非ABO抗体。

这些抗体通常是由输血、妊娠、疾病或免疫接种等过程中产生的免疫反应所致。

不规则抗体可以是IgG或IgM类型，它们能够与红细胞表面抗原发生反应，导致红细胞凝集或溶血等不良反应。

2. 筛查意义进行不规则抗体筛查具有重要意义。

首先，不规则抗体是输血反应的主要原因之一，包括输血后溶血性反应、发热反应和过敏反应等。

通过筛查不规则抗体，可以及时发现并避免这些输血反应的发生，保障输血的安全性和有效性。

其次，不规则抗体筛查对于孕妇和新生儿也具有重要意义。

孕妇在妊娠过程中会产生不规则抗体，这些抗体可能通过胎盘进入胎儿体内，导致新生儿溶血病。

通过筛查不规则抗体，可以及时发现并采取相应的干预措施，避免新生儿溶血病的发生。

此外，不规则抗体筛查还可以为临床诊断和治疗提供重要依据，帮助医生了解患者的免疫状态和疾病情况。

3. 筛查方法不规则抗体筛查主要采用血清学方法，包括盐水法、凝聚胺法、抗球蛋白法等。

这些方法通过检测血清中的抗体与红细胞表面的抗原反应，来判断是否存在不规则抗体。

其中，抗球蛋白法是目前最常用的不规则抗体筛查方法，具有较高的灵敏度和特异性。

除了血清学方法外，还有一些新型技术如流式细胞术、基因测序等也逐渐应用于不规则抗体筛查中。

4. 筛查时机不规则抗体筛查的时机通常取决于具体的临床情况。

对于输血患者，应在输血前进行不规则抗体筛查，以确保输血的安全性和有效性。

对于孕妇，应在妊娠早期和晚期分别进行不规则抗体筛查，以监测不规则抗体的产生和变化情况。

对于需要接受器官移植、免疫治疗等特殊情况的患者，也应在相应的时机进行不规则抗体筛查。

5. 结果解读不规则抗体筛查的结果通常分为阳性和阴性。

阳性结果表示患者血清中存在不规则抗体，可能存在输血反应或新生儿溶血病的风险。

不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。

二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。

三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。

四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。

2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。

3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。

5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。

五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。

六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。

2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。

3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。

4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。

5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。

不规则抗体筛选1原理用已知抗原表型的试剂红细胞组，通过直接凝集试验和间接抗球蛋白试验，筛选标本中可能存在的血型同种免疫性抗体。

避免含有临床意义的血型同种抗体随血液、血液成分制品一同输入。

2试剂与材料用于筛选的试剂红细胞必须来自至少两名无关O型供者，要求一种细胞为R1R1，另一种为R2R2表型，且表达下列抗原：M，N，S，s，Mur，Di a，k，Fy a，Fy b，Jk a，Jk b和 Le a。

并尽可能多的包含Duffy, Kidd血型系统中主要抗原的纯合子以及低频率抗原。

不可通过混合来自不同供者的细胞获得需要的抗原表达范围。

3方法血型血清学盐水悬浮细胞凝集试验、间接抗球蛋白试验。

3.1盐水悬浮细胞凝集试验:在试管或微量板中将血浆(血清)与筛选细胞1:1混合。

室温立即离心和/或37℃孵育30分钟后离心判读结果。

3.2间接抗球蛋白试验:在试管或微量板中将血浆(血清)与筛选细胞1:1混合, 37℃孵育30分钟后，弃去上清，用生理盐水洗涤三次红细胞。

加抗人球蛋白试剂，离心判读结果。

3.3必须对筛选检测出的抗体进行鉴定，评估其临床意义。

不进行抗体鉴定的实验室需将抗体筛选阳性标本送至具有资质的参比实验室进行最后鉴定或确证。

4注意事项4.1有些抗体(如-Le a,-Jk a)在盐水悬浮细胞凝集试验中可溶解抗原不配合的红细胞。

4.2在进行间接抗球蛋白试验时，必须有IgG致敏的红细胞作为阳性对照。

同时需定期使用含临床意义的弱抗体附加对照试剂 (如抗Fy a或抗-Jk a) 以确保试验步骤的敏感性和试剂红细胞抗原表达的完整性。

4.3其它方法如果已经验证和证明其适用性，可作为间接抗球蛋白试验的补充 (而非替代)，如酶处理技术或聚凝胺方法。

但对某些临床重要性抗体，间接抗球蛋白试验优先于其它可选择技术。

4.4注意血清与红细胞的比率，特别是使用Liss和PEG等促凝剂时，适当增加血清比例，防止弱抗体的漏检。

4.5抗体筛选应能检出浓度不高于0.5 IU/mL的抗-D。