人白细胞介素10IL

人白细胞介素-10（IL-10）酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。

本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人白细胞介素-10（IL-10），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。

用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10（IL-10）的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人白细胞介素-10（IL-10）的水平。

向预先包被了人白细胞介素-10（IL-10）单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10（IL-10），温育；洗涤后，加入HRP标记过的白细胞介素-10（IL-10）抗体。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10（IL-10）的浓度呈正相关。

试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。

2．标准规格酶标仪。

3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差3．建议所有标准品、样本都做双份检测。

如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少注入孔内，浸泡1-2分钟。

根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人白细胞介素10(IL-10)重组蛋白一、销售信息产品名称产品编号产品规格人白细胞介素10(IL-10)重组蛋白P01P00545ug 10ug 50ug 100ug1mg二、产品描述别名CSIF;TGIF;GVHDS;IL-10;IL10A 蛋白及NCBI编号P22301、NM_000572.3宿主 E.coli表达区域1-178aa蛋白长度全长蛋白（含标签）蛋白序列MHSSALLCCLVLLTGVRASPGQGTQSENSCTHFPGNLPNMLRDL RDAFSRVKTFFQMKDQLDNLLLKESLLEDFKGYLGCQALSEMIQFYLEEVMPQAENQD PDIKAHVNSLGENLKTLRLRLRRCHRFLPCENKSKAVEQVKNAFNKLQEKGIYKAMSE FDIFINYIEAYMTMKIRN分子量约20.5kDa融合标签6×His-SUMO（N端）纯度≥95%蛋白电泳物理性状液态或冻干粉复溶储存液：推荐用PBS或者根据实验需要选定合适溶剂配成1mg/mL储存液，分装保存于-20℃。

工作液：客户可根据实验要求稀释，现配现用。

工作液配置后可以4℃放置2-3周。

稳定性在-20℃/-80℃条件下，液态产品保存6个月，冻干产品保存12个月。

应用抗体制备，免疫实验（ELISA，WB），亚细胞定位和互作蛋白鉴定等。

发货周期1-2周，现货2-3天。

实验效果图Bis-Tris(MOPS)SDS-PAGE蛋白电泳图三、运输和储存2-8℃运输。

从收到之日起，在-20℃至-80℃的无菌条件下保存。

四、注意事项本产品仅作科研用途。

请穿实验服并戴一次性手套操作。

五、背景信息IL-10是由B细胞、Th1、Th2等适应性免疫细胞产生的多价生物因子。

IL-10激活巨噬细胞/单核细胞的广泛功能，包括单核细胞因子的合成，一氧化氮（NO）的产生，以及主要组织相容性复合体类Ⅱ(MHCⅡ)共刺激分子的表达，如IL-12和CD80/CD86。

白细胞介素-10与心血管疾病关系研究进展高楠;田祥;刘露;姚燕妮;常文龙;赵颖;李鹏;王惠琴【摘要】白细胞介素-10(IL-10)是一种多功能的细胞因子,调节细胞的生长与分化,参与炎性反应和免疫反应,是目前公认的炎症及免疫抑制因子,近年研究发现其在延缓动脉粥样硬化(AS)、心肌缺血再灌注损伤、介入术后再狭窄的发展过程中起重要作用,本文就此作一综述.【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2017(046)011【总页数】2页(P1623-1624)【关键词】白细胞介素10;冠状动脉疾病;心肌缺血;再灌注损伤【作者】高楠;田祥;刘露;姚燕妮;常文龙;赵颖;李鹏;王惠琴【作者单位】河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000;河北省保定市第一中心医院保定071000【正文语种】中文【中图分类】R541白细胞介素(Interleukin，IL)是一组小分子活性多肽，通过抗炎与促炎调控着机体免疫反应的动态平衡及正常进行[1]。

其中IL-10是一种重要的抗炎细胞因子，主要由Th2淋巴细胞和调节性T细胞(Treg)等分泌。

IL-10不仅能抑制单核细胞活性，下调催化因子和炎症因子对平滑肌细胞增殖的刺激作用[2]，而且可直接抑制黏附因子的表达[3]。

1 IL-10与AS 早在1986年，美国华盛顿大学医学院ROSS教授提出动脉粥样硬化是一种炎症性疾病，是对损伤的一种过度防御反应。

动脉粥样硬化由动脉血管壁损伤及血管内皮功能障碍引起，导致促炎和致炎因子释放，促进单核巨噬细胞迁移至血管内膜下，形成泡沫细胞；活化的巨噬细胞引发炎症瀑布反应，加重炎症，释放大量细胞因子、氧自由基等，进一步将低密度脂蛋白(Low density lipoprotein，LDL)分子氧化成氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)，形成粥样斑块。

细胞因子检测【关键词】细胞因子检测一、白细胞介素(IL)检测1.白细胞介素1β(IL-1β)检测IL-1又称淋巴细胞激活因子，是急性期免疫反映的要紧调剂因子，对T细胞激活，诱导IL-2产生起着大体的作用；而这些作用大多数是IL-1β直接产生的。

[参考值]～μg/L(ELISA)[临床意义](1)组织损伤或感染，如Crohn’s病、败血症；某些自身免疫性炎症反映(如类风湿关节炎)、结核、风湿等血中IL-1β升高。

(2)神经系统炎症或损伤时脑脊液中IL-1β升高。

(3)胸膜腹膜炎渗出液中IL-1β升高。

(4)在再生障碍性贫血患者，单核细胞产生IL-1能明显下降。

(5)老年人或癌症患者外同血中单核细胞产生IL-1能力也低于正常人，因此在感染后不易显现发烧等临床病症。

[注意事项](1)不抗凝静脉血检测，也可是脑脊液或渗出液；(2)搜集标本必需用不含致热原、内毒素的清洁试管；(3)标本不该有溶血、脂血、黄疸。

2.白细胞介素2(IL-2)检测白细胞介素2(IL-2)是白细胞介素中的一种。

要紧由活化T细胞产生，是具有多向性作用的细胞因子(要紧增进淋巴细胞生长、增殖、分化)。

它对机体的免疫应答和抗病毒感染有重要作用。

[参考值]～μg/L(ELISA)[临床意义](1)IL-2要紧刺激T细胞生长；诱导细胞毒作用；对B细胞的生长及分化有必然的增进作用；可明显增强对单核.巨噬细胞的抗原递呈能力、杀菌力、细胞毒性。

IL-2随年龄增加有降低趋势。

(2)增高见于自身免疫性疾病(如SLE、类风湿关节炎等)、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤、心血管病、肝病、肿瘤、排斥反映等。

(3)降低见于免疫缺点病(如艾滋病、联合免疫缺点病等)、恶性肿瘤、l型糖尿病、某些病毒感染、同意免疫抑制医治者和老年人等。

[注意事项](1)不抗凝静脉血标本，以血清进行检测，也可检测尿液或人淋巴细胞培育上清液中的白细胞介素2水平。

(2)搜集标本必需用不含致热原、内毒素的清洁试管。

GMP级重组人白介素10（冻干粉）Recombinant Human IL-10作用机理：白细胞介素-10(IL-10)是多种哺乳动物细胞类型产生的免疫抑制细胞因子，包括巨噬细胞、单核细胞、T细胞、B 细胞和角质形成细胞。

IL-10 抑制 IL-1 和 TNF-α等促炎细胞因子的表达.和 IL-4 一样，IL-10 增强了体液免疫反应，减弱了细胞介导的免疫反应.人白细胞介素-10 对小鼠细胞具有活性，而小鼠白细胞介素-10 对人细胞无活性。

规格参数：货号：TL-639 规格：50ug产品信息：表达宿主：人HEK293细胞同源名称：B-TCGF, CSIF, TGIF ,IL-10,IL10A ,GVHDS,MGC126450,MGC126451,RP11-262N9.1,Interleukin-10 蛋白序列：DNA 序列编码人 IL-10（NP_000563.1）表达带有 His 标签在 C 末端分子量：IL-10 包含 166 个氨基酸，预测分子量为 19.5kd纯度：≥95%采用 SDS-PAGE 凝胶和高效液相色谱分析内毒素：≤0.01EU/ug（凝胶法）生物活性：确定通过剂量依赖性作用，与人白细胞介素 4(IL-4)共同刺激 MC/9 细胞，ED 50为≤2.0ng/mL，对应的特异性活性为≥5×105 IU/mg纯化方式：层析纯化性状：白色疏松体保存温度：2-8℃有效期：24 个月生产厂家：同立海源生物使用说明：稳定性和储存：冻干的样本的可以在4℃保存 24 个月，溶解后的液体可以于-20℃保存 6-12 个月，并且避免反复冻融相关产品：Human IL-2、Human IL-15、Human IL-12、Human IL-6、Human IL-18、Human IL-21、Human IFN-γ、Human GM-CSF、Human EGF、NK细胞培养试剂盒。

第59卷 第2期2023年04月青岛大学学报(医学版)J O U R N A LO FQ I N G D A O U N I V E R S I T Y (M E D I C A LS C I E N C E S)V o l .59,N o .2A pr i l 2023[收稿日期]2021-03-25; [修订日期]2023-03-31[基金项目]山东省新旧动能转换重大工程重大课题攻关项目(鲁发改重大办[2018]1268号);山东省重大科技创新工程项目(2018C X G C 1404)[第一作者]王贞丽(1971-),女,硕士,副主任药师㊂E -m a i l :q d -w z h e n l i @163.c o m ㊂[通信作者]丁会芹(1987-),女,博士,高级工程师㊂E -m a i l:d i n g h u i q i n @k l t ph a r m.c n ㊂白细胞介素-10的免疫双重作用及抗炎应用进展王贞丽1,秦欢2,王建刚3,丁会芹2,3(1 中国人民解放军海军青岛特勤疗养中心质量管理科,山东青岛 266071;2 青岛大学基础医学院;3 康立泰生物医药(青岛)有限公司)[摘要] 白细胞介素-10(I L -10)是抗炎细胞因子,近年来,大量研究显示I L -10兼具免疫刺激和免疫抑制的双重作用㊂本文分析了I L -10发挥双重免疫调节作用的机制与主要抗炎作用通路,综述了I L -10在炎性疾病中的治疗潜力及I L -10的药物开发方向㊂[关键词] 白细胞介素10;免疫调节;炎症;基因治疗[中图分类号] R 979.5 [文献标志码] A [文章编号] 2096-5532(2023)02-0313-04d o i :10.11712/jm s .2096-5532.2023.59.061[开放科学(资源服务)标识码(O S I D )][网络出版] h t t ps ://k n s .c n k i .n e t /k c m s 2/d e t a i l /37.1517.R.20230522.1154.011.h t m l ;2023-05-23 17:09:07A D V A N C E S I NT H ED U A LI MM U N O R E G U L A T O R YR O L EO FI N T E R L E U K I N -10A N DI T SA P P L I C A T I O NI N A N T I -I N F L A M -M A T I O N WA N GZ h e n l i ,Q I N H u a n ,WA N GJ i a n g a n g ,D I N G H u i qi n (Q u a l i t y M a n a g e m e n tS e c t i o no fQ i n g d a oS p e c i a l S e r v i c eS a n a t o r i u m C e n t e r o f P L A N a v y ,Q i n gd a o 266071,C h i n a )[A B S T R A C T ] I n te r l e u k i n -10(I L -10)i s a na n t i -i nf l a mm a t o r y c y t o k i n e ,a n d i n r e c e n t y e a r s ,a l a r gen u m b e r o f s t u d i e sh a v e s h o w n t h a t I L -10h a s t h e d u a l r o l e o f i mm u n o s t i m u l a t i o n a n d i mm u n o s u p p r e s s i o n .T h i s a r t i c l e a n a l yz e s t h em e c h a n i s mo f t h e d u a l i mm u n o r e g u l a t o r y r o l e o f I L -10a n d t h em a i n a n t i -i n f l a mm a t o r y p a t h w a y s o f I L -10a n d r e v i e w s t h e t h e r a p e u t i c p o t e n t i a l o f I L -10i n i n f l a mm a t o r y d i s e a s e s a n d t h e f u t u r e d i r e c t i o n f o r d r u g d e v e l o pm e n t .[K E Y W O R D S ] i n t e r l e u k i n -10;i mm u n o m o d u l a t i o n ;i n f l a mm a t i o n ;g e n e t i c t h e r a p y30年前,人们首次发现白细胞介素-10(I L -10),认为其是T h 2细胞分泌的标志性细胞因子㊂在I L -10发现初期,人们便证明它可以抑制T h 1细胞产生炎性细胞因子[1],以及通过下调主要组织相容性复合体Ⅱ(MH C -Ⅱ)抑制单核细胞的抗原递呈能力,从而阻止T 细胞特异性增殖[2]㊂但随着研究的深入,人们逐渐发现I L -10不仅具有抗炎的免疫抑制作用,同时又有免疫刺激作用,这可能是阻碍I L -10临床应用的重要原因㊂本文通过对I L -10免疫双重作用的分析及抗炎作用的机制研究进展进行综述,分析I L -10抗炎方面的治疗潜力,旨在为I L -10抗炎作用的临床应用和药物开发提供参考依据㊂1 I L -10结构与来源I L -10是由两个非共价键结合的单体组成的同型二聚体分子,分子量约36000,每个单体由160个氨基酸组成,在单体之间存在两个二硫键连接㊂I L -10主要由活化的T 细胞㊁单核细胞㊁巨噬细胞㊁树突状细胞㊁自然杀伤细胞和B 细胞分泌,其中T 细胞是I L -10的主要来源[3]㊂值得注意的是,近年来研究显示,一些非造血细胞(如上皮细胞)也能够产生I L -10,当内源性和外源性递质(例如脂多糖㊁儿茶酚胺和c AM P 升高药物)激活这些细胞时,I L -10就会释放出来[4]㊂2 I L -10在免疫反应中的双重作用及影响因素早先的研究认为,I L -10的主要作用是抑制炎症反应㊂然而,近些年的研究结果却表明I L -10可能存在免疫双重作用,即在某些情况下促进炎症反应的发生而非抗炎,这一作用可能是阻碍I L -10在炎症性疾病中应用的原因之一㊂例如,R E N N I C K 等[5]研究发现,I L -10缺陷型小鼠自发性发展为炎症性肠病(I B D ),体内产生大量促炎细胞因子;而过表达I L -10的小鼠可以抵抗葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎,这表明内源性I L -10能够预防I B D 的发生㊂此外,I L -10在胰腺炎[6]㊁糖尿病[7]㊁脓毒症[8]动物模型中均表现出了抑制炎症作用㊂然而临床研究结果却与预期相反,给予重组人源I L -10(r h I L -10)病人临床症状并没有显著地改善,且疗效在病人间存在较大差异,r h I L -10对疾病严重程度高㊁内源性I L -10血清水平低病人的疗效高于疾病严重程度低㊁I L -10血清水平高的病人[9];此外,低至中剂量的r h I L -10给药可改善病人临床症状,而高剂量r h I L -10全身给药促进疾病进展,这与血清促炎细胞因子水平升高有关[10]㊂以上研究结果提示,I L -10的免疫双重作用取决于炎症程度和I L -10剂量,此外还与靶细胞类型㊁免疫反应阶段等有关系㊂2.1 I L -10作用于不同靶细胞介导不同的免疫效应I L -10在免疫系统中的作用可以分为固有免疫与适应性免疫两个方面㊂在固有免疫中I L -10作用于抗原递呈细胞Copyright ©博看网. All Rights Reserved.314青岛大学学报(医学版)59卷(A P C s),主要诱导免疫抑制反应㊂A P C s如巨噬细胞(Mø)和树突状细胞(D C s)表达高水平的I L-10受体(I L-10R),并在激活后进一步上调其表达[11],A P C s中I L-10信号通路的一般功能是维持免疫稳态,抑制促炎反应㊂因此,在固有免疫中I L-10发挥抗炎作用㊂而适应性免疫中I L-10发挥免疫双重作用,这取决于T 细胞的异质性㊂T细胞主要参与适应性免疫,不同于A P C s 本身高表达I L-10R,T细胞一般在激活后才上调I L-10R,即在幼稚T细胞中表达最低,在记忆T细胞中表达最高[12]㊂因此,I L-10影响T细胞在不同炎症阶段的功能㊂一方面, I L-10在炎症过程中直接抑制C D4+T细胞亚群的促炎效应[13]㊂F o x p3高表达的C D4+T细胞是重要的促炎细胞,其表面表达C D40L蛋白,能够激活B细胞从而促进炎症的发生[14]㊂此外I L-10还可影响F o x p3+调节性T细胞(F o x p3+ T r e g)的稳定性,抑制炎症的发生㊂而1型调节T(T R1)细胞是一类F o x p3低表达的C D4+T细胞,其特征是表达多种共抑制受体(L A G-3㊁T I M-3㊁P D-1㊁C T L A-4㊁T I G I T)但不表达C D40L,研究发现I L-10能促进T R1细胞的稳定性和功能,发挥抗炎作用[15]㊂此外,I L-10还能够抑制T h17细胞的分化[16]㊂另一方面,I L-10调控C D8+T细胞可能发挥相反的效应,肿瘤内C D8+T细胞经I L-10诱导后释放I F N-γ和颗粒酶/穿孔素,I F N-γ一般可促进炎症,但也有报道认为其与I L-10可能在免疫抑制中起协同抗炎作用;另外,I L-10还刺激C D8+T细胞的细胞毒性功能以及记忆免疫的形成,发挥促炎作用[17]㊂2.2 T细胞中I L-10的浓度与功能的关系在健康志愿者体内进行的I L-10临床试验显示,在脂多糖(L P S)诱导内毒素血症的情况下,高剂量的r h I L-10除了能够抑制A P C s和C D4+T细胞活化外,还可诱导细胞毒性C D8+T细胞活化[18]㊂提示I L-10的双重功能不仅依赖于靶细胞,还依赖于I L-10的浓度,即A P C s和C D4+T细胞在低浓度和高浓度I L-10水平时均可以被控制,而C D8+T细胞则需要高浓度I L-10才能被激活㊂但是I L-10在什么情况下激活相同靶细胞(如C D8+T细胞㊁T h1细胞和T h17细胞)的促炎或抗炎信号还需要进一步的研究㊂此外,I L-10的细胞来源和辅助因子(如其他细胞因子)是否会影响I L-10的双重功能尚不清楚㊂在肿瘤治疗研究方面,N A I N G等[19]选择晚期实体瘤病人作为研究对象,聚乙二醇修饰的I L-10(P E G-I L-10)以1~ 40μg/k g剂量每日一次皮下给药,研究药物安全性和耐受性,结果表明P E G-I L-10可激活全身免疫反应,免疫刺激细胞因子升高,血清中转化生长因子β降低,其中1例葡萄膜黑色素瘤病人和4例肾细胞癌病人以20μg/k g剂量治疗8周后病情缓解㊂而在炎症性疾病的研究方面,F E D O R A K 等[20]应用r h I L-10(1~20μg/k g)治疗轻度至中度活动性克罗恩病病人,结果显示5μg/k g剂量的治疗效果最佳㊂此外T I L G等[21]研究显示,应用20μg/k g剂量r h I L-10皮下注射治疗克罗恩病会导致病人血清I F N-γ水平升高,不仅没有观察到对克罗恩病的临床疗效,反而观察到发热㊁头痛等副作用㊂以上结果提示低剂量I L-10可抑制C D4+T细胞发挥抗炎作用,用于治疗炎症疾病;而高剂量I L-10可诱导C D8+T 细胞活化,抗炎作用减弱,但可用于抗肿瘤治疗㊂3I L-10抗炎作用相关级联通路I L-10作用于靶细胞后发生何种反应取决于细胞表面I L-10R的参与和细胞内的信号级联[22]㊂I L-10R由α㊁β两个亚基组成,I L-10Rα主要表达于白细胞,与I L-10高亲和性结合,而I L-10Rβ则是广泛表达的,与I L-10辅助性结合㊂与I L-10Rα亚单位相关的J a n u s激酶(J A K)和与I L-10Rβ亚单位相关的酪氨酸激酶(T Y K)在I L-10的作用下发生磷酸化,然后激活信号转导蛋白和转录激活蛋白(S T A T s)同源/异源二聚化并移位到细胞核中,进而调节免疫反应,如降低MH C-Ⅱ的表达,减少A P C s分泌促炎细胞因子,以及上调参与调节巨噬细胞失活的肌腱膜纤维肉瘤基因B型蛋白,从而抑制炎性因子的表达㊂研究表明,除经典的J A K-S T A T 级联通路外,I L-10还可以通过激活磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶(P I3K)/A k t级联通路,增强抗凋亡因子B c l-2和B c l-x l的表达,同时降低c a s p a s e-3的表达水平,从而阻止细胞凋亡[23]㊂E D D I E I P等[24]提出了另一条与I L-10代谢有关的机制通路:I L-10抑制L P S诱导的葡萄糖摄取和糖酵解,并促进氧化磷酸化;此外,I L-10通过激活S T A T-D D I T4通路抑制雷帕霉素靶蛋白(m T O R)靶点的活性来控制细胞代谢,并认为I L-10的这种代谢控制对炎症的控制至关重要㊂因此,与其多重来源一样,I L-10也靶向多种细胞和通过多种分子途径来抑制或刺激免疫反应[22]㊂4I L-10的抗炎应用研究进展4.1外源性I L-10蛋白治疗鉴于I L-10具有广泛的抗炎作用,人们首先想到通过应用外源性I L-10治疗疾病,目前已在多种动物模型或临床试验中证实了重组I L-10蛋白对疾病的疗效㊂MA Z E R等[25]通过建立小鼠脓毒症模型研究显示,I L-10一方面抑制单核细胞产生T N F-α,降低炎症反应;另一方面激活适应性免疫促进T细胞产生I F N-γ,激活机体抗感染反应,表明I L-10不论是对先天性免疫的抑制作用还是对适应性免疫系统的刺激作用均对脓毒症具有积极的治疗作用㊂K R I S HN A-MU R T H Y等[26]对小鼠急性心肌梗死模型研究显示,造模后第0㊁1㊁3㊁5㊁7天皮下注射50μg/k g重组I L-10可改善心室功能,减轻心肌纤维化,降低小鼠死亡率㊂HO S等[27]建立了角膜缝线诱导的大鼠角膜新生血管模型,结膜注射小鼠重组I L-10蛋白10μg/L治疗,结果表明I L-10可以抑制炎症反应并抑制血管生成,证明I L-10具有治疗病理性角膜炎的潜力㊂T I N S L E Y等[28]的研究显示,连续向孕鼠腹腔注射r h I L-10可减轻其子痫样症状㊂Z HA O等[29]用不同浓度I L-10处理小鼠视网膜色素上皮细胞(R P E),结果显示I L-10可抑制R E P细胞增殖和迁移,下调炎症因子分泌,表明I L-10Copyright©博看网. All Rights Reserved.2期王贞丽,等.白细胞介素-10的免疫双重作用及抗炎应用进展315具有改善风湿性视网膜脱离的潜力㊂尽管外源性I L-10蛋白治疗在动物实验中表现出了不错的效果,然而在临床试验中却并未表现出良好的疗效㊂原因可能是由于I L-10半衰期短,药代动力学不确定,作用机制复杂,很难通过简单地提供外源性I L-10蛋白来达到临床需求㊂4.2I L-10抗体药物治疗I L-10全身性给药不仅治疗效果不佳,还容易引起不良反应,新的开发策略倾向于I L-10的靶向给药㊂例如,由意大利P h i l o g e n公司开发的单克隆抗体-细胞因子融合蛋白F8-I L-10(D e k a v i l)就是基于抗体的药物传递策略,由人F8抗体(靶向纤维连接蛋白结构域A)与I L-10融合,能够在疾病部位传递和积累细胞因子,在治疗类风湿性关节炎(R A)和I B D中很有前景[30]㊂F R A N Z等[31]研究显示,F8/I L-10在慢性排斥反应发展过程中有治疗效果㊂G A L E A Z Z I等[32]在临床试验中应用F8/I L-10与甲氨蝶呤联合治疗R A,与安慰剂组相比显示出较好的疗效㊂Q I A O等[33]则开发了基于西妥昔单抗的I L-10融合蛋白,能够延长I L-10半衰期并有助于I L-10肿瘤靶向递送,具有更好的抗肿瘤效果㊂I L-10抗体药物解决了单独使用重组I L-10蛋白给药特异性差的问题,是未来新药开发的一个有效途径㊂4.3I L-10基因治疗基因治疗和基因编辑(基因的功能修饰)代表了人类疾病治疗的未来方向㊂I L-10的基因治疗同样成为了近年来主要的研究方向㊂C Y P E L等[34]在肺移植前使用编码I L-10的腺病毒载体(A d h I L-10)进行基因治疗以修复原发性移植物功能障碍导致的供体肺损伤,结果显示A d h I L-10治疗后肺功能(动脉氧压和肺血管阻力)有显著改善,促炎细胞因子表达向抗炎细胞因子表达转变,肺泡-血液屏障恢复完整性㊂O I S H I等[35]研究也显示,慢病毒I L-10基因疗法增加了肺移植模型小鼠I L-10的表达,具有积极作用㊂为了对抗移植排斥反应,J E O N G等[36]构建了携带巨细胞病毒I L-10(v I L-10)基因重组腺病毒载体,治疗供体大鼠1h后进行皮肤异体移植,结果证明移植物中的v I L-10基因提高了移植物存活率并减少急性排斥反应,证明I L-10基因治疗是预防移植排斥反应的一种有效的免疫抑制方法㊂此外,结肠炎小鼠模型直肠给药编码I L-10的慢病毒载体和腹腔注射编码I L-10的质粒均安全地穿透局部黏膜组织,对小鼠结肠炎有治疗作用[37]㊂将编码h I L-10质粒注入去卵巢大鼠牙龈,能抑制牙槽骨吸收,抑制促炎细胞因子的表达,治疗牙周炎[38]㊂不同于以上研究中直接使用I L-10基因载体,有研究构建了慢病毒C X C L10载体,以C X C L10启动子基因间接调节I L-10的过表达,结果显示R A病人滑膜细胞产生的炎症细胞因子减少,该研究提供了一种适用于R A的诱导型局部基因治疗方法㊂综上所述,I L-10是一种具有抗炎和促炎特性的多效细胞因子,炎症程度㊁I L-10剂量㊁靶细胞类型㊁免疫反应阶段等均可影响I L-10的抗炎效应㊂外源性重组I L-10蛋白已经在众多炎症性疾病动物模型中表现出了良好的药理作用,近年来,随着抗体药物与基因治疗的发展,研究者们开始致力于I L-10融合蛋白药物㊁抗体药物或基因治疗药物的开发㊂本综述聚焦在I L-10免疫调节双重作用的因素与I L-10成药性研究上,旨在为I L-10抗炎药物开发提供参考㊂[参考文献][1]F I O R E N T I N O DF,Z L O T N I K A,MO S MA N N T R,e ta l.I L-10i n h i b i t sc y t o k i n e p r o d u c t i o nb y a c t i v a t e d m a c r o p h a g e s[J].T h e J o u r n a l o f I mm u n o l o g y,1991,147(11):3815-3822.[2]N E UMA N N C,S C H E F F O L D A,R U T Z S.F u n c t i o n sa n dr e g u l a t i o no fTc e l l-d e r i v e d i n t e r l e u k i n-10[J].S e m i n a r s i n I m-m u n o l o g y,2019,44:101344.[3]WA N GXT,WO N G K,O U Y A N G WJ,e t a l.T a r g e t i n g I L-10f a m i l y c y t o k i n e s f o r t h et r e a t m e n to fh u m a nd i s e a s e s[J].C o l dS p r i n g H a r b o rP e r s p e c t i v e si n B i o l o g y,2019,11(2):a028548.[4]O U Y A N G W J,O G A R R A A.I L-10f a m i l y c y t o k i n e s I L-10a n d I L-22:f r o mb a s ic s c i e n c e t o c l i n i c a l t r a n s l a t i o n[J].I mm u-n i t y,2019,50(4):871-891.[5]R E N N I C K D M,F O R T M M.L e s s o n s f r o m g e n e t i c a l l y e n g i-n e e r e da n i m a lm o d e l s.Ⅻ.I L-10-d e f i c i e n t(I L-10(-/-)m i c ea n d i n t e s t i n a l i n f l a mm a t i o n[J].A m e r i c a n J o u r n a l o fP h y s i o l o-g y G a s t r o i n t e s t i n a la n d L i v e r P h y s i o l o g y,2000,278(6):G829-G833.[6]林荣贵.白介素-10对重症急性胰腺炎大鼠血脑屏障损伤的影响及机制研究[D].福州:福建医科大学,2018.[7]赵辉.过表达I L-10的脂肪间充质干细胞促进糖尿病小鼠慢性创面愈合的研究[D].北京:北京协和医学院,2019. 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IL10升高作为肿瘤诊断与监测的生物标记的价值分析引言肿瘤作为一种严重威胁人类健康的疾病，早期的诊断与治疗对于提高存活率至关重要。

近年来，关于生物标记物在肿瘤诊断与监测中的应用越来越受到科研人员的关注。

本文将针对一种具有潜在用于肿瘤诊断与监测的生物标记物IL10升高的价值进行分析，并讨论其可能的应用前景。

IL10介绍IL10即白细胞介素-10，是一种由多种免疫细胞分泌的细胞因子，被广泛认为在机体中具有多种调节免疫系统的功能。

IL10作为抗炎因子，在免疫反应中发挥重要作用，能够抑制炎症细胞的活性，调节免疫细胞的分化和功能，促进免疫系统的平衡状态。

近年来的研究表明，IL10升高在某些肿瘤中可能具有一定的生物学意义。

IL10升高与肿瘤相关性多项研究表明，IL10升高与某些肿瘤的发生、发展和转移相关。

例如，在恶性黑色素瘤、胃癌、结直肠癌和肺癌等多种肿瘤中，IL10的表达水平明显升高。

IL10的高表达与肿瘤的浸润、转移和预后密切相关，提示其可能作为肿瘤发生和发展的生物标记物。

IL10升高与肿瘤诊断的价值IL10升高作为肿瘤诊断的生物标记具有一定的潜在价值。

首先，由于IL10在肿瘤发展过程中的表达水平明显升高，因此检测IL10的表达水平可以作为一种肿瘤诊断依据。

其次，IL10的高表达与某些肿瘤的转移和预后密切相关，因此可以作为判断肿瘤转移风险和预后的指标。

此外，通过监测IL10的变化，还可以对肿瘤治疗的效果进行评估和监测。

IL10升高作为肿瘤监测的生物标记的价值IL10升高作为肿瘤监测的生物标记也具有一定的应用价值。

肿瘤监测的目的是通过定期检测肿瘤标记物来监测肿瘤的进展和治疗效果。

IL10作为一种易于检测的标志物，可以在肿瘤治疗过程中进行定期监测。

一旦IL10的水平发生变化，可以及时调整治疗方案，提高治疗效果。

此外，IL10作为肿瘤监测的生物标志物，其检测成本相对较低，操作方便，可以在临床实践中广泛应用。

IL10升高作为肿瘤诊断与监测生物标记的应用前景IL10升高作为肿瘤诊断与监测的生物标志物在临床应用中具有广阔的前景。

人白介素10（IL-10）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：12.5pg/ml-800pg/ml,最低检测限：3pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-10，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-10含量。

说明?试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

?浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

?中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

?刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述：白细胞介素10（IL-10）是近几年新发现的细胞因子，又称细胞素合成抑制因子，为含178个氨基酸残基的单肽链糖蛋白（其中Ｎ端18个氨基酸信号肽序列）。

IL-10分子量35-40kDa，通常为二聚体，其基因为单拷贝基因。

人的IL-10基因定位于第1号染色体上，限制性内切图谱提示该基因至少含3个间隔序列，同其他已知细胞因子基因的核苷酸序列货对应的蛋白质序列比较，IL-10与这些细胞因子无明显的顺序同源性。

IL-10主要由Th2细胞产生，但Tho 细胞、Th细胞、CD8+T细胞、活化的B细胞、单核-巨噬细胞、kupffer细胞、肝细胞、角化细胞等也可产生。

IL-10是具有多向性生物学活性的强免疫抑制因子，能改变机体的免疫应答和MHCⅡ类抗原的表达，并介导Th1和Th2两类细胞之间的相互调节。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-10抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-10抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IL-10呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人白细胞介素-10（IL-10）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素10（IL-10）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-10（IL-10）水平。

用纯化的人白细胞介素-10抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-10，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素-10（IL-10）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-10（IL-10）含量。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

白细胞介素—10检测及其临床意义250?Labeledlmmunoassays&ClinMed.Dec咖ber2001.V ol8.N0.4检测技歹了白细胞介素一10检测及其临床意义董晓军(解放军总医院科技开发由一,北京100853)白细胞介素一10(简称白介素10,inlet—leukin一10,IL一10)是具有多种生物功能的细胞因子,它与机体自身免疫疾病,感染性疾病和肿瘤等有着密切关系.IL10主要由单核细胞,巨噬细胞,肥大细胞,T,B淋巴细胞和激活的角质细胞产生.人的IL1O是一种单肽链的.由160个氯基酸组成的酸性蛋白,分子量为18.7kD(不包括N端18个氨基酸构成的信号肽序列),等电点为8.1,通常为二聚体(39kD)人IL一1O和鼠II～10核苷酸序列同源性达81%,氯基酸序列同源性达73%.人IL1O对人细胞和小鼠细胞均有作用,小鼠IL一10只对鼠细胞有作用,而对人细胞无作用.白介素的基因是单拷贝基因,其位置在第一染色体上.IL～1O基因的核苷酸序列或蛋白质氯基酸顺序和其他的细胞因子无明显的顺序同源性而IL一10基因和EBV基因组中有一段开放读码区的BCRF1有大于80%的明显同源性.IL1O是一种具有免疫抑制和免疫刺激作用的细胞因子,人IL一10在单核细胞存在下,能直接抑制T细胞增殖和白介素的产生.当它作为免疫抑制因子时,能抑制多种细胞合成其他细胞因子ll10抑制细胞性免疫应答,主要是通过抑制T1产生IL一2,干扰素一(IFN一)等,抑制II2R的作用.在机体免疫应答中,既有对机体起保护作用的一面,也有不利于机体的一面.IL一10 能增强体液免疫应答IL1O在机体多种自身免疫疾病的产生过程中起着重要的作用,与白血病关系较为密切.IL10与11,3和IL一4协同因子能刺激未成熟的肥大细胞增殖内源性IL一10也能抑制同种异体MLR表达IL一10和转化生长收稿日期:2001—02—18:修回日期:2001'05—28 因子(TGF)可通过抑制一氧化氮的产生而干扰IFN一对单核细胞活化.IL1O对NK细胞的抑制作用是间接的而非直接,IL10抑制NK细胞产生IFN—I1一10不抑制LAK细胞活性.成熟的B细胞才能分泌IL一10,IL1O是B细胞有效的增殖和分化因子,它对B细胞活化和增殖有着效应.在TGF口存在下,IL—l0能提高lgA分泌能力,在IL4存在下IL10能提高IgE生物活性.IL10检测对疾病的临床诊断,免疫病理和免疫调节等方面的研究都是必需的.IL一1O的检测方法和临床意义:1放射免疫分析法和酶免疫吸附法这类检测方法简称为RIA和ELISA法,检测特异性高,较生物活性检测方法快速,其灵敏度可达Pg水平.可测患者的血,细胞液和尿液等标本中的IL1O水平,已有成套试剂盒可供使用,操作也十分方便和简单.2斑.杂交法用地高辛甙标记的eDNA作为探针的点杂交方法,可检测系统红斑狼苍(SLE)患者IL一1O mRNA的含量.实验结果表明,LES患者IL一1O mRNA表达量比正常人高二倍,提示IL一10与SLE发病有直接关系,并表明了IL10拮抗剂有可能用于SLE病的治疗.这种方法操作简便,并有助于SLE疾病的临床治疗和用于选择合适的免疫调节剂.3反转录一PCR检测法这种检测法简称为RT—PCR,检测IL1O特定基因转录产物RNA的表达水平.它可以从血清,血浆,细胞,腹水和组织液等,一步处理,快速分离样品中的RNA,可从50pgRNA中扩增出所需片段,最大扩增片段超过2kb,因此具有高特异记免疫分析与临床2001年l2月第8卷第4期性和高灵敏度.4免提荧光法采用双标记免疫荧光法,可检测唾液腺炎患者唾液腺组织中IL—l0,IL—l2和IFN一的表达水平,而大部分IL—l0表达阳性的单个核细胞, CD4也阳性,又称双阳性免疫荧光标记法采用免疫双染色法可检测类风湿性关节炎和骨关节炎患者的滑膜细胞培养液中IL—l0的水平,结果表明类风湿性关节炎患者II一10水平为358—5501pg/mL,骨关节炎患者Il一l0水平为310—3390pg/mL.这表明IL—l0是由l滑膜里层单核细胞和聚集的淋巴细胞(T细胞)产生的5ELISA一点技术这项技术简称为ELI—SPOT,用ELI—SPOT25l能检测单个细胞水平IL—l0的产生,对研究IL—l0在细胞间进行信息传递的作用,具有重要的意义.操作步骤:将单细胞悬液加到包被抗IL—l0抗体的反应孔中,经诱导产生IL—l0,后者与生物素化的第二抗体产生结合反应,当加入碱性磷酸酶标记的链亲和素和显色剂后,显色反应在覆盖的琼脂胶中进行,最后用倒置显微镜计数蓝色斑点.本法操作简单,可以使细胞处于与体内的状态非常相近的条件.ELI—SPOT法还可用来跟踪疾病产生,调整治疗方案等.如用于重症肌无力患者外周血T细胞分泌IL—l0(和IFN—)的研究;用于检测多发性硬化患者外周单个细胞IL—l0分泌水平.(胨泮藻编委审张增武编辑)用流式细胞仪测定母血中胎儿红细胞含量的新方法周春喜(解放军总医院雕璺宴验锺试中..北京100853)本文介绍一种快速而准确地测量母血中胎儿红细胞含量的方法.它通过流式细胞仪检测母血中胎儿红细胞胞内的血红蛋白(HbF)和红细胞表面i抗原,可以特异地识别母血中胎儿红细胞.这对预防新生儿溶血症和优生优育具有重要意义.材料与方法l样品处理方法(1)静脉采血lmL,用EDTA抗凝,室温保存备用.(2)用血球计数仪计数并计算抗凝血中红细胞的浓度.(3)用冲洗液将抗凝血稀释成浓度为25x109个/mL的红细胞悬液.(4)取一带盖尖底离fl,管,加入10/~I红细胞悬液及100~-L封闭液,混匀.加入100VI同定液, 混匀,室温温育30rain.收稿日期:2001—05—18;修回B期:2OOl—o8—10 (5)再加2.5mL冲洗液,将离心管颠倒几次洗细胞.1000g离心3min,弃上清,将剩下的细胞混匀.加100/~L破膜液,混匀,室温温育3min. (6)加2.5mL冲洗液,将离心管颠倒几次洗细胞.1000g离心3min,弃上清,用25mL冲洗液再洗细胞一次.离心弃上清,加lmL冲洗液,混匀.2黄光染色方法(1)每份样品取2支流式细胞仪样品管,分别标记为l和2.(2)在l号管中依次加入100/~L细胞悬液,10/~L异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗HbF,10/~L 藻红蛋白(PE)标记的抗i抗原和10/~LDNA染液(LDS751),混匀.(3)在2号管中依次加入100~.L细胞悬液,10~.LFITC标记的IgGl,10vLPE标记的IgM和10t,LLDS751,混匀.(4)将两管于4t避光温育30rain.用2.5mL冲洗液洗1次.。