人Human白细胞介素-2IL-2ELISA检测试剂盒使用方法

白细胞介素2酶联免疫检测试剂盒定量测定酶联免疫吸附试验使用说明书本试剂盒只作为实验室研究使用，不得作为临床诊断的依据产品编号：50R-E.1109检测种属：大鼠检测介质：血清-血浆-组织匀浆-细胞培养液引言使用前请仔细阅读使用说明书。

试验原理此白细胞介素2检测试剂盒是竞争性抑制法酶联免疫吸附实验。

使用纯化的抗体包被微孔板，使其充分吸附在微孔壁上，制成固相载体。

酶联亲和物中含有酶标记的抗原。

试验过程中加入待测样本和酶联亲和物与包被在微孔上的抗体一起温育反应使其充分结合在微孔壁上，共同竞争包被在微孔上的固相抗体，形成标记抗原复合物。

反应过后冲洗掉未结合的部分，再加入底物反应，底物在酶的作用下变为蓝色，并在酸的作用下转化为最终的黄色。

通过读取吸光度值来绘制出标准曲线，并在标准曲线上反算出待测样本的浓度。

试剂盒组成需要但未提供的试剂和器材贮藏条件1、试剂盒贮存在2-8℃，包被微孔板干燥保存。

2、试剂有效期内保持稳定，显色液应为无色。

如果发色或变蓝应及时更换。

警告和使用1、在试验之前要将试剂盒在室温下平衡至少30分钟。

2、不要重复使用手中的吸头和试管，否则会引起交叉污染，导致试验失败。

3、该试剂盒内不包含有传染性试剂。

4、不要混用不同批号的试剂和包被微孔板。

5、试验过程中所有试剂和待测样本应充分混合。

6、包被微孔板应干燥保存，避免受潮。

7、如有剩余试剂请放置2-8℃保存。

8、试验过程要严格按照说明书操作，先后顺序不得颠倒。

9、如果样本量较大应注意加样时间，避免加样过慢或间隔时间过长。

10、使用和贮存底物Ⅱ时应注意避光。

11、试验期间室内温度应始终保持在18-28℃。

并保持室内清洁，无粉尘。

12、避免直接接触试剂盒内的液体，一旦接触请尽快用水清洗。

13、在试验过程中不要吸烟、使用化妆品和吃喝。

这将对操作者的健康及试验结果造成影响。

14、不要用嘴吸取试剂瓶内的试剂。

样本的采集和制备1、[血清]操作过程中避免受到刺激，使用非焦化和不含有内毒素的试管，静脉穿刺收集血液并迅速离心，分离出血清[1000×g离心20分钟]。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）和肽素（copeptin）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被和肽素（copeptin）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的和肽素（copeptin）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1.5、3、6、12、24pmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

白细胞介素（IL-2）检测及临床意义
一、概述
白细胞介素-2 (IL-2)又称T细胞生长因子。

主要由T细胞产生。

是在淋巴细胞增殖分化过程中重要的细胞生长因子，生理作用有刺激T细胞生长、诱导细胞毒作用和对B细胞的生长及分化均有一定的促进作用等
二、检测方法
IL-2主要检测方法为生物素亲合素系统的双抗体夹心ELISA 法。

三、临床意义
1、IL-2可提高人体对病毒、细菌、真菌和原虫等感染的免疫应答，促进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK 细胞)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK 细胞)和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增殖，并使其杀伤活性增强，进而清除体内肿瘤细胞和病毒感染细胞等。

2、IL-2 还可以增加抗体和干扰素 (IFN)等细胞因子的分泌，在机体免疫应答中具有非常重要的作用，是一种免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤和提高机体免疫功能等作用。

3、IL-2的表达异常与临床多种疾病有密切关系，尽管外周血、尿液中IL-2 水平，或激活淋巴细胞上清液中IL-2水平的异常没有疾病特异性，但是可作为相关疾病的辅助诊断、预后及疗效观察提供可靠数据。

4、IL-2升高：肿瘤、心血管病、肝病等疾病时均可使 IL-2 水平升高，在器官移植后早期排斥反应时也出现IL-2表达升高。

5、IL-2降低：在多种原发性免疫缺陷病和继发性免疫缺陷病时均可伴有 IL-2 水平降低，如 SLE、麻风和艾滋病等。

一、产品简介 ������������������� ���������二、检测原理 ������������������� ���������三、试剂盒组分 ������������������� ���������四、储存条件 ������������������ ����������五、注意事项 ������������������ ����������六、其它实验材料 ������������������� ��������七、使用说明 �������������������� �������7.1、样品收集、处理及保存方法 �������������������� � 7.2、试剂准备 �������������������� ������� 7.3、操作步骤 �������������������� ������� 7.4、操作流程图 �������������������� ������� 7.5、操作要点提示 �������������������� ���7.6、结果判断 �������������������� �������八、常见问题分析及解决 ���������� ������������� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目 录全国统一热线：400-600-4213 Elisa试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IL-2浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分，如有任何疑问请与北京兰杰柯科技有限公司或经销商联系，公司将为您提供强有力的技术支持。

仅供研究，不用于临床诊断。

二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA，用抗人IL-2单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标准品，其中IL-2会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人IL-2抗体，抗人IL-2抗体与结合在单抗上的人IL-2结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。

人白介素I L试剂盒的操作说明书Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T0-8ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白介素6（IL-6）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素6（IL-6）水平。

用纯化的人白介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再与HRP标记的白介素6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白介素6（IL-6）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白介素6（IL-6）浓度。

试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（16ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

8ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。

IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-1β会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后，抗人IL-1β抗体与IL-1β接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。

生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

最后加入显色剂，若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-1β浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-1β浓度。

标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测；D.标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。

2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。

注：正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。

注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。

2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

3.若标准品复溶后，请在三天内用完。

4.底物请勿接触氧化剂和金属。

5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。

6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。

7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。

8.室温反应，请严格控制在25～28℃。

IL-2,白介素2,大鼠白介素2ELISA试剂盒kit说明书ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

IL-2,白介素2,大鼠白介素2ELISA试剂盒kit说明书培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

适应：科研实验保存温度: 2~8°规格：96T/48T96T指可以做94个标本，2个标准对照48T指可以做47个标本，1个标准对照96T-84个样本主要组织相容性复合体Ⅰ类48T-42个样本引起ELISA 试剂盒测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

引起ELISA 试剂盒测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

重复性：＜15% ，规格： 96T/48T ，标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

白介素2检测动物种类：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、猴,植物类,鸟类等检测标本类型：血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液、唾液、关节滑液、肺泡灌洗液等检测指标：趋化因子、生长因子、抑制因子、炎症因子、营养因子、脂肪因子、血管生成因子、动脉粥样硬化因子、基质金属蛋白酶等实惠点：选用进口材料：专业的技术支持，可靠的实验结果，优秀的产品质量，低廉的市场价格，实惠、经济、可靠。

优点：高灵敏度、高精密度，高重现性，高特异性。

不仅有高可靠性的实验结果，更为您节约实验成本和时间。

技术服务：。

白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书性状：试剂盒kit(含试剂+酶联板+覆膜等)。

ELISA：2-8℃，六个月白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书（1）要注意避免出现严重溶血。

血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。

（2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书在elisa实验前的注意事项：1 仔细阅读说明书2 确定试剂盒在有效期内3 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）4 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。

短期内无法实验者，注意低温保存。

白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书试剂盒分两种规格48T/96T，每次实验的标准曲线一般设7个不同浓度，加上空白孔，标准曲线一共需要8个孔。

因此，一个48T试剂盒最多可以测定40个样本（不做重复且一次用完），一个96T试剂盒最多可以测定88个样本（不做重复且一次用完）。

可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。

的比色测定由酶标仪进行。

有的同行可能会认为，既然由酶标仪进行，那么此时便可以万事大吉了，其实不然，因为当代较为先进的酶标仪，均有较多的功能，使用不当，会得到令人难以理解的实验结果。

如使用酶标仪比色测定后，有许多的阴性测定孑L的吸光度值为负数；或测定假阳性率大大增加等等。

这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。

此外，在加入底物开始显色反应前，好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加1滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。