下载文档原格式
细菌外膜囊泡研究进展一、本文概述细菌外膜囊泡（Bacterial Outer Membrane Vesicles，简称OMVs）是近年来微生物学领域的研究热点之一，它们是由革兰氏阴性细菌外膜衍生出的纳米级囊泡结构。
OMVs在细菌生物学、感染机制、疫苗开发以及药物传递等多个方面都具有重要的应用价值。
本文旨在综述细菌外膜囊泡的研究进展，包括其结构特性、生成机制、功能与应用等方面的最新研究成果。
通过深入了解OMVs的生物学特性及其潜在应用，有望为未来的抗感染治疗、疫苗研发以及药物传递等领域提供新的思路和方法。
二、细菌外膜囊泡的结构与功能细菌外膜囊泡（Outer Membrane Vesicles, OMVs）是革兰氏阴性菌释放的一种纳米级膜囊泡，具有独特的双层膜结构，外层由细菌的外膜组成，内层则为周质空间。
这种结构使得OMVs能够携带并传递多种生物活性分子，如毒素、酶、DNA和RNA等。
在功能上，OMVs扮演着多重角色。
它们是细菌与宿主细胞间交流的重要媒介。
细菌通过OMVs向宿主细胞传递信号分子，进而调控宿主细胞的生理活动。
OMVs在细菌致病过程中发挥关键作用。
它们能够保护并传递毒素和酶至宿主细胞内，导致细胞损伤和疾病发生。
OMVs还参与细菌生物被膜的形成和维持，增强了细菌对环境的适应能力。
近年来，随着对OMVs研究的深入，人们发现它们在疫苗开发、药物传递和生物传感器等领域具有广阔的应用前景。
例如，利用OMVs 作为疫苗载体，可以高效地递送抗原至宿主细胞，诱导产生强烈的免疫应答。
OMVs也可作为药物传递系统，将药物精确地运送至病变部位，提高治疗效果。
然而，目前对OMVs的研究仍处于起步阶段，许多关键问题亟待解决。
例如，OMVs的精确释放机制、与宿主细胞的相互作用方式以及其在不同生理环境下的功能变化等。
未来，随着研究的深入和技术的发展，我们有望更加全面地了解OMVs的结构与功能，进而为疾病治疗和生物技术的发展提供新的思路和方法。
外泌体功能与临床应用研究进展外泌体是由细胞分泌的膜性囊泡，是细胞间通讯的重要介质，参与到细胞间生物信号的传递。
目前有5种公认且较为常用的提取外泌体的方法。
外泌体在临床疾病研究中突破性的进展主要体现在外泌体参与肿瘤疾病的进展、外泌体中的核酸或蛋白可以作为疾病的分子标志物、外泌体可以作为药物的载体进行靶向治疗等方面。
外泌体在疾病中行使的功能使其极具向临床应用的优势。
本文主要从外泌体的发现、提取方法优缺点及其在临床疾病功能的研究进展这三个方面加以阐述。
标签：外泌体；提取方法；外泌体与临床疾病1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现[1-2]，1987年Johnstone 等[3]将其命名为“exosome”。
研究者最初认为外泌体是一种实验的人工制品、废物或死细胞的残留物[1]。
到20世纪90年代，Zitvogel等[4]和Raposo等[5]发现外泌体很可能是细胞间相互交流的一种新方式。
2007年，Valadi等[6]发现外泌体内携带有核酸（mRNA、microRNA等）和蛋白质，并可以被其他细胞捕获。
这一系列的突破性发现打开了外泌体研究的新篇章。
目前，外泌体提取方法各具特色，并能够得到用于研究的外泌体，因此外泌体研究在近几年呈现指数型上涨。
外泌体在临床疾病方面也有较多突破性的报道，这种纳米级的小分子有希望替代细胞治疗投入到临床应用之中。
1 外泌体定义与提取鉴定方法外泌体是携带核酸和蛋白质的直径为30～150 nm的膜性囊泡，外泌体表面表达CD63、CD9、CD81等表面标志物。
胞外囊泡（extracellular vesicles，EVs）为细胞分泌的由膜包裹的囊泡统称为胞外囊泡，其包括外泌体、外膜泡、微泡、微粒、凋亡小体和其他EV亚群。
外泌体起源于质膜循环途径中的膜腔或早期胞内体，这些膜腔或早期胞内体向内凹陷形成管腔内膜泡，进一步发展成为多泡小体，多泡小体在细胞内分子马达的牵引下与细胞表面融合，最终分泌出去[7]。
基于转铁蛋白受体(TfR1)的肿瘤与脑部疾病靶向治疗研究进展人转铁蛋白受体（TfR1)在不同组织器官中普遍表达，其主要功能是协助转铁蛋白在细胞和血脑屏障内外转运，维持细胞铁平衡。
在肿瘤细胞中以及血脑屏障中，TfR1的表达水平明显高于正常细胞组织，因此，TfR1被认为是肿瘤靶向治疗和脑部疾病靶向治疗的重要靶点。
基于TfR1靶向治疗的药物载体主要有转铁蛋白（Tf）、抗TfR1抗体、TfR1结合肽，这些生物大分子能与TfR1特异性结合，结合之后可以通过受体介导的跨胞转运机制进入细胞或穿过血脑屏障。
将小分子药与这些载体偶联可以促进许多亲水性的化疗药物或神经治疗药物进入肿瘤细胞或血脑屏障，而许多中枢神经治疗性大分子则主要通过融合蛋白的方式与抗TfR1抗体连接转运进入中枢神经系统。
Abstract：Human TfR1 was universally expressed in different tissues. The major function of TfR1 was to facilitate delivery of transferrin across cells and blood-brain barrier(BBB). As a result, iron homo-stasis was maintained. TfR1 was recognised as a critical target for tumor and brain disease therapy due to its over expression in tumor cells and BBB. In recent years, drug carriers based on TfR1 recognition were developed such as Transferrin (Tf）, anti-TfR1 antibody and TfR1 binding peptide. These carriers bind to TfR1 specifically and enter into cell or BBB through receptor mediated endocytosis. Chemicals conjugated with these carriers can be facilitated to enter into tumor cells and brain tissue. Therapeutic proteins can be engineered to fused with anti-TfR1 antibody and transported across BBB.Key words：TfR1; Tumor target therapy;Brain directed delivery1轉铁蛋白受体（TfR1)简介转铁蛋白受体（TfR1)是一种在不同组织和细胞系中普遍表达的糖蛋白。
脂质体的研究进展及应用作者：陈云灿刘帅刘小虎来源：《健康周刊》2018年第07期【摘要】脂质体是由脂质双分子层组成，内部为水相的一种闭合囊泡。
利用特殊的脂质材料或将脂质体进行修飾，从而赋予脂质体不同的特性使其作为药物载体是近年来新兴的一种研究领域，是涉及基础理论较多的一项新技术。
脂质体携带药物具有靶向性强、毒副作用小、半衰期长、运载量大等优点。
有关其研究很多，本文主要阐述脂质体作为药物载体的研究进展。
【关键词】脂质体药物载体靶向早在60年代初，英国Bangham等[1]发现，当磷脂分散在水中时能形成多层囊泡，类似于洋葱结构，且每一层均为脂质双分子层，各层之间被水相隔开，这种具有类似生物膜结构的双分子层小囊称为脂质体（liposome）。
近年来，随着生物技术的不断发展，脂质体的工艺逐步完善，脂质体在稳定性差、包裹药物量少等方面的问题逐一被克服。
本文对脂质体研究现状进行了综述，并总结了脂质体近来的应用。
1 脂质体的简介脂质体是磷脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露于水相中，形成具有双分子层结构的封闭囊泡。
在囊泡内水相和双分子膜内可以包载药物，类似于超微囊结构。
其一般由磷脂和胆固醇构成，是一种被广泛研究的药物递送系统。
制备脂质体的膜材料主要为类脂类成分，有磷脂和胆固醇等。
其中磷脂最常用。
胆固醇主要与磷脂结合，阻止磷脂聚集成晶体结构。
胆固醇趋向于减弱膜中类脂与蛋白质复合体间的连接，像“缓冲剂”一样起调节膜流动性的作用。
脂质体的制备技术较为成熟，传统方法主要有薄膜分散法、逆向蒸发法、乙醇注入法、高压均质法、超声法等；新开发的有薄膜分散—动态高压微射流法、动态高压微射流一冻融法、动态高压微射流—乙醇注入法、加热法、冷冻干燥法等。
脂质体的传统制备方法比较简单，适合小剂量制备，而不适合工业生产。
新型制备方法制备的脂质体具有包封率较高、粒径分布均一、无残留有机溶剂、可工业化大生产等优点，已经被广泛应用于食品、化妆品、药品等行业[2-6]。
脂质体主动载药技术研究进展一、概述随着医药科技的飞速发展，药物传递系统作为连接药物研发与临床应用的关键桥梁，其重要性日益凸显。
在众多药物传递系统中，脂质体作为一种生物相容性好、毒性低、能够有效保护药物并提高药物靶向性的载体，受到了广泛关注。
脂质体主动载药技术，作为脂质体研究领域的热点之一，通过主动调控脂质体的组成、结构和功能，实现药物的高效、精准输送，为提高药物疗效、降低副作用、提升患者生活质量提供了有力支持。
脂质体主动载药技术的基本原理在于利用脂质体的特殊结构和性质，通过主动靶向和或主动转运的方式，实现药物的高效、精准和可控释放。
脂质体是由磷脂双分子层构成的纳米级囊泡，其结构与生物细胞膜相似，因此具有良好的生物相容性和细胞膜融合能力。
这种结构特点使得脂质体能够包裹水溶性或脂溶性药物，并在体内运输过程中保持稳定。
主动载药技术的关键在于利用细胞膜上的转运蛋白或受体，通过配体受体相互作用或主动转运机制，将药物定向输送到病变组织或细胞。
本文旨在对脂质体主动载药技术的研究进展进行系统性梳理和总结，以期为相关领域的科研工作者和从业人员提供有益的参考和启示。
将对脂质体主动载药技术的基本概念、原理及其发展历程进行简要介绍，为后续研究内容的展开奠定基础。
随后，将重点围绕脂质体主动载药技术的关键要素，如脂质体的制备工艺、药物的装载与释放机制、靶向性的实现策略等进行深入探讨。
还将对脂质体主动载药技术在不同疾病治疗领域的应用案例进行分析，以展示其在实际应用中的潜力和优势。
将对脂质体主动载药技术面临的挑战和未来的发展趋势进行展望，以期为推动该技术的进一步发展提供有益的思考和建议。
1. 脂质体的定义与特性脂质体（Liposomes）是一种由磷脂双分子层构成的纳米级囊泡结构，其内部可以包裹水溶性药物，而双层之间则可以容纳脂溶性药物。
自上世纪60年代被发现以来，脂质体因其独特的药物传递特性，在医药领域受到了广泛关注。
生物相容性与生物可降解性：脂质体的磷脂成分与细胞膜结构相似，因此具有良好的生物相容性。
抗肿瘤纳米药物载体的研究进展一、概述随着生物医学技术的飞速发展，抗肿瘤纳米药物载体已成为当前肿瘤治疗领域的研究热点。
纳米药物载体，作为一种新型的药物输送系统，以其独特的纳米级尺寸和特殊的结构形态，在肿瘤治疗中展现出巨大的应用潜力。
它们能够有效地提高药物的生物利用度、靶向性和稳定性，同时降低药物的毒副作用，为肿瘤治疗提供了新的策略和方向。
抗肿瘤纳米药物载体的研究涉及多个学科领域，包括纳米技术、生物医学、药学等。
研究者们通过设计不同结构和材料的纳米载体，实现对药物的精准输送和控释释放，从而提高肿瘤治疗的疗效和安全性。
已经实现包括纳米微粒、纳米胶束、树枝状大分子等多种结构的纳米药物载体的制备，并且这些载体所使用的材料也越来越多样化，如聚酯、蛋白质多肽等生物相容性良好的材料。
纳米药物载体的主要作用机制是通过与药物分子的相互作用，实现对药物的负载和保护。
在药物输送过程中，纳米载体能够通过改变其表面性质或结构，实现对药物释放速度、稳定性和靶向性的调控。
纳米载体还可以通过与肿瘤细胞表面的特异性受体结合，实现药物的精准定位，提高药物的局部浓度，减少药物在正常组织中的分布，从而减少药物的副作用。
尽管抗肿瘤纳米药物载体的研究已经取得了显著的进展，但仍面临着许多挑战和问题。
如何进一步提高载体的靶向性和稳定性，如何降低载体的制备成本，以及如何将其应用于临床实践中等。
未来的研究需要继续深入探索纳米药物载体的作用机制，优化其设计和制备方法，以期在肿瘤治疗中发挥更大的作用。
抗肿瘤纳米药物载体作为一种新型的药物输送系统，在肿瘤治疗中具有重要的应用价值和发展前景。
随着研究的不断深入和技术的不断进步，相信未来会有更多高效、安全的抗肿瘤纳米药物载体问世，为肿瘤患者带来更好的治疗效果和生活质量。
1. 肿瘤治疗的重要性与挑战作为一种严重危害人类健康的疾病，其发病率和死亡率在全球范围内均呈上升趋势。
肿瘤治疗的重要性不言而喻。
肿瘤治疗面临着诸多挑战。
外泌体在风湿病中作用的研究进展作者：郭晓萱李大可来源：《风湿病与关节炎》2023年第10期【摘要】外泌体是一种纳米囊泡，不同类型的细胞均可以释放，在正常情况下可以从血液、尿液等多种体液中分离得到。
外泌体及其组成成分在细胞间通讯中起着重要作用。
现如今越来越多的研究已经证实，外泌体可以将其所含成分转移到受体细胞中，从而改变受体细胞的生物活性，与各种风湿病的病理生理过程有关，并在疾病治疗和诊断中有着潜在作用。
【关键词】风湿病；外泌体；微小RNA；研究进展；综述外泌体是一种直径为30～120 nm的由磷脂双分子层膜包裹的囊泡，可以参与细胞间的信息传递［1］。
外泌体的成分包括DNA、RNA、蛋白质及脂质物质，其中微小RNA （miRNA）是一种长度为21～23个核苷酸的单链非编码小分子RNA，在人体中通过转录后抑制蛋白质编码基因的表达参与多种生物学途径的调节［2］。
长链非编码RNA（lncRNA）是一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA，与多种自身免疫性疾病的发生、发展有关。
近期的研究表明，外泌体或许可以作为疾病诊断和预后的新生物标志物，并为多种疾病提供新的治疗方向。
1 外泌体与类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）在RA的病理过程中，外泌体主要参与抗原呈递、炎性细胞因子和miRNA的传递以及成纤维样滑膜细胞（FLS）的激活［3］。
RA患者滑膜外泌体具有较高的破骨潜能，这可能导致了其特征性的骨质侵蚀［4］。
FLS来源的外泌体可显著诱导T细胞分化，使辅助性T细胞（Th17）增加，调节性T细胞（Treg）细胞减少，通过调节Treg/Th17平衡影响RA临床症状，因此，可以作为RA的潜在治疗靶点［5］。
程明等［6］实验发现，人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）来源外泌体miRNA-320a对CXC趋化因子配体9有负调控作用，从而抑制RA-FLS增殖和迁移能力。
外泌体来源的miR-155可能通过对趋化因子的调节而促进炎性细胞在RA滑膜中的募集和滞留，进而参与RA的发病［7］。
囊泡作为药物载体的研究进展赵 静，王仲妮*（山东师范大学化学化工与材料科学学院，山东 济南 250014）摘 要： 囊泡有较强的增溶能力，其双层膜具有较好的牢固性和稳定性，作为药物载体给药途径较广，载药稳定性、药物增溶量以及药物生物利用度较高。
本文介绍了囊泡作为药物载体的研究现状，包括囊泡形成，膜结构选择和应用，以及囊泡在口服给药、局部给药和体内给药的应用。
关键词：囊泡；表面活性剂；药物载体中图分类号：R944.5 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2010)03-0129-04收稿日期：2009-12-24基金项目：山东省自然科学基金（Y2006B29），贵州省教育厅自然科学研究项目[黔教科（2007）016号]作者介绍：赵静（1985-），女，硕士研究生，从事胶体与界面化学研究*通讯作者：王仲妮，女，硕士生导师 E-mail: zhongniw@Progress on V esicle as Drug CarrierZHAO Jing, W ANG Zhong-ni(College of Chemistry, Chemical Engineering and Materials Science, Shandong Normal University, Jinan 250014，China )[4] Gould F A. Mitigation of surfactant erythrocyte toxicity byegg phosphatidylcholine[J]. J Pharm Pharmacol , 2008, 52: 1203-1209.[5] Buggins T R, Dickinson P A , Taylor G. The effects ofpharmaceutical excipients on drug disposition[J]. Adv Drug Deliv Rev , 2007, 59(15): 1482-1503.[6] Filardo G, Blasi M D, Galia A, et al . Peracetylated β-cyclodextrinas solubilizer of arylphosphines in supercritical carbon dioxide[J]. J Supercrit Fluid , 2006, 36(3): 173-181.[7] Górnicki A. The hemolysis kinetics of psoriatic red blood cells[J].Blood Cell Mol Dis , 2008, 41(2): 154-157.[8] Pierigè F, Sera fi ni S, Rossi L, et al . Cell-based drug delivery[J].Adv Drug Deliv Rev , 2008, 60: 286-295.[9] Savi ć S, Weber C, Savi ć M M, et al . Natural surfactant-basedtopical vehicles for two model drugs: Influence of different lipophilic excipients on in vitro/in vivo skin performance[J]. Int J Pharm , 2009, 381(2): 220-230.[10] Bandyopadhyay P, Neeta N S. Evidence for vesicle formationfrom 1:1 nonionic surfactant span 60 and fatty alcohol mixtures in aqueous ethanol: Potential delivery vehicle composition[J]. Colloid Surf B: Biointerface , 2007, 58(2): 305-308.[11] Ohnishi M, Sagitani H. The effect of nonionic surfactant structureon hemolysis[J]. J Am Oil Chem Soc , 1993, 70(7): 679-684.[12] Prete P S C, Gomes K, Malheiros S V P. Solubilization ofhuman erythrocyte membranes by non-ionic surfactants of the polyoxyethylene alkyl ethers series[J]. Biophys Chem , 2002, 97: 45-54.[13] Galembeck E, Meirelles N C. Effects of polyoxyethylene chainlength on erythrocyte hemolysis induced by poly[oxyethylene (n ) nonylphenol] non-ionic surfactants[J]. Chem-Biol Interact , 1998, 113: 91-103.[14] 孙岩, 陈怡，等. 烷基糖苷与生物膜的相互作用及其溶血活性[J]. 表面活性剂工业,1998, 2: 3-6.[15] Sanchez L, Vinardell M P. Potential irritation of lysine derivativesurfactants by hemolysis and HaCaT cell viability[J]. Toxicol Lett , 2006, 161: 53-60.[16] Vives M A, Vinardell M P. Erythrocyte hemolysis and shapechanges induced by new lysine-derivate surfactants[J]. Chem-Biol Interact , 1999, 118: 1-18.[17] Vinardell M P. Characteristics of interaction between amphiphilesand membranes[J]. Trends Comp Biochem Physiol , 1996, 2: 73-82.[18] Groot R D, Rabone K L, et al . Mesoscopic simulation of cellmembrane damage, morphology change and rupture by nonionic surfactants[J]. Biophys J , 2001, 81: 725-736.[19] Shalel S, Streichman S, Marmur A. The mechanism of hemolysisby surfactants:effect of solution composition[J]. J Colloid Inter Sci , 2002, 252: 66-76.[20] Lichtenberg D, Opatowski E, Koslov M, et al . Phase boundariesin mixtures of membrane-forming amphiphiles and micelle-forming amphiphiles[J]. BBA-Biomembranes , 2000, 1508: 1-19.[21] Sánchez L, Martínez V, Infante M R, et al . Hemolysis andantihemolysis induced by amino acid-based surfactants[J]. Toxicol Lett , 2007, 169(2): 177-184.药物载体是指能改变药物进入人体内的方式和分布，控制药物释放速度并将其输送到靶器官的体系。
该体系可防止药物短时间降解、失活、排泄以及发生人体免疫反应[1]。
为了寻找合适的药物载体，人们研究了蛋白质、酶蛋白、脂质体以及单克隆抗体（DNA）等各种体系。
其中表面活性剂缔合形成的多种分子有序组合体如胶束、微乳液、液晶及囊泡等，具有包载药物分子的能力以及与生物膜的良好相容性和渗透性，成为药物载体的重要研究领域[2-4]。
20世纪90年代开始研究将立方液晶作为药物载体，其热力学稳定、生物可降解等特性受到关注。
但是，立方液晶体系非常黏稠，需较长的平衡时间，科研、制备和应用均有一定的困难[1,5]。
微乳液稳定性好，与细胞膜有很好的相容性，但靶向性较差且有一定的刺激性，其药物释放机制不很明确，故临床上很少应用 [5]。
囊泡具有双层膜结构，与细胞膜有良好的相容性和渗透性，给药途径广泛，能提高药物增溶量、药物生物利用度和贮存稳定性，引起了普遍关注。
本文介绍了囊泡形成、膜结构选择以及作为药物载体的特点，并总结了近年囊泡作为药物载体的研究进展。
1 囊泡形成及膜结构选择1.1 囊泡的成1965年英国Bangham等[6]用超声波将磷脂分子分散在水中形成了多层囊泡，每层均为脂质的双分子层。
将这种类似生物膜结构的双分子小囊泡作为脂质体，标志着人工制备囊泡的开始。
表面活性剂可以在不加任何能量的情况下自发形成囊泡体系。
2008年Marques等[7]利用阴阳离子表面活性剂复配体系自发形成囊泡，并通过改变表面活性剂疏水链的长度和复配比例调节囊泡大小、表面电荷和渗透性等，引起表面活性剂学、生物学和药物学等众多研究领域的关注，各种表面活性剂复配体系囊泡的自发形成和应用的报道逐渐增多。
同时因pH改变引发表面活性剂囊泡体系释放也受到更多关注。
Borchert等[8]研究了pH导致聚2-乙烯吡啶b-环氧乙烯（P2VP-PEO）嵌段共聚物的破裂，pH降到5以下时发生质子化作用，P2VP-PEO嵌段共聚物溶解，使磷脂膜破裂、溶解和释放。
这为此后药物释放的研究奠定了基础。
1.2 囊泡膜结构的选择天然卵磷脂和聚氧乙烯脂肪醇醚（POE）非离子表面活性剂[9]是目前载药表面活性剂缔合结构囊泡的主要选择。
以大分子嵌段共聚物如聚1,2-丁二烯-聚氧乙烯（PB-PEO）、聚己内酯-聚氧乙烯（PCL-PEO）、聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯（PEO-PPO-PEO）等形成大分子胶束，用于药物和DNA载体，这方面的探索方兴未艾[10]。
