Roche 480II实时荧光定量PCR仪操作规程、维护方法、校准（SOP-1）1 目的：确保Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪正确及正常使用。
2 适用范围：Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪。
3操作人 ** **4标准操作方法：4.1在打开电源以前，先确认以下内容：4.1.1确认电源线插头已插入电源插座中。
4.1.2 Line-Gene与计算机及电源的连接是否可靠。
4.2．核酸扩增仪操作方法：4.2.1依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关,进入“荧光定量PCR检测系统”界面；4.2.2模板制好后，按模拟模板反应孔的样式放入扩增仪反应槽，注意阴阳性、阳性标准品、质控品位置，标本不够用空白管填补；4.2.3打开PCR仪电源开关,预热5分钟；4.2.4点击“运行”键，打开“运行”文件中“达安”试剂程序；4.2.3点击工具栏中的“样本资料”按钮，输入样本资料，并清空缺省样本号；点击“确认”保存样本资料信息，保存的文件名为：年月日+批次（批次用a、b、c表示）如20030516a 文件自动形成后缀名为*.flr4.2.4点击仪器运行的红色按钮“！！”，仪器进入运行状态。
4.2.5检测结果分析：a.程序运行结束后，系统自动进入分析界面并将检测结果自动保存，在荧光定量PCR检测系统界面单击“数据分析”键，进入结果分析界面。
b.定量分析：1）单击“分析模式”菜单中的“定量分析”命令，在分析方法选择中可选择样点拟合法。
2）样点数选择：样点为循环数/荧光强度对数曲线中基线以上各循环的点，系统根据选择的样点数，将被选中的样点拟合成直线，该直线与域值的交叉点即为CT值（仅适合于样点拟合）。
3）击“零点调整”，在弹出零点调整对话框进行设置——手动调整：以设置的起始循环至终止循环荧光强度的平均值为零点设置时尽可能选择样本荧光强度稳定（用“达安”试剂在Line-Gene荧光定量扩增仪对标本及控制品4）检测，通常起始及终止为5-15，结果较理想）。
第 1 页 共 2 页1 目的 Objective规范电热鼓风干燥箱的使用及维护，保证其正常使用。
2 范围 Scope适用于PCR 室电热鼓风干燥箱操作的相关人员。
3 职责Responsibility技术人员：严格遵守操作程序，进行相应项目检测。
仪器设备管理员：按本操作维护程序中的有关要求对仪器进行维护操作。
设备厂家：进行每年一次的全面校准及保养。
4 操作程序4.1 打开电源，打开风机开关，把需要干燥处理的物品放入干燥箱内，关好箱门。
（如图1.1，1.2）。
4.2 按SET 键，进入程序编辑状态。
当所需加热温度与设定温度相同时不需要重新设定，反之则需要重新设定（如图2）4.3 按控温仪的功能键“SET ”进入温度设定状态，此时PV 显示“5P ”，再按加键“AT ”或减键“TIME ”设定所需温度，设定结束按一下进入定时界面，此时PV 显示“5F ” ，再按加键“AT ”设定所需时间，设定结束按一下功能键“SET ”确认（如图3.1，3.2）4.4 关机。
干燥结束后，把电源开关拨至“0”处，断开电源开关。
如马上打开箱门取出物品时小心烫伤。
（如图4）5 校准由厂家定期校准，校准周期为一年一次。
6 维护保养月维护：取出箱体内的所有的不锈钢架子，使用75%的酒精对不锈钢架及箱体内壁进行清洁。
清洁完毕将不锈钢架放回干燥箱内。
7 仪器工作环境室内温度：5-35℃；相对湿度：≤80%。
8 注意事项8.1 干燥箱外壳必须有效接地，以保证使用安全。
8.2 干燥箱应放置在具有良好通风条件的室内，在其周围不可放置易燃易爆物品。
8.3 干燥箱无防爆装置，不得放入易燃易爆物干燥。
8.4 箱内物品放置切勿过挤，必须留有空间，以利热空气循环。
8.5 控制仪参数循环设定中P、I、D、T、LCK功能的各项参数出厂前已调整好，请不要随意调整，如需调整请与厂方联系。
9 支持性文件电热鼓风干燥箱使用说明书10 相关记录表格CBJY-PCR-SOP-005-01 《DHG-9053A电热鼓风干燥箱使用及维护记录表》第 2 页共 2 页。
JJF ××××─201×基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范1 范围本规范适用于48孔或96孔孔板结构的测量范围为（0～120）℃的多通道基因扩增仪（PCR仪）测温系统或者单通道基因扩增仪（PCR仪）测温仪的的校准，其他孔板结构和温度范围的基因扩增仪（PCR仪）测温系统的温度校准可以参考本规范。
2引用文件本规范引用下列文件：JJF 1071-2000 《国家计量校准规范编写规则》JJF 1007-2007 《温度计量名词术语及定义》JJF 1527-2015 《聚合酶链反应分析仪校准规范》YY/T 1173-2010《聚合酶链反应分析仪》ITS-90 1990年国际温标凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语3.1 基因扩增仪（PCR仪），即聚合酶链反应分析仪polymerase chain reaction analyzer基于PCR（聚合酶链反应）技术原理，模拟DNA或RNA的复制过程，在模板、引物、校验和没等存在的条件下，特异扩增已知序列，对其进行检测分析的仪器设备。
[YY/T 1173-2010 3.2]3.2 基因扩增仪（PCR仪）测温系统temperature measuring system for Polymerasechain reaction analyzer用于基因扩增仪（PCR仪）的专用温度校准装置。
3.3 温度校准专用等温块与配件isothermal block and accessory for temperaturecalibration与标准恒温槽配套使用并提供基因扩增仪测（PCR仪）温系统温度校准的洁净温场的辅助装置。
3.4 温度校准专用等温块测试孔testing hole for temperature calibration模拟基因扩增仪控温块内的结构，提供基因扩增仪（PCR仪）测温系统探头布放插孔的专用等温块。
