免疫吸附新技术的介绍
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荧光酶联免疫吸附法1. 简介荧光酶联免疫吸附法(Fluorescence enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)是一种常用的生物分析技术,用于检测和定量分析样品中存在的特定蛋白质或其他生物分子。
该方法基于免疫反应的原理,结合荧光检测技术和酶反应技术,具有灵敏度高、特异性强、操作简便和结果可定量等特点,广泛应用于医学、生物学和生物化学领域。
2. 原理荧光酶联免疫吸附法的原理基于抗原与特异性抗体的结合,通过荧光标记使得抗原-抗体结合物形成荧光信号,经荧光光谱仪检测荧光强度,从而实现对抗原或抗体的检测和定量。
具体步骤如下:1.表面涂覆:将待检样品或纯化的抗原分子均匀涂覆在微孔板(通常是96孔板)的孔底上,使其与固相结合。
2.免疫反应:将用于检测的荧光标记的抗体加入到孔中,与样品中的抗原发生特异性反应,并形成抗原-抗体复合物。
3.洗涤:通过洗涤步骤去除非特异性结合的物质,以降低背景信号。
4.信号放大:加入特定的酶标记抗体,并通过与抗原-抗体复合物的结合,进一步放大信号。
5.底物反应:加入酶的底物,使其与酶反应产生可观察的荧光信号或颜色。
6.信号检测:使用荧光光谱仪或酶标仪检测荧光强度或吸光度,从而实现对抗原或抗体的定量和检测。
3. 优势和应用荧光酶联免疫吸附法具有以下优势:•高灵敏度:荧光信号可以被高灵敏度的检测设备捕获和定量,其信号强度与目标物浓度呈正相关关系。
•特异性强:通过适当选择特异性抗体,可以实现对目标物的高度特异性识别,避免与其他成分的干扰。
•相对较简便:相对于其他生物分析方法,荧光酶联免疫吸附法的操作相对简便,不需要复杂的仪器设备和高端实验条件。
•可定量:通过荧光信号的定量测量,可以对目标物进行定量分析,获得充分的数据。
荧光酶联免疫吸附法在以下领域有广泛的应用:•医学诊断:荧光ELISA常被用于检测病原体感染、抗体水平、肿瘤标志物、药物浓度等医学领域的诊断与监测。
免疫吸附名词解释
免疫吸附(Immunoadsorption,IA)是一种血液净化技术,是近15年发展而来的一种新的血液净化方法。
它利用抗原抗体特异性结合的原理,通过特定的吸附柱将血液中的致病因子或有害物质清除,从而达到净化血液、缓解病情的目的。
免疫吸附疗法可用于治疗多种自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、ANCA 相关性血管炎等,也可以用于治疗原发性血小板减少性紫癜、冷球蛋白血症等疾病。
免疫吸附疗法的主要优点包括对血浆中致病因子清除的选择性高,血浆中有用成分的丢失范围与数量较小,同时避免了血浆输入所带来的各种不良影响。
此外,免疫吸附疗法操作简便,患者痛苦小,不良反应少,且费用相对较低。
需要注意的是,免疫吸附疗法并非万能的,其效果因个体差异而异。
在选择该治疗方法时,患者应在医生的指导下进行,以了解其适应症、禁忌症及可能的风险和不良反应。
此外,患者在日常生活中应注意休息,避免过度劳累和剧烈运动,以免影响治疗效果。
简述酶联免疫吸附测定的原理酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种高度敏感、高通量的免疫技术,常用于检测微量生物分子或抗体的存在与浓度。
ELISA的原理基于抗体与抗原之间高度特异性的结合,以及酶底物反应的可见色素反应。
ELISA的基本原理如下:1. 酶联:先将抗原或抗体固定在固相载体(如微孔板)上。
最常用的固相载体是聚丙烯酸酯(polystyrene),可以牢固地吸附抗原或抗体。
2.结合:在固相载体上固定的抗原与样品中的分子结合,以形成特异性的抗原-抗体复合物。
3.洗涤:为了去除非特异性结合的物质,需要进行反复的洗涤步骤。
4.检测:加入与目标分子相关的抗体,这些抗体经过标记,通常是酶标记。
这些标记的抗体与复合物中的目标分子结合。
5.洗涤:再次进行洗涤步骤,以去除非特异性结合的物质。
6.底物-酶反应:加入合适的底物,底物与酶标记的抗体发生反应,并产生可见的色素物质。
7.读数:用光度计测量反应物的吸光度,吸光度的强度与样品中目标物的浓度成正比。
ELISA的优点是具有高度的特异性和敏感性,可以检测极低浓度的物质。
此外,ELISA还可以同时检测多个样品,并且操作相对简单,不需要昂贵的设备。
ELISA的应用广泛,特别是在医学诊断领域。
例如,ELISA可以用来检测一些疾病的标志物,如乳腺癌、艾滋病、流感等。
此外,ELISA还用于酶抗体检测、药物监测、细菌和病毒的检测等领域。
虽然ELISA是一种非常有用的技术,但也存在一些局限性。
ELISA对样品中的杂质比较敏感,可能会导致假阳性结果。
此外,ELISA只能检测已知的抗原或抗体,无法发现新的目标分子。
此外,ELISA需要时间较长(通常需要2-4小时)。
综上所述,酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种重要的免疫技术,通过抗原与抗体的特异结合和酶底物反应,可以准确、敏感地检测微量生物分子或抗体的存在与浓度。
免疫检测技术前沿与进展免疫检测技术在医学和生命科学领域中扮演着极为重要的角色,它能够快速准确地检测人体内的抗体或抗原,帮助我们了解疾病的发展及人体免疫系统的功能情况。
随着科技的不断进步,免疫检测技术也在不断发展,不断地推动着医学及生命科学领域的进步。
本文将介绍免疫检测技术的前沿与进展。
一、免疫检测技术概述免疫检测技术是指利用人体免疫系统的特异性识别机制,针对特定的抗原或抗体进行检测的技术手段。
常见的免疫检测技术包括酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、放射免疫测定法(radioimmunoassay, RIA)、免疫荧光技术、免疫电泳技术等。
这些技术的发展,为准确检测疾病和研究免疫系统的功能提供了有力的手段。
二、免疫检测技术的前沿发展随着科技的进步和新技术的不断涌现,免疫检测技术也在不断地刷新着我们的认知。
以下将介绍几个免疫检测技术的前沿发展。
1. 荧光免疫检测技术荧光免疫检测技术是近年来兴起的一种高灵敏度的免疫检测方法。
它利用荧光标记的抗体或抗原,通过荧光显微镜等设备对样本进行检测。
相较于传统的免疫检测技术,荧光免疫检测技术具有更高的灵敏度和准确性,可以检测到更低浓度的抗原或抗体。
2. 微流控免疫检测技术微流控免疫检测技术是一种基于微流体芯片的免疫检测方法。
它通过控制微流体的流动,使样本与抗原或抗体在芯片内发生特异性反应,并通过显微镜等设备进行检测。
微流控免疫检测技术具有高通量、快速、灵敏度高的特点,可以同时检测多个目标物质,且样本消耗量较小。
因此,它在生物医学研究和临床诊断中具有广阔的应用前景。
3. 共振贡献检测技术共振贡献检测技术是一种新兴的免疫检测方法。
它利用共振贡献现象对样本进行检测。
共振贡献是指当体系与外界发生共振时,其贡献出的能量达到最大值。
通过对共振贡献的测量,可以实现对样本中抗原或抗体的高灵敏度检测。
共振贡献检测技术具有快速、灵敏度高、无需标记物等优点,将成为未来免疫检测领域的重要发展方向之一。
生物学中的新型免疫检测技术免疫检测是指利用免疫反应进行检测的方法。
它是生物学中一种非常重要的检测技术,通过特异性抗体与待检测样品中的分子相结合,从而实现对分子的定量或定性分析。
随着科技的不断发展,免疫检测技术也不断得到改进和创新。
本文将介绍几种在生物学中常用的新型免疫检测技术。
一、荧光免疫测定法荧光免疫测定法(Fluorescent Immunoassay,FIA)是一种通过荧光标记物来检测的免疫测定法。
它是在酶联免疫吸附试验(ELISA)的基础上发展起来的,具有灵敏度高、特异性强、快速高效、操作简便等优点。
荧光免疫测定法的原理是将与抗原相结合的荧光标记抗体加入反应体系,通过荧光仪检测其荧光强度,从而获得定量结果。
与传统的ELISA相比,荧光免疫测定法具有更高的灵敏度和准确性,因此在检测细胞因子、病原体、药物残留等方面广泛应用。
二、磁性颗粒固相免疫检测法磁性颗粒固相免疫检测法(Magnetic Particle-Based Immunoassay,MPIA)是一种通过磁性颗粒分离和检测的免疫检测法。
它可以快速、准确地检测低浓度的物质,并能够在很短时间内完成检测分析。
MPIA的原理是将特异性抗体固定在磁性颗粒表面,与待测物质相结合后将磁性颗粒沉淀下来,再通过磁场的作用将颗粒聚集在一起,形成磁性团块。
通过测定磁性团块的大小、颜色、荧光等特性来定量或定性分析待测物质。
MPIA不需要多次清洗和离心分离,可以快速、高效地完成检测分析。
三、表面等离子体共振免疫检测法表面等离子体共振免疫检测法(Surface Plasmon Resonance-Based Immunoassay,SPR)是一种通过表面等离子体共振技术来检测分子相互作用的方法。
它与传统的免疫检测法相比,具有灵敏度高、特异性强、检测速度快、无需标记物等优点。
SPR的原理是将特异性抗体固定在传感器芯片的金属薄膜表面,当待测物质与抗体相结合时,会引起表面等离子体共振信号发生变化。
免疫酶联吸附法是一种常用的生物检测技术,它利用抗原抗体反应的特异性来检测样品中的目标物质。
该方法具有灵敏度高、特异性强、分析范围广、结果准确等优点,因此在医学、生物化学、食品安全等领域得到了广泛应用。
免疫酶联吸附法的原理基于抗原抗体反应。
首先,样品中的目标物质与特异性抗体结合,形成一个复杂的复合物。
然后,免疫复合物被转移到固相支持物(如聚苯乙烯分子)上,通过洗涤去除未结合的免疫复合物。
接下来,加入一种酶标记的抗抗体,该抗抗体能够与剩余的免疫复合物结合。
最后,通过显色反应或荧光反应等观察和分析免疫复合物的数量,从而确定样品中目标物质的存在和浓度。
免疫酶联吸附法的优点包括高灵敏度、高特异性、可重复性和易于自动化。
该方法适用于多种样品类型,如血清、血浆、组织切片等。
在食品安全领域,免疫酶联吸附法可用于检测食品中的有害物质,如农药残留、兽药残留等。
在临床诊断中,该方法可用于检测病毒、细菌、肿瘤标志物等生物标志物。
此外,免疫酶联吸附法还可以与其他技术相结合,如质谱技术、基因测序技术等,以实现更精确的生物标志物检测和疾病诊断。
免疫酶联吸附法的应用范围非常广泛,涉及到食品安全、临床诊断、生物科学研究等多个领域。
在食品安全领域,免疫酶联吸附法可用于检测农药残留和兽药残留等有害物质,保障公众健康。
在临床诊断中,该方法可用于检测各种疾病相关的生物标志物,如肿瘤标志物、病毒感染等,为医生提供更准确的诊断依据。
此外,免疫酶联吸附法还可以应用于生物科学研究,为基因表达、蛋白质相互作用等领域的研究提供有力支持。
总之,免疫酶联吸附法是一种重要的生物检测技术,具有高灵敏度、高特异性、可重复性和易于自动化等优点。
在食品安全、临床诊断、生物科学研究等领域中具有广泛的应用前景。
随着技术的不断进步,免疫酶联吸附法有望在未来的生物检测领域发挥更加重要的作用。
酶联免疫吸附试验ELISA一种酶联免疫技术。
用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。
即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。
酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。
其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。
此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。
因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。
此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。
用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。
目前应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。
1•辣根过氧化物酶(HRP)过氧化物酶广泛分布于植物中,辣根中含量最咼,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH3-9,催化反应的最适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH5左右。
此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。
酶联免疫吸附技术的优缺点及解决策略
优点:1、酶联免疫吸附技术(ELISA)是一种快速、灵敏、可重复性较高的检测方法,可用于检测抗原或抗体,可以检测极低浓度的物质。
2、ELISA技术可以高效地检测多种抗原,可以同时对多种抗原进行检测,可以检测多种抗原,也可以检测多种抗体。
3、ELISA 技术不仅可以检测抗原或抗体,还可以检测抗原抗体复合物,可以用于检测蛋白质的抗原性。
4、ELISA技术的操作很简单,可以实现高通量的检测,可以在实验室快速准确地检测抗原或抗体。
缺点:1、ELISA技术的检测精度不高,检测结果受很多因素的影响,可能会出现假阳性或假阴性结果。
2、ELISA技术只能检测特定抗原或抗体,无法检测复杂的抗原抗体复合物。
3、ELISA技术的操作复杂,操作过程需要严格控制,容易受外界环境的影响而出现错误。
解决策略:1、在ELISA技术的操作过程中,应严格控制实验环境,确保实验条件的稳定。
2、ELISA技术的检测结果应进行重复检测,以确保检测结果的准确性。
3、应开发新的ELISA技术,可以检测复杂的抗原抗体复合物,提高检测精度。
4、应开发新的高通量ELISA技术,可以更快速准确地检测抗原或抗体。
elisa酶联免疫吸附实验报告一.实验目的酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称ELISA)是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,ELISA过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原), 再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。
借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。
待测抗体(抗原)的定量与有色产生成正比。
二.实验原理用于免疫酶技术的酶有很多,如过氧化物酶,碱性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰胆碱酯酶,6-磷酸葡萄糖脱氧酶等。
常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶,碱性磷酸酯酶等,其中尤以辣根过氧化物酶为多。
由于酶摧化的是氧化还原反应,在呈色后须立刻测定,否则空气中的氧化作用使颜色加深,无法准确地定量。
辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。
酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。
氯化血红素辅基的最大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm,所以酶的浓度和纯度计算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分浓度为100ml 含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶浓度以mg/ml 计算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm纯度RZ(Reinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。
高纯度HRP的RZ值在3.0左右,最高可达3.4。
用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。
ELISA的基本原理有三条:(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
免疫吸附技术免疫吸附技术是一种重要的生物技术,广泛应用于生物学、医学、环境科学等领域。
本文将从以下几个方面对免疫吸附技术进行介绍。
一、免疫吸附技术的基本原理免疫吸附技术是利用抗体与抗原之间的特异性结合来实现检测、纯化、定量等目的的技术。
抗体是一种特异性识别和结合抗原的蛋白质,而抗原则是引起抗体产生的物质。
在免疫吸附技术中,通常使用抗体作为固定相,将其固定在固体表面上,例如微孔板、磁珠等。
样品中的抗原与固定在表面上的抗体结合,形成抗原-抗体复合物。
通过检测抗原-抗体复合物的信号,可以实现对目标物质的检测、纯化、定量等目的。
二、免疫吸附技术的种类1. 酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是目前应用最广泛的免疫吸附技术之一。
其基本原理是将待测物与特异性抗体结合,再加入与抗体结合的酶标记物质,通过酶标记物质的催化作用,将显色底物转化为可见的产物,从而实现对待测物的检测。
酶联免疫吸附法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,可应用于医学、生物学等领域的检测。
2. 免疫印迹法(Western blot)免疫印迹法是一种常用的蛋白质检测技术。
其基本原理是将待测蛋白质与特异性抗体结合,再将抗体标记物质与抗原-抗体复合物结合,形成可见的带状图案。
免疫印迹法可用于鉴定蛋白质的存在和表达量,具有灵敏度高、特异性强等优点。
3. 免疫磁珠分离法免疫磁珠分离法是利用磁珠作为固定相,将抗体固定在磁珠表面上,实现对目标物质的纯化和分离的技术。
该技术具有操作简便、纯化效果好、适用于大规模分离等优点。
三、免疫吸附技术的应用1. 医学领域免疫吸附技术在医学领域中应用广泛,主要用于检测和诊断疾病。
例如,酶联免疫吸附法可用于检测病毒感染、肿瘤标志物等;免疫印迹法可用于检测蛋白质表达及变异等;免疫磁珠分离法可用于纯化蛋白质、细胞等。
2. 生物技术领域免疫吸附技术在生物技术领域中也得到了广泛的应用。
例如,酶联免疫吸附法可用于检测基因表达水平、蛋白质相互作用等;免疫印迹法可用于鉴定蛋白质结构、功能等;免疫磁珠分离法可用于纯化重组蛋白等。
酶联免疫吸附测定技术嘿,朋友们!今天咱来聊聊酶联免疫吸附测定技术,这可真是个厉害的玩意儿啊!你想想看,就好像我们在一个大迷宫里找宝藏,酶联免疫吸附测定技术就是那盏能帮我们快速找到宝贝的明灯。
它能检测出各种我们肉眼看不到的东西,是不是很神奇?说起来,它的原理其实也不难理解。
就好比一场特殊的“配对游戏”。
我们把要检测的东西当作一个特定的“目标”,然后用专门的“钥匙”去找到它。
这个“钥匙”就是抗体啦,它们能精准地和目标结合在一起。
然后呢,通过一系列的操作和反应,我们就能知道目标有没有被找到啦!做这个实验就像是在精心烹饪一道特别的菜肴。
我们得准备好各种“食材”,也就是试剂和样本。
然后小心翼翼地按照步骤一步一步来,不能有丝毫马虎。
要是哪一步出了差错,那可就像做菜盐放多了一样,效果可能就大打折扣了哦!而且啊,酶联免疫吸附测定技术的应用那可太广泛啦!在医学上,它能帮医生快速诊断疾病。
比如检测某种病毒或者标志物,就像侦探在寻找犯罪线索一样,一找一个准!在科研领域,那更是不可或缺的好帮手,能让科学家们解开很多谜题呢!你说,要是没有它,我们得走多少弯路啊!它就像我们的秘密武器,能让我们在探索未知的道路上更加得心应手。
做这个实验可得有耐心哦!不能着急,要慢慢地、仔细地去操作。
这就跟绣花一样,得一针一线慢慢来,才能绣出漂亮的图案。
有时候可能会遇到一些小挫折,比如结果不太理想,但别灰心呀!咱再重新来一次,说不定就成功啦!总之,酶联免疫吸附测定技术真的是太重要啦!它给我们的生活和科学研究都带来了巨大的帮助。
我们可得好好利用它,让它发挥出最大的作用呀!怎么样,是不是对它有了更深的了解呢?。
免疫吸附技术及护理摘要】目的讨论免疫吸附技术及护理。
方法配合治疗进行护理。
结论建立静脉通道,加强局部观察,保持静脉通道畅通。
在吸附治疗过程中根据患者血管条件及操作规程,适当调节泵出血液的速度和压力,以确保吸附过程的正常进行。
每个吸附周期后及时用pH试纸检查冲洗吸附泵后排出液体的pH值,使其处于中性。
【关键词】免疫吸附技术护理免疫吸附 (简称IA)疗法是近年来医学发展的最新成就。
本疗法是通过体外循环选择性的清除血液中的致病物质达到治疗效果。
主要是对血脂和自身抗体的清除以治疗心脑血管疾病和自身免疫性疾病。
免疫吸附是吸附疗法中的一种血液净化方式。
自1979年美国学者 Terman等第一次将免疫吸附技术应用于临床治疗以来,免疫吸附治疗已逐渐成为血液净化领域的一个重要分支,且日益受到医学界的广泛关注。
免疫吸附是利用抗原—抗体的生物化学反应理论,将抗原或抗体固定在特定的载体上制成吸附柱,当血浆流经吸附柱时,血浆中的抗体或抗原可被吸附柱吸附及清除。
我科收治6例重症肌无力、系统性红斑狼疮患者成功地实施了免疫吸附治疗,取得了很好的治疗效果,现将其护理技术报告如下。
1资料与方法1.1观察对象 6例患者。
其中男性 2例,女性24例,年龄 13~ 6 8岁 ,平均年龄 34岁 ;诊断为系统性红斑狼疮4例 ,重症肌无力 2例。
2 免疫吸附装置免疫吸附系统常由三大部分组成:①动力系统;②血浆分离器;③免疫吸附装置。
另外尚需各类压力、空气、温度、血液监测报警设备。
2.1 动力系统(1)血泵:用于引出血液。
为避免破膜,泵速不宜过大,一般为20~150ml/min。
(2)血浆泵:将血浆从血浆分离器中引出,泵速一般为15~35ml/min。
一般根据吸附柱的饱和情况以及预计要清除物质的量来设定血浆循环量(通常为9000ml)。
2.2 血浆分离器用于分离血浆,使之与吸附柱作用,这样可以避免血细胞与吸附柱直接接触,降低不良反应发生率,提高吸附效能。