《动物学实验》 技能培训手册
南京晓庄学院生命科学系
2007 年 3 月
目 录
技能一．无脊椎动物解剖技能 (2)
技能二．脊椎动物解剖技能 (4)
技能三．分类简索表的编制和使用 (6)
技能四．昆虫标本的采集和制作技术 (7)
技能一．无脊椎动物解剖技能
一．无脊椎动物的处死方法：
实验无脊椎动物的处死方法很多，应根据动物种类和实验目的，以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。最后通过观察其活动状况确定实验动物是否死亡。
无脊椎动物多采用过度麻醉处死法，但不同动物的麻醉剂与用量均不相同。
1．水螅处死法：先用含氯仿的1%丙酮溶液以滴管漫漫滴入，使动物完全麻醉后加入福尔马林溶液（使盛动物的水变成7%福尔马林溶液），使动物杀死。
2．涡虫处死法：用薄荷脑麻醉3小时，然后把薄荷脑和大部分水取出，加入7%福尔马林溶液将其杀死。
3．蛔虫处死法：收集蛔虫洗净后放于盆中加水适量，缓慢添加70%酒精或甲醛。
4．蚯蚓处死法：收集蚯蚓洗净后放于盆中加水适量，缓慢添加70%酒精或甲醛。
5．河蚌处死法：收集河蚌洗净后放于盆中加水适量，缓慢添加70%酒精或甲醛。
6．鳌虾或蝗虫处死法：将鳌虾或蝗虫放于盆中加入70%酒精或10%甲醛溶液。
二．无脊椎动物的解剖方法：
为观察动物的内部结构，常将麻醉或处死后的动物背面向上，爬卧解剖盘中，沿背中线或体侧由后向前剪开。
1．蛔虫的解剖技能：将蛔虫的浸制标本置于蜡盘上，背面朝上。用大头针固定两端，在身体背面略偏背中线处，用大头针从后向前浅浅剪入，拉开体腔。大头针下去的一定要浅，以免损坏生殖器官或穿破肠壁。每剪开1厘米左右，即用大头针向两边固定，这样循序渐进地直至头端。左右大头针应交错向两边固定，针插方向与蜡盘成45℃角，并尽量向外倾斜，使两侧体壁完全展开（如下图）。观察时略加点水，以免虫体干燥，便于观察。
2．蚯蚓的解剖技能：将蚯蚓的浸制标本（或活体）置于蜡盘上，背面朝上。用大头针固定两端，用镊子镊住蚯蚓身体，在身体背面略偏背中线处，用剪刀尖从肛门处浅浅剪
入，剪开体腔。剪刀尖一定要向上翘，以免损坏内部器官或穿破肠壁。每剪开3～5个体节，即用大头针向两边固定，这样循序渐进地直至头端。左右大头针应交错向两边固定，针插方向与蜡盘成45℃角，并尽量向外倾斜，使两侧体壁完全展开（如下图）。观察时略加点水，以免虫体干燥，便于观察。
3．河蚌的解剖技能：活的河蚌由于闭壳肌的作用，两壳紧闭不易打开，解剖时可用左手执傍（使左壳向上），右手执解剖刀，用刀柄自两壳腹面中缝和处平行插入，扭转刀柄，将壳稍撑开，然后插入镊子柄取代刀柄，取出解剖刀，以其柄将一壳内表面紧帖壳的皮肤皱褶轻轻分离，在以刀锋紧贴壳切断在前后背缘处的闭壳肌，壳即打开。或在解剖前先将河蚌放入35℃左右的温水中，待其伪足伸出后，继续加热水温以麻醉河蚌，直至用手触摸斧足不太收缩为止，即可用上述方法解剖。将左壳取下，进行观察。
4．鳌虾或蝗虫的解剖技能：用剪刀将虾头胸甲的一侧剪掉，露出鳃腔中的鳃，观察呼吸系统。然后用剪刀沿头胸甲向前剪，并用镊子将头胸甲与下面的器官轻轻剥离移去，再用剪刀沿腹部两侧由前向后剪，将腹部背面的外骨骼去掉。即可进行观察。
技能二．脊椎动物解剖技能
一．脊椎动物的处死方法：
实验动物的处死方法很多，应根据动物种类和实验目的，以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。最后通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，确定实验动物是否死亡。
脊椎动物多采用过度麻醉处死法，但不同动物的麻醉剂与用量均不相同。
1．过量麻醉处死法：此法多用于处死蟾蜍、豚鼠和家兔。让动物吸入过量的乙醚或快速过量注射非挥发性麻醉药，使实验动物中枢神经过度抑制，导致死亡。
2．窒息处死法：此法多用于处死鸟类或哺乳类。将鸟类或哺乳类头部放入水中窒息处死，或用手中指固定鸟类下颌，拇指与食指分别堵住两鼻孔，使鸟类窒息死亡。
3．双毁脊髓法：此法多用于处死青蛙（蟾蜍）。用手指将青蛙（蟾蜍）头骨向上抬起，头骨后有一凹窝，此部位稍前既是枕骨大孔，用探针从这儿浅刺入内，在把探针转90度与身体平行刺入颅腔，搅动几下，破坏脑髓，再转向后刺入脊椎椎管，使脊髓被破坏，青蛙（蟾蜍）四肢处于软直状态即可。
4．空气栓塞法：此法多用于处死家兔、猫和犬等。向实验动物静脉内注入一定量的空气，形成肺动脉或冠状动脉空气栓塞，或导致心脏内充满气泡，从而影响回心血液量和心输出量，引起循环障碍、休克或死亡。
5．击打头盖骨法：此法多用于处死豚鼠和家兔。操作时抓住实验动物的尾部（家兔抓后肢）并提起，用木锤等硬物猛烈打击实验动物头部，使大脑中枢遭到破坏，实验动物痉挛并死亡。
6．颈椎脱臼处死法：此法多用于处死大、小鼠。是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指和食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，实验动物立即死亡。
二．脊椎动物的解剖方法：
为观察动物的内部结构，常将麻醉或处死后的动物腹面向上，仰卧解剖盘中，沿腹中线偏左（右）或由后向前剪开。
1．鲫鱼内部结构的观察：将鱼体左侧面朝上放于解剖盘中，从生殖孔沿腹中线，用剪刀向前剪至鳃盖骨下。再由生殖孔向上沿脊椎向前剪至鳃盖骨后，最后沿鳃盖骨后缘由上向下剪去一侧体壁。剪刀尖一定要向上翘，以免损坏内部器官或穿破肠壁。然后就可观察鱼的内脏。
2．两栖类、鸟类和哺乳类内部结构的观察：将麻醉或处死后的动物腹面朝上，放于解剖盘中，鸟类或兽类要用水打湿腹部，分出腹中线。在身体腹面略偏腹中线处，用剪刀尖从由肛门处向前剪至肩带前，剪开体腔。剪刀尖一定要向上翘，以免损坏内部器官或穿破肠壁。然后就可观察动物的内脏。
3．鲫鱼、蟾蜍、家鸽和兔子脑的观察：从头背部进行解剖，由脑颅骨后缘剪开，逐步剔除周围骨骼、组织，不要剪得太深以免损坏脑组织，影响观察。
技能三．分类简索表的编制和使用
检索表是分类鉴定的工具，检索表所选用的动物特征是最明显的外部特征，而且是严格的对称形态，用最简练、明确的文字表达出来，以利使用。常用的检索表有以下两种形式。
一．单项式：
单项式又叫连续式，双歧括弧式。同一内容的两项相对特征，分别在开头数字行及括弧内数字所示行中描述，二行之一必与待查的动物标本特征相符。检索时，先查开头数字一行特征，如相符，便按数字继续往下查；若不相符，则查括弧内数字所示一行。以此类推，直至查出名称为止。单项式检索表好用，但初学者不易编写。
例：1(2)鳃裂6～7个；背鳍1个┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄六鳃鲨目
2(1)鳃裂5个；背鳍2个
3(6)具臀鳍
4(5)鳍前方具一硬棘┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄虎鲨
目
5(4)鳍前方无硬棘┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄真鲨
目
6(3)臀鳍、硬棘或有或无┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄角鲨目 二．双项式：
双项式又称并列式检索表。同一内容的两项相对特征，在一条内并列为二行描述，其中之一必与待查的动物标本特征相符。检索时，按条文前面的数字进行，看两行中哪一行与标本特征相符。末尾的数字则表示下一步应查的那一条，以此类推，直至查出名称为止。单项式检索表与双项式检索表可以互相转换，双项式检索表检索速度较单项式
检索表略慢，但初学者容易编写。
例：1.翅无,或极退化┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄2 翅两对或一对┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄23 2.无足，幼虫状，头和胸愈合，内寄生于膜翅目、半翅目和直翅目等昆虫体内，
仅头胸部露出寄主腹节外┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄捻翅
目
有足，头和胸不愈合,不寄生于昆虫体内┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄3 3.腹部除外生殖器和尾须外有其他附肢.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄4 腹部除外生殖器和尾须外无其他附肢.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄7 4.无触角；腹部12节，第1～3节各有1对短小的附肢┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄原尾目 有触角；腹部最多11节┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄5 5.腹部至多6节，第1腹节具腹管，第3腹节有握弹器，第4腹节有一分叉的弹器┄弹尾目
腹部多于6节,无上述附肢，但有成对的刺突或泡┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄6 6.有1对长而分节的尾须或坚硬不分节的尾铗，无复眼┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄双尾目 除1对尾须外还有1条长而分节的中尾丝，有复眼┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄缨尾目 7.口器咀嚼式.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄8 口器刺吸式或舐吸式、虹吸式等┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄18 8.腹部末端有1对尾须,或尾铗┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄9 腹部无尾须┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄15 9.尾须呈坚硬不分节的铗状┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄革翅目 尾须不呈铗状┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄10 10.前足第1跗节特别膨大,能纺丝┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄纺足目 前足第1跗节不特别膨大,不能纺丝┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄11 11.前足捕捉足.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄螳螂目 前足非捕捉足.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄12 12.后足跳跃足.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄直翅目 后足非跳跃足.┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄13 13.体扁，卵圆形，前胸背板很大,常向前延伸盖住头部┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄蜚蠊目 体非卵圆形,头不为前胸背板盖住┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄14 14.体细长杆状 ┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄竹节虫目 体非杆状，社会性昆虫 ┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄┄等翅目
技能四．昆虫标本的采集和制作技术
一．标本的采集：
1．网捕：采集能飞善跳的昆虫种类，可采用网捕。正在飞行的昆虫，可用空网，迎头捕捉或从旁掠取。当昆虫进网后迅速摆动网柄，将网袋下部连虫带网翻到网框上，取虫时，先用左手握住网袋中部，空出右手来取毒瓶，将毒瓶伸入网内，把虫扣住装入瓶中。大型蛾蝶也可先隔网控住其胸部，使之失去活动能力之后，放入毒瓶。生活于草丛或灌木丛中的昆虫，要用扫网边走边扫捕。
2．振落：利用许多昆虫的假死性，可通过摆动和敲打植物，树技，把它们振落，加以捕捉。有些无假死性昆虫，经振动虽不落地，由于飞行暴露了目标，便可网捕。
3．诱集：利用昆虫的某些特殊趋性或生活习性来采集昆虫，常用的方法在灯光诱集，食物诱集，场所诱集。
（1）灯光诱集：适于有趋光性的昆虫，可设置诱集，诱虫灯最好用20瓦或40瓦的日光灯，也可用普通的电灯或汽灯。灯下装一漏斗和毒瓶，诱采的昆虫经过漏斗落入毒瓶而被毒死。也可在漏斗下装一个不同网孔和分层筛，减少虫子互相撞伤，保持虫体特征的完整。也可在炎热无风的黑夜，在采集的地方点盏荧光灯，张挂一块白布，就可诱到大量虫子。
（2）食物诱集：某些具有趋化性的昆虫，可以利用这些昆虫有正趋性的食物诱饵来诱集。如利用糖醋液诱集粘虫，小地老虎和种蝇等。
（3）场所诱集：可利用某些昆虫的生活习性，进行诱集。如草堆诱集地老虎幼虫、蟋蟀；果树上束草，捕捉多种越冬害虫。
此外性诱剂也是一种采集的方法。
4．挖掘：对蛴螬、金针虫、地老虎等地下害虫，可用挖掘方法捕捉。
5．饲养：对寄生性昆虫，可采集宿主虫体饲养，即可得到寄生性昆虫。对于不认识的种类，饲养其幼虫或蛹，羽化后的成虫，通过鉴定，达到认识的目的。饲养可获得一种昆虫的多个虫态。
采到标本后，要及时做好采集记录，包括编号，采集日期，采集地点，采集人等。当时的环境情况。寄生以及害虫的生活习性等也要记录下来。同时还要注意当地的气象记录，如气温、降水量、风力等也要加以记载。
昆虫标本，应尽量设法保持其完整，若被损坏，就会失去应有价值。昆虫的翅、足、触角及蛾蝶的鳞片等极易碰损，故应避免直接用手捕捉。
二．标本的制作：
1．蛛形类标本制作：采到蜘蛛等标本，一般都可投入75％的酒精或5％福尔马林等浸渍液，制成浸制标本。如不浸渍，采集后，直接制作干制标本，需剖腹取出内脏，填充脱脂棉，经固定、整姿，制成干制标本。
2．多足类标本制作：蜈蚣体壁坚硬，捕捉后，先用注射器从肛门向体腔内注入甲醛，杀死后经固定，整姿，制成干制标本。蜈蚣马陆等多足类动物，一般多制成浸制标本，但马陆浸清时多卷缩成团，躯体不能伸展，所以在浸前也应向体腔内注入甲醛液。
3．昆虫标本制作：
应根据不同昆虫的特点和用途，制成针插，展翅的干制标本和浸渍标本，生活史标本，玻片标本和包埋标本，现主要个介绍下列几种：
（1）针插标本的制作：一般用来制作成虫标本。
① 制作用具：昆虫针是用不锈钢制成的，长度为37—40毫米，依粗细分为1、2、3、
4、5号。号数越大，针越粗。另外还有一种更小的“微针”。长度为12mm，是制作微小昆虫标本供二重插时用的。
三级台：由一块整木板制成，长7．5cm，宽3cm，高2．4cm。分为三级，第一级高8mm，第二级1．6cm，第三级高2．4cm，每级中间有一小孔以便插针。三级台用来，针插标本时，使所制作的标本及其标签插针高度一致。
整姿板：用高2．5cm的木框，上面盖以软木板作成，或用厚的硬泡沫塑料板，整姿更为方便。
展翅板：多用较软的木料制成。板中有一槽沟，中央铺一层软木板。沟旁的两块板其中一块是可活动的，便于调节中间的距离，以适应不同在小昆虫展翅的需要。也可用硬泡沫制成展翅板。
台纸：用硬一些纸，剪成长方形或三角形，用来粘制小型昆虫标本。
粘虫胶：修补昆虫标本用，采用木工用的白乳胶效果也较好。
② 制作方法：虫体针插标本应按昆虫的大小，选用适当粗细的昆虫针，夜蛾类一般用3号针。天蛾等大蛾类用4或5号针。盲蝽蟓，叶蝉，小蛾类用1或2号针。虫针在虫体上的针插位置是一定的，例如鳞翅目、膜翅目等都从中胸背面正中央插入；同翅目
从中胸的中间偏右的地方插针；直翅目插在前胸背板的右面靠后处，鞘翅目插在右鞘翅基部的1/4处；半翅目插在中胸不盾片的中央偏右处。针插部位的规定：一方面是为了插得牢固，另一方面是为了使插针不破坏虫体的鉴定特征。
虫体在针上有一定高度，在制作时，可将插有虫的针转过来，放入三级台第一级的小孔中，使昆虫体背部贴在合面上，使成虫体上部的留针长度为8mm。
微小昆虫，如飞虱、米象、寄生蜂等，可用重插法或三角纸点胶法来作。重插法是先用“微针”从虫体的胶面插入固定在一块长方形的小软木片上，再照昆虫的插法，将软木片插在普通昆虫针上。三角纸点胶法是以卡片纸剪成长数毫米的小三角纸片，尖端沾少许白乳胶或万能胶贴在虫体的中足的前足间，再用普通昆虫针从小三角形的底边插入。使它达到与昆虫一样的高度。小三角纸的尖端向左，虫体的前端向前。
整肢与展翅：虫体插针后，还需将触角和足的姿势加以整理，使前足向前，后足向后，中足向左右；触角短的伸向前方，长的伸向背侧面，使虫体两侧的附肢保持对称、自然、美观。
腹部膨大柔软而不易干燥的昆虫，如螳螂、螽蜞、蝼蛄、蝗虫等，容易腐烂变形，或者体内还会渗透出油脂来。因此，可将新鲜标本从腹部的侧膜区剪一条小口，取出内脏，用脱脂棉填充成原形，再针插保存。
蛾蝶、蜻蜓、蜂等昆虫针插后还需展翅。展翅时，把已插针的标本插在展翅板槽底软木板上，使虫体背面与两侧木板平行，并调节活动的木板，使中间的空隙与虫体相适应，然后用昆虫针插在较粗的翅脉上，将左右前翅向前拉。鳞翅目，以两翅后缘是一直线为准，而蜻蜓目昆虫，则以后翅的前缘成一直线为准，前翅后缘，稍向前倾。蝇类和蜂类以前翅的尖端与头粗齐准。把前翅暂时固定在展翅板上，再拉后翅，蛾蝶类的后翅前缘压在前翅后缘下，左右对称，充分展平。最后用光滑的纸条压住，以大崐头针固定后，放通风干燥处，等标本完全干燥后取下。
纸条压翅法操作麻烦，改用玻片压翅法，不仅简化手续，加快展翅速度，而且能获得翅展平整的标本。
每一个针插昆虫标本，都放附有两种标签，一种写采集时间，地点，寄主。另一种写昆虫的名称。
3．浸渍标本的制作：一般昆虫的卵，幼虫，蛹，或直翅目，鞘翅目，半翅目，同翅目，膜翅目，双翅目等成虫，都可制成浸渍标本保存。一般浸渍前要使虫体饥饿1—2天，让体内粪便排除干净或先将活虫用热水杀死再投入浸渍液内保存。