基因工程名词解释
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名词解释:的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的1.Gene Engineering基因工程:在体外把核酸分子(DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新组合(重组DNA 新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。
人类基因组计划:是一项规模宏大,跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体2.HGP从而绘制人类基因组图谱,并且辨识其载有的亿个碱基对组成的核苷酸序列,(指单倍体)中所包含的30基因及其序列,达到破译人类遗传信息的最终目的。
3.Gene Therapy 基因治疗:是指将外源正常基因导入靶细胞,取代突变基因,补充缺失基因或关闭异常基因,达到从根本上治疗疾病的目的。
.基因诊断:是利用重组DNA 技术作为工具,直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷。
Vector载体:是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增或表达的工具。
plasmid质粒:是生物细胞内固有的、能独立于宿主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
shuttle vector穿梭载体:是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。
质粒不相容性;同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象,称为质粒不相容性. multiple cloning sites,MCS多克隆位点:DNA载体序列上人工合成的一段序列,含有多个限制内切酶识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。
α-互补:LacZ'基因的互补:lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶基因的突变体之间实现互补。
粘性末端:指DNA分子的两端具有彼此互补的一段突出的单链部分, 这一小段单链部分和同一分子的另一端或其它分子末端的单链部分如果互补的话,则能通过互补碱基之间的配对, 形成双链。
并在DNA连接酶的作用下, 使同一DNA 分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子。
名词解释【基因工程】:在体外对不同生物的遗传物质(基因)进行剪切、重组、连接,然后插入到载体分子中(细菌质粒、病毒或噬菌体DNA),转入微生物,植物或动物细胞内进行无性繁殖,并表达出基因产物。
【限制性核酸内切酶】:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列(4-8bp),并由此处切割DNA双链结构的核酸内切酶。
【识别序列】:限制性核酸内切酶在双链DNA上能够识别的特殊核苷酸序列被称为识别序列。
【酶切位点】:DNA在限制性核酸内切酶的作用下,使多聚核苷酸链上磷酸二酯键点开的位置被称为切割位点。
【粘性末端】:是指含有几个核苷酸单链的末端,可通过这种末端的碱基互补,使不同的 DNA片段发生退火。
【平末端】:限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时产生的平齐的末端。
【同裂酶】:一些来源不同的但能识别位点的序列相同的限制性内切酶。
【同尾酶】:一些来源不同且识别序列不同,但能产生相同粘性末端的限制性内切酶。
【DNA的甲基化程度】:DNA被甲基化酶甲基化,识别序列中的核苷酸一旦被甲基化,就会影响内切酶的切割效率。
【位点偏爱】:对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象【内切酶的star活性】:某种限制性核酸内切酶在特定条件下,可在不是原来的识别序列处切割DNA,这种现象称为star活性。
【末端转移酶】:一种能将脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)加到某DNA片段上3’-OH基上的酶。
【DNA连接酶】:借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA双链,DNA片段紧靠在一起的3’-OH末端与5’-PO4末端之间形成磷酸二酯键,使两末端连接【DNA聚合酶】:以DNA为复制模板,使DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
【反转录酶】:与DNA聚合酶作用方式相似:5’→3’聚合,模版是mRNA,合成DNA【碱性磷酸酶】:能够催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA(或RNA)片段的5’-P 末端转换成5’-OH末端。
基因工程名词解释1、基因工程:对不同的遗传物质在体外进行剪切、组合和拼接,使遗传物质重新组合,然后通过载体转入微生物、植物和动物细胞内,进行无性繁殖,并使所需的基因在细胞中表达,产生人类所需的产物或新生物类型。
2、重组DNA技术:是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后再转入另一个生物体(受体)内,按照人们的意愿稳定遗传并表达新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。
3、基因xx:经无性繁殖获得基因许多相同拷贝的过程。
通常是将单个基因导入宿主细胞中复制而成。
(包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组的DNA,然后送入受体生物中去表达。
从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。
)4、限制性内切核酸酶:一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸水解酶。
5、修饰酶:体内有些酶可在其他酶的作用下,将酶的结构进行共价修饰,使该酶活性发生改变,这种调节称为共价修饰调节(covalentmodificationregulation),这类酶称为修饰酶(prosessing enzyme)。
6、同裂酶:识别相同序列的限制酶称同裂酶,但它们的切割位点可能不同。
(同序同切酶、同序异切酶、“同功多位”等)7、同尾酶:切割不同的DNA片段但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。
8、位点偏爱:某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割,即对不同位置的同一个识别序列表现出不同切割效率。
9、星星活性:极端非标准反应条件下,限制酶能够切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。
10、甲基化酶:原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员,用于保护宿主DNA不被相应的限制酶所切割。
11、DNA聚合酶:以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
基因工程是要按人们的意愿去有目的地改造,创建生物遗传性,因此最基本的工程就是得到目的基因或核酸序列的克隆。
分离或改建的基因和核酸序列不能自身繁殖,需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现功能。
基因工程( genetic engineering ):狭义上讲,基因工程是指将一种或多种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。
又称DNA重组技术(DNA recombination)广义上讲,基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
供体、受体、载体构成了基因工程的三要素基因工程的工具酶(instrumental enzyme of gene engineering)是应用于基因工程各种酶的总称,包括核酸序列分析、标记探针制备、载体构建、目的基因制取、重组体DNA制备等所需要的酶类。
R-M系统是细菌安内御外的积极措施。
细菌R-M系统的限制酶可以降解DNA,为避免自身DNA的降解,细菌可以修饰(甲基化酶)自身DNA,未被修饰的外来DNA则会被降解。
限制性核酸内切酶(限制酶):在细胞内能够识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列,并对DNA分子进行切割的一种酶。
同裂酶:来源不同的限制酶识别相同的核苷酸靶序列。
产生同样的切割,形成同样的末端。
同尾酶:来源不同,识别的核苷酸靶序列也不相同,但切割后DNA分子产生的粘性末端EcoRⅠ在正常情况下识别GAATTC序列发生切割,但如果缓冲液中甘油浓度超过5%,其识别位点发生松动,可在AATT处发生切割,EcoRⅠ这种特殊的识别能力叫做星活性,用EcoR Ⅰ*表示。
星活性可造成位点切割机率不等,降解不完全。
甲基化酶也称修饰酶(modification enzyme),用来修饰限制酶的识别序列,在该序列位点的胞嘧啶(C)5-氨基上加一个甲基,使得该序列可以被限制性内切酶识别而免于切割。
基因工程的名词解释有哪些基因工程是一门涉及生物技术和遗传学的领域,通过人为干预和改变生物体的基因组,以改善物种的特征或开发新的功能。
它在许多领域产生了深远的影响,包括农业、医学、食品工业和环境保护等。
1. 基因:基因是生物体遗传信息的基本单位,它是DNA分子的一部分,包含编码特定蛋白质的遗传指令。
基因决定了生物体的性状和功能。
2. 基因组:基因组是生物体所有基因的总和。
每个生物体的基因组大小和组成都不尽相同。
3. DNA重组:DNA重组是基因工程的核心技术之一,它指的是将来自不同源的DNA片段重新组合。
通过这种方法,可以将具有特定功能的基因导入另一个生物体中,以改变其特性或功能。
4. 限制性内切酶:限制性内切酶是一种能够识别和切割DNA特定序列的酶,也是DNA重组的关键工具。
通过限制性内切酶的作用,可以在DNA链上切割出特定的片段。
5. 载体:载体是基因工程中用于携带和传递外源DNA的工具。
常见的载体包括质粒、病毒和人工染色体等。
通过携带外源DNA,载体可以将外源基因导入目标生物体中。
6. 转化:转化是指将外源DNA导入到目标生物体中的过程。
转化方法包括微注射、基因枪、电穿孔和冷冻融合等。
7. 转基因生物:转基因生物是指通过基因工程技术插入外源基因并稳定遗传的生物。
转基因生物可以具有与其自然亲本不同的属性和特征。
8. 基因编辑:基因编辑是一种精确修改生物体基因组的技术,能够实现DNA序列的替换、插入或删除。
常用的基因编辑技术包括CRISPR-Cas9系统和锌指核酸酶。
9. 基因药物:基因药物是通过基因工程技术制备的用于治疗疾病的药物。
基因药物可以通过携带特定基因序列,修复或替代受损细胞中的基因功能。
10. 基因检测:基因检测是利用分子生物学和遗传学技术对个体DNA进行分析,以确定患有某种遗传病的风险或评估个体对特定药物的反应性。
基因检测可以为个体提供个性化的医疗和治疗方案。
基因工程为人类提供了许多新的机会和挑战。
基因工程名词解释1.载体:能载带微量物质共同参与某种化学或物理过程的常量物质,在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。
2.克隆:科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术,其本身的含义是无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。
3.限制性内切酶:一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。
4.基因文库:将所有的重组DNA分子都导入宿主细胞进行扩增,得到分子克隆的混合体,这样一个混合体称为基因文库。
5.cDNA基因文库:是指以 mRNA为模板,在反转录酶及其他一系列酶的催化作用下所获得的双链cDNA,经与适当载体连接并转化到寄主细胞内进行扩增,由此而构成包含着相应基因编码序列的一群克隆。
6.粘性末端:当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段,即5’突出。
这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过分子内反应环化。
因此称这些片段具有粘性,叫做粘性末端。
7.基因组:指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。
8.操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起,转录生成一个mRNA,然后分别翻译成几种不同的蛋白质。
这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶,或共同完成某种功能。
这些结构基因与其上游的启动子,操纵基因共同构成转录单位,称操纵子。
9.启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件,包括至少一个转录起始点。
在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。
有时,将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。
10.增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件,最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA,可使旁侧的基因转录提高100倍,其后在多种真核生物,甚至在原核生物中都发现了增强子。
基因工程名词解释1.基因工程:指将一种或多种生物体(供体)的基因或基因组提取出来,或者人工合成的基因,按照人们的愿望进行严密的设计,经过体外加工重组,转移到另一种生物体(受体)的细胞内,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。
2.复制子:DNA复制时从一个DNA复制起点开始最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。
DNA中发生复制的独立单位称为复制子。
3.半保留复制:即DNA复制时亲代DNA的两条链解开,每条链作为新链的模板,从而形成两个子代DNA分子,每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的链。
4.一个单位的限制性核酸内切酶:在合适的温度和缓冲液中,在50ul反应体系中,1h完全降解1ug底物DNA所需要的酶量。
5.星号活性:指限制性内切酶的识别位点测定时,当改变测定条件时,有些酶的识别位点也随之改变,可能切割一些与特异识别序列相类似序列的现象。
6.一个韦氏单位:指在37度,20分钟内催化1nmol 32P从磷酸根置换到y,B-32P-ATP所需要的酶量。
7.载体:指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”。
8.质粒的不亲和性:也称不相容性,是指在没有选择压力的情况下,两种不同质粒不能够在同一个宿主细胞系中稳定地共存的现象。
9.多克隆位点(MCS):指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制性和酸内切酶酶切位点的DNA片段。
10.阅读框架:指RNA或DNA中,一组连续且不重复的3核苷酸密码子11.T-DNA:能转移到植物细胞内的DNA片段质粒拷贝数:是指生长在标准的培养基下每个细菌细胞中所含有的质粒DNA分子的数目。
12.探针:是指经放射性或非放射性等物质标记的已知或特定的DNA或RNA序列。
13.DNA的变性:通过加热或变性作用可使DNA双螺旋的氢键断裂,双链解离,形成单链DNA。
14.DNA复性:解除变性条件之后,变性的单链可以重新结合起来,形成双链。
15.平台效应:是指PCR循环的后期,合成的产物到达0.3~1pmol的水平,由于产物积累,使原来以指数增加的速率变成平坦曲线,扩曾产物不在循环次数而明显上升。
基因工程的名词解释
基因工程是一种利用生物技术手段改变生物体内遗传信息的技术,包括利用DNA分子作为工具来切割、重组、连接和修饰DNA分子,从而改变生物的性状和功能。
在基因工程中,通常会使用一些特定的工具和技术来操作DNA分子。
这些工具和技术包括:基因编辑技术,如CRISPR/Cas9、Taq酶、文库筛选等;DNA片段的制备,如扩增、剪切、合成等;DNA连接技术,如基因连接酶、基因转化技术等;以及基因转化材料,如植物、细菌、酵母等。
基因工程的应用范围非常广泛,包括生物医学研究、农业改良、食品加工、药物开发等。
在生物医学研究中,基因工程可以用于治疗疾病、开发新药物和改变生物体的性状。
在农业改良中,基因工程可以用于提高作物产量、改善作物品质、降低生产成本等。
在食品加工中,基因工程可以用于改变食品的口感、味道和营养价值等。
除了传统的生物学方法外,基因工程还采用了一些现代技术手段,如基因芯片、基因组学、蛋白质结构预测等。
这些技术的发展使得基因工程的研究和应用更加高效和精准。
基因工程也有一些伦理和法律问题需要解决,如基因隐私、基因歧视、遗传信息保护等。
因此,在基因工程的研究和应用中,需要遵循伦理和法律规定,确保其安全性和合法性。
名词解释:1.Gene Engineering基因工程:在体外把核酸分子(DNA的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。
2.HGP人类基因组计划:是一项规模宏大,跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体(指单倍体)中所包含的30亿个碱基对组成的核苷酸序列,从而绘制人类基因组图谱,并且辨识其载有的基因及其序列,达到破译人类遗传信息的最终目的。
3.Gene Therapy 基因治疗:是指将外源正常基因导入靶细胞,取代突变基因,补充缺失基因或关闭异常基因,达到从根本上治疗疾病的目的。
.基因诊断:是利用重组DNA 技术作为工具,直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷。
Vector载体:是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增或表达的工具。
plasmid质粒:是生物细胞内固有的、能独立于宿主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
shuttle vector穿梭载体:是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。
质粒不相容性;同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象,称为质粒不相容性.multiple cloning sites,MCS多克隆位点:DNA载体序列上人工合成的一段序列,含有多个限制内切酶识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。
α-互补:LacZ’基因的互补:lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶基因的突变体之间实现互补。
粘性末端:指DNA分子的两端具有彼此互补的一段突出的单链部分, 这一小段单链部分和同一分子的另一端或其它分子末端的单链部分如果互补的话,则能通过互补碱基之间的配对, 形成双链。
并在DNA连接酶的作用下, 使同一DNA分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子。
★基因工程概念(狭义)是在分子生物学和分子遗传学等学科综合发展的基础上,于上世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。
应用基因工程技术完全打破生物界物种的界限,在体外对大分子DNA进行剪切、加工、重组后引入细胞中表达,使其具有新的遗传特性,从而定向改造生物。
广义:指DNA重组技术的产业化设计与应用,包括上下游技术。
上游技术指外源基因重组、克隆和表达载体构建;下游技术则涉及含有重组外源基因的生物细胞的大规模培养以及外源基因表达产物的分离、纯化过程。
★基因: 是一个含有特定遗传信息的核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
基因特点:基因是实体:DNA或RNA(如烟草花叶病毒);基因是具有一定遗传效应的DNA分子中特定的核苷酸序列;基因是遗传信息传递和性状分化发育的依据;基因是可分的,根据其编码产物的功能,可分为编码蛋白质基因、tRNA和rRNA,以及不转录却有特定功能的DNA区段(如启动子、操作子基因等)。
★两个实验:首先用肺炎双球菌实验证明基因的化学本质DNA分子的是美国著名微生物学家O.T. Avery于1944年发表;1952美国冷泉港喀内基遗传学实验室的A.D.Hershey用35S和32P分别标记噬菌体外壳蛋白质与DNA,感染大肠杆菌,证明了Avery的结论。
★顺反子:在现代的遗传学文献中,顺反子和基因这两个术语是相互通用的,一般说来,一个顺反子就是一个基因,大约含有1500个核苷酸对,是由一群突变单位和重组单位组成的线性结构。
因此,基因不是最小单位,它仍然是可分的;并非所有的DNA序列都是编码基因,而只有其中某一特定的多核苷酸区段才是基因的编码区。
★基因家族是真核生物基因组中来源相同,结构相似,功能相关的一组基因。
★假基因:具有与功能基因相似的核苷酸序列,但由于有许多突变以致失去了原有的功能,所以是没有功能的基因,常以ψ表示。
现已在大多数真核生物中发现了假基因。
★基因工程诞生:核酸限制性内切酶:1972年H. Y. Boyer发现EcoRI位点GAATTC。
名词解释:1.Gene Engineering基因工程:在体外把核酸分子(DNA的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。
2.HGP人类基因组计划:是一项规模宏大,跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体(指单倍体)中所包含的30亿个碱基对组成的核苷酸序列,从而绘制人类基因组图谱,并且辨识其载有的基因及其序列,达到破译人类遗传信息的最终目的。
3.Gene Therapy 基因治疗:是指将外源正常基因导入靶细胞,取代突变基因,补充缺失基因或关闭异常基因,达到从根本上治疗疾病的目的。
.基因诊断:是利用重组DNA 技术作为工具,直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷。
Vector载体:是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增或表达的工具。
plasmid质粒:是生物细胞内固有的、能独立于宿主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
shuttle vector穿梭载体:是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。
质粒不相容性;同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象,称为质粒不相容性.multiple cloning sites,MCS多克隆位点:DNA载体序列上人工合成的一段序列,含有多个限制内切酶识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。
α-互补:LacZ’基因的互补:lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶基因的突变体之间实现互补。
粘性末端:指DNA分子的两端具有彼此互补的一段突出的单链部分, 这一小段单链部分和同一分子的另一端或其它分子末端的单链部分如果互补的话,则能通过互补碱基之间的配对, 形成双链。
并在DNA连接酶的作用下, 使同一DNA分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子。
名词解释一RNase:RNA水解酶Restriction endonucleasr:限制性核酸内切酶RBS:核糖体结合位点SD sequence:SD序列。
可结合原核生物的核糖体。
Ori:复制起始原点Promptor:启动子Klenow fragment:大肠杆菌pol1的大片段Reverse tranecriptase:反转录酶Transferred DNA:转移DNAMCS(multiple cloning site):多克隆位点IPTG: 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷X-gal:5-溴4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷GUS:β-葡萄糖苷酸酶X-gluc:5-溴4-氯-3-吲哚-β-D葡萄糖苷酸酯Ampr(ampicillin resistance gene):氨苄青霉素抗性基因Cmr:氯霉素抗性基因Tetr:四环素抗性基因Kanr:卡那霉素抗性基因Ermr:红霉素抗性基因Neor:新霉素抗性基因supF:琥珀突变抑制基因phagemid:噬菌粒plasmid:质粒YAC ( yeast artificial chromosome):酵母人工染色体BAC(Bacterial Artificial Chromosome):细菌人工染色体PAC(P1 artificialchromosome):P1人工染色体TEL: 端粒重复序列CEN:着丝粒ARS: 自主复制序列Cosmid:黏粒PCR(Polymerase Chain Reaction):聚合酶链式反应dNTP:脱氧三磷酸核苷RT-PCR:反转录(reverse transcriptase)PCR或实时定量(real-time)PCR DD(RT)-PCR:差异(反转录)显示PCRTAIL PCR:热不对称相错PCRRACE: cDNA末端的快速扩增RAPD:随机扩增多态性DNAAFLP:扩增片段长度多态性SSH:抑制性扣除杂交FISH:荧光原位杂交Vector:载体Blunt end:平末端Match end/cohesive end:匹配黏端/黏性末端Deoxyribonuclease:脱氧核糖核酸酶TAP:烟草算焦磷酸酶SDS:十二烷基磺酸钠PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳PFGE:脉冲电场凝胶电泳PEG:聚乙二醇DEPC:焦碳酸二乙酯GFP:绿色荧光蛋白Competent cell:感受态细胞PNA:肽核酸Ptac:乳糖操纵子和色氨酸操纵子的杂合启动子GST(Glutathione S-transferase):谷胱甘肽-S-转移酶DDT:二硫苏糖醇Tag:标记蛋白Polyhis-6:六聚组氨酸肽名词解释二1 同裂酶(isoschizomer)识别相同序列的限制酶称同裂酶同尾酶(isocaudarner)许多不同的限制酶切割DNA产生的末端是相同的,且是对称的,即它们可产生相同的黏性突出末端。
关于基因工程的名词解释引言:基因工程,作为现代生命科学的一个重要分支,旨在通过改变生物体的遗传信息,实现对生物特性的调控和改良。
下面将解释一些与基因工程相关的常见名词,以便更好地理解这个领域的重要概念。
一、基因工程基因工程,又称遗传工程,是一种通过人工方法对生物体的基因进行操作和改造的技术。
它包括对DNA序列的修改、插入和删除,以达到改变生物的表型特征或增强其产物能力的目的。
二、DNADNA(脱氧核糖核酸)是生物体内存储遗传信息的主要分子,它由四种碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳟嘧啶)组成,通过特定的序列排列形成基因。
基因工程的核心工作就是对DNA进行修饰和操作。
三、基因基因是DNA中编码一个特定蛋白质或遗传特征的单位。
每个生物体都由大量基因组成,这些基因决定了生物体的特性和遗传信息的传递方式。
基因工程中的目标之一就是对特定基因进行改造,以期望在生物体中产生特定的效果。
四、基因组基因组是一个生物体中包含的所有基因的集合。
它可以分为染色体基因组和质粒基因组。
染色体基因组是生物体核内DNA组成的基因集合,而质粒基因组则存在于质粒中,通常被用于外源基因的插入和传递。
五、重组DNA技术重组DNA技术是基因工程中一项重要的技术手段,它通过将源自不同生物体的DNA片段在体外进行精确拼接,创造出新的重组DNA。
这种技术可以用于插入外源基因、制备重组蛋白质等。
六、基因表达调控基因表达调控是指细胞对特定基因的调控机制,包括转录因子的结合、启动子区域的调控和DNA甲基化等。
通过基因表达调控,科学家可以改变基因的表达水平,进而改变生物的性状和功能。
七、转基因转基因是指将外源基因导入目标生物体中的过程。
通过转基因技术,科学家可以将具有特定功能的基因导入到其他生物体中,从而改变目标生物体的遗传特性。
八、克隆技术克隆技术是基因工程中的一项重要技术,它可以复制生物体的DNA或细胞。
克隆技术主要包括体细胞核移植和DNA克隆。
基因工程名词解释-标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII基因工程名词解释1 基因工程:对不同的遗传物质在体外进行剪切、组合和拼接,使遗传物质重新组合,然后通过载体转入微生物、植物和动物细胞内,进行无性繁殖,并使所需的基因在细胞中表达,产生人类所需的产物或新生物类型2 限制性内切核酸酶:一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸水解酶3 粘性末端:指DNA分子在限制酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构,它们能够通过互补碱基间的配对而重新环化起来4 平末端:当限制酶从识别序列的中心轴西线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端5 酶的星号活性:极度非标准反应条件下,当条件改变时许多酶的识别位点会改变,导致与切割序列的非特异性,这种现象称为星号活性6 载体:将外源DNA或基因携带进入宿主细胞进行扩增或表达的工具7 质粒的不相容性:两种质粒在同一宿主细胞中不能共存的现象8PCR引物:在PCR反应中,与待扩增的DNA两侧碱基互补的寡核苷酸片段,其本质是单链DNA9cDNA文库:指将某种生物体基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA 片段,分别与克隆载体重组,储存于某种受体菌中,该群体就称该生物基因组的cDNA文库10基因组文库:指将某种生物体的全部基因组DNA用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度范围的DNA片段,在与合适的载体在体外重组,并转化相应的宿主细胞,获得的所有阳性菌落,这个群体就称为该生物基因组文库11DNA体外重组:将外源DNA用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA上12 感受态细胞:经过适当处理后容易接受外源DNA进入的细胞13 受体细胞:从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞14 报告基因:一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程:广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义:基因工程。
限制性核酸内切酶:是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶,简称限制酶回文结构:每条单链以任一方向阅读时都与另一条链以相同方向阅读时的序列是一致的,例如5'GGTACC3' 3'CCATGG5'.同裂酶(isoschizomer)或异源同工酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列(BamH I 和Bst I具有相同的识别序列G↓GATGC)同尾酶(isocaudiners):来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。
两个同尾酶形成的黏性末端连接之后,一般情况下连接处不能够再被其任何一种同尾酶识别。
BamH I 识别序列: G↓GATCCBgl II 识别序列: A↓GATCT黏性末端 (cohesive terminus/sticky ends):DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为黏性末端。
平末端(blunt ends): DNA片段的末端是平齐的。
星活性(star activity):指限制性内切酶在非标准条件下,对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应,导致出现非特异性的DNA片段的现象。
易产生星活性的内切酶用*标记。
如:EcoR I*底物位点优势效应:酶对同一个DNA底物上的不同酶切位点的切割速率不同。
连杆/衔接物(linker):化学合成的8~12个核苷酸组成的寡核苷酸片段。
1.基因工程:是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。
Or 通过基因操作来定向改变或修饰生物或人类自身,并且有明确应用目的的活动。
Or是在分子水平上进行的遗传操作,指将一种或多种生物体(供体)的基因或基因组提取出来,或者人工合成基因,按照人们的愿望进行严密的设计,经过体外加工重组,转移到另外一种生物体(受体)的细胞内,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。
2.上游技术:指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术)。
3.下游技术:涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
4.重组DNA技术:是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。
重组DNA技术的三大基本元件:供体、受体、载体。
5.载体:指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”,它的本质是DNA复制子。
6.质粒载体:是基因工程中最常用的载体,主要是以细菌质粒的各种元件为基础组建而成的,它必须包含有3种共同的组成部分:复制必需区、选择标记基因和限制性核酸内切酶的酶切位点(克隆位点)。
7.表达质粒载体:指专用于在宿主细胞中高水平表达外源蛋白质的质粒载体。
8.质粒:是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
质粒常见于原核细菌和真菌中;绝大多数的质粒是DNA型的。
绝大多数的天然DNA质粒具有共价、封闭、环状的分子结构,即cccDNA。
质粒DNA的分子量范围:1 - 200 kb。
9.限制性核酸内切酶:识别双链DNA分子中的特定序列,并切割双链DNA特意位点的酶。
主要存在于原核细菌中,帮助细菌限制外来DNA的入侵细菌的限制与修饰作用。
10. Star activity现象:高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端pH值等,会使一些核酸内切酶的识别和切割序列发生低特异性。
基因工程:对不同生物的遗传物质-基因,在体外进行剪切、组合和拼接,使遗传物质重新组合,然后通过载体转入微生物、植物或动物细胞内,进行无性繁殖,并便所需要的基因在细胞中表达,产生出人类所需要的产物或组建成新的生物类型。
细胞工程:包括细胞融合、细胞大规模培养以及植物组织培养快速繁殖技术。
酶工程:包括酶的生产应用、酶和细胞的固定化以及酶的分子修饰技术。
就是在一定的生物反应器中,利用酶的催化作用将相应的原料转化成有用物质的技术。
发酵(微生物)工程:包括菌种选育、菌体生产利用、代谢产物的生产利用以及微生物机能的利用技术。
发酵工程是利用微生物的特定性状,通过现代化工程技术,生产有用物质或直接应用于工业生产的一种技术体系。
蛋白质工程:它是通过对蛋白质分子结构的合理设计,再通过基因工程的手段,改变基因的核苷酸序列以达到改变基因产物―蛋白质的目的,生产出具有更高生物活性或全新的、具有独特活性的蛋白质。
生化工程:包括生物反应器设计制造、传感器的研制以及产物的分离提取和精制技术。
基因工程(Genetic engineering)原称遗传工程。
从狭义上讲,基因工程是指将一种或多种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。
因此,供体、受体和载体称为基因工程的三大要素。
广义的基因工程定义为 DNA重组技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。
限制性核酸内切酶( Restriction endonucleases)是一类能在特异位点上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性片段的核酸水解酶。
几乎存在于任何一种原核细菌中。
同位酶:一部分酶识别相同的序列,但切点不同,这些酶称为同位酶同裂酶:识别位点与切割位点均相同的不同来源的酶称为同裂酶同尾酶(Isocandamers):识别位点不同,但切出的 DNA 片段具有相同的末端序列,这些酶称为同尾酶。
●变性:在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基之间的氢键断裂,使DNA分子双螺旋结构松散,变成单链。
●复性:高温变性的DNA逐渐冷却后,分开的两条单链重新结合成双链DNA●退火:热变性的DNA经缓慢的冷却后,复性的过程●PCR:聚合酶链反应,是模仿体内细胞DNA复制的过程的体外DNA快速扩增方法。
以DNA互补链聚合反应为基础,通过DNA变性,引物与模板一侧的互补序列复性杂交,耐热DNA聚合酶催化引物延伸等过程的多次循环,获得待扩增的特异性DNA片段。
●模板:一条单链DNA片段,其3’上具有与引物杂交的序列●引物:与待扩增的靶DNA区段两端序列互补的人工合成的寡核苷酸片段,其3’端必须具有游离的-OH基团。
个磷酸二酯键断开。
●DNA连接酶:催化DNA链的相邻3’-羟基和5’-磷酸基团发生缩合反应,形成磷酸二酯键,分为ATP依赖型和NAD+依赖型。
Klenow片段:是大肠杆菌DNA 聚合酶 I 的羧基端片段,长度为全酶的 70%。
具有5’→3’聚合酶活性及 3’→ 5’外切酶活性。
限制性图谱:DNA分子上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布图同裂酶:即从不同的原核生物中分离出来,具有相同识别序列的限制性核酸内切酶。
切割的位点可以相同,也可以不相同。
同尾酶:来源不同,识别序列也不同,但切割DNA分子所得到的DNA片段具有相同的黏性末端,这样一组限制性核酸内切酶称为同尾酶。
黏性末端:大多数断裂的结果形成的DNA片段,具有互补碱基的单链延伸末端.这种末端叫黏性末端。
酶活性单位:某种限制性核酸内切酶在最适反应条件下,60min内完全切割1ug λDNA所需要的酶活性定为1酶活性单位 (unit 或U)容积活性 : 1ul酶液中具有的酶活性单位,即U/ul●缺口:在双链DNA的某一条链上两个相邻核苷酸之间失去一个磷酸二酯键所出现的单链断裂。
●裂口:在双链DNA的某一条链上失去一个或多个核苷酸所出现的单链断端。
接头:是一种化学合成的寡核苷酸,含有一种以上的限制性内切核酸酶识别序列。
连杆:一种按照预先设计,化学合成的寡核苷酸片段。
一般由8-12个核苷酸组成,其上有一种或几种内切酶的识别位点。
谨型松弛型质粒:拷贝数多(10个以上)的质粒称为松弛型质粒的不亲和性:不能共存在于同一个宿主细胞中的质粒,称为●克隆载体:是一种能携带外源DNA片段进入受体细胞,并得以维持或表达的DNA分子。
●表达载体:是在克隆型载体的基础上增加了表达元件,并且在受体细胞中能稳定●核细胞中复制又能在真核细胞中复制。
这类载体主要是质粒载体。
α-互补:冠瘿碱:在带有完整 T-DNA的Ti质粒或Ri质粒的转化植物细胞中,都能检测到一类特殊的非蛋白态的氨基酸,这一类氨基酸总称为冠瘿碱T-DNA:能转移到植物细胞内的DNA片段双元中间克隆载体:T-DNA和中间质粒中都含有LIH序列中间质粒克隆载体:T-DNA的部分序列插入大肠杆菌质粒载体,构建的载体插入外源DNA后,先在辅助质粒的帮助下进入农杆菌,再在农杆菌的介导下进入植物细胞的基因载体。
COS位点:在λ噬菌体线性双链DNA分子的两端,各有一条由12个核苷酸组成的彼此完全互补的5’单链突出序列,即为COS位点。
Ti质粒:存在于植物的土壤农杆菌中,诱发植物产生冠瘿瘤的质粒。
SD序列:在mRNA 起始密码子 AUG上游 10个碱基左右处,有一段富含嘌呤的碱基序列,能与细菌 16SrRNA 3’端识别互补,帮助从起始 AUG 处开始翻译,称为SD序列重叠基因:在某些生物中,不同基因可共用同一段DNA的核苷酸序列,它们的核苷酸序列是彼此重叠的,这样的基因叫重叠基因●基因组文库:某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体之中,这个受体菌群体就是该种生物的基因组文库。
●cDNA文库:某种生物基因组转录的部分或全部mRNA经反转录产生的各种cDNA片段分别与克隆载体重组,贮存在一种受体菌群体中,这个群体叫cDNA文库●RACE:cDNA末端的快速扩增,以cDNA的第一条链为模板,设计合成一组引物,通过PCR扩增技术获得多拷贝数双链cDNA套式PCR:用两对引物扩增同一样品的方法在两对引物中,一对引物与靶序列的退火结合位点处于另一对引物扩增的DNA序列内,前者称为内部引物,后者称为外侧引物锚定PCR:单侧或者单边PCR,是指通过添加锚定引物接头的方法来扩增合成位置序列或未全知的序列的方法逆转录PCR:RT-PCR,是将mRNA逆转录与PCR技术相偶联的一种基因分离技术反向PCR:根据已知DNA序列设计2个引物,扩增出这已知靶序列的两端未知DNA片段●酵母双杂交系统:由诱饵蛋白、靶蛋白、带有一个或多个报告基因的宿主菌株组成,用于检测已知蛋白质之间的相互作用,蛋白质的功能域研究及未知蛋白编码基因的分离克隆。
表面显示技术:是一种基因表达筛选技术。
将目的基因克隆在特定的表达载体中,使其表达产物显示在活的噬菌体表面,然后根据表达产物的某些生物学活性的检测来筛选、富集和克隆带有目的基因的噬菌体。
●噬菌体显示技术:是一种基因筛选技术,他将目的基因克隆在特定的表达载体上,使其表达产物显示在活的噬菌体表面,根据表达产物的生物学活性的检测,来筛选、富集和克隆含有目的基因的噬菌体。
表达序列标签(EST):基因序列中一段能够特意的标记或表征基因的序列,它一般含有足够的结构信息来显示该基因与其他基因的区别,长度为100——150bp。
●转座子标签法;转座子随机转入某一功能的基因内部,会导致该基因发生突变失活,而专离该基因时,可使它恢复活性。
根据这种特性建立的分离基因的方法。
定点诱变;体外特异性地改变目的DNA序列中某个碱基的技术。
●基因定位克隆;根据目的基因在基因组上的位置特性而不是其编码产物来进行基因克隆。
●染色体步查法:是一种利用已知的基因或分子标记来分离与其紧密连锁的未知基因的有效方法。
源DNA分子的状态,这时的细胞称为感受态细胞.转化 (transformation);重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞,并在受体细胞稳定维持和表达的过程。
转染(transfection);采用与质粒DNA转化受体细胞相类似的的方法,将重组λ噬菌体DNA 分子直接导入受体细胞的过程。
转导(transduction);通过λ噬菌体颗粒感染宿主细胞为媒介,将外源DNA分子导入到受体细胞中并稳定遗传的过程。
报告基因:载体携带的选择标记基因。
核酸分子杂交;分子探针:具有同特异性目标分子产生很强的相互作用并可对作用产物进行有效检测的DNA 分子、RNA分子和蛋白质分子。
下,还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。
Pribnow框;原核生物中,在起始密码子上游有一个由5-6个核苷酸组成的共有序列,以其发现者的名字命名为Pribnow框(Pribnowbox),这个框的中央位于起点上游10bp处,所以又称—10序列(—10 sequence),是转录的解旋功能部位,一般较保守。
转录单位;从转录起始位点到转录终止位点所对应的、作为RNA聚合酶模板的基因序列范围。
可以是单一基因、也可以是多个基因。
●操纵子;转录的功能单位。
很多功能上相关的基因前后相连成串,由一个共同的控制区进行转录的控制,包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列●增强子:能够增强启动子转录活性的DNA顺式作用序列,决定基因时间和空间特异性表达。
●衰减子:在第一个结构基因与启动子之间的一个区域,包括前导序列、终止序列及之间的隔序列。
转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶连,是原核生物特有的基因调控机制。
●绝缘子:阻止临近的调控元件对其所界定基因的启动子起增强或抑制作用抑制增强子的功能具有极性。
反义RNA;是指与mRNA互补的RNA分子,也包括与其它RNA互补的RNA分子。
由于核糖体不能翻译双链的RNA,所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的翻译。
共抑制;转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)现象。
转录后基因沉默指转基因在细胞核里能稳定转录,但在细胞质里却无相应的稳定态mRNA存在。
由于转基因编码区与受体细胞基因组间存在的同源性,导致转基因与内源基因的表达同时受到抑制基因沉默;基因没有正常表达的现象。
主要表现在转基因植物和转基因动物中。
融合蛋白;将外源蛋白基因与受体菌自身蛋白基因重组在一起,但不改变2个基因阅读框,以这种方式表达的蛋白叫融合蛋白包涵体;在一定条件下,外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地聚集在一起形成无膜的裸露结构。
信号肽;有些蛋白质在刚开始合成时,N端富含疏水性氨基酸的特异序列,介导新合成的肽链穿过质膜而被定向转运。
●亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。
问答题:1.简述PCR反应的原理及步骤2.RNA制备过程中如何消除RNA酶的污染?3. 用于检测核酸样品纯度和浓度有哪些方法?简述其基本原理4. DNA的双脱氧链终止测序法的基本原理?5.凝胶电泳的种类及应用?基因工程常用的工具酶的特点及应用?1. 基因克隆载体的条件?2. pUC质粒载体的优点?3.大肠杆菌表达载体有哪些种类?特点如何?4.如何利用农杆菌Ti质粒构建植物克隆载体?5.构建噬菌体克隆载体的依据及策略?6. Cosmid载体的特点?7.大容量克隆载体的类型及其特点?1.基因文库的类型及其特点?2.构建λ噬菌体基因组文库的步骤3. cDNA文库的构建过程4. mRNA差别显示技术的原理和基本程序5. cDNA RDA的基本原理6.抑制性加法杂交技术的原理7.简述PCR技术在DNA定点诱变方面的应用1.简述受体细胞选择的基本原则及几类受体细胞的特点。
2. 简述外源重组基因导入植物和动物受体细胞的主要方法。
3.筛选植物转化细胞的常用报告基因有哪些及方法?4.核酸分子杂交分析的基本原理及核酸探针制备的主要方法?5. Southern 印迹杂交、Northern 印迹杂交、斑点印迹杂交、菌落(噬菌斑)原位杂交的基本步骤和异同点?1.原核生物和真核生物启动子的特点?2. 基因表达的调控机制包括哪些?3.基因表达的顺式调控元件有哪些?原核生物和真核生物有什么不同?4.增强子有哪些特征?5.本征终止子和依赖型终止子的特点?6. 如何在大肠杆菌中高效表达外源目的基因?7.IPTG如何诱导Lac表达系统中的基因表达?8.外源基因在大肠杆菌中的表达形式有哪些?9. 简述外源基因表达产物检测的主要方法?。