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基因工程课后习题答案基因工程课后习题答案基因工程是一门涉及生物学、遗传学和生物技术的综合学科，它的发展和应用在医学、农业、环境保护等领域具有重要意义。

在学习基因工程的过程中，我们常常会遇到一些习题，下面是一些常见的基因工程课后习题及其答案，希望能对大家的学习有所帮助。

1. 什么是基因工程？基因工程是利用生物技术手段对生物体的基因进行操作和改变的过程。

它包括了基因的克隆、重组、转染和编辑等技术，旨在实现对基因组的精确控制和改造。

2. 请简要介绍基因克隆的步骤。

基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。

其步骤主要包括：DNA提取、DNA片段的切割、载体DNA的准备、DNA片段的连接、转化和筛选等。

3. 什么是重组DNA技术？重组DNA技术是指将来自不同生物体的DNA片段进行切割，然后通过连接酶将其重新组合成新的DNA分子的过程。

重组DNA技术的应用广泛，可以用于基因克隆、基因表达、基因治疗等领域。

4. 请简要介绍PCR技术。

PCR（聚合酶链反应）是一种体外扩增DNA的技术。

它通过不断重复DNA的变性、退火和延伸等步骤，可以在短时间内大量复制目标DNA序列。

PCR技术在基因工程中被广泛应用于基因克隆、基因检测和DNA测序等方面。

5. 什么是基因编辑技术？基因编辑技术是指通过直接对基因组进行修改，实现对目标基因的精确编辑和改造的技术。

目前最常用的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统，它可以实现高效、精确和经济的基因编辑，对于研究基因功能和治疗基因相关疾病具有重要意义。

6. 基因工程在医学领域有哪些应用？基因工程在医学领域的应用非常广泛，包括基因治疗、药物生产、疫苗研发等方面。

例如，通过基因工程可以将治疗性基因导入患者体内，用于治疗遗传性疾病和癌症等疾病；还可以利用基因工程技术生产重组蛋白药物，如胰岛素和生长激素等。

7. 基因工程在农业领域有哪些应用？基因工程在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和农业有害生物的控制。

2．质粒DNA和病毒（噬菌体）DNA作为载体的主要特征是什么为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力；具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，具有合适的选择标记3．如何理解质粒的不相容性及其在DNA重组克隆过程中的运用意义质粒的不相容性：具有相同或相似复制子结构及调控模式的两种不同的质粒不能稳定存在于同一受体细胞内.4．列举表达质粒、穿梭质粒、探针质粒和cos质粒的不同用途表达质粒:在多克隆位点的上下游分别装有两套转录效率较高的启动子、合适的核糖体结合位点序列（SD）序列以及强有力的终止子结构，使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达。

穿梭质粒：质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子以及相应的选择性标记，能在两种不同的受体细胞中复制并检测。

探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件。

通常含有报告基因，但缺少相应的调控序列（如启动子或终止子），只有含有启动子或终止子的调控序列被克隆进入载体后，报告基因才能别表达，表达量的大小直接反应了克隆进入的调控元件的强弱。

cos质粒：人工构建的含有λDNA的cos位点序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。

具有大的装载量，可以用于构建基因组文库。

5． II类限制性核酸内切酶的主要酶学特征是什么分子量较小的单体蛋白，双链识别和切割活性仅需Mg2+，识别位点为4-6个bp的回文序列，切割位点在识别序列中或靠近识别序列7． KLenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构和功能上的主要区别DNA聚合酶I包括大片段(klenow片段)和小片段功能上：DNA聚合酶I比klenow酶多了5’→3’核酸外切酶活性，两者都具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性。

8．影响限制性核酸内切酶活性的主要因素有哪些？温度、盐度等物理因素，DNA样品纯度，DNA甲基化程度，限制性核酸内切酶的缓冲液性质，甘油和微量的金属离子会抑制限制性内切酶的活性9.如何理解粘性末端比平头末端更容易连接在退火条件下，粘性末端的连接为分子内反应，平头末端是分子间反应，平头末端的连接反应更加复杂，速度也慢。

基因工程试题一、名词解释(4 ‘*10)1.基因工程技术：按照人们的愿望，进行严密的设计，通过体外DNA 重组和转移等技术，有目的地改造生物种性，使现有物种在较短的时间内趋于完善，创造出新的生物类型。

2.感受态细胞：受体细胞经一些特殊方法(如CaC12、RbCl (KC1) 等化学试剂)处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性改变，成为能允许外源DNA 分子进入的细胞状态。

3.cDNA文库：从组织细胞中分离得到纯化的mRNA,然后以mRNA为模板，利用逆转录酶合成其互补DNA,再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后导入受体菌内，扩增，构建cDNA文库。

4.鸟枪法：指将某种生物体的全基因组或单一染色体切成大小适宜的 DNA 片段，分别连接到载体DNA上，转化受体细胞，形成一套重组兑隆，从中筛选出含有目的基因的期望重组子。

5.SD序列(Shine-Dalgarno):位于翻译起始密码了•上游的6-8个核苷酸序列(5’ UAAGGAGG 3’)，它通过识别大肠杆菌核糖体小亚基中的16S rRNA 3’端区域3’ AUUCCUCC 5’并与之专一性结合，将mRNA定位于核糖体上，从而启动翻译。

6.包涵体：胞内高效表达时，工程菌因大景合成异源蛋白质所形成的水不溶性积聚物。

7.复合转座子：是由两个重复序列夹着一个或多个结构基因如某些抗药性基因和其它基因组成。

存在于R因子及其它质粒中。

复合转座子两端的组件由IS和类IS组成。

8.菌落原位杂交：是将菌落或噬菌斑转到固相膜上，原位裂解细胞后使核酸固定在膜上，然后与探针杂交。

用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织细胞间期染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。

9.RACE：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA 为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3, 或5，端之间未知序列的方法。

10.连续式发酵：即在连续发酵反应器中，细胞的总数和培养液总体积同时维持恒定，前提是由培养液流出所造成的细胞损失正好为细菌分裂所产生的新细胞弥补。

基因工程课后习题答案基因工程，也称为遗传工程，是一种通过直接操作生物体的基因来改变其遗传特性的技术。

这项技术在医学、农业、工业和环境科学等领域有着广泛的应用。

以下是一些基因工程课后习题的答案：1. 基因工程的定义：基因工程是利用分子生物学技术，将外源基因插入到宿主生物体的基因组中，使其表达出新的或改变的遗传特性。

2. 基因工程的基本步骤：- 目标基因的获取：通过PCR扩增、基因克隆等方法获得目标基因。

- 基因载体的构建：将目标基因插入到合适的载体中，如质粒、病毒等。

- 转化：将构建好的载体导入到宿主细胞中。

- 筛选：通过抗生素抗性标记等方法筛选成功转化的细胞。

- 表达：在宿主细胞中表达目标基因，产生所需的蛋白质或性状。

3. 基因工程在农业中的应用：基因工程可以用于培育抗虫、抗病、抗旱、耐盐碱等性状的作物品种，提高作物的产量和质量。

4. 基因工程在医学中的应用：- 生产药物：利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物。

- 基因治疗：通过修复或替换缺陷基因来治疗遗传性疾病。

5. 基因工程可能带来的伦理问题：基因工程可能引发生物安全、生物多样性丧失、基因歧视等伦理问题，需要在实施过程中进行严格的伦理审查和监管。

6. 基因工程的安全性问题：基因工程产品可能存在潜在的食品安全和环境安全问题，如转基因作物可能对非目标生物产生影响，需要进行长期的环境影响评估。

7. 基因工程的未来发展趋势：随着基因编辑技术如CRISPR-Cas9的发展，基因工程将更加精准和高效，有望在治疗遗传病、提高作物产量等方面发挥更大的作用。

8. 基因工程的法律和政策：不同国家和地区对基因工程的法律和政策不同，需要遵守当地的法律法规，确保基因工程的安全和合法性。

通过这些习题答案，学生可以更好地理解基因工程的基本概念、技术流程、应用领域以及面临的挑战和未来发展。

基因工程原理习题集参考答案一、名词解释1、DNA分子克隆技术：克隆，指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。

DNA分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程。

其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。

载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。

主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库，另一种是cDNA库。

2、分子杂交：两条不同来源的DNA（或RNA）链或DNA与RNA之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。

形成杂交分子的过程称为分子杂交。

3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的DNA，使用同一种限制性内切酶酶切，切得的片段长度各不相同。

酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。

通常是在酶切位点处发生突变而引发的。

4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR）：一种体外扩增DNA的方法。

PCR使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。

以过高温变性将模板DNA分离成两条链。

低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3/端合成一条互补的新链。

而新合成的DNA又可以继续进行上述循环，因此DNA的数目不断倍增。

6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。

某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。

《基因工程技术》题库第一章概论一、名词解释题基因，基因工程技术，内含子，外显子%1.简答题1.基因具有什么功能？2.基因工程技术的主要操作内容是什么？3.用图示筒要说明基因工程技术的技术路线。

4 .简述基因工程技术的巨大意义有我国在该领域取得的成就?5.生物制药专业的学生为什么要学习基因工程技术？第二章DNA重组一、名词解释题遗传密码，变性，复性，复制子，翻译与转录，基因突变与突变基因，表达二、简答题1.DNA的组成单位是什么？组成元素有哪些？组成成分是什么？2.基因突变的生物学效应是什么？3.D NA的复制与转录有何异同点？如何利用基因突变为制药服务？4 .简述生物物种的遗传稳定性和进化原理与DNA的性质与功能的关系第三章植物基因工程技术一、名词解释题转基因植物，植物细胞反应器，抗逆性，叶盘法二、简答题1.从用途出发，转基因植物FI前可以分为儿类？2.图示植物遗传转化基本过程3.简述农杆菌介导法生产转基因植物的注意事项。

4.植物基因工程技术研究应用在医药上的优势是什么？5.什么是抗虫转基因植物？第四章动物基因工程技术一、名词解释题动物乳腺生物反应器，转基因动物，显微注射法，胚胎干细胞1.简述转基因动物技术路线2.显微注射法制备转基因动物的主要过程及注意事项是什么？3.简述动物基因工程技术与医药领域的应用。

一、名词解释题细胞因子，基风工程技术抗体，基风工程技术疫苗，基因治疗二、简答题1.举例说明细胞因子的种类、功能及其临床应用2.简述基因工程技术抗体种类及结构特点3.举例说明基因工程技术激素类药物及其临床应用4.简述基因诊断和治疗的原理第六章基因工程技术工具酶一、名词解释题限制性内切酶，平末端与粘性末端，酶活性单位，回文序列二、简答题1.限制性内切酶的特点与使用注意事项有哪些？2.影响限制性内切酶反应的因素有哪些？3.简述限制性内切核酸酣在基|大I工程技术中的作用。

4.举例说明不同类型DNA片段是如何连接的。

《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。

复习题1 （包括分子生物学基础知识）（请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!）一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）, gene cloning的基本要点有（），（）和（）。

2.（）是遗传物质的基木单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。

它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。

4.启动子（Promo（or）是指（）。

通常一个Gene是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。

在转录过程屮，Promoter还是（）的结合位点。

5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：（）和（），其屮。

■因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。

6.从（）到（）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其屮可包括一个或者多个Gene。

7.转录终止子主要有两种，一种是（），另一种是（）。

8.重叠基因（Overlapping gene）是指（）,间隔基因（Interrupted gene）是指（）三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

四、简答题：1.简述基因克隆的两个基本特征？参考答案：基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子（一般情况下都是DNA）在不同宿主屮的繁殖，打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征，基因操作的另一个重要特征是繁殖。

2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆（subcloning） ?参考答案：基因克降：一定程度上等同于基因的分离，即从复杂的生物体基因组中，经过酶切，消化等步骤，分离带有目的基因的DNA片段。

基因工程复习题一、名词解释: （10～20%）基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶得Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交: 将细胞或组织得核酸固定保持在原来得位置上, 然后用探针与之杂交得一种核酸分子杂交技术, 该方法可较好地反映目得基因在细胞或组织中得分布与表达变化。

粘性末端: 双链DNA被限制性内切酶切割后, 形成得两条链错开几个碱基, 而不就是平齐得末端。

Northern印迹杂交: 将RNA进行变性电泳后, 再转移到固相支持物上与探针杂交得一种核酸分子杂交技术, 可用于检测目得基因得转录水平。

转位: 一个或一组基因片段从基因组得一个位置转移到另一个位置得现象。

基因工程: 在体外, 用酶学方法将各种来源得DNA与载体DNA连接成为重组DNA, 继而通过转化与筛选得到含有目得基因得宿主细胞, 最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子得过程称为基因工程, 又称基因克隆、DNA克隆与重组DNA等。

目得基因：基因工程中, 那些被感兴趣得、被选作研究对象得基因就叫作目得基因。

连接器: 人工合成得一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段, 连接到目得基因得两端, 便于基因重组中得切割与连接。

转化: 受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变得过程。

停滞效应: PCR中后期, 随着目得DNA扩展产物逐渐积累, 酶得催化反应趋于饱与, DNA扩增产物得增加减慢, 进入相对稳定状态, 即为停滞效应, 又称平台期。

逆转录PCR: 以mRNA为原始模板进行得PCR反应。

PCR: 即聚合酶链式反应。

在模板, 引物, 4种dNTP与耐热DNA聚合酶存在得条件下, 特异性地扩增位于两段已知序列之间得DNA区段地酶促合成反应。

α-互补（α-complementation）：指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中, 插入了lac 启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸得核苷酸序列（又称α-肽）, 该序列不能产生有活性得β-半乳糖苷酶。

基因工程习题及答案.doc1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（B ） A ? I 类限制酶 B. II 类限制酶111类限制酶 D.核酸内切酶2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是（BA.是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。

B. 它们的识别序列完全相同。

C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。

D. E. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。

3.多数限制酶消化DNA 的最佳温度是37 °C B. 30 °C C. 25 °C D. 16 °C E. 33 °C4. 下列关于限制酶的叙述错误的是（5.A. B.C.D.E. ［类限制酶反应需要Mg2+、 II 类限制酶反应需要Mg2+、111类限制酶反应需要Mg2+、 ATP 和S-腺昔蛋氨酸。

ATP oATP ， S-腺昔蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。

I 、III 类限制酶对DNA 有切割和甲基化活性，II 类限制酶对DNA 只有切割活性而无甲基化活性。

TT 类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。

如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA 上识别6bp 的切割概率为（D ）A. 1/44C. 1/64D. 1/46E. 1/1066.多数II 类限制酶反应最适PH 是（C ）A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4T07.下列关于限制酶反应的说法错误的是（D ）A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嗜嚏、腺噂吟或尿嗜嚏被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。

B. 许多限制酶对线性DNA 和超螺旋DXA 底物的切割活性是有明显差异的。

8. C. D. E.有些限制酶对同一 DNA 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。

限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。

BSA 对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA oII 类限制酶反应中必须的阳离子是（C ）单选题E. RNAase有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。

基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中,一般需使用A。

同种限制酶 B.两种限制酶 C。

同种连接酶 D。

两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④ D。

①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A。

限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C。

质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A。

细菌质粒 B.噬菌体 C。

动植物病毒 D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。

在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A。

人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞 D。

目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A。

干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D。

乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C。

限制酶和运载酶 D。

连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因 B。

决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制 D。

有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。

在转基因技术中,这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。

这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B。

用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C。

合成β-球蛋白的DNAD。

合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。

基因工程习题答案基因工程，又称DNA重组技术，是一种按照人们的意愿，将不同来源的基因按预先设计好的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的技术。

基因工程在医学、农业、工业等领域都有着广泛的应用。

1. 基因工程的基本步骤：- 目的基因的获取：从生物体中提取出所需的基因。

- 基因载体的构建：将目的基因插入到载体DNA中，常用的载体有质粒、病毒等。

- 转化：将重组DNA分子导入宿主细胞。

- 筛选：通过特定的标记基因筛选出含有重组DNA的细胞。

- 表达：在宿主细胞中表达目的基因，产生所需的蛋白质或性状。

2. 基因工程的应用：- 农业：通过基因工程改良作物，提高作物的抗病性、抗旱性、产量等。

- 医学：生产重组蛋白药物，如胰岛素、干扰素等。

- 工业：利用基因工程生产特定的工业酶，提高生产效率。

3. 基因工程的伦理和安全性问题：- 伦理问题：基因工程可能涉及到对生物的改造，需要考虑其对自然生态的影响。

- 安全性问题：基因工程产品可能对人体健康和环境安全造成影响，需要严格的安全性评估。

4. 基因工程的前景：- 随着技术的进步，基因工程在疾病治疗、生物制药、环境保护等方面将有更大的发展空间。

- 同时，也需要加强相关法律法规的建设，确保基因工程的健康发展。

5. 习题答案：- 习题一：基因工程中常用的载体有哪些？答案：常用的载体包括质粒、噬菌体、人工染色体等。

- 习题二：基因工程在医学上的应用有哪些？答案：基因工程在医学上的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断等。

通过以上内容的学习，可以对基因工程有一个基本的了解，同时认识到其在社会和科学发展中的重要性。

在实际应用中，需要综合考虑技术、伦理和安全等多方面因素，以确保基因工程的可持续发展。

2.质粒DNA和病毒（噬菌体）DNA乍为载体的主要特征是什么为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力；具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，具有合适的选择标记3 •如何理解质粒的不相容性及其在DNA重组克隆过程中的运用意义质粒的不相容性：具有相同或相似复制子结构及调控模式的两种不同的质粒不能稳定存在于同一受体细胞内.4.列举表达质粒、穿梭质粒、探针质粒和 cos质粒的不同用途表达质粒：在多克隆位点的上下游分别装有两套转录效率较高的启动子、合适的核糖体结合位点序列（SD）序列以及强有力的终止子结构，使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达。

穿梭质粒：质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子以及相应的选择性标记，能在两种不同的受体细胞中复制并检测。

探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件。

通常含有报告基因，但缺少相应的调控序列（如启动子或终止子），只有含有启动子或终止子的调控序列被克隆进入载体后，报告基因才能别表达，表达量的大小直接反应了克隆进入的调控元件的强弱。

cos质粒：人工构建的含有入DNA的cos位点序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。

具有大的装载量，可以用于构建基因组文库。

5.II类限制性核酸内切酶的主要酶学特征是什么分子量较小的单体蛋白，双链识别和切割活性仅需Mg+，识别位点为4-6个bp的回文序列，切割位点在识别序列中或靠近识别序列7. KLenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构和功能上的主要区别DNA聚合酶I包括大片段（klenow片段）和小片段功能上：DNA聚合酶I比klenow酶多了 5'一3'核酸外切酶活性，两者都具有5'一3' DNA聚合酶活性和 3'T 5'核酸外切酶活性。

8影响限制性核酸内切酶活性的主要因素有哪些？温度、盐度等物理因素，DNA样品纯度，DNA甲基化程度，限制性核酸内切酶的缓冲液性质，甘油和微量的金属离子会抑制限制性内切酶的活性9.如何理解粘性末端比平头末端更容易连接在退火条件下，粘性末端的连接为分子内反应，平头末端是分子间反应，平头末端的连接反应更加复杂，速度也慢。

名词解释基因工程：用人工方法, 在体外对DNA分子进行切割、连接，组成重组DNA分子，再导入生物体内,并使其在异种生物内复制、表达,从而使受体生物获得新的遗传性状,这一全过程称为基因工程。

（PPT）限制酶：限制酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。

（P 21页）DNA连接酶：DNA连接酶是一种能够将两段DNA拼接起来的酶称为DNA连接酶。

（或DNA连接酶是一种能够催化双链DNA片段紧靠在一起的3`羟基末端与5`磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶）（P 27页）DNA聚合酶：DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶。

（P 30页）DNA修饰酶：DNA修饰酶是一类通过添加或删除化学基团来修饰DNA分子的酶，主要有末端脱氧核苷酸转移酶（简称末端转移酶）、碱性磷酸酶、T4噬菌体多核苷酸激酶等。

（P 22页与网上整理结合）质粒：质粒是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。

（P 42页）穿梭质粒：穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带着外源DNA在不同物种的细胞之间往返穿梭的质粒载体。

（P 56页）：噬菌粒：噬菌粒是一类由质粒载体和单链噬菌体载体结合而成的新型载体系列。

（P 77页）粘粒载体：粘粒又称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。

（P 70页）M13噬菌体载体：M13噬菌体是一种含有6.4kb环状单链DNA分子的大肠杆菌丝状噬菌体。

（73页及PPT）克隆载体：克隆载体是指具有在细胞内进行自我复制能力的DNA分子，是外源基因的运载体，又称无性繁殖载体。

末端脱氧核苷酸转移酶：末端脱氧核苷酸转移酶是一种来源于小牛胸腺，为核酸末端加上一个同聚物尾巴的DNA修饰酶。

基因工程一、单项选择题：1．科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达,使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸,结果大大提高β-干扰素的抗病性活性,并且提高了储存稳定性,该生物技术为( B )A、基因工程B、蛋白质工程Ｃ、基因突变D、细胞工程２.下列有关质粒的叙述,正确的是( A )Ａ.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DＮA分子B.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器C.质粒携带了外源基因进入受体细胞后,只能停留在该细胞内独立复制D．在进行基因工程操作中,被用作载体的质粒都是天然质粒3.蛋白质工程中,直接需要进行操作的对象是(Ｄ)Ａ．氨基酸结构ﻩB．蛋白质空间结构C.肽链结构D．基因结构4．限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割ＤNＡ分子上特定的核苷酸碱基序列。

下图为四种限制酶BａmH I,EcoR I，HiｎｄⅢ以及ＢglⅡ的辨识序列。

箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何?( D )A. BamH I和ＥｃｏR I;末端互补序列—AＡTT—B. BamHＩ和HindⅢ;末端互补序列—GAＴＣ—C. EcｏR I和HindⅢ；末端互补序列—AＡTT—D．ＢamＨI和Bgl II;末端互补序列—ＧＡTC—5．蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。

下图示意蛋白质工程流程.下列有关叙述错误的是（ A )A.蛋白质工程就是根据人们需要，直接对蛋白质进行加工修饰B.蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成等方法,对现有蛋白质进行改造Ｃ．①②过程为转录和翻译D.蛋白质工程是从④开始的二、多项选择题:1.下列关于生物工程相关知识的叙述,不正确的是 ( ACＤ）A．在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制性内切酶,露出的黏性末端可以不相同B．蛋白质工程以基因工程技术为手段，可以定向地改造天然的蛋白质，甚至创造新的、自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子C.植物体细胞杂交,能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定是纯合体D. 湿地生态恢复工程主要是针对小流域水土流失比较严重问题提出的三、非选择题:1.番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。

基因工程试题库+参考答案一、单项选择题1. 下列哪项不是基因工程的基本操作步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的检测与鉴定D. 细胞融合答案：D2. 下列哪种酶在基因工程中用于切割DNA分子？A. 核酸酶B. 限制性内切酶C. 逆转录酶D. 聚合酶答案：B3. 下列哪个过程不是基因表达的过程？A. 转录B. 剪接C. 翻译D. RNA干扰答案：D4. 下列哪种方法不是获取目的基因的方法？A. 基因文库筛选B. PCR扩增C. 化学合成D. 细胞工程答案：D5. 下列哪种技术不是基因工程的应用领域？A. 基因治疗B. 基因农业C. 基因制药D. 心理咨询答案：D二、多项选择题1. 基因工程中的工具酶包括哪些？A. 限制性内切酶B. 连接酶C. 核酸酶D. 逆转录酶答案：AB2. 基因表达载体构建的目的包括哪些？A. 使目的基因在受体细胞中稳定存在B. 使目的基因能够表达和发挥作用C. 使目的基因便于检测和分离D. 提高目的基因的复制速度答案：ABC3. 基因工程在农业方面的应用包括哪些？A. 转基因作物B. 转基因动物C. 生物农药D. 生物肥料答案：ABCD4. 基因治疗的基本原理包括哪些？A. 替换异常基因B. 修复异常基因C. 插入正常基因D. 抑制异常基因表达答案：ACD三、判断题1. 基因工程可以用于治疗遗传病。

答案：正确2. 基因工程中的连接酶是用来连接DNA分子的。

答案：正确3. 基因工程在农业方面的应用主要是通过转基因作物来提高产量和抗病性。

答案：正确4. 目的基因在受体细胞中稳定存在是基因工程的基本操作步骤之一。

答案：正确5. 基因工程可以用于制造生物武器。

答案：错误四、简答题1. 请简要说明基因工程的基本操作步骤。

答案：基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定、目的基因的转移与表达。

2. 请简要说明基因表达载体的构建目的。

基因工程体外DNA重组和转基因技术新的遗传特性更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 DNA分子水平 DNA重组技术限制性核酸内切酶（限制酶）原核生物特定的核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端平末端 DNA连接酶磷酸二酯键黏性末端两种末端单个核苷酸两个DNA片段载体 DNA聚合酶 PCR技术耐高温能在受体细胞中复制并稳定保存具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择质粒基因选择性表达裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子噬菌体的衍生物、动植物病毒目的基因的获取编码蛋白质的结构基因直接分离人工合成反转录法化学合成法 DNA双链复制 DNA解链引物结合到互补DNA链热稳定DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成基因表达载体的构建稳定存在遗传至下一代表达和发挥作用目的基因启动子终止子标记基因DNA片段首端 RNA聚合酶转录出mRNA 蛋白质 DNA片段尾端是否含有目的基因含有目的基因的细胞抗生素基因将目的基因导入受体细胞是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌 Ca2+ 感受态细胞重组表达载体DNA分子含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达目的基因的检测和表达转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因 DNA分子杂交技术目的基因是否转录出了mRNA 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交目的基因是否翻译成蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交个体生物学水平转基因抗虫植物是否出现抗虫性状抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在的蛋白质细胞工程细胞全能性细胞核具有全能性植物组织培养生根胚状体细胞分裂素 2、4-D 激素脱分化再分化受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞植物细胞＞动物细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织试管苗植物体单倍体微型繁殖作物脱毒制造人工种子单倍体育种染色体加倍细胞产物的工厂化生产转基因植物植物体细胞杂交离心、振动、电刺激聚乙二醇（PEG）克服了远缘杂交不亲和的障碍组织单个细胞培养基生长和繁殖动物胚胎或幼龄动物的器官或组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶细胞悬液原代培养传代贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制无菌、无毒的环境无菌抗生素代谢产物积累对细胞自身造成危害糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等血清、血浆适宜温度 36.5℃＋0.5℃ 7.2～7.4 95%空气5%CO2 细胞代谢维持培养液的pH 制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞胚胎细胞核移植体细胞核移植促进排卵卵(母)细胞去核的卵细胞卵(母)细胞比较大，容易操作卵(母)细胞细胞质多，营养丰富加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育保护濒危物种，增大存活数量生产珍贵的医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植等健康问题遗传和生理缺陷细胞杂交两个或多个杂交瘤细胞细胞融合聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激远缘杂交的不亲和性细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育特异性抗体产量低、纯度低、特异性差无性繁殖专一的抗体特异性强，灵敏度高，并能大量制备作为诊断试剂抗原一定抗原准确、高效、简易、快速用于治疗疾病和运载药物癌症治疗生物导弹缩短育种周期胚胎工程早期胚胎或配子原始性腺细胞胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养胚胎雌性动物体内输卵管上段有丝分裂并不增加，或略有减小桑椹胚全能细胞分化全能性仍比较高内细胞团囊胚腔原肠胚三胚层囊胚腔原肠腔早期胚胎或从原始性腺胚胎细胞体积小，细胞核大，核仁明显发育的全能性增殖分化冷冻保存遗传改造个体发生和发育规律细胞分化分化诱导因子细胞分化和细胞凋亡人类的某些顽疾新的组织细胞坏死或退化体外诱导分化人造组织器官器官移植免疫排斥促性腺激素输卵管冲取卵子屠宰母畜的卵巢活体动物的卵巢卵母细胞培养成熟获能的精子获能获能溶液专用的受精溶液发育培养液受精状况和受精卵的发育能力受精卵具有全能性维生素、激素、氨基酸、核苷酸血清受体移植冷冻保存桑椹胚或囊胚 4个细胞同种的、生理状态相同的供体受体转基因核移植体外受精胚胎移植技术胚胎工程的最后一道工序供体本身的繁殖周期雌性优良个体的繁殖能力生理变化是相同的相同的生理环境游离胚胎的收集提供了可能免疫排斥反应胚胎在受体的存活提供了可能生理和组织遗传特性遗传信息对供、受体的选择和处理遗传特性和生产性能健康的体质和正常繁殖能力同一同期发情处理促性腺激素超数排卵配种或人工授精对胚胎的收集、检查、培养或保存胚胎移植是否妊娠早期胚胎 2等份、4等份同卵双胎或多胎的技术相同的遗传物质无性繁殖全能性仍很高内细胞团分割后胚胎的恢复和进一步发育提高优良母畜的繁殖力。

《基因工程》一、选择题（每小题 分，共 分）．基因工程的创始人是 。

．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有 不太恰当。

由作用于同一 序列的两种酶构成 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 进行修饰不同的宿主系统具有不同的限制 修饰系统．在 的 链上，基因的起始密码子是（或 ）． 限制性内切核酸酶可以特异性地识别 。

双链 的特定碱基对 双链 的特定碱基序列特定的三联密码 以上都正确．末端转移酶是合成酶类，具有 活性。

聚合酶 聚合酶 内切酶 外切酶．下面关于松弛型质粒 性质的描述中， 是不正确的。

质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。

可以在氯霉素作用下进行扩增。

通常带有抗药性标记。

同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。

．关于 的最正确的说法是 。

同 互补的单链 同 互补的双链以 为模板合成的双链 以上都正确．关于 ，下列说法中哪一项不正确是最常用的 连接酶。

不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。

不但能连接粘性末端。

最适温度 ℃ 。

．下列关于建立 文库的叙述中， 是错误的从特定组织或细胞中提取 或 用反转录酶合成 的对应单链以新合成的单链 为模板合成双链新合成的双链 克隆到载体上，并导入受体细胞．用下列方法进行重组体的筛选，只有 说明外源基因进行了表达。

印迹 原位菌落杂交二、填空题（每空 分，共 分）．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是 。

．为了防止 的自身环化，可用 去双链 。

．切口平移 法标记 探针时应用的酶是 。

．基因工程中的 种主要类型的载体是 、 、 。

．野生型的 不适合用作基因工程载体，主要原因是 、 和 。

．黏粒 是 杂合载体。

．引物在基因工程中至少有 个方面的用途： 、 。

． 印迹和 印迹有两点根本的区别： 、，． 反应中常用的酶是 。

．感受态的大肠杆菌细胞在温度为 时吸附 时摄人外源 。