β-D-葡聚糖的检验与临床

572014年2月第21卷第3期血清（1-3）-β-D 葡聚糖检测判断肺部侵袭性真菌感染的诊断价值谢 颖肺部侵袭性真菌感染（PIF I ）的诊断目前主要根据患者痰培养或肺组织活检，但操作复杂，尤其是肺组织活检，临床可操作性差，不易开展。

（1-3）-β-D 葡聚糖为一种多糖，普遍存在于真菌的细胞壁中，约占真菌细胞壁干重的50％。

笔者对我院送检痰标本患者的血清进行（1-3）-β-D 葡聚糖检测，评价其在PIFI 中的诊断价值。

1 资料与方法1.1 一般资料与分组 2008年6月至2012年11月，送检我科的支气管镜吸引痰标本及其患者血清各77份。

有广谱抗生素应用史41例（53.2%），糖皮质激素使用史31例（40.3%），体内置留导管22例（28.6%），恶性肿瘤史8例（10.4%）。

痰标本培养真菌阳性28例，设为感染组；阴性49例，设为非感染组。

1.2 血清（1-3）-β-D 葡聚糖检测 检测流程按试剂盒要求逐步进行。

① 将事先准备待检的静脉血2ml 置入离心管中以2900r /min 的转速离心6min ，然后吸取上层血清100μl 置入900μl 处理液中，振荡摇匀。

将其放置在恒温水浴箱中70℃孵育10min ，然后快速放置到冰水中。

② 将制备好的标本200μl 放入含有主反应试剂A 的管中，充分振荡混匀并移植标准玻璃反应管中，放入MB-80微生物快速动态检测系统中进行反应。

③ 反应1h 后进行结果判断。

1.3 统计分析 计量资料以（x-±s ）表示，组间比较用t 检验。

计数资料以百分数表示，组间比较采用χ2检验。

Stata 12.0统计绘制ROC 曲线，并根据敏感性和特异性的最佳组合判断血清（1-3）-β-D 葡聚糖的临界值，并给出相应的该临界值下的诊断PIF I 敏感性和特异性，计算曲线下面积，双侧P ＜0.05认为差异有统计学意义。

2 结果2.1 两组基本情况比较 年龄：感染组（66.8±9.2）岁，非感染组（67.4±11.1）岁，差异无统计学意义（t =0.24，P ＞0.05）。

支气管肺泡灌洗液(1,3)-β-D-葡聚糖检测对慢性呼吸系统疾病合并真菌感染诊断的临床价值卢岳虹;潘玲;谭玉萍;冯原;陆彩云;冯玉清;苏齐鉴;罗珍贞【摘要】目的:探讨支气管肺泡灌洗液(1,3)-β-D-葡聚糖(BG)检测对慢性呼吸系统疾病合并真菌感染的诊断价值.方法:选取2013年5月至2016年12月在广西中医药大学附属瑞康医院呼吸科与重症医学科二区住院的90例慢性呼吸系统疾病患者作为研究对象,根据具体病情,这些患者被分为真菌感染组、普通感染组、非感染组,每组30例,分别采集患者的血浆和肺泡灌洗液标本进行葡聚糖检测试验,比较三组患者血浆和肺泡灌洗液BG浓度及对真菌感染预测效果.结果:三组患者血浆及肺泡灌洗液BG浓度比较,真菌感染组>普通感染组>无感染组,差异有统计学意义(P<0.05).血浆G试验浓度为66.07pg/mL时的约登指数值最大为0.584,敏感性为66.7％,特异性为91.7％;肺泡灌洗液G试验浓度为78.3pg/mL时的约登指数值最大为0.733,敏感性为80％,特异性为93.3％.结论:肺泡灌洗液G试验较血浆G试验对早期真菌感染的诊断更有临床价值,值得临床推广应用.【期刊名称】《大众科技》【年(卷),期】2019(021)002【总页数】4页(P73-75,81)【关键词】支气管肺泡灌洗液;(1,3)-β-D-葡聚糖;真菌感染;早期诊断【作者】卢岳虹;潘玲;谭玉萍;冯原;陆彩云;冯玉清;苏齐鉴;罗珍贞【作者单位】广西中医药大学,广西南宁 530001;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁 530011【正文语种】中文【中图分类】R519;R56慢性呼吸系统疾病主要包括慢性阻塞性肺疾病、慢性支气管炎、支气管哮喘、支气管扩张、间质性肺疾病等，其在世界范围内具有较高的患病率、死亡率以及病程长和治疗成本高等特点，成为2015年全世界第3大死因[1]。

1,3-β-D葡聚糖(BG)在检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析近20年来，由于大剂量广谱抗生素、抗肿瘤药物的长期应用，器官移植及造血干细胞移植等治疗方法的完善，各种导管在体内的介人以及恶性肿瘤、艾滋病等免疫功能低下患者的不断增加，侵袭性真菌感染的发病率明显上升。

侵袭性真菌感染（IFI）临床常无特异性，而真菌实验室诊断方法中镜检、培养、血清学诊断、组织病理学检查和分子生物学方法的检出率较低，G试验检测时间短其为非侵人手段在临床上广受关注。

目的及意义:分清1,3-β-D-葡聚糖检测（G试验）干扰因素，提高准确性。

G试验是及激活试剂中鲎变形细胞裂解物中的凝固酶（G因子），形成凝固蛋白，根据反应物的浓度变化对1,3-β-D葡聚糖浓度进行定量检测。

G试验是念珠菌感染的首选检查方法，检测速度快。

G试验是新的真菌抗原检测方法、念珠菌感染首选检查方法，在深部真菌感染早期诊断有重要意义，检查结果作为方法学评价标准，弥补了传统病理学及培养的不足，提高IFI检测率，缩短检查时间，早期治疗赢得时间为临床合理用药提供帮助。

G试验标准值：＜10pg/ml为阴性，10pg/ml-20pg/ml是观察，＞20pg/ml 阳性。

一般两次及以上G试验阳性及临床特征，并排除干扰因素就可以确定真菌感染。

BG升高原因：1，3-β-D葡聚糖(（1，3）-β-D-glucan,BG)广泛存在于多种真菌细胞壁中，是真菌的特有多糖成分，包括念珠菌、曲霉菌、镰刀菌及卡氏肺孢子菌．占其干质量的50％以上，细菌、人和病毒都不含该成分,真菌菌丝生长的过程中、进入人体体液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，1，3-β-D葡聚糖可从细胞壁中释放出来，使血液和体液(如尿、脑脊液，腹水，胸水等)中1，3-β-D葡聚糖含量升高，故检测血液中的BG可以协助侵袭性真菌感染（IFI）的诊断，当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清除 1,3-β-D-葡聚糖。

(1-3)-β-D葡聚糖检测与真菌培养联合检测对临床深部真菌感染的对比研究摘要：目的: 评估血清(1-3)-β-D葡聚糖检测定量分析(G实验)与真菌培养联合检测对临床深部真菌感染的诊断意义。

所有真菌细胞膜上都含有(1-3)-β-D葡聚糖，而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分，因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据。

方法: 通过回顾性分析80例怀疑深部真菌感染住院患者的G实验和真菌培养结果,分别计算两种方法及联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。

结果: G 实验和真菌培养联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为88.0%、96.0%、91.7%和94.1%。

G实验的灵敏度和阳性预测值高,真菌培养的特异度高。

结论:血清(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养联合检测可提高实验的灵敏度,减少假阴性的发生,对早期诊断深部真菌感染有一定临床意义。

关键词：(1-3)-β-D葡聚糖；真菌培养；深部真菌感染【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602(2014)03-0210-01近年来随着广谱抗菌药物、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用，临床深部真菌感染率不断上升，已成为医院感染的主要原因之一。

一般来说,通常发生于危重患者,而且病情极易被原发病掩盖,从而导致误诊、漏诊[1]。

通过此研究的结果以便对危重病人深部真菌感染早发现、早治疗降低死亡率。

据统计,近30年深部真菌感染的发病率增加了3~5倍,真菌感染已成为艾滋病的重要死亡原因之一。

引起深部真菌感染的病原菌主要有念珠菌病、孢子丝菌病、隐球菌病、曲霉菌病、毛霉菌病、马尔尼菲青霉菌病、组织孢浆菌病以及球孢子、副球孢子菌病等临床病症。

由于传统的培养方法不能及时提供深部真菌感染的信息,目前一些快速诊断技术,如高分辨CT(HRCT)及检测真菌抗原和核酸的非培养诊断技术得到快速发展。

深部真菌感染患者血清1-3-β-D葡聚糖检测的临床意义发表时间：2016-06-17T10:27:23.853Z 来源：《医师在线》2016年3月第5期作者：姜莉[导读] 深部真菌感染是指致病真菌侵犯皮下组织和内脏等器官，导致器官发生真菌性感染。

姜莉（贵阳市第二人民医院；贵州贵阳550000）【摘要】：目的：讨论血清1-3-β-D葡聚糖检测深部真菌感染的临床意义。

方法：选取我院2015年1月—10月，深部真菌感染患者31例为研究对象，另外在选取20例健康人为对照。

采用MB-80微生物快速动态检测系统测定所有研究对象的血清1-3-β-D葡聚糖的含量。

结果：观察组的患者血清1-3-β-D葡聚糖含量平均值为（5.74±1.35）pg/ml；而观察组的平均值为（268.28±101.07）pg/ml。

观察组的数据明显高于对照组，其差异具有统计学意义（p<0.05）.结论：血清1-3-β-D葡聚糖检测可以在早期为临床提供可靠的感染消息，是一种实用的早期诊断方式。

【关键词】1-3-β-D葡聚糖；深部真菌感染；临床检测深部真菌感染是指致病真菌侵犯皮下组织和内脏等器官，导致器官发生真菌性感染。

具有发病率高、病情快、死亡率高等特点，严重的危害患者的生命安全[1]。

临床中，由于免疫抑制剂、皮质类固醇激素、广谱抗生素和肿瘤化疗药物的大量使用，导致深部真菌感染的发病率不断上升，并且该疾病在发病初期并没有出现什么异常反应，病情容易被隐藏，往往发现时病情已经达到十分严重的地步，因此该疾病在初期时容易出现漏诊或误诊的现象，给患者带来极大的影响[2]。

所以如何在早期快速诊断和治疗深部真菌感染是至关重要的，为了研究检测血清1-3-β-D葡聚糖的临床效果，特选取2015年1月—10月，深部真菌感染患者31例进行研究，现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料，选取我院2015年1月—10月，深部真菌感染患者31例为研究对象，男性患者20例，女性患者11例，年龄17至91岁，平均年龄（35.4±5.5）岁，其中泌尿道感染的患者为15例，呼吸道感染的为10例，血液感染的为4例，静脉插管引起感染的为2例。

检验科细菌室新项目：真菌感染定量检测－（1-3）-β- D-葡聚糖检测（G试验）临床各科室：我科细菌室最新购买的MB-80微生物快速动态检测系统已安装调试完毕，现已应用临床辅助诊断深部真菌的感染。

与真菌培养相结合可提高诊断阳性率。

检测项目：G试验检测标本范围：血液标本送检时间：每周一至周五报告时间：当日报告标本送检要求：采样过程要求无菌操作，常规病人早上用药治疗前空腹采血取样（血透患者透析前采血），标本类型：抗凝静脉血，使用无热原真空采血管（细菌室取采血管），采集血液2-3ml并立即混匀。

半小时内送检。

参考值：1、＜10pg/ml阴性2、10pg/ml—20pg/ml观察3、＞20pg/ml阳性检测目的：检测血液中的1-3-β-D葡聚糖的含量，此物质为真菌细胞壁的特异成分，通过检测该物质的可溶性抗原，可快速诊断深部真菌的感染。

真菌1-3-β-D葡聚糖检测的临床意义：通过对血液中真菌1-3-β-D葡聚糖的含量测定，可早期、快速诊断侵袭性真菌感染，可用于真菌感染早期筛查，适用于念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等，不能用于检测隐球菌和接合菌感染。

对真菌感染症状进行诊断，阳性结果代表存在侵袭性真菌感染注意事项：1对阳性样品，应再次取血检测，以确诊。

2对观察期病人，应每周取1—2次血检测以观察病情发展。

3对确诊病人，应每周做2次检测，以观察用药后的效果。

滨州医学院附属检验科细菌室电话：6582检验科细菌室新项目：内毒素定量检测临床各科室：我科细菌室最新购买的MB-80微生物快速动态检测系统已安装调试完毕，现已应用临床内毒素定量检测。

检测项目：内毒素定量检测检测标本范围：血液标本送检时间：每周一至周五报告时间：当日报告标本送检要求：采样过程要求无菌操作，常规病人早上用药治疗前空腹采血取样（血透患者透析前采血），标本类型：抗凝静脉血，使用无热原真空采血管（细菌室取采血管），采集血液2-3ml并立即混匀。

临床检验G试验和GM试验定义、临床意义、检测结果影响因素区别总结G 试验和GM 试验作为检测真菌抗原非培养技术，已经成为侵袭性真菌感染的诊断指标之一，这两种标志物受到较大关注，是国内外侵袭性真菌病诊断研究热点，并且得到广泛的临床应用。

定义G试验：又称1,3-β-D 葡聚糖试验，是检测真菌的细胞壁成分1,3-β-D 葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高。

1,3-β-D 葡聚糖可特异性激活鲎变形细胞裂解物中的G 因子，活化的G 因子又可使凝固酶原转化为凝固酶，通过旁路途径激活鲎试验，从而产生凝集反应，故称G 试验。

GM试验：是检测曲霉菌细胞壁上的一种多聚糖抗原（即半乳甘露聚糖抗原，glactomannan，GM），半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，在曲霉菌侵袭组织早期，曲霉菌细胞壁外层的GM 可被释放入血，是最早释放的抗原，可以通过酶联免疫吸附试验法进行检测。

GM 试验主要适用于侵袭性曲霉引起的感染。

临床意义G试验方法具有快速、操作方法简单等特点，适用于隐球菌、接合菌（毛霉菌）以外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌引起的感染；G 试验测得包括曲霉和念珠菌在内更多致病性真菌，具有较好敏感性和特异性，假阳性率较低，只能提示有无真菌侵袭性感染，并不能确定为何种真菌感染，这是此方法的缺陷。

GM试验主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。

可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测。

在其他诊断方法阳性之前 6 至14d 即可检测到GM。

另一方面，GM释放量与菌量成正比，可以反映感染的严重程度，连续检测GM也可作为治疗疗效的监测；根据侵袭性肺真菌病诊断指南，其中G试验、GM 试验连续2次阳性为有意义检查结果。

检测结果影响因素▲ G 试验出现假阳性的因素：1.药物因素：①血液制品：静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或新鲜冰冻血浆；②β-内酰胺类抗生素，如青霉素、阿莫西林-克拉维酸钾、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦和氟氯西林等；③抗肿瘤药物：抗肿瘤药物如香菇多糖、多糖Ｋ、裂褶多糖和西索菲兰等是Ｇ试验检测的假阳性因素之一。

真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断一、概述经研究表明,1-3-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%,其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有;深部真菌感染患者中血浆1-3-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性;当真菌进入人体血液或深部组织后,经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后,1-3-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来,从而使血液或其它体液中1-3-β-D葡聚糖含量增高;当真菌在体内含量减少时,机体免疫可迅速对其清除;而在浅部真菌感染中,1-3-β-D葡聚糖未被释放出来,故其在体液中的量不增高,它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI深部真菌感染的标志;二、深部真菌感染的诊治近年来,由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等,临床上侵袭性真菌感染invasive fungal infections,IFI的患病率明显上升;IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一;由于缺少有效的早期诊断手段,深部真菌感染病死率居高不下;对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断,及早用药治疗;常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据,但其培养方法耗时长4-7天,不适宜用作早期诊断;并且,随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用,使得培养的阳性率极低;常用的免疫学方法,也由于抗原抗体反应的特异性差,往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测,既费时又不经济,而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊;对一些以往接触过相应真菌抗原的个体,作抗体检测时还会出现阳性反应,因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断,期末属性较差;有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高,将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验;虽然检测1-3-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染,不能确定为何种真菌,但也可能转化为一种优势;因近年来,一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染,这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法;因系统抗真菌药物种类较少,抗菌谱较广,且不因真菌种类而异,当检测到标本中的1-3-β-D葡聚糖含量较高时,可给予以系统治疗,不必耗时等待鉴定出种属,否则会贻误最佳治疗时机;因此,血清1-3-β-D葡聚糖含量检测不失为一种实用的真菌感染早期诊断方法;并且,相关研究表明,1-3-β-D葡聚糖水平在确诊IFI患者的血清中出现持续升高,而随着药物的使用,对药物敏感者可很快出现1-3-β-D葡聚糖水平下降及转阴,而药物治疗无效人群1-3-β-D 葡聚糖值无明显改变;因此,1-3-β-D葡聚糖可以用来判断药物的疗效,以协助临床医师及时进行药物种类及剂量的调整;通过对人体体液进行1-3-β-D葡聚糖含量检测,可帮助判断人体是否已被真菌感染;对高危患者的样本进行连续分析,可为临床检测提供入侵真菌的量值或阴性预示值,为临床诊断和治疗提供了一种快速检查方法,对提高病人治疗治愈率和指导医生合理用药,以及促进我国医疗事业的发展具有重要意义;三、国内外相关发展情况目前,临床上诊断侵袭性真菌感染invasive fungal infections,IFI的方法主要由宿主因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学4部分组成;血液、支气管肺泡灌洗液中的各种真菌PCR测定,是诊断IFI的微生物学的检测方法;但传统真菌鉴定方法都因周期长、血培养率低而难于快速诊断;研究者也逐渐将早期诊断的注意力转向建立血清学方法来检测真菌菌体成分或代谢产物,如测定白念珠菌的甘露聚糖、烯醇化酶、D-阿拉伯糖醇等;鉴于深部真菌感染时,经吞噬细胞处理,菌胞壁降解成分大量入血,90年代初,有学者建立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成分曲霉半乳甘露聚糖抗原GM和1-3-β-D葡聚糖抗原1-3-β-D-gluean,BG的含量, 用于早期诊断深部真菌感染具有较好灵敏度和特异性,且迅速、简便,并能提示抗真菌药物治疗;BG检测也称G试验是一种新的真菌抗原检测方法,主要由以下研究机构开展,日本东京Wako 纯化学研究所,Seikagaku Kogyo公司,Ma-ruha公司和美国Cape Code协会;其中Cape Code 协会研制的Fungitell试剂盒已被美国FDA批准用于血液病、肿瘤等免疫受损的患者IFI 的诊断;BG是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分,作为真菌抗原具有较高的特异性,原核生物、病毒和人体细胞都不存在这种多聚糖;因此,它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI的标志;真菌细胞壁的主要成分BG的比色法检测试剂盒已广泛用于临床;美国FDA已于2003年批准该试验用于可疑IFI患者血清定性检测;2008年欧洲肿瘤研究治疗组织EORTCIFI合作组IFICG和国家过敏及感染类疾病研究NIAID真菌病研究组MSG将G试验结果列为诊断IFI的诊断标准,但试剂盒必须是FDA认证的;国外多个研究中心为评估该试验的特性已做了大量的回顾性调查,证实其敏感度、特异度及临床一致性均较好;编辑： gaowei2010 来源：。

检验科细菌室新项目：真菌感染定量检测－（1-3）-β- D-葡聚糖检测（G试验）临床各科室：我科细菌室最新购买的MB-80微生物快速动态检测系统已安装调试完毕，现已应用临床辅助诊断深部真菌的感染。

与真菌培养相结合可提高诊断阳性率。

检测项目：G试验检测标本范围：血液标本送检时间：每周一至周五报告时间：当日报告标本送检要求：采样过程要求无菌操作，常规病人早上用药治疗前空腹采血取样（血透患者透析前采血），标本类型：抗凝静脉血，使用无热原真空采血管（细菌室取采血管），采集血液2-3ml并立即混匀。

半小时内送检。

参考值：1、＜10pg/ml 阴性2、10pg/ml —20pg/ml 观察3、＞20pg/ml 阳性检测目的：检测血液中的1-3-β-D葡聚糖的含量，此物质为真菌细胞壁的特异成分，通过检测该物质的可溶性抗原，可快速诊断深部真菌的感染。

真菌1-3-β-D葡聚糖检测的临床意义：通过对血液中真菌1-3-β-D葡聚糖的含量测定，可早期、快速诊断侵袭性真菌感染，可用于真菌感染早期筛查，适用于念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等，不能用于检测隐球菌和接合菌感染。

对真菌感染症状进行诊断，阳性结果代表存在侵袭性真菌感染注意事项：1对阳性样品，应再次取血检测，以确诊。

2对观察期病人，应每周取1—2次血检测以观察病情发展。

3对确诊病人，应每周做2次检测，以观察用药后的效果。

滨州医学院附属检验科细菌室电话：6582检验科细菌室新项目：内毒素定量检测临床各科室：我科细菌室最新购买的MB-80微生物快速动态检测系统已安装调试完毕，现已应用临床内毒素定量检测。

检测项目：内毒素定量检测检测标本范围：血液标本送检时间：每周一至周五报告时间：当日报告标本送检要求：采样过程要求无菌操作，常规病人早上用药治疗前空腹采血取样（血透患者透析前采血），标本类型：抗凝静脉血，使用无热原真空采血管（细菌室取采血管），采集血液2-3ml并立即混匀。

真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定规范操作1.目的建立真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测标准操作规范，保证实验结果的准确性。

2.授权操作人经培训合格的微生物实验室检验人员。

3.实验原理（1-3）-β-D葡聚糖检测原理：真菌（1-3）-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白，根据其所引起的浊度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。

4．产品性能指标4.1 灵敏度10pg/ml4.2 精密度批间CV≤10% 。

4.3 准确性回收率75-125%。

4.4 标准曲线相关系数r绝对值≥0.9805．实验组成5.1实验仪器及器具：MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪，20~200µl加样器、100~1000µl加样器、旋涡混合器、定时器。

5.2实验耗材：200µl无热原吸头、1000µl无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。

5.3试剂盒组成：真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒（光度法）：试剂盒包括反应主剂和样品处理液。

6．工作环境相对湿度：20%~80%；温度控制：10~30℃；电源电压：220V±10%，50Hz±2%。

7．标本采集及保存7. 1检测样本：血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液等。

7.2采集要求：采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管（肝素类抗凝）。

常规病人早上用药治疗前采血/取样（血透患者透析前采血）。

7.3样本保存：样本采集后应在3000转/分进行离心，若不能及时检测，应将血浆转移至无热原转移管内，在-20℃冰箱中冷冻保存，一周内使用。

8．操作程序8.1 打开MB-80微生物快速动态检测系统主机、电脑及恒温仪预热30min。

8.2 打开MB-80微生物快速动态检测系统软件，录入病人信息、样本种类及检测项目等信息后点击采集。

8.3 血液前处理过程，无菌操作，用专用无热原真空采血管（肝素类抗凝）抽取静脉血4ml轻轻混匀，按转速3000r/min进行离心1分钟，得到富含血小板血浆。

真菌(1-3)-β-D-葡聚糖检测60例分析从实际临床检验工作中，深切地感受到，真菌病原体感染仅次于革兰氏阴性杆菌感染和革兰氏阳性球菌感染。

真菌侵入人体组织、血液，并在其中生长繁殖，致组织损害、器官功能障碍、炎症反应，引起深部真菌感染。

(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分，占其干燥重量的80%～90%，其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有［1］。

且(1-3)-β-D-葡聚糖含量与真菌感染数量成正比，故血浆中(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高对深部真菌感染诊疗具有重要意义。

采用MB-80微生物快速动态监测系统进行(1-3)-β-D-葡聚糖检测，对应用抗真菌药物有效的60例病例进行研究，并从中列举2例，分析其在深部真菌感染患者诊疗中的作用。

结果发现，60例(1-3)-β-D-葡聚糖增高患者应用抗真菌药物治疗有效，且测定方法简便、省时。

血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测作为深部真菌感染诊疗的可靠方法，应引起广大临床医师的重视，早诊断、早治疗，避免滥用抗生素。

资料与方法调查对象是2011年4～9月各科住院患者，入院3天内检测(1-3)-β-D-葡聚糖增高且抗真菌药物治疗有效。

共收集到符合条件的患者资料60份，患者年龄20～80岁，平均47.5岁，男女比1.6:1(37/23)。

调查方法：①标本采集方法：用含有少许抗凝剂(肝素钠)的无热原真空玻璃管采取患者血液2ml，及时送检。

②试验方法及判定标准：采用MB-80微生物快速动态监测系统和配套试剂进行(1-3)-β-D-葡聚糖检测，结果判断标准：＞20pg/ml为阳性，完成全部实验步骤约需1～2小时。

结果60例(1-3)-β-D-葡聚糖增高患者应用抗真菌药物治疗有效。

例1：患者，男，21岁，再生障碍性贫血，胸部CT检查，显示双肺感染性改变，右中肺病灶呈圆形，周围有毛刺状改变，内见空洞，提示霉菌感染的可能性极大。

实验室检查：入院后多次作血常规检查，白细胞平均1.2×109/L，血沉和C-反应蛋白(CRP)均升高。

附1真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测标准操作规程1.目的规范真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测的操作规程，保证结果准确性。

2.原理实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)-β-D葡聚糖能够特异性地激活本试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。

利用(1-3)- β-D葡聚糖标准品建立β-D-葡聚糖生物效应与透光度变化关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)- β-D葡聚糖含量。

3.试剂真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测试剂盒，湛江安度斯生物有限公司。

试剂盒包装规格：20人份/盒。

复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。

若当次试验有剩余，可将剩余的试剂溶液置-20℃以下冷冻保存，一周内使用。

不能反复冻融试剂溶液。

4.检测设备：LKM动态试管检测仪。

5.实验用具：250 μl无热原吸头、20-200 μl移液器、75℃试管恒温仪、旋涡混合器、塑料试管架、无热原真空采血管（肝素抗凝剂）。

6.标本采集及送检要求6.1标本采集要求6.1.1采集过程要求无菌操作，用指定的肝素类抗凝、无菌、无β葡聚糖采血管；6.1.2常规住院病人早上用药前空腹采血，血透患者透析前采血。

6.2标本的送检和保存要求标本采集后应在半小时内离心，4小时内检测完。

若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无β葡聚糖的容器内-20℃以下冷冻保存，一周内使用。

7.实验操作7.1在试验开始前，先开启LKM动态试管检测仪，预热，一段时间后发出哔的一声，试管仪温度达到37℃，待用；7.2取本试剂盒所配的无热原真空采血管取受试者静脉血1～2 ml，以400 g离心10分钟；7.3取富含血小板的血浆100 μl，加到样品稀释瓶中，在旋涡混合器上轻轻混匀，然后插入75℃试管恒温仪中加热10分钟；7.4加热10分钟后，将样品稀释瓶从75℃试管恒温仪中取出，使其降至室温即可，即为1:10稀释的样品供试溶液；7.5取β-G试剂1支，开启；7.6取β-G试剂复溶液1支，开启后用移液器取0.25 ml加入β-G试剂中，轻轻摇匀，澄清后得试剂溶液备用；7.7打开检测软件连接LKM动态试管检测仪，进入临床检查采集数据界面，点击“开始”按钮，使检测软件进入待采集状态；7.8取本试剂盒所配的专用反应试管，先取已制备好的样品供试溶液100 μl加入反应试管中，然后加入50 μl试剂溶液，每个样品供试品溶液平行两管；7.9加样完毕，依次拿起试管在旋涡混合器上轻点一下，使试管中的溶液均匀混合，然后把各试管逐一插到LKM动态试管仪中，反应开始，37℃反应75分钟，在反应结束前填写试验相关的信息；7.10反应完毕，检测软件将自动处理数据，计算出样品供试溶液中的（1-3）-β-G葡聚糖测量值，进入“临床检查数据报告”可查看检验结果，进入“临床检查数据分析”可查看反应曲线。