植物激活蛋白对番茄防御酶活性的影响

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灰葡萄孢菌激活蛋白的生物学功能(DOC)

北京农学院
本科生毕业论文开题报告课题：灰葡萄孢菌激活蛋白的生物学功能
学生姓名：张艳丽学号：200920242182 学科、专业：植物保护研究方向：植物病理学入学年月：2009年9月
导师姓名：赵晓燕职称：讲师
填表说明
一、开题报告各项内容要实事求是，逐条认真填写，表达要明确、严谨。

二、开题报告需用计算机打印，一律A4纸双面打印，于左侧装订成册。

三、毕业论文开题报告的一级标题1，二级标题1.1，三级标题1.1.1，
四级标题1.1.1.1，标题字体均为小四号宋体加粗;开题报告内容字体为小四号宋体,行距为1.25倍行距；参考文献字体为五号宋体，格式要求与毕业论文一致。

四、此表填写一式三份，一份交系留存（含电子版），一份交指导教师，
一份学生自存。

四、对开题报告的意见。

新型激活蛋白对多种作物种子发芽的影响

维普资讯
＾ＣＴ＾ＡＨＣＬＵＡＯＩＵＴＲＥＢＲｎＪＳＩｎ０￡－＂ＩＬＣ
华北农学报・０７，２增刊）２ — ４２０２（：１２
新型激活蛋白对多种作物种子发芽的影响
发芽率。
ｍＬ的蛋白浸种６ｈ能显著提高种子的发芽率。黄瓜－，－用５０倍和１
关键词：活蛋白；激种子；发芽率中国分类号：８Ｑ１文献标识码：Ａ文章编号：０００１２０）刊一０１ｏ１０ —７９（０７增０２一４
Ｎｎｉ２００，ｈａ４ＪａｈａｇＡｒｈｍｃｌＣ，ｔ，ｎｎ２００，ｈａａｊｇ１００Ｃｉ；．ｎｎＳｉｎｇｃｅｉｓｏＬｄＪａ５１０Ｃｉ）ｎｎｉｂｏａｉｎ
Ａｂｓｒｃ：Ｉｒｅｏａｐｏｃｈｃａｉｍｆｅｈｎｉｇｐａｔｇｏｈｂｅｆｎａｃｉａｏｒｔｉｔｅｉｆｕｔａｔｎｏｄｒｔｐｒａｈｔｅｍｅｈｎｓｏｎａｃｎｌｎｒｗｔｙｎｗｕｇｌａｔｔｒｐｏｅｎ，ｈｎ－ｖｌ
ＥｆｅｔｆＮｅＴｙｅＡｃｉａｏｏｅｎｏｅｄＧｅｍｉａｉｎｏａｙＣｒｐｆｃｓｏｗｐｔｖｔｒＰｒｔｉｎＳｅｒｎｔｏｆＭｎｏｓ
ｗｕＧａｇｙｎ，Ｉｅｗｎ，ｈｎｑａｗＵＧａｇｆ。ＺＡｈｎ —ｉ４ｕｎ—ａＱＵＤ — ｅＷＵＺｅ —ｕｎ，ｕｎ— ｎ，Ｈ０Ｓｅｇｎａｙｇ

植物激活蛋白(VDAL)对设施甜瓜生长的影响及增效剂增效作用研究

水量。
结果药剂处理区与空白对照无明显差异。研究表明，植物激
茎粗［３］。甜瓜主要农艺性状见表１。
由表１可知，喷施植物激活蛋白（ＶＤＡＬ）２０００倍液对于
１．５田间调查于施药前和施药后７、１４、２１、２８ｄ进行田间
设施甜瓜具有良好的促生长作用，对设施甜瓜的株高、主茎
处理随机调查５点，每点调查１株。在收获期，随机选择果
持效期，施药效果随时间推移逐步上升，药后２８ｄ增长率达
１．６数据处理调查数据采用ＳＰＳＳ１９．０进行分析，采用
２２８．４２％。
２结果与分析
２８ｄ内保持在４．５９％～１１．７５％和５．００％～１８．３２％，效果保持良
Ｄｕｎｃａｎ’ｓ新复极差法进行方差分析。
２．１ＶＤＡＬ与３种增效剂对设施甜瓜主要农艺性状的影
响施药后经连续调查观察，喷施植物激活蛋白（ＶＤＡＬ）处
喷施ＶＤＡＬ甜瓜主茎粗和主茎叶片数增长速率在药后
好，表现较为理想。
表１喷施维达利安（ＶＤＡＬ）对设施甜瓜主要农艺性状的影响
Ｔａｂｌｅ１ＥｆｆｅｃｔｏｆｓｐｒａｙｉｎｇＶＤＡＬｏｎｍａｉｎａｇｒｏｎｏｍｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｓｏｆｐｒｏｔｅｃｔｅｄＣｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏＬ．
８．９９％；糖度达１５．２７％，较ＣＫ提升了４．３３％。在植物激活蛋白ＶＤＡＬ中添加３种增效剂（激键、杰效利、意欧）处理后，施药效果明显提
高，其中添加杰效利增加最为明显，在株高、主茎粗和主茎叶片数等方面药后７ｄ增效比分别达２．３２、３．２３和１．９９；在单果重、单果直径、
导和激活植物对病虫害的抗性，调节植物生长代谢系统、促

植物激活蛋白在蔬菜中的应用现状研究

２０００年邱德文博士从植物病原真菌中提取获
得一类新型蛋白质，经氨基酸和核酸序列分析表
通过与植物受体蛋白的相互作用，诱导植物的信号传导，激活植物的一系列代谢调控反应，目前的研究证明，苯丙氨酸解氨酶（Ａ）过氧化物酶ＰＬ、
３．引植和恢复经济类水生植物，通过试验种植．１４藕莲、菱角、芦苇等具有较高经济价值的湿生、水
生植物，提高水生植物收割和利用率，转移水体
氮、磷等营养盐，降解污染物质，抑制藻类过度生
长，净化水质。３．开展渔业增殖放流，通过科学选择、合理搭．２４配放养草食性、滤食性种类摄食水草、消耗浮游生
化，从而达到改善水域生态环境。
ห้องสมุดไป่ตู้
结构设计，充分利用当地天然生物物种，慎重引进
外来种，提高衡水湖水体自净能力和自我修复能
力。
参考文献
３５利用生态补水。在对污染源进行控制的前提．下，实施生态补水，并力争变应急补水为常规补水，引清水入湖，加大水资源调度，增加经常性下泄量，以稀释水体，迅速有效地改善水质。３６利用疏浚作业。对沉积较深的污染底泥，采．
植物自身的防御系统，启动植物体内一系列的代谢反应，最终加强植物对病原物的抗性或免疫力。

四种农药对番茄叶片抗氧化相关酶活性的影响

四种农药对番茄叶片抗氧化相关酶活性的影响于高波;杜康健;李贤;张光辉;赵长江;魏金鹏【摘要】为了揭示农药对番茄叶片抗氧化相关酶活性的影响,以番茄为试验材料,利用四种具代表性杀虫剂,毒死蜱、氯虫苯甲酰胺、苏云金杆菌、噻虫嗪分别处理番茄叶片,并测定其APX、PPO、CAT、POD酶活性及相应的蛋白含量.结果表明,农药杀虫剂处理番茄后,番茄叶片蛋白含量受到除苏云金杆菌处理外的其他农药处理的不同程度的影响,番茄叶片的抗氧化系统也发生了明显的变化,抗氧化酶活性呈现出不同程度的提高以响应农药处理,但均随时间的延长而逐渐变小.APX、PPO、CAT酶活性在农药处理后12 h~1 d期间达较高水平,POD酶活性在噻虫嗪、苏云金杆菌、氯虫苯甲酰胺三种农药处理后,均在3 d时达到最高值,7d左右恢复至对照水平,但这种差异因农药种类的不同存在着一定差异,其中毒死蜱对番茄抗氧化酶活性的影响与其他农药相比有所不同.【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2017(029)004【总页数】5页(P16-19,136)【关键词】番茄;农药;抗氧化酶【作者】于高波;杜康健;李贤;张光辉;赵长江;魏金鹏【作者单位】黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学农学院,大庆 163319【正文语种】中文【中图分类】S6随着化学工业的发展，农药在作物病虫害的有效防治及作物高产的保障方面扮演了重要的角色。

但农药是把双刃剑，其带来的农药残留问题已逐渐引起了人们的高度重视[1]。

已有研究发现在施农药时，仅约1%农药作用于靶标生物，其余主要残留在植物体或留于土壤或水域[2]。

目前针对杀虫剂、杀菌剂等农药的已有研究多集中在农药对有害生物的毒杀作用及农药的毒理，而针对其处理后对植物产生影响的研究相对较少。

8种生物源和矿物源农药防治加工番茄细菌性斑点病试验

8种生物源和矿物源农药防治加工番茄细菌性斑点病试验韩盛;杨渡;徐万里;孙保成;张云舒;孙肃民;马永尚【摘要】[目的]研究8种生物源和矿物源农药对加工番茄细菌性斑点病的防治效果,筛选出更加适合番茄制品出口食品安全要求的高效农药.[方法]采用田间小区试验,比较8种生物源和矿物源农药对加工番茄细菌性斑点病防效差异.[结果]第3次施药后7 d各药剂的防效分别为:77%氢氧化铜干悬浮剂73.11%、37.5%氢氧化铜悬浮剂67.43%、波尔多液64.78%、2.0%氨基寡糖素水剂51.14%、4%春雷霉素可湿性粉剂50.38%、3%多抗霉素可湿性粉剂45.46%、0.5%小檗碱水剂43.45%,植物激活蛋白防效最低仅为29.17%.[结论]77%氢氧化铜干悬浮剂、37.5%氢氧化铜悬浮剂和波尔多液3种矿物源农药防效较高,且更适合加工番茄产品出口的食品安全要求.【期刊名称】《新疆农业科学》【年(卷),期】2010(047)011【总页数】4页(P2258-2261)【关键词】加工番茄;细菌性斑点病;生物源农药;矿物源农药【作者】韩盛;杨渡;徐万里;孙保成;张云舒;孙肃民;马永尚【作者单位】新疆农业科学院植物保护研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院植物保护研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院土壤肥料与农业节水研究所,乌鲁木齐,830091;乌苏古尔图农牧业发展有限责任公司,新疆乌苏,833203;新疆农业科学院土壤肥料与农业节水研究所,乌鲁木齐,830091;乌苏古尔图农牧业发展有限责任公司,新疆乌苏,833203;乌苏古尔图农牧业发展有限责任公司,新疆乌苏,833203【正文语种】中文【中图分类】S436.4120 引言【研究意义】番茄细菌性斑点病亦称番茄细菌性叶斑病或斑疹病,是由丁香假单胞杆菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)引起[1,2],危害加工番茄的叶、茎、花、叶柄和果实,该病在低温、多雨天气及田间湿度大的条件下易流行。

植物蛋白激酶MAPK及其在病原信号传导中的作用

植物蛋白激酶ＭＡＰＫ及其在病原信号传导中的作用【摘要】：植物蛋白激酶在信号传递过程中越来越受到关注。

促细胞分裂剂激活性蛋白激酶（MAPK）是一类存在于各种真核生物体中的丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶。

它被上游激活因子MAPKK磷酸化而激活，并通过将底物蛋白上的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化而传递信号。

它与其他一些信号分子组成MAPK级联信号通路，接受外界刺激信号，将信号转入细胞内，影响特定基因的表达，它的作用受到不同因子的调节。

文章主要介绍了植物体中的MAPK的结构特点、分类以及其在病原信号传导中的作用。

【关键词】：植物蛋白激酶；MAPK；MAPK级联；信号传导蛋白质的磷酸化与去磷酸化过程是生物体中普遍存在的一种调节机制,几乎涉及所有的生理和病理过程,如糖代谢、细胞的生长发育、光合作用、基因表达、神经递质的合成与释放、不良环境的适应、甚至癌变等等,它在细胞信号转导中起重要作用[1] 。

蛋白质的磷酸化作用由蛋白激酶催化,这方面的研究最初集中在酵母和动物领域,植物蛋白激酶的研究起步较晚,但近年来发展很快。

1. 植物蛋白激酶的类型迄今已从拟南芥、烟草、小麦、玉米、水稻、黑麦、燕麦、豌豆、大豆、苜蓿、菠菜、番茄、苹果、土豆和十字花科等的植物中发现许多蛋白质激酶或其基因。

根据hanks 和hanter以及stone和walker的分析，可把这些酶归入4类蛋白质激酶之中（表1），但目前尚未在植物体系中发现第Ⅳ类蛋白质激酶。

表1 植物蛋白质激酶特性及可能作用2. MAPK的结构特点和分类植物MAPK 级联激酶的研究开始于90 年代初,但近几年发展很快[2] ,现已在植物中发现了大量MAPK家族成员,而且在植物中识别出的MAPK数量比在动物和酵母中还多,不少编码MAPK和一些编码MAPKK与MAPKKK的基因也已从植物中分离到。

MAPKs是一类丝氨酸，苏氨酸fSer，r1蛋白激酶．广泛存在于真核生物中。

与一些其他的信号分子组成MAPK级联途经。

冷激诱导采后番茄果实的抗病性及H2O2在其中的作用

冷激诱导采后番茄果实的抗病性及H2O2在其中的作用王菲1 申琳2 生吉萍31中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京（100083）2中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京（100083）3中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京（100083）E-mail:fwang831212@摘要：本实验以918号番茄为试材，研究冷激对采后番茄果实抗病性的影响以及H2O2在其中的作用。

结果表明，冷激提高了番茄果实的抗病指数，诱导了冷藏初期番茄果实中H2O2含量的升高和谷胱甘肽S转移酶活性的提高，并且诱导了抗病相关酶PAL，几丁质酶和B-1,3葡聚糖酶的活性增加。

外源H2O2可以促进冷激诱导的果实内H2O2含量的升高和谷胱甘肽s转移酶的提高，并且促进抗病相关酶活的诱导，而外源抑制H2O2会使诱导作用大大减弱。

由此得出结论，冷激可以诱导采后番茄果实的抗病性，提高抗病相关酶活，H2O2参与了冷激介导的抗病性增强。

关键词：番茄，冷激，病害，H2O2，抗病相关酶中图分类号：TS255.1Induced disease-resistance of postharvest tomatos bycold-shock and the effect of H2O2 during the inductionprogressFei Wang, Lin Shen, Jiping ShengChina Agricultural University, the College of Food Science and Nutritional EngineeringAbstract: The effects of hydrogen peroxide on the induced disease-resistance of tomato fruits bycold-shock treatment were studied. Cold-shock treatment can induce the disease-resistance of tomato fruits, enhance the endogenous H2O2 content in the beginning of storage and increase the activity of GST. Also, cold-shock can induce the activities of some anti-disease enzymes, including PAL, chitinase本课题受到2007年国家自然基金项目资助。

番茄抗叶霉病分子机制研究进展

安徽农学通报2023年09期病原菌·有害生物·动植物防护作者简介牛义岭（1993—），女，硕士，农艺师，从事作物栽培技术推广工作。

收稿日期2022-11-25番茄抗叶霉病分子机制研究进展牛义岭商丽敏（安达市农业技术推广中心，黑龙江安达151400）摘要叶霉病是番茄常见病害之一，发病后不仅会阻碍植株生长，果实品质和产量也显著下降。

抗病育种依然是防治该病害最有效的方法。

在与叶霉病的长期互作过程中，番茄已经进化出一系列抗性机制以抵抗病原菌入侵。

在分子水平上关于番茄对叶霉病抗性机制的研究已有很多，主要集中在Cf 抗性基因的克隆及抗病机制分析等。

本文主要综述了番茄叶霉病的生理小种、抗病基因结构和功能等分子抗性机制的研究进展，以期为番茄抗病育种提供一定的参考。

关键词番茄；叶霉病；分子抗性机制中图分类号S436.412文献标识码A文章编号1007-7731（2023）09-0137-03叶霉病又称黑毛病，病原菌是半知菌亚门真菌，其定名为黄枝孢菌。

当植株被侵染后，发病快、蔓延快，若防控不到位，很可能造成绝产。

该病害虽然可以侵染植株的整株器官，但主要危害叶片，当环境适宜或病情严重时也会危害茎、花和果。

植株被病菌侵染后，光合能力减弱，养分汲取和积累下降。

叶片最先出现病症，主要表现为叶表面出现椭圆形或不规则的淡黄色病斑，叶背面长出白色霉层，为病原菌的菌丝体，随着病情加重，白色霉层褐变直至变为黑褐色绒毛状，即为病原菌的分生孢子、分生孢子梗。

在高温高湿环境下，发病叶片正面也会长出黑霉。

1番茄叶霉病菌的侵染机制番茄叶霉病菌的侵染能否成功取决于与寄主植株的亲和性。

番茄叶霉病菌的侵染机制包括2种，①与抗病番茄品种的非亲和互作类型。

在适宜的温湿度条件下，病原菌分生孢子落在叶片上，萌发形成芽管，而后生长形成菌丝，菌丝通过叶片气孔向维管组织生长、吸收营养。

在这一过程中会激发寄主对病原菌的防御反应，防御反应启动后一方面部分菌丝则不能穿过气孔或穿过气孔后会生长停止，另一方面菌丝肿胀弯曲，无法在叶片内生长蔓延，因此病菌菌丝只存在于侵染部位附近区域内，形成坏死病斑，这一过程也被称为过敏反应[1]。

过表达番茄叶绿体小分子热激蛋白提高植株的耐热性

一
３）引物Ｒ５一ＣＡＡＧ１ ℃ ＣＡｒＩＡＧ一 ’用ｐＮｏｍｒｅ行ＰＲ扩增，ＢｍＨＩ和Ｅｏ酶 ’和（ ’ ＣＣ从＿ＡＵＧＧＴＣ￣ＡＩ３）ｆＤＡＰｌｅａ进ＩＩｕｙｓＣ用ａｃＲＩ双
能保护光系统 Ⅱ ，ＰＨＰ的组成型表达可以缓解番茄氧化伤害ｌ，］ＣｓＳ６重金属胁迫时，］增加ＣｓＳ含量可以保护植物的光合电ＰＨＰ
子传递和净光合速率，）这些研究结果表明ＣｓＳＰＨＰ对植物叶绿体有保护作用一个是完整基因序列全长（ｏｐ，ｅｐｐｃＮ＿其ｓＪ８ｏｂ）经测序与Ｇｎａｋ中ｅｂｎ已发表序列（Ｐｕ６０）Ｃ６３ｏ相差２个碱基，编码区１８１位丙氨酸代替了苏氨酸．实验构建了由ＣＭＶ５本ａ３Ｓ启动子驱动的植物表达载体，运用农杆菌介导方法将番茄叶绿体ｓＳＨＰ基因（简称Ｌ一ｅ析表明，ｅ一Ｌ）导人番茄．对转基因植株的Ｎｒｅ和Ｗｅｅｎ杂交分ｏｈｒｔｎｓｒｔ已在植株中呈现组成型表达，与对照番茄相比，转基因番茄的耐热性明显提高．
Ｖｏ．３Ｎｏ４１２．
过表达番茄叶绿体小分子热激蛋白提王佳颖王丽刘箭一
（山东师范大学生命科学学院，５１， ∥第一作者２岁，，２０４济南０６女硕士生）
５／ｄＯｎ卡那霉素的Ｍｓ培养基上，筛选能够生长侧根的幼苗，继续培育并自交结实，到获得纯合转基因番茄．直
１３原核表达载体的构建及包涵体的纯化以Ｌ —ｃ￣ＤＡ为模板，．ｅｐｐｃＮｓ利用引物Ｆ５一ｃＡＧ（ ’ ＡＧ ℃ＣＴＡ ℃ ＣＩ＇ＡＡＧＡＡ１￡ｒｃｃＡＩＡ

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收稿日期：2008-03-10 基金项目：国家“973”项目(2003CB114204) 作者简介：李丽(1978-)，女，湖南娄底人，硕士，湖南文理学院讲师．*通讯作者：dewenqiu@．
的病程相关蛋白 (pathogenesis-related protein ， PR)[1,4].植物激活蛋白[5-6]是从真菌中分离提取的一类具有促进植物生长[7-8]和提高植物抗性的蛋白激发子，它对灰霉病菌(Botrytis cinerea)等多种植物病原真菌有较好的防效，防效达71.03%以上[9]．笔者以2 µg/mL植物激活蛋白和灰霉病菌孢子悬浮液分别处理番茄叶片，比较番茄叶片防御酶活性的变化，以期从诱导抗性的角度分析植物激活蛋白的诱导抗病性，为植物激活蛋白诱导抗性机理的研究提供参考.
536
湖南农业大学学报(自然科学版)
2008 年 10 月
POD 活性比对照增加 118.72%，PPO 增加 101.79%； 6 d 时 2 种酶活性下降，但 POD 仍比对照高 98.25% ，PPO 比对照高 58.06%．植物激活蛋白与病菌同时处理植株，叶片中 POD 和 PPO 活性均显著高于对照，且变化趋势与植物激活蛋白单独诱导处理基本一致．病菌单独接种也能诱导 POD 和 PPO 活性增加，但与植物激活蛋白诱导处理相比，POD 活性增加幅度较小，第 6 天时 2 种酶活性下降比较快(图 3、图 4)．
李丽 1，2，刘峥 1，杨秀芬 1，邱德文1*
(1.中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所，北京 100081；2 湖南文理学院生命科学系，湖南常德
415000)
摘要：用 2 µg/mL 植物激活蛋白处理番茄叶片，测定番茄叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、
POD 同工酶、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)含量．结果表明：经植物激活蛋白诱导处理后，防御酶活性明显增强．诱导 1 d 后，PAL 活性最大，是对照的 3.93 倍，8 d 后仍为对照的 3.4 倍；POD 和 PPO 诱导后 4 d 活性最高，分别比对照增加 118.72% 和 101.79%，8 d 后仍比对照高；SOD 活性诱导后 4 d 达高峰，8 d 后稍高于对照．POD 同工酶活性诱导后 3 d 比对照增加了 88.96%，同时还出现了新的酶带．
关键词：植物激活蛋白；番茄；诱导抗性；防御酶；灰霉病菌
中图分类号：Q554+.9
文献标识码：A
Effect of plant activator protein on tomato defence enzyme
LI Li1，2，LIU Zheng1，YANG Xiu-fen 1，QIU De-wen1* (1.Institute of Environment and Sustainable Development in Agriculture，Chinese Academy of Agricultural Science，Beijing 100081，China；2.Department of Life Sciences，Hunan University of Arts and Science，Changde，415000 China）
2.2 植物激活蛋白对番茄POD同工酶的诱导作用
图 5(a)显示，2 µg/mL 的植物激活蛋白作用于番茄品种中蔬 6 号，POD 同工酶谱带出现新的条带和条带亮度的变化．处理后第 3 天，POD 同工酶谱带与空白对照具有极显著性差异(P<0.01)，b1(Rf＝ 0.49)，b2(Rf=0.53)条带加强，分别比对照增加了 88.96%、43.16%．水杨酸处理从第 1 天开始出现新的条带和条带亮度的变化.
植物激活蛋白诱导处理后第 2、4、6 天，各处理株 SOD 活性与对照相比均有不同程度升高，8 d 后仍高于对照，且每处理株第 4 天达高峰，但处理 1 上升幅度低于病菌单独处理或植物激活蛋白与病菌同时处理(处理 3、4)，可能有利于活性氧短暂积累，激发诱导抗性产生(图 2).
300
处理1
处理2
性迅速上升．第 4 天达最大值，为对照的 3.93 倍；第 6 天仍保持较高的水平，为对照的 3.65 倍；第 8 天仍为对照的 3.4 倍．植物激活蛋白和灰酶病菌同时接种时，PAL 活性第 2 天为对照的 2.45 倍, 第 4 天达高峰值，为对照的 3.34 倍；4 d 后开始下降，但下降幅度较小，第 8 天仍为对照的 2 倍以上．病菌单独接种后叶片中 PAL 活性的增加幅度小于植物激活蛋白及植物激活蛋白和灰酶病菌同时接种处理，第 6 天和第 8 天 PAL 活性比植物激活蛋白诱导处理分别低 50.0%和 66.67%(图 1).
POD活性/(U·g－1·min－ 1)
200
处理1 处理2 处理3 处理4
180
160
140
120
100
80
60
40
20
Hale Waihona Puke 0124
6
8
接种后时间/d
图 3 植物激活蛋白对番茄叶片 POD 活性的影响
Fig.3 The activities of POD in tomato leaves induced by plant activator protein
1.2 方法
1.2.1 诱抗试验
设 4 种处理．处理 1：清水对照；处理 2：用毛笔将 2 µg/mL 植物激活蛋白液涂抹于番茄植株下部第 2 叶位叶片，3 d 后进行 1 次加强处理．处理 3：植物激活蛋白加强处理后，立即以病菌 BC-1 菌丝贴叶接种；处理 4：未经任何处理直接贴叶接种灰霉病病菌．每处理 10 株，重复 3 次．试验植株 25 ℃ 下保湿 24 h. 1.2.2 防御酶活性测定
Abstract：The induced resistance was studied in tomato leaves treated with 2 µg/mL plant activator protein. The phenylalanine ammonia-lyase(PAL), peroxidase(POD) and its isozyme,polypenoloxidase(PPO) and superoxide dismutase(SOD)concentration of tomato were tested. Results show the activities of defense enzyme in tomato leaves increased obviously. The activities of PAL peaked 1 day after the treatment while the activities of SOD, POD and PPO reached their maximum 4 days after the treatment．Compared with control, PAL, POD, PPO and SOD in treated leaves kept higher activities for 8 days during the experiment．Peroxidase isozyme in treated leaves reached the peak 3 days after inoculation 88.96% higher than that in the contro1,which could induce the thickening of the original isozyme bands and the expression of some new isozyme bands．
分别在诱导处理后1、2、4、6、8 d取样．称取 0.50 g样品，置于5 mL 50 mmoL/L pH 7.0的磷酸缓冲液(含1%的聚乙烯吡咯烷酮)中冰浴研磨匀浆，在 0～4 ℃下12 000 r/min离心20 min，上清即为粗酶液，－20 ℃ 冰箱中保存备用．PAL、POD、PPO 活性测定参照文献[11]、[12]方法进行．SOD活性测定参照文献[13]方法稍作修改：5 mL反应液中含25 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.8)、13 mmol/L 甲硫氨酸， 75 µmol/L氮蓝四唑(NBT)、10 µmol/L EDTA-Na2、2 µmol/L核黄素，加入83 µL酶液．SOD以抑制NBT 光化还原50%作为一个酶活单位；PAL、POD、PPO 酶活性单位采用以U/(g ·min)表示. 1.2.3 POD同工酶
PPO活性 /(U·g－1·min－1)
10
处理1 处理2 处理3 处理4
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
1
2
4
6
8
接种后时间/d
图 4 植物激活蛋白对番茄叶片 PPO 活性的影响
Fig.4 The activities of PPO in tomato leaves induced by plant activator protein
1 材料与方法
1.1 材料
植物激活蛋白提取自链格孢菌(Alternaria sp.)
第 34 卷第 5 期
李丽等植物激活蛋白对番茄防御酶活性的影响
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(由中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所蛋白质药物工程实验室制备)[10]；番茄品种为中蔬6 号，在25~28 ℃、自然光周期的温室内培育至4~6 叶期供试验用．番茄灰霉病菌孢子悬浮液的制备：在PDA培养基上培养番茄灰霉病菌7~9 d，收集孢子制成孢子悬浮液．
第 34 卷第 5 期 2008 年 10 月
湖南农业大学学报(自然科学版) Journal of Hunan Agricultural University (Natural Sciences)