抗肿瘤药物体内筛选试验标准操作规程(SOP)

抗肿瘤药物药效学实验方法及指导原那么一、根本原那么1.抗月中瘤药物分类(1)细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2)生物反响调节剂(biological response modifier)；(3)月中瘤而寸药逆转齐1J (resistance reversal agent)(4)月中瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)(5)月中瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；(6)分化诱导齐1J (differentiation inducing agent);⑺ 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；(8)反义寡核甘酸(antisense oligonucleotide).2.抗月中瘤药物药效学需研究内容2.1包括体外抗月中瘤试验,体内抗月中瘤试验.2.2评价药物的抗癌活性时,以体内试验结果为主,同时参考体外试验结果以做出正确的结论.2.3I类抗月中瘤新药应进行药物作用机制初步研究.二、体外抗月中瘤活性试验1.试验目的1.1对候选化合物进行初步筛选；1.2了解候选化合物的抗瘤谱；1.3为随后进行的体内抗月中瘤试验提供参考,如剂量范围、月中瘤类别等.2.试验方法选用10-15株人癌细胞株,根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度, 按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唾盐MTT复原法、XTT复原法、磺酰罗丹明B(SR染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用.药物与细胞共培养时间一般为48-72小时,贴壁细胞需先贴壁24小时后再给药. 试验应设阳性及阴性对照组,阳性对照用一定浓度的标准抗月中瘤药,阴性对照为溶媒对照.3.评价标准以同一样品不同浓度对月中瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线,然后采用Logit法计算半数有效浓度〔IC50值或EC50值〕.体外试验至少重复一次. 附注：评价药物抗癌活性的方法：1. MTT复原法1.1根本原理：四氮口坐［MTT,3-〔4,5-dimethylibiazol-2-yl〕-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide］是一种能接受氢原子的染料.活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲［月替］〔formazan〕,而死的细胞那么无此功能.用二甲基亚讽〔DMSO〕溶解甲［月替］后,在一定波长下用酶标仪测定光密度值,即可定量测出细胞的存活率.1.2操作步骤：1.2.1选用对数生长期的贴壁月中瘤细胞,用胰酶消化后,用含10%小牛血清的RPMI l640培养基配成5000个/ml的细胞悬液,接种在96孔培养板中,每孔接种200晨37C, 5%CO2 培养24 h.1.2.2实验组换新的含不同浓度被测样品的培养基,对照组那么换含等体积溶剂的培养基,每组设3〜5平行孔,37C, 5%CO2培养4〜5 d.1.2.3弃去上清液,每孔参加200仙新鲜配制的含0.2 mg/ml MTT的无血清培养基.37c继续培养4 h.小心弃上清,并参加200履DMSQ用微型超声振荡器混匀后,在酶标仪上以试验波长为570 nm,参比波长为450 nm测定光密度值.1.3结果评定：按下式计算药物对月中瘤细胞生长的抑制率：月中瘤细胞生长抑制率%= 〔1- OD实验/OD对照〕100%以同一样品的不同浓度对月中瘤细胞生长抑制率作图可得到剂量反响曲线,从中求出样品的半数杀伤浓度IC50.合成化合物或植物提取纯品的IC50<10世"m1 或植物粗提物的IC50<20 N/m1时,那么判断样品在体外对月中瘤细胞有杀伤作用.2.生长曲线法的根本原理：在最适条件下,月中瘤细胞在培养液中呈指数生长,如取细胞数的对数与培养时间作图可得一条直线,故称此时为对数生长期.随着细胞密度不断增高,由于代谢产物的积聚及营养物的消耗,细胞生长逐渐减慢以致停止,此时称高坪期或稳定期.因此药物对细胞生长的影响可通过生长曲线反映出来.3.染料排斥试验的根本原理：活细胞有排斥某些染料如伊红、台盼蓝、苯胺黑等的水平,而死细胞由于膜完整性的破坏,可被着色.因此培养的月中瘤细胞中参加这些染料,一定时间后,对着色和未着色的细胞进行计数,即可算出被杀死的细胞比例.4.集落形成法的根本原理：克隆原细胞具有持续增殖水平,当单个细胞分裂6代或6代以上时,其后代所组成的群体(集落)便含50个以上细胞.通过集落计数可对克隆原细胞作定量分析. 它反映了单个细胞的增殖潜力,故能较灵敏地测定抗癌药的活性,日前被认为是一种较理想的检测方法.常用的集落形成法可分为贴壁法及半固体培养法两种.5. SRB法的根本原理：SRB(sulforhodamine &是一种蛋白质结合染料,粉红色,可溶于水.SRB可与生物大分子中的碱性氨基酸结合.其在515 nm波长的OD读数与细胞数呈良好的线性关系.故可用作细胞数的定量.MTT法的一个缺点是OD值可随放置时问而变,而SRB法无此现象.因此更适用于进行大规模的试验. 三、体内抗月中瘤试验体内抗月中瘤试验必须选用三种以上月中瘤模型,其中至少一种为人癌裸小鼠移植模型或其它人癌小鼠模型.试验结果三种模型均为有效,再重复一次也为有效,评定该化合物对这些实验性月中瘤具有治疗作用.鼓励使用人类月中瘤裸鼠移植瘤模型和多种类的移植瘤模型、原位接种模型和中空纤维测定(hollow-fiber assay)等方法.1.动物动物要求健康,符合等级动物要求,有实验动物合格证.雌雄均可,但同一批实验中动物性别必须相同.小鼠鼠龄为5-6周,体重为18-22克.评价同一物质的活性时,不同批次的实验必须采用同一品系的小鼠2.月中瘤模型2.1小鼠月中瘤模型淋巴细胞白血病腹水瘤L1210和P388、白血病L-615、宫颈癌U14、肝癌H22、Lewis肺癌、黑色素瘤B16、网织细胞瘤M5076、肠癌26、肠月M癌38、乳腺癌CD8F1、艾氏腹水瘤(EAC)、肉瘤-180等,以及各种小鼠月中瘤的亚型和耐药株等.2.2人癌裸小鼠移植瘤模型应选用体外试验敏感细胞株进行体内抗人癌裸小鼠移植瘤试验.模型建立和使用应注意：(1)移植瘤一般由相应的细胞株移植而建立,对细胞株和移植瘤的化疗敏感性应予了解.(2)移植瘤复苏后一般应传2-3代后再用于体内抗月中瘤试验.(3)对模型生长情况应全面了解,尤其是生长快的模型(4)为了保持移植瘤的生物学特性和遗传特性,复苏后移植瘤体内传代应少于15-20 代3.试验过程3.1接种：月中瘤接种方法主要有皮下接种、腹腔接种和原位接种.3.1.1皮下月中瘤模型选择肿瘤生长旺盛且无溃破的荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,在无菌条件下(超净台或接种罩),用碘酒、酒精或新洁尔灭消毒动物皮肤,切开皮肤,剥离月中瘤.将瘤组织剪成1.5 mm3左右,用套管针接种于动物一侧或双侧腋窝皮下；或制成细胞悬液,然后按一定比例参加无菌生理盐水, 一般每只小鼠接种肿瘤细胞数量为(1-5) M06.3.1.2腹水瘤模型无菌条件下,消毒动物皮肤,吸取生长良好的动物腹水,以生理盐水按一定比例稀释后接种于动物腹腔,接种细胞数量一般为(1-5) X106.3.1.3原位接种模型原位接种是指将来源于某脏器的月中瘤接种在动物的某脏器,如将人肝癌接种在裸小鼠的肝脏.原位接种不是常规的方法,但有其优越性,是鼓励使用的方法.主要有肺、肝、胃、肠、乳腺、颅内等原位接种方法.3.2动物分组3.2.1试验设阴性对照组、阳性对照组、治疗组.3.2.2治疗组设高、中、低三个剂量组.小鼠月中瘤和腹水瘤接种后次日将动物随机分组,裸鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径,待月中瘤生长至100—300mm3后将动物随机分组.3.2.3动物数普通小鼠每组10只,裸鼠6只.阴性对照组动物数为治疗组动物数戏验组数1/23.3剂量设置3.3.1治疗组设高、中、低剂量治疗组,一般按4:2:1设置,高剂量使用最大耐受量或LD10的剂量.3.3.2阴性对照组给予相应的溶剂；3.3.3阳性对照药选用对该动物敏感的、临床应用的抗月中瘤药物,3.3.4如受试物为一抗癌药物的衍生物或类似物时,必须选用该抗癌药物作为阳性对照药.3.4阳性对照药选择原那么疗效确切；与被试物质化学结构类似；与被试物质有类似的作用机理.3.5药物配制溶于水的药物,用生理盐水或蒸储水配制；如用酸、碱溶解者,可先用小量酸(0.1-0.5N HCl)或碱(NaHCO3、Na2CO3、NaOH)溶解,调节pH 在 4.5-9.0 的范围内.用乙醇、丙二醇、吐温80、DMSO助溶的药物,或用吐温60、吐温80、2-3% 淀粉、0.5%竣甲基纤维素制成混悬液的药物,可腹腔注射或口服,但必须设相同浓度的溶剂对照组.用注射用花生油配制的溶液或乳剂可口服、皮下或肌肉注射.3.6给药方案和给药途径分组当日开始给药,根据不同药物的代谢动力学和毒性反响等确定给药方案.给药途径应与推荐临床用药的途径相同.给药次数较多,或被试物质溶解性较差,静脉给药有困难时,可考虑使用腹腔给药,但在评价药效时要注意这两种给药途径是有差异的.可采取瘤周、瘤内、肌肉、皮下给药途径.腹水瘤试验时一般不能应用腹腔给药途径.4评价标准4.1腹水瘤模型接种给药后,观察和记录动物死亡时间,计算生存天数.如阴性对照组20%动物存活时间超过4周,说明腹水瘤生长不良,实验作废.采用中位生存时间(即median survival time,MST)来评价每组的生存时间 ,其计算公式为：每组鼠数的中间数-中间生存天数前死亡的鼠数MST=(中间生存天数-0.5) +中间生存天数死亡的鼠数治疗组与对照组的比拟,采用T/C (%)来表示,计算公式为：T MSTT/C % = X 100%C MSTT MST:治疗组MST ; C MST:阴性对照组MST.评价标准以125%为界,当T/C%> 125%时.视为有效,反之那么无效.4.2裸鼠移植瘤模型推荐使用测量瘤径的方法,动态观察受试物抗月中瘤的效应.月中瘤直径的测量次数根据移植瘤的生长情况而定,一般为每周2-3次,每次测量同时还需称鼠重.月中瘤体积(tumor volume,TV)的计算公式为：V = 1/2 a>Ob2 或兀/6 XaXbXc其中a、b、c分别表示长宽高.两公式的相关性极好,可采用任一公式.根据测量结果计算出相对月中瘤体积(relative tumor volume, RTV), RTV = Vt /V0O其中V0为分笼给药时(即d0)测量所得月中瘤体积,Vt为每一次测量时的肿瘤体积. 抗月中瘤活性评价指标为相对月中瘤增殖率T/C (%)TRTVT/C % = X 100%CRTVTRTV:治疗组RTV ; CRTV:阴性对照组RTV.疗效评价标准：T/C % >60 %为无效；T/C %060%并经统计学处理P<0.05为有效.4.3小鼠月中瘤模型生长较慢小鼠月中瘤采用与裸鼠移植瘤同样的测量瘤径的评价方法.生长较快小鼠月中瘤可采用称瘤重的方法评价. 试验结束后处死动物,称体重,解剖剥离瘤块,称瘤重.阴性对照组月中瘤平均瘤重小于1克,或20%月中瘤重量小于400毫克,表示月中瘤生长不良,试验作废.疗效评价公式：给药组平均瘤重-阴性对照组平均瘤重月中瘤生长抑制率= X100%阴性对照组平均瘤重评价标准：月中瘤生长抑制率<40%为无效；月中瘤生长抑制率 ?40%并经统计学处理P<0.05 为有效.4.4原位接种模型不同原位接种模型可采用不同评价方法,主要有瘤重和生存时间评价法.如肝原位接种可用瘤重评价,颅内接种可用生存时间评价.评价方法、标准和考前须知同腹水瘤模型和小鼠月中瘤模型.四、抗月中瘤药物的特殊要求I类抗月中瘤新药应进行药物作用机制的初步研究.非细胞毒类药物除完成体内外抗月中瘤试验,还应进行特定抗月中瘤作用研究.1.生物反响调节剂药效学包括：体内抗癌试验和免疫功能研究.1.1体内抗癌试验注意点：模型：裸鼠是免疫缺陷动物,一般应用正常免疫鼠月中瘤模型.给药时间：可按常规给药,也可在接种前预先给药,接种后继续给药或停药.105个瘤细胞/小鼠.月中瘤细胞接种量：可比细胞毒类药物低一个数量级,一般为(1-5)给药方法：可单独给药,也可与其它抗月中瘤药物合并使用,观察增效或减毒作用. 1.2免疫功能试验方法具有抑瘤作用的生物反响调节剂,还需作免疫功能测定,以明确其抑瘤作用是否与免疫功能调控有关.免疫功能测定包括细胞免疫和体液免疫两方面.免疫功能测定有：(1)巨噬细胞功能测定(2) 天然杀伤细胞(natural kill cell)测定(3)淋巴细胞转化试验(4)淋巴因子活化的杀伤细胞测定(lymphocyte- activated killer cell)(5)各种细胞因子测定,如IL-2、IL-6、IL-12、IFN-丫TNF-a等.(6)迟发型超敏反响检测2.月中瘤耐药逆转剂2.1体外抗耐药活性试验选才? 2-3对月中瘤耐药/敏感细胞株,采用MTT法或SRB法测定细胞毒性.一般在无毒剂量或相当于IC10的剂量下设三个剂量,并设立相应的阳性和阴性对照组.评价逆转效果用逆转倍数(fold reversal, FR)表示：FR=IC50(不加逆转剂)/IC50(加逆转剂).注意的方面：耐药株的耐药性：耐药株因传代,尤其是撤药后耐药性可改变或消失；试验前必须对试验耐药株进行耐药倍数(FR)测定,保证试验的可靠性.假设非逆转多药耐药(MDR)而是逆转单药耐药,那么实验的瘤株中需有针对该药的耐药细胞株. 阳性对照药建议采用维拉帕米(verapamil) 10 M环抱菌素 A (cyclosporin A) 3 的M2.2体内抗月中瘤耐药活性试验小鼠敏感和对应的耐药月中瘤和人癌裸鼠敏感和对应的耐药移植瘤2.3耐药基因及其表达产物测定可测定月中瘤细胞内的药物浓度变化和耐药基因及其表达产物,初步明确其逆转耐药机制.包括多药耐药基因及其编码蛋白(multidrug resistance gene/p-glycoprotein,Mdr1/Pgp)、多药而寸药相关蛋白(multidrug resistance-relatedprotein, MRP)、肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein, LRP)其它与耐药相关的基因/蛋白及酶等.3.抗月中瘤转移药物月中瘤是否转移不仅依赖于月中瘤细胞本身具有的内在转移潜能,而且也取决于机体抗转移因素的消长.所以,抗转移药物只有在动物体内模型上才能得出符合实际的结果. 3.1体外试验测定候选化合物作用下月中瘤细胞对基底膜的侵袭、粘附和月中瘤细胞趋化性运动的水平.3.2体内试验3.2.1模型：小鼠B16黑色素瘤、小鼠Lewis肺癌等和人癌裸鼠移植高转移瘤模型.3.2.2接种方法：常用静脉注射方法,也可用皮下接种等方法.3.2.3评价指标接种给药后,观察记录动物死亡时间,计算生存天数.试验结束后,称动物体重、肺重、移植瘤重,解剖显微镜下计数肺转移瘤灶、测瘤径 (计算肺转移瘤体积)和病理组织学切片观察等；计算转移率转移抑制率=1 -(治疗组转移率/对照组转移率)M00%.4.月中瘤血管生成抑制剂4.1体外试验体外试验模型有：(1)人血管内皮细胞模型：人脐静脉血管内皮细胞和人微血管(肺、皮肤等)内皮细胞.(2)血管形成促进因子等刺激细胞DNA合成、增殖、迁移、血管形成(tubeformation)来观察药物的抗血管形成作用.如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)或碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)(3)月中瘤细胞模型：主要应用国内已建立的人实体癌细胞系,确定VEGF、FGF等高分泌的细胞株. 检测细胞增殖、转移水平及血管形成因子的基因表达状况来评价药物.4.2体内试验4.2.1血管抑制试验经典的血管形成评价方法有：鸡绒毛膜尿囊和卵黄膜囊( CAM)、啮齿动物虹膜和角膜等.也可用如皮下移植塑料或多孔的polytetrafluoroethylene管、皮下移植无菌的海绵；一些自然的或化学修饰的物质如Matrigel和纤维凝胶等用于体内模型.4.2.2抗月中瘤试验通过观察新生血管生成抑制剂的体内抗月中瘤效应检测移植瘤的血管密度、血管生成因子和抑制因子的分泌和表达,以及月中瘤的转移情况等综合评价月中瘤血管生成抑制剂的作用和作用机制.5.分化诱导剂分化诱导剂的药效学研究包括体外和体内研究模型；目前的药物主要能对急性白血病进行有效的分化治疗.阳性对照药选用维甲酸类(retinoid)化合物.5.1体外试验5.1.1白血病的分化诱导常用的细胞株有人急性早幼粒白血病细胞株HL-60、NB4细胞、人红白血病K562细胞等.可选择以下试验方法研究并判断结果：(1)四唾氮蓝(NBT)复原试验：对照组细胞的复原水平010%候选化合物的复原水平＞50%(2)细胞形态学观察：可在光学显微镜与电镜下观察候选化合物作用后细胞的形态学变化,对照组的早幼粒细胞应＞90%-95%,候选化合物组细胞分化,成熟粒细胞占比例越高,说明该化合物的分化效果越好.5.1.2实体瘤细胞的分化诱导常用细胞株：人肝癌HepG2、SMMC7721试验方法及评价标准：主要测定细胞的甲胎蛋白〔AFP〕、白蛋白含量,下谷氨酸转移酶〔-GT〕、酪氨酸转氨酶〔TAT 〕活性及观察细胞形态.分化细胞AFP含量、TAT和Y GT活性明显降低,白蛋白含量增加,细胞胞质增加、核缩小.5.2体内试验常用人癌细胞小鼠肾囊膜下移植试验、小鼠髓单核细胞白血病试验和人癌细胞裸小鼠移植瘤模型等.可选两种模型,根据月中瘤鼠生存时间、月中瘤的体积及形态变化,观察分化诱导效果. 重复试验一次.6.月中瘤治疗增敏剂增敏剂主要是指放射治疗增敏剂,能增加临床上恶性月中瘤放射治疗或其它治疗的疗效及降低治疗后的复发率.6.1体外试验分别选择对放射、化疗药物具有中、低度敏感的人月中瘤细胞株,采用MTT、SRB 或细胞集落形成方法进行化合物的细胞毒性试验,以IC50值作为评价指标.6.2体内试验选用对射线及化疗药物敏感性较小的三种实体瘤模型进行试验,其中至少有一种人癌裸鼠移植瘤模型.由强致癌物或病毒等因素诱发的月中瘤,或者不是在同一品系动物身上移植传代的月中瘤往往会出现免疫反响,因此都不能用于月中瘤治疗增敏剂研究.疗效评价可参照体内抗月中瘤试验 .。

抗肿瘤药物筛选及临床实验责任编辑:luanchaojibing,作者：佚名文章来源：本站原创点击数：更新时间：2005-10-24 14:54:02(—)抗肿瘤药物的筛选1．体内筛选方法体内筛选方法是药物应用于有移植性肿瘤的动物进行实验的方法。

肿瘤模型是进行药物筛选的先决条件。

一个理想的用于药物筛选的肿瘤模型应具备的条件是：①对临床疗效有预告性；②快速、经济；③指标明确、客观；④重现性好，结果可信赖。

常用于鼠类，近年来在体内试验方面，裸鼠被广泛应用于抗肿瘤药物的筛选，目前已成功地将官颈癌、卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌等10余种人体肿瘤移植于裸鼠，国内已成功地建立了卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和腹水瘤模型，并已用于科研和临床。

在体内试验方面需注意：①给药途径。

因腹腔给药假阳性较多见，因此要筛选一种药物是否对一种移植肿瘤确实有效，需应用两种以上不同的给药途径，并且三次实验结果均显示标准抗癌活性时才能判定有效。

②在每一种给药途径中，还需观察不同剂量的抗肿瘤活性，以揭示有效抗肿瘤药物的量效关系。

2．体外筛选方法因体内筛选需要的技术条件高，故大批筛选或粗选时多采用体外筛选。

(1)人肿瘤集落形成法：该方法是将单细胞悬液，接种到含软琼脂的培养基中，培养一定时间后一部分肿瘤细胞能够在琼脂中生长，形成集落。

通过药物处理组和对照组的细胞集落生成数量比较，可作为肿瘤化疗的药物敏感试验。

每次可用多个平面筛选8一10种药物，以找出对肿瘤细胞最敏感的药物。

此法快速、经济、选择性高，而且结果可靠，故在临床用药选择和抗肿瘤药物开发上将得到广泛应用。

该方法缺点是活肿瘤组织单细胞悬液的制备比较困难，并且集落形成的成功率不够高，故在方法学上需待完善。

ALberts等以此法指导69例复发转移卵巢癌的治疗，结果临床有效率为54％；经验治疗组的有效率为20％；而以。

HCTA中抗药的药物治疗的有效率为8％。

(2)三磷酸腺苷生物发光法(ATP法)：其基本原理是ATP为细胞内能量的基本来源，其浓度与活细胞量有关。

临床试验标准操作规程临床试验是评估新药、医疗器械和治疗方法的安全性和有效性的重要手段。

为了保证试验结果的可靠性和可比性，制定和遵守标准操作规程（Standard Operating Procedures，SOPs）是至关重要的。

本文将详细介绍临床试验标准操作规程的编写内容和要求。

一、引言在引言部分，应简要介绍临床试验的背景和目的，明确制定标准操作规程的目的和意义。

同时，还应说明本标准操作规程的适用范围和相关术语的定义。

二、试验设计在试验设计部分，应详细描述试验的类型、目标人群、样本量、随机分组方法、对照组设置等内容。

同时，还应说明试验的主要终点指标和次要终点指标，并提供相应的测量方法和评价标准。

三、试验流程试验流程部分是标准操作规程的核心内容，包括以下几个方面的内容：1. 受试者招募与筛选：详细描述受试者招募的方式和条件，并明确筛选标准和流程。

2. 随机分组与盲法：说明随机分组的方法和过程，并介绍盲法的设计和执行。

3. 药物或治疗方案的使用：详细描述药物或治疗方案的使用方法、剂量、频率和疗程，并提供相应的给药或治疗流程。

4. 数据采集与记录：明确试验数据的采集方法、数据表格的设计和填写要求，并提供相应的数据记录表格。

5. 安全监测与不良事件报告：说明安全监测的方法和频率，明确不良事件的定义和报告要求，并提供相应的不良事件报告表格。

6. 终点指标评价与统计分析：明确终点指标的评价方法和时间点，并提供相应的统计分析方法和流程。

7. 质量控制与质量保证：介绍试验过程中的质量控制措施和质量保证要求，包括监察和审核的流程。

四、试验终止和数据分析在试验终止和数据分析部分，应说明试验终止的条件和流程，并提供数据分析的方法和流程，包括主要终点指标和次要终点指标的统计分析方法和结果解释。

五、伦理与法律要求在伦理与法律要求部分，应明确试验过程中需要遵守的伦理和法律要求，包括受试者知情同意、试验注册、伦理委员会审批、试验报告和数据保密等方面的内容。

药品临床试验标准操作规程2005.5山东XXXX制药有限公司注册部药品临床试验标准操作规程刖言为了保证新产品临床试验过程中遵循科学和伦理道德的原则，使数据的采集、录入和报告做到及时、完整、准确和一致，使受试者的权益和健康得到保护，确保临床试验遵循试验方案、药物临床试验质量管理规范（GCP和有关法规，使试验结论科学、可靠，根据《中华人民共和国药品管理法》、《药物临床试验质管理规范》、《药品注册管理办法》《赫尔辛基宣言》及ICH《人体生物医学研究国际道德指南》等相关法规文件精神，制定本标准操作程序医疗器械临床试验依其流程、内容和进程不同，将其划分为临床试验前的准备、启动临床试验、临床试验过程、中期协调会和结束临床试验等五个阶段。

标准操作规程（sop目录SO(Standard Operating Procedure ):为有效地实施和完成某一临床试验中每项工作所拟定的标准和详细的书面规程。

标准操作规程制订、修订及编码的SOP1、注册部指定人员起草或修订试验总的SOP2、起草人或修订人按照GCF的要求，根据试验的实际情况起草或修订SOP3、注册部主管人员审核。

4、注册部对SOP实行统一编码。

5、编码格式为：“ZCSOIP XX”，“ZC'代表“机构” ；“XXX”为顺序号。

例如：“标准操作规程制订、修订及编码的SOP的编码为：ZCSOPOQ16 SOP经部门讨论通过，由注册部部长审核批准后生效。

7、注册部对通过的SOP归档保存。

8、新的SOP通过后，旧的SOP同时废除，并统一由部门回收。

10、注册部组织试验相关人员学习SOP并监督SOP的实施。

1•国家食品药品监督管理局下达医疗器械临床试验批件。

2.|领会批文精神，了解药物［植入物）性质、作用特点、功能主治以及疾病的流行病学等。

3.从国家医疗器械临床研究基地名单中筛选出符合专业条件的临床试验基地，根据医院规模、地域、样本量的大小等实际情况初步遴选临床试验参加单位和确定参研单位的数量。

cde 抗肿瘤入排标准一、简介本标准规定了cde抗肿瘤临床试验的入排标准，以确保试验的严谨性和科学性。

入排标准是临床试验前的重要步骤，旨在筛选符合试验条件的受试者，排除不符合试验条件或可能对试验结果产生不良影响的受试者。

二、入排标准1.受试者年龄：年龄范围为18-75岁，且具有一定的认知能力。

2.受试者性别：不限，包括男性和女性。

3.受试者体重：不限，无体重限制。

4.受试者病情：患有符合入组范围的肿瘤疾病，包括但不限于肺癌、乳腺癌、肝癌等常见肿瘤疾病。

5.受试者肿瘤分期：根据肿瘤疾病的不同分期进行入组，以确保试验的安全性和有效性。

6.受试者病理类型：包括实体瘤和非实体瘤两种类型。

7.受试者治疗方案：目前未接受过任何形式的抗肿瘤药物治疗，或已接受过药物治疗但病情稳定。

8.受试者合并症：无严重的心、肝、肾等重要器官功能障碍，以及无其他严重的合并症。

9.受试者依从性：能够按照试验方案的要求按时服药、接受检查和随访等。

10.受试者知情同意：受试者需充分了解试验目的、方法、风险和利益等相关信息，并签署知情同意书。

三、排除标准1.受试者年龄范围以外的年龄段。

2.患有精神病或认知障碍，无法正确理解试验目的和风险。

3.患有严重的肝、肾等重要器官功能障碍，或患有其他严重的合并症，可能影响试验结果。

4.已接受过抗肿瘤药物治疗，且病情不稳定或无法控制。

5.对试验药物有过敏史或其他不能耐受的情况。

6.受试者依从性差，无法按时服药、接受检查和随访等。

7.受试者不同意参加试验或无法签署知情同意书。

四、注意事项1.入排标准是临床试验前的重要步骤，必须严格遵守。

2.在筛选受试者时，应确保符合入排标准的准确性，避免误诊和漏诊。

3.对于不符合入排标准的受试者，应向其提供合适的医疗建议和帮助。

4.在试验过程中，应定期对受试者的身体状况进行评估和调整，以确保其符合试验要求。

5.所有参与试验的人员必须签署知情同意书，并充分了解试验相关的风险和利益等信息。

药物临床试验管理制度和标准操作规程肿瘤科专业组目录药物临床试验管理制度和标准操作规程情况 (3)一、管理制度 (3)1．药物临床试验运行管理制度 (4)2．试验药物管理制度 (4)3．其他药物管理制度 (4)4．仪器设备管理制度 (4)5．研究人员培训制度 (5)6．文件管理制度 (5)7．合同管理制度 (6)8．财务管理制度 (6)9．申报伦理委员会批件制度 (7)10．药物临床试验洽谈管理制度 (8)11．档案室管理制度 (12)12．制订临床试验设计方案与知情同意书制度 (12)13．研究人员组成制度 (13)14．药物临床试验不良反应的报告制度 (14)二、质量保证体系与制度三、试验设计技术要求规范 (15)四、标准操作规程（SOP）1制定阶段 (20)1）标准操作规程设计与编号SOP (24)2）制定标准操作规程的SOP2.试验前准备阶段 (27)3）人员培训的SOP (29)4）试验药品使用记录表设计的SOP (33)5）知情同意书设计的SOP (34)6）原始资料记录SOP (40)7）病例报告表设计的SOP (44)8）更改试验方案的SOP (46)9）临床试验方案审查的SOP (47)10）准备临床试验启动会议的SOP (49)11）临床试验启动会议的SOP (50)12）报送伦理委员会批准的SOP (51)13）准备试验用药品及资料的SOP (52)14）应急信件的保存和紧急情况破盲的SOP (53)15）盲底保存的SOP (55)16）试验文件整理的SOP (56)17）药物临床试验质量控制的SOP (57)18）实验室检测和质量控制的SOP3.临床试验启动阶段 (59)19）开始临床试验的SOP (62)20）临床试验接受监查的SOP (64)21）内部质量监查员工作的SOP (66)22）受试者筛选和入选的SOP (68)23）临床试验招募受试者SOP (69)24）受试者知情同意的SOP (70)25）试验药品管理和记录的SOP (71)26）试验药物接收、发放、回收及销毁SOP (73)27）治疗给药SOP (75)28）试验用药物的给药说明SOP (76)29）试验数据记录的SOP (77)30）填写病例报告表的标准操作规程 (78)31）更正病例报告表SOP (80)32）不良事件和严重不良事件处理的SOP (81)33）不良事件和严重不良事件记录和报告的SOP4.中期协调会议 (82)34）中期协调会议的SOP5.临床实验结束 (87)35）数据管理与数据统计的SOP (89)36）试验用药品的清点、处理的SOP (91)37）临床试验文件归档与保存的SOP (92)38）临床试验结束会议的SOP (97)39）临床试验结果分析报告SOP (98)40）撰写临床试验总结报告SOP (99)41）临床试验保密SOP (102)42）结束试验项目的SOP5.临床处置 (103)43）体温测量的SOP (104)44）脉搏测量的SOP (105)45）呼吸测量的SOP (106)46）血压测量的SOP (107)47）肌内注射术的SOP (108)48）静脉采血SOP (110)49）口服给药SOP (111)50）PICC置管SOP (113)51）PICC维护SOP (114)52）深静脉穿刺置管SOP (117)53）气管插管术的SOP (119)54）气管切开术的SOP6.仪器设备管理使用 (122)55）仪器设备使用的SOP (126)56）抢救车管理SOP (128)57）呼吸机使用的SOP (130)58）心电图机使用的SOP (133)59）多参数心电监护仪使用的SOP (136)60）电动吸引器使用的SOP (139)61）中心吸氧SOP (141)62）血糖监测仪SOP (144)63）除颤仪使用的SOP (146)64）微量注射泵使用的SOP (148)65）多功能微波治疗机使用案SOP (150)66）高频治疗机使用SOP (152)67）模拟定位机使用SOP (154)68）陀螺刀使用SOP (158)69）直线加速器使用SOP (160)70）外挂MLC使用SOP7.急救预案 (162)71）药物临床试验急救预案SOP (165)72）心肺复苏SOP (168)73）过敏性休克急救预案的SOP (170)74）重症药疹急救预案的SOP (172)75）脑出血急救预案的SOP (174)76）脑梗塞急救预案的SOP (176)77）脑疝急救预案的SOP (178)78）癫痫持续状态急救预案的SOP (180)79）低血糖诊疗的SOP (182)80）急性肾功能衰竭急救预案的SOP (183)81）上消化道出血急救预案的SOP (184)82）急性心肌梗死急救预案的SOP (189)83）急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征诊疗的SOP (192)84）重型哮喘诊疗的SOP (202)85）弥散性血管内凝血（DIC）诊疗的SOP86）化疗药物外渗的应急预案SOP87）放化疗所致骨髓抑制抢救SOP88）试验期间受试者发生猝死护理的应急预案SOP89）消防紧急疏散患者的应急预案SOP8. 药物临床试验方案设计90）药物临床试验方案设计SOP91）常见恶性肿瘤化疗药物临床试验方案设计SOP92）癌性疼痛治疗药物临床试验方案设计SOP93）放化疗后骨髓抑制治疗药物临床试验方案设计SOP药物临床试验管理制度和标准操作规程情况一、管理制度药物临床试验运行管理制度药物临床试验工作由机构办公室统一管理，接受临床试验任务、布置给有关专业组承担，常分三步程序进行管理，现分述如下：一、试验前管理1. 进行药物临床试验，申办者必须提供药品监督管理部门的批文。

抗肿瘤药物工作流程1.环境清洁洗手。

2.按照标准操作规程进行操作，要求戴好一次性口罩（加两块消毒纱布），戴两付手套，在操作中一旦手套破损应立即更换。

3.开始配置前，先用75%的酒精对操作台进行擦拭，开始配置。

4.配置完毕，再次核对无误后，在配置输液标签上签全名，并在标签上划对勾表示已按提示加药。

5.将配好后的输液袋和空安瓿，交于核对人员核对。

6.所有配置结束后应清洁台面，所有清洁用后的物品、配置药液的注射器等放入感染性垃圾袋中袋中，按要求集中处理。

7.按操作规程进行用药。

8.观察用药后的反应。

抗肿瘤药物的防护管理制度1.药品配置区域只允许配置人员进入。

2.配置人员进入操作区前，需更换清洁服，配置人员不得将防护器材穿戴出操作区域。

污染的、脏的或日常的衣服禁止带入配置区。

3.配置人员一旦进入配置区域，在未完成配置操作前不得离开配置区域。

4.配置人员不得随意走动、大声说话等，避免多余动作。

5.在存储药物的区域应有适当的警告标示，抗肿瘤药物应与常用药物分开放置。

6.在药物配置区域及配药期间应禁止进食、喝水，严格执行无菌操作。

7.所有抗肿瘤药物的配置都应在生化安全柜中进行。

8.定期对操作人员进行健康状况检查，合理安排人员休息和轮班；避免孕期、哺乳期及患有消化道或呼吸道疾病的工作人员接触抗肿瘤药物。

9.给药护士应严格遵守给药规程，减少病区及人员的污染。

10.加强病房巡视，每15-30min巡视患者1次，检查注射部位有无回血及外渗。

11.严格交接班。

抗肿瘤药物渗漏上报制度1.立即报告值班医生、科主任和护士长，夜间上报总值班。

2.填写登记表，24-48小时内上报护理部。

3.护士长组织科室工作人员认真讨论，将事情经过、处理过程及时记录，填写化疗药物外渗上报表，科室人员查找、分析渗漏发生的原因，提出整改措施，防止类似事件发生。

4.有意隐瞒不报者，一经发现将严肃处理。

化疗药物外渗时的应急预案1．立即停止化疗药液的注入，可保留针头接注射器，回抽漏于皮下的药液，然后拔除针头。