苦荞麦黄酮含量的测定

苦荞籽壳中黄酮类化合物的定性定量研究

【摘要】 目的:建立苦荞籽壳黄酮类化合物的定性和含量测定方法。方法:用薄层色谱法对苦荞中主要黄酮类化合物芦丁和槲皮素进行定性鉴别，并用紫外分光光度法对其进行总黄酮含量测定。结果:TLC定性鉴别能检出供试品中槲皮素和芦丁;总黄酮含量在4.32×10-3～2.59×10-2mg・mL-1范围内线性关系良好，平均加样回收率99.7%，RSD为0.21%。结论:色谱分离良好，斑点清晰可见，提示该方法简便可行，准确度和精密度均能满足分析要求。

【关键词】 苦荞籽壳; 黄酮类化合物; 定性分析; 定量分析; 薄层色谱法;

紫外分光光度法

苦荞麦为蓼科荞麦属植物，别名乌麦、花荞等。《本草纲目》记载:苦荞麦性味苦、平、寒，有益气力、续精神、利耳目、降气宽肠健胃的作用。苦荞主要分布在西北、东北、华北以及西南一带高寒山区。苦荞中含有丰富的蛋白质、脂肪酸及维生素，苦荞维生素的独特之处是含有大量的黄酮类物质，其中主要是芦丁，约占80%左右。几年来的研究表明，芦丁等黄酮类化合物对加强毛细血管和调节其渗透性，改善心血管系统，抑制恶性肿瘤生长及癌症，抗糖尿病，消炎，治疗溃疡以及对呼吸道系统疾病等有良好的作用。本试验采用TLC对苦荞籽壳提取物进行定性鉴别，并用紫外分光光度法对其中总黄酮进行含量测定，为苦荞的开发和利用奠定基础。

1仪器与试剂

1.1仪器756型紫外-可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）;恒温水浴锅（北京市医疗设备总厂）;旋转蒸发仪（北京市医用仪器厂）;美国Waters公司真空脱气过滤装置。

1.2试药苦荞籽壳:广灵苦荞，由山西省农科院小杂粮室提供，种 子干燥样品经粉碎过筛后的苦荞籽壳;芦丁对照品:上海试剂二厂，Sigma进口分装;槲皮素对照品:中国药品生物制品检定所;其余试剂均为分析纯。

1.3样品的制备准确称取苦荞籽壳粉碎样5g，滤纸包好，放入索氏抽提器，加入70%乙醇300mL抽提至回流液无色，过滤提取液，减压蒸馏至无醇味后，用乙醚萃取3次，萃取液旋转蒸发浓缩至剩少量液体后冷冻干燥，得黄绿色粉末（为苦荞黄酮提取物）。所有溶剂都要经过脱气处理。

荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量测定

一、背景介绍

荞麦是一种传统的粮食作物，也是一种天然的保健食品。荞麦中含有丰富的总黄酮，具有抗氧化、抗炎、降血糖、降血脂等多种保健功效。商品苦荞茶是以苦荞为原料加工而成的茶类产品，同样富含总黄酮。因此，测定荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量对于了解其保健功效具有重要意义。

二、测定方法

测定荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量通常采用高效液相色谱法（HPLC）。

1. 样品制备

将干燥的荞麦粉或商品苦荞茶粉称取5g左右，加入50ml乙腈-水（80:20）混合溶液中，在常温下超声提取30min，离心10min后收集上清液备用。

2. 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18（250mm×4.6mm）

流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液（15:30:55）

流速：1.0ml/min 检测波长：360nm

3. 标准曲线绘制

取总黄酮标准品，分别加入不同浓度的乙腈-水混合溶液中制成一系列浓度不同的标准溶液。以每个浓度的标准溶液为样品进行HPLC测定，并绘制出标准曲线。

4. 样品检测

将样品提取液过滤，取适量注入色谱柱中进行HPLC检测。根据标准曲线计算出样品中总黄酮的含量。

三、结果分析

经过HPLC检测，荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量均较高。其中，荞麦中总黄酮的含量一般在100-150mg/100g左右，而商品苦荞茶中总黄酮的含量则更高，一般在300-500mg/100g左右。

四、结论

荞麦和商品苦荞茶均富含总黄酮，具有多种保健功效。通过HPLC法可以快速、准确地测定其总黄酮含量，为进一步研究其保健功效提供了科学依据。

一、实验目的

本实验旨在通过提取荞麦中的黄酮类化合物，探讨荞麦黄酮的提取工艺，并对其抗氧化活性进行初步研究，为荞麦黄酮的开发利用提供理论依据。

二、实验材料与仪器

1. 实验材料：荞麦（购买于当地超市）、无水乙醇、甲醇、氢氧化钠、盐酸、活性炭、蒸馏水等。

2. 实验仪器：旋转蒸发仪、电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、超声波清洗器、高速离心机等。

三、实验方法

1. 荞麦黄酮提取

（1）称取适量荞麦粉末，置于锥形瓶中。

（2）加入适量无水乙醇，超声处理30分钟。

（3）将提取液转移至分液漏斗中，加入等体积的氢氧化钠溶液，充分振荡后静置分层。

（4）将下层水相转移至另一锥形瓶中，加入适量活性炭，搅拌脱色。

（5）将脱色后的溶液过滤，滤液转移至旋转蒸发仪中，浓缩至近干。

（6）加入适量甲醇溶解残渣，定容至10mL容量瓶中，得荞麦黄酮提取液。

2. 荞麦黄酮含量测定

采用紫外-可见分光光度法测定荞麦黄酮含量。

（1）绘制标准曲线：分别配制0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL的芦丁标准溶液，在510nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。

（2）样品测定：取荞麦黄酮提取液适量，按标准曲线法测定其吸光度，计算荞麦黄酮含量。

3. 荞麦黄酮抗氧化活性研究

采用DPPH自由基清除法测定荞麦黄酮的抗氧化活性。 （1）绘制DPPH自由基清除率标准曲线：分别配制0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL的荞麦黄酮溶液，测定其清除率，绘制标准曲线。

（2）样品测定：取荞麦黄酮提取液适量，按DPPH自由基清除率标准曲线法测定其清除率。

四、实验结果与分析

1. 荞麦黄酮提取

根据实验结果，荞麦黄酮的最佳提取条件为：无水乙醇为溶剂，提取温度为50℃，提取时间为6小时，物料比为1:15。

2. 荞麦黄酮含量测定

根据实验结果，荞麦黄酮提取液在510nm波长下的吸光度为0.510，根据标准曲线计算得出荞麦黄酮含量为0.4mg/mL。

不同产地苦荞麦中黄酮类成分的含量测定与分析

张继斌;王玉;徐浪;陈志元;丁苗

【摘 要】建立苦荞麦中芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-o-芸香糖苷4种黄酮类成分的含量测定方法,比较不同产地苦荞麦中黄酮类成分的含量差异.采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定不同产地苦荞麦样品中黄酮类成分的含量,采用统计学方法分析不同产地4种成分含量的差异.方法学考察中线性范围、精密度、稳定性、重复性及加标回收试验均符合规定,云南产苦荞麦中槲皮素、山奈酚含量明显高于其他产地,芦丁、山奈酚-3-o-芸香糖苷含量相差不大.该方法可用于苦荞麦中黄酮类成分的含量测定,为苦荞麦原料的采购提供技术依据.

【期刊名称】《食品研究与开发》

【年(卷),期】2018(039)024

【总页数】6页(P143-148)

【关键词】苦荞麦;黄酮成分;含量;产地

【作 者】张继斌;王玉;徐浪;陈志元;丁苗

【作者单位】劲牌生物医药有限公司,中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室,湖北大冶435100;劲牌生物医药有限公司,中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室,湖北大冶435100;劲牌生物医药有限公司,中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室,湖北大冶435100;劲牌生物医药有限公司,中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室,湖北大冶435100;劲牌生物医药有限公司,中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室,湖北大冶435100 【正文语种】中 文

苦荞麦为蓼科（Polygonaceae）荞麦属植物苦荞麦（Fagopyrum tataricum

L.Gaertn）的干燥成熟种子，又名野荞麦、鞑靼荞、万年荞、野南荞[1]。《本草纲目》中记载：苦荞麦味苦、性平寒，有益气力、续精神、利耳目、降气、宽肠健胃的作用。苦荞麦营养丰富，含有黄酮类化合物（如芦丁、槲皮素、山萘酚等，其中芦丁含量较多）、多种氨基酸、肌醇衍生物、多糖、不饱和脂肪酸及多种微量元素等成分[2-7]。现代药理研究表明，苦荞麦具有抗氧化、抗肿瘤、抗敏、抗菌、抗病毒、降血脂、降血压等作用[8-11]。苦荞麦主要集中种植在我国西南地区的四川、云南、陕西、甘肃、山西、贵州等省的高海拔山区、高原和高寒地区[12]，四川凉山和云南昭通地区为主要产地。试验建立苦荞麦中芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-o-芸香糖苷4种黄酮类成分的含量测定方法，选用四川、云南重点产区及贵州、陕西产地的苦荞麦样品，分别对其中的4种黄酮类成分进行含量测定与对比，为苦荞麦原料的采购提供技术依据。