酸溶血试验
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临床血液学检验Ⅰ、血液一般检验----红细胞系统一、红细胞生成起源二、红细胞及血红蛋白增多1、男:RBC>6.0×1012/L,Hb>170g/L女:RBC>5.5×1012/L,Hb>160g/L2、红细胞及血红蛋白增多的【临床意义】⑴、相对增多:血浆容量减少血液浓缩⑵、尽对增多①继发性:非造血系统疾病,要紧环节是EPO增多代偿性增加:血氧饱和度低,组织缺氧所致生理性:新生儿、高原居民病理性:慢性心肺疾病、异常血红蛋白病非代偿性增加:无血氧饱和度低和组织缺氧肿瘤和肾病所致:肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、子宫肌瘤、肾盂积水、多囊肾等②原发性:真性红细胞增多症三、红细胞及血红蛋白减少1、贫血:男<120g/L,女<110g/L贫血程度:轻度:>90g/L中度:90-60g/L重度:60-30g/L极重度:<30g/L2、红细胞及血红蛋白减少的【临床意义】⑴、生理性减少:婴幼儿〔生长发育迅速〕,妊娠中、后期〔血容量增加,血液稀释〕,老人〔骨髓造血减少〕⑵、病理性减少①生成减少骨髓造血障碍造血干细胞异常:再障骨髓浸润:急性白血病等缘故不明或多种机制:慢性感染、肿瘤、肝病、内分泌病等伴发的贫血细胞分化和成熟障碍DNA合成障碍:巨幼细胞贫血血红蛋白合成障碍血红素合成障碍:IDA珠蛋白合成障碍:海洋性贫血②破坏过多红细胞内在缺陷〔遗传性〕:遗球、红细胞酶缺陷的溶贫、珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病、PNH 红细胞外在缺陷〔获得性〕:免疫性、机械性③失血急性失血慢性失血四、网织红细胞〔reticulocyte〕【定义】网织红细胞是晚幼红细胞到成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞,胞质中尚残存多少不等的核糖核酸等嗜碱性物质。
用煌焦油蓝或新亚甲蓝进行活体染色,这些嗜碱性物质被凝聚沉淀并着色,在胞浆中呈现蓝色细颗粒状,颗粒间又有细丝状联缀而构成网状结构,故称网织红细胞。
溶血实验的基本原理溶血实验是一种常用的实验方法,用于检测红细胞的抗原和抗体反应。
溶血实验主要通过观察红细胞在不同条件下的溶解情况来判断是否发生了溶血反应。
它可以被广泛应用于血型鉴定、免疫学研究以及临床诊断等领域。
红细胞的特点在了解溶血实验的原理之前,我们首先要了解红细胞的一些基本特点。
红细胞是人体内最常见的一类细胞,它们主要负责运输氧气到身体各个组织和器官,并将二氧化碳从组织带回肺部排出。
红细胞有一个重要的特点,就是其表面覆盖着一种复杂多样的糖蛋白分子,这些分子被称为抗原。
不同个体之间的红细胞上所表达的抗原种类和数量可能会有所不同,这也是造成人类存在不同血型系统(如ABO血型系统、Rh血型系统等)的重要原因。
溶血反应的基本原理溶血反应是指当红细胞与相应抗体结合时,抗体与红细胞上的抗原发生特异性反应,导致红细胞破裂并释放其内部的血红蛋白。
溶血实验就是通过观察红细胞在不同条件下的溶解情况来检测这一反应是否发生。
溶血实验通常使用两种方法来观察溶血现象:直接法和间接法。
直接法直接法是指将已知抗体与待测红细胞混合,通过观察混合物中是否出现明显的沉淀或颜色变化来判断是否发生了溶血反应。
例如,在ABO血型鉴定中,我们可以将待测红细胞分别与A型、B型和O型抗体混合。
如果待测红细胞与A型抗体混合后出现沉淀,说明该样本为A型;如果与B型抗体混合后出现沉淀,则为B型;如果与O型抗体混合后没有出现明显变化,则为O型。
这种方法主要适用于已知抗体和待测红细胞数量相对较少的情况。
间接法间接法是指将已知红细胞与待测抗体混合,通过观察混合物中是否发生溶血来判断待测抗体是否与红细胞上的抗原结合。
例如,在Rh血型鉴定中,我们可以将已知Rh阴性的红细胞与待测血清混合。
如果混合物发生了溶血现象,则说明待测血清中存在抗Rh抗体。
这种方法主要适用于已知红细胞和待测抗体数量相对较少的情况。
溶血实验的关键因素在进行溶血实验时,有一些关键因素需要考虑,以确保实验结果的准确性和可靠性。
湖南中医药大学-2020级-冲刺班医学检验专业实验诊断学模拟试题(一)基本信息:[矩阵文本题] *一、名词解释1. 溶血性贫血: [填空题] *_________________________________答案解析:(174 页)是指各种原因导致红细胞生存期缩短、破坏加速,骨髓造血功能不足以代偿红细胞的破坏而引起的一类贫血。
2. 出血时间(BT): [填空题] *_________________________________答案解析:(189 页)是指皮肤毛细血管被刺破后自然出血到自然止血所需的时间。
3. 管型: [填空题] *_________________________________答案解析:3.(201 页)是蛋白质在肾小管、集合管内凝聚而成的两边平行,二端钝圆,折光性强的长条形圆柱体。
4. 高蛋白血症: [填空题] *_________________________________答案解析:(230 页)血清总蛋白>80g/L,为高蛋白血症。
5. 胆酶分离: [填空题] *_________________________________答案解析:5.(229 页)发生急性重症肝炎,黄疸进行性加重,酶活性反而降低的现象称胆酶分离,一般预后不良。
二、填空题6. MCV(),MCH(),MCHC(),血浆总蛋白(),血清钾()。
[填空题] *_________________________________(答案:82-100fl|27-34pg|320-360g/L|60-80g/L|3.5-5.5mmol/L|)7. 浆膜腔积液检测时,通常恶性积液铁蛋白含量(),FDP 含量()(此处填写:“增高”或“降低”) [填空题] *_________________________________(答案:增加|增加|)8. 脑脊液检查时,陈旧性蛛网膜下腔出血脑脊液一般呈()色,化脓性脑膜炎脑脊液一般呈()色,铜绿假单胞菌感染时脑脊液一般呈()色 [填空题] *_________________________________(答案:黄|白|绿|)9. 基因诊断昰以()或()为原料,通过检查基因的存在、缺陷或表达异常,对人类的状态或疾病做出诊断的方法和过程。
检验参考值一、血液一般检验红细胞计数(RBC)参考值:男4.0~5.5T/L;女3.5~5.0T/L;新生儿6.0~7.0T/L。
血红蛋白浓度参考值:男120~160g/L;女110~150g/L;新生儿170~200g/L。
平均红细胞体积(MCV)参考值:80~100fl红细胞体积(HCT)参考值:男0.4~0.5L/L;女0.37~0.48L/L。
平均红细胞血红蛋白含量(MCH)参考值:27~34pg平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)参考值:320~360g/L红细胞体积分布宽度(RDW)参考值:11.5%~14.5%红细胞平均厚度(MCT)参考值1.7~2.5μm白细胞计数(WBC)参考值:成人4~10G/L;小儿5~13G/L;新生儿15~20G/L。
白细胞分类计数(DC)中性杆状核粒细胞百分率参考值:1%~5%中性杆状核粒细胞绝对值参考值:0.04~0.5G/L中性白细胞百分率(%N)参考值:50%~70%中性粒细胞绝对值(NEU)参考值:2.0~7.0G/L杆状核与分中核比值参考值:1:13淋巴细胞百分率(%L)参考值:20%~40%淋巴细胞绝对值(LYM)参考值:0.8~4G/L单核细胞百分率(%M)参考值:3%~8%单核细胞绝对值(MONO)参考值:0.12%~0.8g/L嗜酸性粒细胞百分率(%E)参考值:0.5%~5.0%嗜酸性粒细胞绝对值(EOS)参考值:0.02~0.5G/L嗜碱性粒细胞百分率(%B)参考值:0~1%嗜碱性粒细胞绝对值(BASO)参考值:0~0.01G/L嗜酸性粒细胞直接计数(EOS)参考值:0.02~0.5G/L网织红细胞计数(Ret)参考值:成人0.5%~1.5%,儿童2%~6%,绝对值24~84G/L。
嗜碱性点彩红细胞计数(SRBC)参考值:<0.01%红细胞沉降率(ESR)参考值:魏氏法男性:0~15mm/1h;女性:0~20mm/1h。
酸溶血试验
1.酸溶血试验的原理:阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者体内存在对补体敏感的红细胞。
酸化血清溶血试验,也称Hamtest,即红细胞在酸性(pH6.4~6.5)的正常血清中孵育,补体被激活,PNH红细胞破坏而产生溶血。
而正常红细胞不被溶解,无溶血现象。
2.适应症:本试验阳性主要见于PNH,某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时也可阳性。
3.试验仪器:水温箱,离心机
①试验试剂:同型正常人血清或AB型血清:取正常人同型或AB型血5ml分离血清备用(37℃孵育)。
取新鲜血清0.5ml放60℃水浴3分钟灭活备用。
②50%RBC悬液:由被检者静脉采血2ml,肝素抗凝。
用生理盐水洗涤红细胞2次,配成50%红细胞悬液。
③0.2mol/l HCL
4.操作步骤:
①取患者的红细胞,用生理盐水重复洗涤2次,最后配成50%红细胞悬液;
②取与患者同型或AB型血3-5ml,待其自然凝固,分离正常人血清(最好采用多人混合新鲜血清,以保证有足够的补体)
③取同一正常人的红细胞,用生理盐水重复洗涤2次,最后配成50%红细胞悬液;按下表操作:
试管号 1 2 3 4 5 6
同型或AB型血清(ml)0.5 0.5 0 0.5 0.5 0
灭活血清0 0 0.5 0 0 0.5
0.2NHCL 0.05 0 0.05 0.05 0 0.05
患者50%红细胞悬液0.05 0.05 0.05 0 0 0
正常人50%红细胞悬液0 0 0 0.05 0.05 0.05
置37℃水浴中1小时,观察结果。
参考值范围及报告;
1.试验管溶血、对照管不溶血为阳性。
2.试验管和对照管都不溶血为阴性。
注意事项:
1.血清酸化后,试管必须塞紧,否则二氧化碳逸出,可使血清酸
度下降。
2.抗凝剂会影响PH值,故不宜用抗凝血浆,但可用脱纤维血;
3.为了保证补体充足,最好用混合血清,但正常对照红细胞必须
用“O”型血;
4.如患者曾经多次输血,血中异常红细胞相对减少,本试验可为
弱阳性或阴性。