例
差速离心形成的沉淀(肝脏)
沉淀 RCF (gav)×时间
内容物
P1 1 000g×10min 细胞核,重线粒体,大片细胞膜 P2 3 000g×10min 重线粒体,细胞膜碎片
P3 6 000g×10min 线粒体,溶酶体,过氧化物酶体,完整高尔基体
P4 10 000g×10min 线粒体,溶酶体,过氧化物酶体,高尔基体
21
三、密度梯度离心 (isodensity centrifugation)
优点
① 分离效果好,可一次获得较纯颗粒。 ② 习惯范围广,能象差速离心法一样分离具
有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮 力密度差的颗粒。 ③ 颗粒可不能挤压变形,能保持颗粒活性。
常用介质:氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖、甘油。
22
沉降速度(sedimentation velocity):微粒
在重力场中下降的速度。
它的影响因素:微粒的大小、形态、密度、 液体的粘度和重力场的强度。
如实验室制备血清时就能够采纳室温静置的 方法得到。
5
二、液体中的微粒在重力场中 的分离
扩散现象:
重力场中扩散现象 是无条件的,绝对的。特 别是关于病毒和蛋白质 类小分子物质,扩散对物 质的沉降影响更大。如 何克服?
F=mv2/r=mrω2=ρVrω2
v:线速度; ω:旋转角速度(弧度/秒) ; r:旋转体离旋转轴的距离(cm) ; m:颗粒质量; ρ:物体密度; V:物体体积
4
二、液体中的微粒在重力场中 的分离
颗粒静置一段时间后,受重力场影响会开 始沉降运动。粒子越重,下沉越快。反之密度 比液体小的粒子就会上浮,这个现象为重力沉 降。
称为区带离心,是将样品溶液置于一个由梯度材料 形成的密度梯度液体柱中,离心后被分离组分以区 带层分布于梯度柱中。离心脱水机