雷帕霉素或二甲双胍联合PD-1单抗在三阴性乳腺癌中的抗肿瘤作用

ω-3多不饱和脂肪酸对两种抗癌药物在乳腺癌细胞中抗肿瘤效果的增强作用及其机制研究全反式维甲酸(ATRA)和mTOR受体抑制剂雷帕霉素(Rp)在内的靶向生物制剂能显著抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡,发挥较好的抗肿瘤效果,从而延长了肿瘤患者的生存期。

但是,随着ATRA及Rp应用的日益广泛,其引起的包括脂质代谢紊乱及药物抵抗等副作用大大限制了此类药物的应用。

膳食补充这一能起到肿瘤预防和辅助治疗的方式在近几十年取得了很大的进展,研究发现多种膳食补充剂对肿瘤治疗有明显的增强作用。

流行病学和临床研究报道显示,ω-3多不饱和脂肪酸具有突出的抗肿瘤作用,并且对心血管疾病、高血脂等都具有积极的防治作用。

ω-3多不饱和脂肪酸能抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡从而降低乳腺癌发生的风险,但有关ω-3多不饱和脂肪酸改善抗肿瘤药物引起的血脂紊乱及药物抵抗方面的研究尚未报道。

因此,为减少全反式维甲酸和雷帕霉素引起的血脂紊乱作用及药物抵抗、增强肿瘤治疗效果,本论文探究能否通过ω-3多不饱和脂肪酸辅助全反式维甲酸及雷帕霉素共同治疗乳腺癌,从而达到更佳的治疗效果。

通过三种不同亚型的乳腺癌细胞模型(ER阳性细胞MCF-7、HER2阳性细胞SKBR-3、三阴性细胞MDA-MB-231)、裸鼠移植瘤体内模型以及自发性乳腺癌MMTV-PyVT转基因模型观察ω-3多不饱和脂肪酸辅助全反式维甲酸及雷帕霉素的抗肿瘤效果及机制。

主要结果如下:在ω-3多不饱和脂肪酸辅助维甲酸治疗乳腺癌的实验中发现ω-3多不饱和脂肪酸或ATRA单独处理对细胞生长的抑制作用较弱,而ω-3多不饱和脂肪酸和ATRA联合处理能显著降低活细胞数目,发挥联合抗肿瘤效果,且ω-3多不饱和脂肪酸添加后可显著改善三阴性乳腺癌对ATRA的通过进一步实验发现联合作用的抗肿瘤效果与自噬的激活存在紧密联系,且联合作用激活的自噬过程依赖MAPK-P38的磷酸化,而不依赖mTOR和BECLIN1这两条经典自噬信号转导途径。

晚期三阴型乳腺癌精准治疗药物应用进展夏云霞1，何方1，令晓玲21 兰州大学第一临床医学院，兰州 730000；2 兰州大学第一医院肿瘤内科摘要：三阴型乳腺癌（TNBC）是乳腺癌的一个分子亚型，其病理组织学分级较差，恶性程度高，侵袭性强，易出现内脏转移和脑转移，复发率高，异质性强。

晚期TNBC（aTNBC）患者生存期短，整体生存率差，因缺乏相应的靶点，化疗是此病的主要治疗方法。

近年随着特殊靶点的发现及靶向、免疫和抗体偶联药物的发明，精准治疗药物被逐渐应用于aTNBC的治疗中，其有特异性、高效性、安全性等特点。

靶向治疗药物通过作用于特定的靶点发挥抗肿瘤作用，治疗精准，有效率高，不良反应较小，但适应人群有限。

免疫检查点抑制剂主要通过激活人体的免疫系统而发挥抗癌功能，作用持续时间长，相对于靶向治疗来说，适应人群更广，不良反应同样较轻，但会出现一些免疫相关性不良反应，且杀伤肿瘤细胞速度慢。

以单克隆抗体和细胞毒性药物为基础的抗体偶联药物，具有高特异性靶向能力和强效杀伤肿瘤细胞的作用，大幅度降低了传统化疗所造成的毒副反应，但同样有适宜人群的限制，且治疗费用昂贵。

尽管上述不同种类的药物用于aTNBC时已经显示出良好的抗肿瘤活性，但由于TNBC的异质性及多数患者缺乏持久的反应，联合药物治疗也可以取得较为明显的优势。

关键词：乳腺癌；三阴型乳腺癌；靶向疗法；靶向抗肿瘤药物；免疫检查点抑制剂；抗体偶联药物doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.12.024中图分类号：R737.9 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）12-0096-07三阴型乳腺癌（TNBC）是指雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2（HER2）均阴性的乳腺癌（BC），常见于年轻和肥胖女性，平均发病年龄为53岁［1］，占BC的15%～20%，多数患者在诊断后的1～2年内复发［2］。

TNBC具有侵袭性强、预后差、复发率高的特点，并具有很强的异质性，5年存活率仅约30%［2］。

研究论著雷帕霉素调控TRAP1抑制三阴型乳腺癌细胞增殖黄思源 石雅倩 李鑫 卢敏 郭文礼 刘勇成 欧叶涛【摘 要】 目的 分析雷帕霉素通过调控肿瘤坏死因子相关蛋白1（TRAP1）影响三阴型乳腺癌细胞MDA -MB -231增殖的药理过程，探讨雷帕霉素抗乳腺癌的作用机制。

方法 将MDA -MB -231随机分为对照组和不同剂量的雷帕霉素组，随后分别在24 h 和48 h 采用四氮唑蓝比色实验检测雷帕霉素对细胞增殖的影响。

同时以半抑制浓度（IC50）为研究条件，采用流式细胞术检测雷帕霉素对MDA -MB -231细胞周期的影响；采用蛋白免疫印迹法检测雷帕霉素靶蛋白（mTOR ）、p -mTOR 、TRAP1的蛋白表达；采用定量PCR 检测mTOR 、TRAP1的mRNA ；采用ATP 试剂盒检测ATP 含量；采用乳酸试剂盒检测乳酸的含量。

结果 雷帕霉素能抑制MDA -MB -231的增殖，在24 h 时，细胞增殖率开始下降，48 h 时，细胞增殖率下降更明显，并在10 μmol/L 、48 h 的条件下达到IC50，且呈剂量及时间依赖性（P < 0.01）。

雷帕霉素可以造成细胞周期G1期阻滞（P < 0.01）。

与对照组相比，加药48 h 雷帕霉素组TRAP1的mRNA 表达下降（P < 0.05），p -mTOR 和TRAP1蛋白表达也下降（P < 0.001），而mTOR 的mRNA 和总mTOR 蛋白变化比较差异均无统计学意义（P 均> 0.05），ATP 含量上升（P < 0.001），乳酸含量下降（P < 0.001）。

结论 雷帕霉素可调控三阴型乳腺癌细胞MDA -MB -231的代谢进程而抑制细胞增殖，该过程与TRAP1的下降有关。

【关键词】 雷帕霉素；三阴型乳腺癌；肿瘤坏死因子相关蛋白1Rapamycin affects the proliferation of triple -negative breast cancer cells by regulating TRAP1 Huang Siyuan △， Shi Yaqian ， Li Xin ， Lu Min ， Guo Wenli ， Liu Yongcheng ， Ou Yetao. △Guilin Medical University ， Guilin 541004， China Corresponding author ， Ou Yetao ， E -mail:*******************【Abstract 】Objective To investigate the pharmacological process of the effect of rapamycin upon the proliferation of triple -negative breast cancer MDA -MB -231 cells by regulating tumor necrosis factor receptor -associated protein 1 （TRAP1）， and to unravel the anti -breast cancer mechanism of rapamycin. Methods MDA -MB -231 cells were randomly divided into the control group and different -dose rapamycin groups ， and then the effect of rapamycin on cell proliferation was detected by MTT assay at 24 h and 48 h ，respectively. Meantime ， the half -maximal inhibitory concentration （IC50） of rapamycin was considered as the research condition. The effect of rapamycin on MDA -MB -231 cell cycle was detected by flow cytometry. The expression levels of mammalian target of rapamycin （mTOR ）， p -mTOR and TRAP1 proteins were detected by Western blot. The expression levels of mTOR and TRAP1 mRNA were measured by qPCR. ATP content was detected by ATP kit. The amount of lactic acid was determined by lactate assay kit. Results Rapamycin inhibited the proliferation of MDA -MB -231 cells in a dose - and time -dependent manner （P < 0.01）. The proliferationof MDA -MB -231 cells was decreased at 24 h and significantly decreased at 48 h after rapamycin treatment. IC50 was obtained at 10 μmol/L after 48 h. Rapamycin induced cell cycle arrest at G1 phase （P < 0.01）. Compared with the control group ， the expression level of TRAP1 mRNA was significantly down -regulated （P < 0.05）， and the expression levels of p -mTOR and TRAP1 proteins were significantly down -regulated （both P < 0.001）， whereas the expression levels of mTOR mRNA and total mTOR protein were notsignificantly changed （both P > 0.05）， the content of ATP was significantly increased （P < 0.001）， and the content of lactic acidwas significantly decreased （P < 0.001） in the 48-h rapamycin group. Conclusion Rapamycin can inhibit the proliferation of MDA -MB -231 cells by regulating the metabolic process ， which is related to the decrease of TRAP1.【Key words 】 Rapamycin ； Triple negative -breast cancer ； Tumor necrosis factor receptor -associated protein 1基金项目：国家自然科学基金（81960481）乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，在我国乳腺癌的发病率增长迅速，在女性原发肿瘤中所占比例高达15%，且呈明显年轻化趋势［1］。

mTOR抑制剂雷帕霉素的抗肿瘤作用李亮亮【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是参与生命活动的多条信号通路的下游因子,其中就包括PI3K/Akt/mTOR信号通路,在细胞生长、分化、转移和存活中地位显著,已成为癌症治疗的一个重要靶标.第一代mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)最初作为一种新型的免疫抑制药物在器官移植领域应用广泛.随着对该药物及mTOR信号通路的深入研究,人们慢慢地认识到RAPA 除免疫抑制外还具有诱导肿瘤细胞凋亡、阻断细胞周期、抑制信号传导、影响基因转录水平及其对表观遗传学的调控作用.本文主要综述了近年来雷帕霉素在抗肿瘤方面的研究进展,同时讨论了雷帕霉素抗肿瘤的局限性.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2019(030)002【总页数】4页(P241-244)【关键词】雷帕霉素靶蛋白;雷帕霉素;肿瘤发生;mTOR信号通路;抗肿瘤【作者】李亮亮【作者单位】海南医学院生物学教研室,海南海口 571199【正文语种】中文【中图分类】R979.1雷帕霉素(RAPA)是由智利复活节岛上的土壤链霉菌分泌的产物，属于三烯大环内酯类的化合物。

最初作为低毒强效的抗真菌药物和免疫抑制剂被研发出来，广泛用于抗炎和维持移植器官免疫能力。

随着科学家们对RAPA药理性质及分子机制的深入研究，人们开始认识到RAPA还具有除抗炎、免疫抑制外的多种其他药理作用，如对肿瘤细胞增殖产生抑制、提高机体免疫力、延缓衰老等作用。

近几十年来，研究发现RAPA可以影响多系统肿瘤性疾病，如消化系统、生殖系统、呼吸系统、女性生殖系统等[1-8]。

RAPA的肿瘤抑制作用受到科学家们关注，为此他们做了许多有关的研究并获得了一些成功，2007年FDA批准RAPA治疗肾癌，RAPA衍生物用于治疗肾癌、脑肿瘤、胰腺癌和乳腺癌等。

2015年FDA获批成为淋巴管肌瘤(LAM)和结节性硬化症(TAC)的治疗药物[9]。

雷帕霉素免疫抑制和抗肿瘤双重效应的研究进展傅云峰;刘竞【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2013(3)20【摘要】Rapamycin (RAPA) is a kind of macrolide antibiotics. Initially it is widely used in clinical as a potent immunosuppressant, which not only has a significant curative effect on a variety of autoimmune diseases, but also shows a good anti-rejectin in organ transplantation and less side effects .In recent years, it's found RAPA has anti-tumor effect, which is a sort of drugs that owning the dual role of immunosuppressive and antitumor. In this paper, the progress of RAPA in the treatment of common diseases for the dual pharmacological effects is reviewed.%雷帕霉素（RAPA）是一种大环内酯类抗生素，最初RAPA在临床上主要作为一种强力的免疫抑制剂而广泛使用，其对多种自身免疫性疾病有显著疗效，而且在器官移植术后显示出良好的抗排斥反应活性，副作用较小，近年来又发现其具有抗肿瘤作用，是一种具有免疫抑制和抗肿瘤双重作用的药物。

本文就雷帕霉素（RAPA）双重药理作用的研究进展作一简要综述。

【总页数】3页(P21-23)【作者】傅云峰;刘竞【作者单位】中南大学湘雅三医院血液内科，湖南长沙 410013;中南大学湘雅三医院血液内科，湖南长沙 410013【正文语种】中文【中图分类】R979.5【相关文献】1.雷帕霉素在免疫抑制和肿瘤抑制中的双重作用 [J], 米蕊芳;张宏冰2.新型免疫抑制剂雷帕霉素的研究进展 [J], 李敏娜3.雷帕霉素免疫抑制机理的研究进展 [J], 魏武;郑军华4.肿瘤微环境中免疫抑制性细胞和细胞因子在抗肿瘤免疫反应中的作用研究进展[J], 何亚运;罗泊涛;陆元志5.FTY720免疫抑制和抗肿瘤双重作用的研究进展 [J], 杨之斌;殷正丰;吴孟超因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中国乡村医药二甲双胍的多通路抗癌作用周　骅　王　增二甲双胍为治疗T2DM的一线用药，通过提高患者对胰岛素的敏感性，减轻高胰岛素血症及胰岛素抵抗，达到抑制胰岛素的促有丝分裂及促生长作用的目的。

由于其不刺激胰岛素的分泌，故可降低癌细胞对胰岛素的应答。

Bodmer等[1]发现，长期使用二甲双胍能降低女性乳腺癌的发病率，使消化道癌症的发病率下降。

提示二甲双胍具有一定的抗肿瘤作用，但抗癌机制尚未完全阐明，存在多种可能机制。

笔者现将二甲双胍可能的抑癌机制综述如下：1　二甲双胍对肝激酶B1-磷酸腺苷激活的蛋白激酶-哺乳动物雷帕霉素蛋白受体信号通路的作用肝激酶B1（LKBl）由抑癌基因LKB1编码，对下游1 4个磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）家族成员有激活作用，能将细胞周期阻滞在G1期[2]。

AMPK是研究代谢性疾病的关键分子，广泛表达于各种代谢相关的器官中，能对多种刺激产生应答。

哺乳动物雷帕霉素蛋白受体（mTOR）是一种高度保守的Ser/Thr蛋白激酶，通过调节mRNA翻译过程中关键酶的磷酸化，间接促进蛋白的合成。

癌细胞中，LKB1-AMPK对蛋白质合成的负向调节被极大减弱[3]，mTOR则出现过表达现象。

传统观点认为，在LKB1的参与下，二甲双胍通过抑制呼吸链，降低三磷腺苷（ATP）水平，上调AMP/ATP比例而激活AMPK。

AMPK通过直接或间接的方式负向调控mTOR，抑制蛋白的合成。

Lin等[4]在肺癌细胞株AS2/S3C上，证实了二甲双胍通LKB1-AMPK-mTOR途径抑制信号转导因子和STAT3的活性。

二甲双胍还可通过不激活AMPK的方式下调mTOR，降低下游70kDA核糖蛋白s6激酶及真核起始因子4E结合蛋白的磷酸化，减少肿瘤细胞蛋白质的合成[5]。

訾富明[6]用二甲双胍对敲除AMPK后的多发性骨髓瘤细胞进行处理，发现其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡的能力反而增强。

对于AMPK在肿瘤进程肿所扮演的角色，目前尚未完全阐明。

雷帕霉素在肿瘤治疗方面研究进展张晓元〗，郝荣华〗，刘飞〗，2,3，陈勉〗，朱希强〗，2,3%凌沛学】，2,3(1.山东省药学科学院山东省生物药物重点实验室山东省多糖类药物工程实验室多糖类药物发酵与精制国 家地方联合工程实验室，山东济南250101; 2.山东大学药学院，山东济南250012; 3.山东福瑞达医药集团公司，山东济南250101)摘要：雷帕霉素（RAPA)在肿瘤治疗方面的研究及应用日益増多，单独应用或联合用药在体外、体内均表现 显著的抗肿瘤效果。

RAPA通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR)受体，影响其转导的多种信号通路，从 而发挥抗血管生成、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡等多种作用，对肿瘤的増殖、侵袭和转移等过程产生影响。

本文综述RAPA在不同肿瘤治疗方面的研究进展，为其在生物医药领域进一步应用提供新方法和新思路。

关键词：雷帕霉素；西罗莫司；肿瘤；哺乳动物雷帕霉素靶蛋白中图分类号：R730.5 文献标识码：A文章编号：1672-979X (2018) 01-0065-06Progress in Application ofRapamycin in Tumor TreatmentZ H A N G X ia o-yuan1,H A O Rong-hua1,L IU Fei1,2,3,C H EN M ia n1,Z H U X i-qiang1,2,3,L IN G Pei-xue1,2,3 (1. National-Local Joint Engineering Laboratory of P olysaccharide drugs,Shandong Provincial Engineering Laboratory of Polysaccharide Dmgs,Shandong Provincial Key Laboratory of B iopharmaceuticals,Shandong A cademy of P harmaceutical Sciences,Jinan250101, China;2. School of P harmaceutical Sciences,Shandong Uni^versity,J~^^an250012, Chi^a;3.Shandong Freda Pharmaceutical Group Company,Jinan750101, China、A b s tra c t:Recently,rapam ycin is increasingly studied and u tilize d in anti-cancer therapy.Rapam ycin alone or combined w ith other antineoplastic shows significant antitumor effects in vitro and in vivo.Rapamycin produces the effects in anti-angiogenesis,blocking cell cycle,promoting cell apoptosis and so on,by inhibiting m TO R receptors to influence m ultiple signal transduction pathways.Those signal pathways can interfere w ith the transcription o f various factors w hich can regulate proliferation,invasion and metastasis o f tumors.This review summarizes the progress in rapamycin fo r the treatment o f different tumors,and provides new methods and new ideas fo r its further application in the field o fbio m e dicine.K ey W o rd s:rapam ycin;sirolim us;tum or;m TO R雷帕霉素（ra p a m y c in，R A P A，R P M)，现 称为西罗莫司（s ir o lim u s)，分子结构为36兀环 含氮三烯大环内酯（图1)。

三阴乳腺癌化疗方案简介乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，而三阴乳腺癌是其中一种最为恶性的乳腺癌类型。

三阴乳腺癌指的是乳腺癌细胞不表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）以及人表皮生长因子受体2（HER2）。

由于缺乏这三种受体，三阴乳腺癌的治疗相对困难，常常需要采用综合的治疗手段，其中化疗是非常重要的一种手段。

化疗方案化疗是通过使用化学药物来杀死或抑制癌细胞的发展。

三阴乳腺癌患者通常会先接受手术切除肿瘤，然后再进行辅助性化疗，以清除残留的肿瘤并预防复发。

常用的化疗药物常用的化疗药物包括： - 艾德霉素（Adriamycin） - 卡铂（Carboplatin） - 紫杉醇（Taxol） - 多西他赛（Docetaxel） - 氟尿嘧啶（Fluorouracil） - 厄托泽贝（Etoposide）上述药物通常会经过化疗方案的组合使用，以达到最佳的治疗效果。

化疗方案的选择化疗方案的选择取决于患者的具体情况，包括病期、身体状况、年龄等因素。

以下是常用的三阴乳腺癌化疗方案：TAC方案TAC方案是常用的三阴乳腺癌化疗方案之一，包括使用艾德霉素、紫杉醇和卡铂这三种药物。

该方案通过不同机制作用于癌细胞，提高治疗效果。

标准的TAC方案是在每三周给药一次，连续六个周期。

具体给药剂量和间隔时间会根据患者的实际情况进行调整。

AC-T方案AC-T方案是另一种常用的三阴乳腺癌化疗方案，包括使用艾德霉素和紫杉醇这两种药物。

该方案将化疗分为两个阶段：第一个阶段使用艾德霉素和环磷酰胺（Cyclophosphamide）的组合给药，第二个阶段使用紫杉醇单药给药。

在AC-T方案中，AC阶段每两周给药一次，总共四个周期；T阶段在AC阶段结束后，每两周给药一次，总共四个周期。

TC方案TC方案是使用紫杉醇和卡铂这两种药物进行化疗。

相比于其他方案，TC方案给药时间更短，可以减轻患者的治疗负担。

标准的TC方案是在每三周给药一次，连续六个周期。

雷帕霉素免疫抑制和抗肿瘤双重效应的研究进展雷帕霉素（RAPA）是一种大环内酯类抗生素，最初RAPA在临床上主要作为一种强力的免疫抑制剂而广泛使用，其对多种自身免疫性疾病有显著疗效，而且在器官移植术后显示出良好的抗排斥反应活性，副作用较小，近年来又发现其具有抗肿瘤作用，是一种具有免疫抑制和抗肿瘤双重作用的药物。

本文就雷帕霉素（RAPA）双重药理作用的研究进展作一简要综述。

标签：雷帕霉素；免疫抑制剂；抗肿瘤传统的免疫抑制剂如硫唑嘌呤（AZA）、环孢素（CsA）等在临床上得到广泛应用，但其过敏反应、肝肾毒性、骨髓抑制等副反应屡见不鲜，尤其会带来一个严重的并发症，那就是增加肿瘤风险，Guba等[1]动物实验发现，环孢素A可诱发小鼠原发和转移性肿瘤发生，新型免疫抑制剂雷帕霉素免疫效应是环孢素10倍以上，而且还具备抗肿瘤效应，免疫抑制剂量（1.5mg/kg）的雷帕霉素（Rapamycin，RAPA）可以使小鼠肝脏原发与转移性肿瘤的体积缩小70%，使鼻咽部肿瘤的体积缩小87%，可显著延长带瘤小鼠的生存周期。

它的双重功效不仅可以使其单独针对性应用于临床，还可以应用于需免疫抑制和抗肿瘤联合治疗的交叉领域。

1 雷帕霉素RAPA是Vezina和She gal从加拿大Rapa Nui岛的土壤中分离的一种具有抗真菌作用的三烯大环内酯类化合物，分子式为C51H79NO13，化学结构与同类免疫抑制剂他克莫司（FK506）相似，为白色或微黄色固体结晶，熔点为183～185℃，亲脂性，易溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醇等有机溶剂，几乎不溶于乙醚和水。

最初被研究作为低毒性的抗真菌药物，从1977年发现其具有免疫抑制作用，1989年把RAPA首次作为治疗器官移植排斥反应药物，近年又发现其具有抗肿瘤的作用，其独特的双效性使其具有广阔的临床开发应用前景。

2 雷帕霉素的作用机制2.1 雷帕霉素的免疫抑制机制（1）雷帕霉素通过不同的细胞因子受体阻断信号传导，将免疫细胞（T细胞和B细胞）滞留于G1/S期，阻止免疫细胞进入S期及抑制DNA的合成，从而抑制免疫细胞的生长、增殖[2]。