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高效液相色谱-串联质谱快速测定饲料中硝基咪唑类药物及其代谢物残留魏云计;丁涛;朱臻怡;冯民;何健;沈金荣;何正和;秦娴;张伶俐;钱怡平【摘要】A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometric (HPLC-MS/MS) method was developed for the rapid determination of metronidazole (MNZ),metronidazole-OH (MNZOH),dimetridazole (DMZ),hydroxydimetridazole (HMMNI),ronidazole (RNZ),ipronidazole (IPZ),ipronidazole-OH(IPZOH) residues in feed.The samples were extracted with 0.1 mol/L pH 8.0 phosphate buffer and ethyl acetate-acetone (70 ∶ 30,by volume),then cleane d up with matrix solid-phase dispersant primary secondary amine (PSA).The extracts were defatted with hexane and cleaned up by liquid-liquid partition.The target compounds were detected by electrospray ionization (ESI) in positive mode using multiple reaction monitoring,and quantified by the isotope internal standard method.No solid-phase extract(SPE) procedure was adopted,which made sample preparation simple and efficient.The calibration curves for seven target compounds were linear in the range of 2.0-100.0 tμg/L with correlation coefficients more than 0.99.Average recoveries at spiked levels of 5.0-25.0 μ,g/kg were between 72.4％ and 95.6％,with relative standard deviation less than 12.5％.The limits of detection(LOD) were 2.5 μg/kg,and the limits of quantit ation(LOQ) were 5.0 μg/kg.%建立了高效液相色谱-串联质谱快速测定饲料中甲硝唑(MNZ)、甲硝唑代谢物(MNZOH)、二甲硝咪唑(DMZ)、二甲硝咪唑代谢物(HMMNI)、洛硝哒唑(RNZ)、异丙硝唑(IPZ)、异丙硝唑代谢物(IPZOH)残留的分析方法.样品经0.1 mol/L pH 8.0磷酸盐缓冲液和乙酸乙酯-丙酮(70∶30)提取,提取液经分散型固相萃取填料N-丙基乙二胺(PSA)净化后,再经正己烷脱脂,液-液分配净化,采用电喷雾电离源(ESI)正离子多反应监测(MRM)模式检测,氘代同位素内标法定量.该方法省去耗时的固相萃取过程,快速、简单、高效,7种目标分析物在2.0～100.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.99,在5.0 ～25.0 μg/kg范围内,3个加标水平的回收率为72.4％～ 95.6％,相对标准偏差(RSD)均小于12.5％;检出限为2.5μg/kg,定量下限为5.0 μg/kg.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2017(036)003【总页数】5页(P377-381)【关键词】高效液相色谱-串联质谱;饲料;硝基咪唑类;代谢物【作者】魏云计;丁涛;朱臻怡;冯民;何健;沈金荣;何正和;秦娴;张伶俐;钱怡平【作者单位】淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,江苏南京210001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001;淮安出入境检验检疫局国家饲料安全检测重点实验室(淮安),江苏淮安223001【正文语种】中文【中图分类】O657.63;TQ460.72硝基咪唑类药物是一种具有5-硝基取代咪唑杂环结构的化合物，常用的药物主要有甲硝唑、二甲硝咪唑、异丙硝唑和洛硝哒唑等。
QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定 鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑药物残留量王 易（广东省惠州市质量计量监督检测所，广东惠州 516000）摘 要：建立了QuEChERS结合超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑残留量的方法。
样品经乙腈提取，QuEChERS净化后，使用Agilent Eclipse Plus C18柱分离，以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行洗脱，多反应监测模式下检测，外标法定量。
结果表明，甲硝唑和地美硝唑的质量浓度在0～50 ng·mL-1时线性关系良好（r2＞0.999），检出限分别为0.002 μg·kg-1、0.007 μg·kg-1；在低、中、高3个添加水平下甲硝唑和地美硝唑的加标回收率分别为95.79%～97.80%、95.66%～100.10%。
该方法前处理简单、重现性好、灵敏度高，适用于鸡蛋中甲硝唑、地美硝唑的测定。
关键词：鸡蛋；甲硝唑；地美硝唑；QuEChERS；超高效液相色谱串联质谱法Determination of Metronidazole and Dimetridazole Residues in Eggs by QuEChERS Combined with Ultra-High Performance Liquid Chromatography Tandem-Mass SpectrometryWANG Yi(Guangdong Huizhou Quality and Measuring Supervision Testing Institute, Huizhou 516000, China) Abstract: A QuEChERS combined with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method was established to determine the residues of metronidazole and dimetridazole in eggs. The sample was extracted with acetonitrile, purified with QuEChERS, and separated using an Agilent Eclipse Plus C18 column. The mobile phase was eluted with acetonitrile and 0.1% formic acid aqueous solution, and detected under multiple reaction monitoring mode. The external standard method was used for quantification. The results showed that the mass concentrations of metronidazole and dimetridazole were linear in the range of 0～50 ng·mL-1 (r2＞0.999), and the detection limits were 0.002 μg·kg-1 and 0.007 μg·kg-1; under low, medium and high addition levels, the recoveries were 95.79%～97.80%, 95.66%～100.10% respectively. The method is simple, reproducible and sensitive, and is suitable for the determination of metronidazole and dimetridazole in eggs.Keywords: eggs; metronidazole; dimetridazole; QuEChERS; ultra-high performance liquid chromatography tandem-mass spectrometry鸡蛋含有非常丰富的卵磷脂、脂肪、蛋白质、微生物、矿物质、微量元素等营养成分，被誉为“全营养”食品[1]，现已成为日常饮食中的重要组成部分。
硝基咪唑类药物测定方法——薄层色谱法16.1.4.2 测定办法生物基质中硝基咪唑类药物的残留分析主要有免疫学办法(IA)、毛细管电泳法(CE)、薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和蔼相色谱法(GC)。
早期讨论集中于单个或几个化合物的分析，现在多残留高通量分析办法得到了较快进展。
随着质谱的推广以及该类药物“零残留量”的执行，使得液相色谱-质谱(LC-MS)和蔼相色谱-质谱(GC-MS)办法成为讨论主流。
(1)薄层色谱法(thin layerchromatography，TLC) TLC系将相宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一匀称薄层。
待点样、绽开后，按照比移值(Rf)与相宜的对比物按同法所得的色谱图的比移值作对照，用以举行药物的鉴别、杂质检查或含量测定。
TLC是迅速分别和定性分析少量物质的一种很重要的试验技术。
Meshram等用TLC测定MNZ和咪康唑硝酸盐。
固定相用法硅胶(silica gel 60 GF254)，绽开剂为甲苯--(3.0+2.0+0.6，v/v)，在240nm波长显像光密度计检测。
MNZ、咪康唑硝酸盐的保留因子分离为0.34和0.55；MNZ线性范围为300～700ng/点，咪康唑硝酸盐线性范围600～1400ng/点；采纳标准加入法测得MNZ和咪康唑硝酸盐的回收率分离为100.13%±1.59%(点高度)、98.92%±0.76% (点面积)和99.49±1.58% ( 点高度)、99.63%±1.46%(点面积)。
但该办法未对组织中残留样品举行测定。
高效薄层色谱法(high performance thin layer chromatography，HPTLC)由经典的TLC进展而来，优点是点样量少，分析时光快，分别度和辨别率好，对样品处理要求最低，操作最简便，LOD可达纳克(ng)至皮克(pg)水平。
Gaugain等报道了用HPTLC 测定猪和家禽组织中DMZ、RNZ、DMZOH残留的办法。
第33卷第1期湖南文理学院学报(自然科学版) V ol. 33 No. 1 2021年3月 Journal of Hunan University of Arts and Science(Science and Technology) Mar. 2021doi: 10.3969/j.issn.1672–6146.2021.01.018三种咪唑物质检测技术研究进展程利侠, 郝华玲, 吕长平, 崔倩(甘肃烟草工业有限责任公司技术研发中心, 甘肃兰州, 730050)摘要:咪唑、2-甲基咪唑及4-甲基咪唑是一类五元杂环小分子化合物, 2-甲基咪唑和4-甲基咪唑是同分异构体, 常是氨(铵)法生产食品添加剂—焦糖色素的副反应产物, 是影响食品添加剂安全性的重要因素。
其中4-甲基咪唑会抑制细胞色素P450同功酶, 引起人体畸变、癌变等症状, 危害人体健康。
近年来, 有文献先后报道了咪唑及(2-或4-)甲基咪唑的测定方法。
因此, 就近年来常用的咪唑和(2-或4-)甲基咪唑检测技术进行了较全面的综述, 对各种检测技术的检测原理及各自的优缺点进行了比较分析, 并进一步展望了咪唑类物质检测技术的发展方向, 为咪唑类物质的研究提供新的思路和方法。
关键词:咪唑; 同分异构体; 添加剂; 焦糖色素中图分类号: S 572 文献标志码: A文章编号:1672–6146(2021)01–0086–04Recent advances in analytical methods of three imidazole substancesCheng Lixia, Hao Hualing, Lv Changping, Cui Qian(Technology R&D Center, Gansu Tobacco Industrial Co Ltd, Lanzhou 730050, China)Abstract: Imidazole, 2-methylimidazole and 4-methylimidazole are five-element heterocyclic small molecule compounds containing two nitrogen atoms. 2-methylimidazole and 4-methylimidazole are isomers, which are side products of caramel pigment produced by ammonia (ammonium) method, and important factors affecting the safety of food additives. In addition, 4-methylimidazole can inhibit the isoenzyme of cytochrome P450, cause human body distortion, cancer or other symptoms, and then endanger people's health. In recent years, a method for the determination of imidazole and (2- or 4-) methylimidazole has been reported. Therefore, the detection techniques of imidazole and (2- or 4-) methylimidazole are comprehensively reviewed, the detection principles, advantages and disadvantages of various detection techniques are analyzed and compared. Possible future directions of the detection techniques are also outlined in order to provide new ideas and methods for the research of imidazoles.Key words: imidazole; isomers; additives; caramel pigment近年来, 食品安全受到全世界人们的关注, 我国对食品添加剂的使用卫生标准做出规定, 规定不同种类添加剂的使用量[1]。
X u m u s h o u y i近年人们对食品安全越来越重视，这也对食品检测工作提出了非常高的要求，尤其是兽药检测，在这样的背景下需积极应用各种高效检测技术，不断提升检测效果，因此才能为食品安全提供有力保障。
基于此，本文首简单阐述了兽药残留检测的重要性，随后分析了当前兽药残留检测技术的研究进展。
一、兽药残留检测的重要性近年我国出现了很多次和食品安全有关的事故，严重影响了人们的身体健康，同时也造成了极其恶劣的社会影响。
食品安全问题和很多因素有关，其中兽药残留是非常关键的一项，因此做好兽药残留检测是保障食品安全的有效手段。
近年我国家兽药残留检测方面有了非常显著的进展，极大提升了是要材料检测水平，主要体现在生物学检测和理化检测两方面，因此为了推动兽药残留检测的不断发展，还需要从这两方面出发展开分析。
二、兽药残留检测技术的研究进展1、生物学检测当前的生物学检测中主要应用的有免疫分析和生物学分析两种方法，接下来本文将分别对这两种方法进行分析。
（1）免疫分析检测法免疫分析检测法建立在抗原抗体特性以及可逆性结合反应的基础上，可以快速筛查食品中的兽药残留物质。
一般兽药都有着非常小的分子量，无法通过免疫原性对生物机体的免疫应答进行刺激，所以只能通过人工合成抗原的形式，检测生物体内的兽药含量，当前免疫分析检测法主要有以下几种。
①酶免疫检测法这种检测方法发展于上世纪70年代，可以利用酶对兽药进行标记，操作过程非常简单，通过这种方法可以准确检测出猪肾内氮哌醇、氮哌酮、乙酰丙嗪等药物的残留量，也可以对牛奶中四环素类药物的残留量进行精确判断。
目前这项技术早已商品化，且已经被广泛应用到兽药残留检测当中。
②荧光免疫检测法这种检测法的标记物为荧光物质或潜荧光物质，过去在使用过程中激发荧光所使用的是普通光，但容易受到干扰，近年号荧光偏振、荧光猝灭、时间分辨荧光等荧光免疫检测法逐渐得到了广泛应用，极大提升了这项技术的灵敏度。
③胶体金免疫检测法这种检测方法将胶体金颗粒作为的标记物，可以快速检测出兽药残留。
硝基咪唑类药物的研究进展【摘要】:硝基咪唑类有机化合物是一类具有硝基咪唑环结构的药物，包括甲硝唑、异丙硝唑、奥硝唑、塞可硝唑、二甲硝咪唑、替硝唑和洛硝哒唑等。
硝基咪唑类药物有良好的抗菌作用，尤其对厌氧菌抗菌作用极强。
本文介绍了一系列硝基咪唑类化合物，综述了其在抗病毒、抗菌、抗结核以及用于抗肿瘤增敏剂等方面的研究进展及应用，并展望了硝基咪唑类药物未来的发展趋势。
关键词：硝基咪唑衍生物；研究进展硝基咪唑类有机化合物是一类具有硝基咪唑环结构的药物，包括甲硝唑、异丙硝唑、奥硝唑、塞可硝唑、二甲硝咪唑、替硝唑和洛硝哒唑等[1]。
硝基咪唑类药物除了具有病毒活性外，还可以抗菌、抗结核、以及用于抗肿瘤增敏剂，目前，临床上已有很多的硝基咪唑类药物用于各种疾病治疗，本文就硝基咪唑类药物在抗各种致病微生物等方面的研究与硝基咪唑类衍生药物开发情况进行综述。
1.抗病毒作用HIV-1型病毒艾滋病的病原体，由于HIV-1的易变性导致的耐药现象，限制了如奈韦拉平、地拉夫定、伊法韦恩、等药物在HIV-1感染的应用[2]。
因此对现有的抗逆转录药物进行改进以及结构修饰的研究在不断进行中，目的是克服其存在的副作用以及耐药性。
2000年，Silvestri课题组成功合成了非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTIs），硝基咪唑类非核苷类抗逆转录药物（DAMNIs）等一系列新药物，如图1。
图 1 硝基咪唑类非核苷类抗逆转录系列化合物结构式二、抗菌作用硝基咪唑类抗菌药物，主要是一系列具有5-硝基咪唑环状结构的药物，主要品种有地美硝唑（DMZ）、甲硝唑（MNZ）、替硝唑（TNZ）、洛硝唑（RNZ）、塞克硝唑（SNZ）和奥硝唑（ONZ）等。
其中替硝唑、甲硝唑、奥硝唑是抗厌氧菌药物，其后，一系列衍生药物被不断开发出来。
甲硝唑作为最常见、最基本的硝基咪唑类药物，其化学结构如图2所示。
由于甲硝唑在临床上使用时间已很长，其耐药性和不良反应存在明显，所以进行甲硝唑的结构修饰，以增强其抗菌效果，减少不良反应，是近年来药物化学的热门课题。
鸡蛋中兽药残留的检测方法及防控方法-养鸡技术鸡蛋是生活中最常见的质优价廉的营养食品．深受人们的喜爱。
在蛋鸡集中化饲养过程中，兽药不仅能够用于防治疾病，部分还可作为饲料添加剂使用，促使机体生长或者产蛋率提高，但同时又容易在机体或者鸡蛋中残留，即使经过加热也依旧具有活性，从而间接导致耐药性传递及过敏、中毒、致癌或者致畸等。
现介绍鸡蛋中兽药残留规律、检测方法以及防治措施！1、兽药残留种类合成抗菌药物残留。
磺胺类药物，是一类药物的总称，主要特征是具有氨基苯磺酰胺结构，因其具有价格便宜、效果良好而在畜牧业中普遍应用。
尽管有关规定要求产蛋鸡不能够使用磺胺类药物，但在实际生产过程中依旧存在非常严重的误用和滥用现象，从而使其在鸡蛋中残留。
在我国，要求磺胺类药物的总残留量控制在每千克含有100 μg以下，同时还要求其中磺胺二甲基嘧啶的残留量控制在每千克含有25 μg以下。
喹诺酮类药物，主要使用的有恩诺沙星、二氟沙星、沙拉沙星、氟甲喹、达氟沙星，但要求处于产蛋高峰期的蛋鸡禁止使用。
在我国，农业部还明确规定鸡蛋中噢啉酸的残留量要控制在50 μg以下，且休药期应控制在6天。
硝基咪唑类药物，主要是作为驱虫药使用，通常以在饲料中添加的形式给药，从而使其残留在动物源性食品中。
国际上规定，所有食品动物可食性组织中硝唑眯唑类药物的残留量要求达到O，也就是说使用最先进的检测设备的定量限规定每千克含有1 μg。
抗生素类药物残留。
四环素类，是一种广谱抗生素，是由链菌霉生成，目前广泛使用的有四环素、多西环素、金霉素、土霉素等，相对来说鸡蛋中较少残留该类药物。
大环内酯类药物，主要作为饲料添加剂以及治疗药物使用，能够加速畜禽生长，促使饲料利用率提高，可作为治疗性兽药使用于无公害食品蛋鸡饲养中，但如果用药不规范就会导致残留现象的发生。
目前，主要使用的有泰乐菌素和红霉素，要求残留量分别控制在每千克含有100 μg和150 μg以下，休药期要控制在7天。
硝基咪唑类药物残留检测方法研究进展汪纪仓1,2,王大菊2,杨自军1,林霖1(1.河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471003; 2.华中农业大学动物医学院,湖北武汉 430070)[收稿日期]2007204-23 [文献标识码]A [文章编号]100221208(2007)0820031203 [中图分类号]S859.84[摘 要] 介绍了硝基咪唑类药物的临床应用情况以及在动物源性食品中残留的危害和国内外对该药使用情况的管理规定。
综述了检测硝基咪唑类药物的方法,包括高效薄层色谱法,酶联免疫吸附法,气相色谱法,气相色谱-质谱法,液相色谱法,液相色谱-质谱法,并对未来检测硝基咪唑的精确、灵敏、快速方法进行了展望。
[关键词] 硝基咪唑类药物;残留;检测方法作者简介:汪纪仓(1977年-),男,河南南阳人,讲师,研究方向为兽医药理学与毒理学。
通讯作者:王大菊,教授。
E-m ai:l chi nahb wdj@ma i.l hzau .edu .cnR esea rch P rogress O n Ana lytica lM ethod s of N itroi m i dazoles R esiduesWA NG Ji 2cang 1,2,WANG Da 2j u 1,YANG Z i 2jun 1,LI N L i n1(1.College of V ete rinary Scie nce and T ec hnolo gy,H enan Universit y of Scie nce and T ec hnology ,Luoyang 471003;2.Colle ge of Veteri nary M e d icine ,H uaz h ong A g ric u lt ural Univers ity ,Wuhan 430070;China )Abstr act :52N itroi m idaz oles had been w ide l y used in veteri n ary med i c i n e f or treat m ent of bacter i a l and protozoal i n f ecti o ns i n poultry (h isto moniasis i n turkey etc)and s w ine (s w i n e dysentery).Any resi d ues of these co m 2pounds were not per m itted i n f ood 2produc i n g ani m als in many coun tries because their mutagen ic and potential car 2cinogenic properties .In t h is paper ,research pr ogress on analyticalmethods of n itr oi m idazoles resi d ues was sum 2marized .K ey w ord s :n itr oi m idazoles ;resi d ues ;detect 硝基咪唑类药物是一类具有5-硝基咪唑环结构的药物,包括甲硝唑(Metron i d az ole ,MNZ)、地美硝唑(D i m etri d azol e ,D MZ)和洛硝唑(Ron i d azol e ,RNZ)等。
硝基咪唑类药物具有抗原虫和抗菌活性,同时也具有很强的抗厌氧菌作用,药物进入易感的微生物细胞后,在无氧或少氧环境和较低的氧化还原电位下,其硝基易被电子传递蛋白还原成具有细胞毒作用的氨基,抑制细胞D NA 的合成,并使已合成的DN A 降价,破坏D NA 的双螺旋结构或阻断其转录复制,从而使细胞死亡,发挥其迅速杀灭厌氧菌、有效控制感染的作用。
1 硝基咪唑类药物的临床应用MNZ 除抗滴虫及阿米巴原虫外,还对脆弱拟杆菌、黑色素拟杆菌梭状杆菌属、产气荚膜梭状芽孢杆菌等有良好抗菌作用;D MZ 不仅能抗大肠弧菌、多型性杆菌、链球菌、葡萄球菌和密螺旋体,且能抗组织滴虫、纤毛虫、阿米巴原虫等。
添加本品于饲料中,可预防螺旋体引起的猪下痢,亦可用于防治禽类的组织滴虫病及六鞭虫病,此外还有增重作用。
该类药物主要治疗原虫感染,如牛毛滴虫病、犬贾第虫病、鸡和火鸡组织滴虫病、禽贾第虫病、急性阿米巴痢疾和肠外阿米巴病。
另外,还有抗蜜蜂#31# 2007,41(8):31~33/汪纪仓,等 中国兽药杂志微孢子虫病和阿米巴虫病的作用。
MNZ内服吸收迅速,其生物利用度为60%~ 100%,在1~2h内达到峰浓度,在血中仅少量与血浆蛋白结合;消除半衰期犬为4.5h,马1.5~3.3 h,一次给药可维持12h;能广泛分布于全身组织,进入血脑屏障,在脓肿及肝脓胸部位可达到有效浓度;血浆蛋白结合率低于20%。
甲硝唑主要经尿排出体外。
2硝基咪唑类药物残留的危害及一些国家对其限制使用情况硝基咪唑类药物具有致突变性和潜在的致癌性,被许多国家列为违禁药物。
在欧盟,RNZ、D MZ 和M NZ分别在1993年、1995年和1998年被禁止用于食用动物,2002年美国食品与药物管理局(FDA)公布了禁止在进口动物源性食品中使用的11种药物,其中包括D MZ及其他硝基咪唑类药物。
我国农业部和国家药品监督管理局第227号公告规定MNZ、D MZ及其盐、酯及制剂不准以促进动物生长为目的在所有食品动物饲养过程中使用。
3硝基咪唑类药物的检测方法国内建立的测定生物基质中硝基咪唑类残留的分析方法中,以常规的分析方法如气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(H PLC)、高效薄层色谱法(H PTL C)为主,但缺少确证方法。
国外不仅有常规分析方法,而且有确证法如气相色谱-质谱法(GC -MS)、液相色谱-质谱法(H PLC-MS)的报道。
3.1高效薄层色谱法(H PTLC)应用分析硝基咪唑类药物的报道较少,Gauga i n等[1]建立了检测猪和禽组织中RNZ、D MZ和HM MN I(羟基地美硝唑)残留检测的HPTL C法。
猪和禽肉用二氯甲烷萃取后蒸干,残余物溶于乙酸铵溶液,正己烷去脂,去脂后的溶液过固相萃取柱,洗脱液吹干溶于甲醇点板。
展开剂为甲醇-乙酸乙酯。
板干燥后喷吡啶紫外312nm检测。
RNZ、D MZ和HM MN I的检测限分别为2、5和5L g/kg。
HPTL C由经典的薄层色谱法发展而来,它的优点是点样量少,分析时间快,分离度和分辨率好,对样品处理要求最低,操作最简便。
检出限可达纳克(ng)至皮克(pg)水平。
3.2酶联免疫吸附法(ELIS A)H uet等[2]建立了鸡肉和鸡蛋中D MZ、M NZ、RNZ、HM M N I和I PZ (异丙硝唑)的ELI S A法,样品用乙腈萃取、正己烷去脂,D MZ在蛋和鸡肉中的检测限分别小于1L g/kg 和2L g/kg,M NZ的检测限小于10L g/kg,RNZ和HM MN I均小于20L g/kg,而I PZ小于40L g/kg。
3.3气相色谱法和气相色谱-质谱法W ang 等[3]建立了禽肉中D MZ、RNZ和MNZ多残留检测的GC2NPD法(氮磷检测器)。
样品用乙腈提取后乙酸酸化,过阳离子固相萃取柱(SCX),乙腈-28%甲醇液洗脱分析物。
洗脱液吹干后溶于甲醇进样分析,内标法定量。
按照空白样品提取液的3倍信/噪计算,D MZ和MNZ的检测限为0.2ng/g, RNZ为0.5ng/g。
D MZ、RNZ和MNZ添加浓度为5L g/kg时,3种药物的回收率分别为85%、90%和80%,变异系数分别为13.0%、14.3%和11.2%。
气相色谱法分离样品具有快速、高效的特点,但只是常规分析法,不能确证分析。
Polz er等[4]建立了火鸡和猪组织中4种硝基咪唑类药物及它们的羟基代谢物的GC2NCI2MS法,5g 样品加酶和缓冲液水解过夜,缓冲液取出后去脂过萃取柱,分析物测定前衍生化(定容至100L L),内标法定量。
D MZ/H M MNI、RNZ、MNZ和M NZ O H(羟基甲硝唑)的检测限为0.65~2.8L g/kg,I PZ和I PZ O H (羟基异丙硝唑)为5.2L g/kg,回收率为95%~ 120%。
H o等[5]建立了禽和猪组织中D MZ和MNZ 的GC2EC N I2M S法,2g样品用甲苯萃取,10mL萃取液加10mL正己烷混合,混合液过固相萃取柱,洗脱液吹干后衍生反应(定容至100L L)进样分析。
检测限为0.1~0.6L g/kg,定量限为0.3~1.9L g/kg, D MZ添加浓度在1~9L g/kg时,回收率为101%~ 106%,变异系数为7.7%~11%;M NZ添加浓度为0.2~2L g/kg时,回收率为72%~90%,变异系数为14%~23%。
Morris等[6]建立的GC2M S2M I D检测猪饲料中D MZ和I PZ,检测限达不到2L g/kg,但两种药物添加水平为0.1mg/kg时,质谱图中可给出足够质谱信息来确证两种药物。
GC2MS集高灵敏度和定性分析于一体,应用将越来越广。
3.4液相色谱法和液相色谱-质谱法有关硝基咪唑药物残留检测方法国内较少,农业部公布了动物性食品中MNZ、D MZ、RNZ残留检测的H PLC法,适用于鸡的肌肉、肝脏组织中单个或多残留的检测,检测限为1L g/kg,在6~50L g/kg添加浓度时回收率为60%~120%。
样品先用乙酸乙酯提取,液液萃取、固相萃取柱净化等过程,处理方法较为复杂。
王建华等[7]建立了鸡的肌肉组织中MNZ、D MZ#32#中国兽药杂志2007,41(8):31~33/汪纪仓,等和RNZ残留检测的H PLC法和气相色谱法。
H PLC 法中采用二氯甲烷提取后,提取液直接过硅胶固相萃取柱净化,样品添加浓度为10~50L g/kg时,平均回收率为78%~91%,但灵敏度低,检测限为10 L g/kg。
艾霞等[8]建立了M NZ在鸡蛋、牛奶及鱼的肌肉和皮肤中残留检测的HPL C法,鸡蛋和牛奶样品用乙酸乙酯提取,鱼的肌肉和皮肤用乙腈提取,提取液旋转蒸干,残余物溶于正己烷-乙酸乙酯(2 B1)过固相萃取柱,洗脱液氮气吹干溶于流动相进样分析,MNZ在各组织中的检测限均可达1.0L g/ kg,牛奶和草鱼可食组织中H PLC残留检测方法,检测限和定量限均可达到1L g/kg,空白鸡蛋、牛奶和草鱼添加MNZ浓度为1、2和4L g/kg时,回收率为65%~82%,变异系数在6%~12%之间。
液相色谱法和气相色谱法一样,不能用来定性,定性的液相色谱-质谱法已有报道,Cap itan-V allvey等[9]采用L C2MS检测水样中5种硝基咪唑类药物的含量,最低检测限在0.2L g/L。
