细胞培养2_人体间期细胞X—小体的制备

一、选择题1-5 BABBB 6-10 BDABB 11-15 ABCAC 16-18 CCC二、填空题1、根据线粒体和叶绿体起源内共生学说，认为线粒体起源于细菌，叶绿体起源于蓝藻。

2、协助扩散和主动运输的主要相同之处在于都需要载体，速度都很快,主要差别在于协助扩散只能顺浓度梯度进行，不消耗能量；主动运输可以逆浓度梯度进行，消耗能量。

3、核纤层结构的组成成分, 属于中间纤维蛋白家族4，核小体的核心由四种组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）各两分子共8分子组成的八聚体，核心的外面缠绕了1.75圈的DNA双螺旋，其进出端结合有H1组蛋白分子。

5、YAC（酵母人工染色体）的构建成功说明：一个有功能的染色体至少有自主复制DNA序列,着丝粒DNA序列, 端粒DNA序列三个不可缺少的功能元件。

6、真核细胞和原核细胞中都存在的rRNA是5SrRNA。

7、细胞周期调控中的两个主要因子细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶（CDK 激酶）和。

细胞周期蛋白其中前者是催化亚基，后者相当于调节亚基。

三、名词解释1.常染色质(euchromatin):间期核中处于伸展状态，压缩程度相对较低、着色较浅的染色质。

2.双信号系统：以PIP2代谢为基础的信号通路中，胞外刺激使转化为IP3和DAG，引发IP3/Ca2+和DAG/PKC 两条信号转导途径，在细胞内沿两个方向传递，实现细胞对外界的应答，这样的信号系统称之为双信号系统。

3.细胞周期同步化：将一个细胞群体内处于不同时期的细胞处于细胞周期的同一时相的方法。

4.多聚核糖体：具有特殊功能与形态结构的核糖体与mRNA的聚合体。

5.细胞凋亡：为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。

6.Hayflick界限：正常的体外培养的细胞寿命不是无限的，只能进行有限次数的增殖。

7踏车行为：在一定条件下,微丝的正极由于肌动蛋白亚基不断添加而延长,负极由于肌动蛋白亚基去组装缩短,这种现象称为踏车行为。

科目遗传学实验题目人类X染色质小体的检测人类X染色质小体的检测摘要X染色质是指雌性哺乳动物体内的体细胞在间期细胞核中，除了一条X染色体外，另一条呈固缩状态的染色质结构，也称巴氏小体。

该特殊结构曾被用于检测奥运女选手遗传性别。

本次实验采用人口腔黏膜细胞和发根细胞为标本，通过硫瑾染液染色，在显微镜下观察巴氏小体部位和形态特征，并进行简单计数统计，估计自己具巴氏小体的细胞比率。

1.引言1948年，Barr的研究生Bertram在研究长时间刺激后神经元是否产生细胞学变化的实验时，观察到核仁附近有一种染色很深的小体，并且存在于部分细胞之中。

Barr通过观察标本，发现该结构与性别有关，称其为“核仁随体”并推测该小体是由两条性染色体的异染色质衍化而来的。

随着人类核型分析技术的成熟，X染色质小体逐渐被证实并且广泛用于大规模筛检X染色体数畸变个体。

1960年，Ohno和Hauschka发现X染色质小体实际上是一条在细胞分裂间期，收缩的、异染色质化的X染色体，与核仁关系不大。

后续研究表明，X染色质小体是由于胚胎发育早期X染色体失活造成的，在X 染色体长臂靠近着丝点的一段序列控制X染色体的失活。

本实验以人类口腔黏膜细胞和发根细胞为标本，经解离、硫瑾染液染色和压片后，观察巴氏小体的部位和形态，通过简单的计数，估计具巴氏小体的细胞比率。

2.材料和方法2.1 实验材料显微镜，牙签，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片；冰醋酸，蒸馏水，95%乙醇，1MHCl，染液：硫瑾染液。

2.2 实验方法2.2.1 获取实验材料实验一：口腔黏膜细胞先漱口2-3次，尽可能除去口中的杂物。

用牙签钝头在口腔一侧用力刮取，弃去第一次的刮取物，在同一部位用另一根牙签重新刮取，将刮到的细胞涂在清洁干燥的载片上，反复几次，晾干。

实验二：发根细胞拔取带毛囊的一根头发，将其置于45%的醋酸溶液中解离5Min，等毛根松软之后用解剖针尖将外层毛囊的组织细胞轻轻刮下。

用解剖针将载玻片上的组织细胞摊平。

人类X染色质的制备与观察摘要X染色质（巴氏小体）是除一条X染色体外，其余的X染色体常浓缩成染色较深的染色质体。

本实验选取口腔粘膜细胞和毛囊细胞，通过解离、染色、压片等方法观察巴氏小体在细胞核内的分布及形态等特征，并且通过显微观察对巴氏小体进行计数，估计巴氏小体在不同性别和不同性格人体细胞中的出现率。

此外，了解X染色体失活的有关假说以及为失活X染色体上的基因所控制的遗传性状地特点也是本实验的目的之一。

关键词X染色质（巴氏小体）口腔黏膜细胞毛囊细胞1.引言X染色质小体（巴氏小体）是由雌性哺乳动物体细胞中失活的X染色体在间期细胞核中呈异固缩状态（染色质高度螺旋化），形成直径约1μm、贴近于核膜边缘的染色小体。

巴氏小体在细胞分裂间期细胞核中出现异固缩现象，表现出浓缩、染色深、无活性的特点。

巴氏小体在不同细胞中呈现不同的形态，有卵圆形，三角形，月牙形，线性等。

一般来说，正常女性口腔粘膜细胞中约30-50%有一个巴氏小体，男性则低于1-2%。

1949年，加拿大学者Barr在雌性猫神经元核仁附近发现一种染色很深的小体，而在雄性猫中则极少出现，Barr称这种小体为“核仁随体”，并推测小体是由两条性染色体的异染色质衍化来的。

1955年，Barr在女性的口腔细胞中发现Barr body（巴氏小体），Moor与Barr 用口腔黏膜上皮细胞检测Barr body，制作出日后被广泛使用的颊涂片。

1959年，人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏小体的研究联系起来。

1960年，Ohno和Hauschka发现，X染色质小体实际上是一条在细胞分裂间期，收缩的、异染色质化的X染色体，与核仁并无关系，也不是Barr推测的那样由两条性染色体各贡献一部分异染色质形成。

受此启发，Lyon（1961，1962）研究了小鼠X染色体连锁的皮毛颜色基因突变体，进一步指出异染色质化的X染色体可以来自父方，也可以来自母本；异染色质化的染色体在遗传上没有活性（后来的研究表明异染色质化的染色体中还是有部分基因保持活性）；这种随机失活是性别决定为XX-XY的动物为平衡两性之间性染色体上的基因剂量而采取的一种特殊的调控方式（因为Y染色体上的基因数量很少，因此雌性个体必须通过减少X染色体上基因剂量的方式使两性个体间基因剂量取得均衡），即所谓的“剂量补偿”，这是X染色体失活的意义所在。

人类X染色质（巴氏小体）的制备与观察摘要巴氏小体是由雌性哺乳动物体细胞中失活的X染色体在间期细胞核中形成的呈异固缩状态，贴近于核膜边缘的染色小体，在遗传学、细胞观察方面有重要意义。

实验中作者取人口腔颊部上皮细胞与发根毛囊细胞进行硫瑾染色操作，通过显微观察对巴氏小体进行识别与计数，描述巴氏小体的形态，并统计其在不同性别人体细胞中的出现率。

引言在哺乳动物体细胞间期细胞核中，除一条X染色体外，其余的X染色体失活并呈异固缩状态，此即为巴氏小体。

又称X小体、性染色质，直径约1μm，通常位于间期核膜边缘。

1949年，加拿大学者Barr在雌性猫的神经元细胞核中发现一种染色很深的小体，而在雄性猫中则极少出现[1]。

通常人类男性细胞核中很少或没有巴氏小体，而女性有1个，性染色体异常的患者如XXY、 XXYY、XXX、XXXY等，巴氏小体的数量＝X染色体数量－1。

综合巴氏小体与哺乳动物性染色体的剂量补偿效应，Lyon M．F 于1961年提出Lyon 假说，主要内容有：(1)正常的雌性哺乳动物两条X染色体只有一条在遗传上有活性，另外一条失活；(2)X染色体失活是随机的。

因此表达是随机的，结果在杂合子中会出现嵌合现象（mosaic）。

例外：有袋类失活的X染色体全部是父方的。

(3)失活发生在胚胎发育的早期，如人在受精后的16天（5000-6000个细胞时）。

一个细胞的一条染色体一旦失活，这个细胞的后代细胞中该染色体均失活。

Lyon假说虽然可以解释一些问题但不是全部，如人类中的44AXO型个体表现为Turner 综合症、44AXXY表现为Klinefelter综合症。

随着生物学和医学的发展人们已经认识到单条X染色体失活现象是普遍存在的，但失活的染色体上存在失活区和非失活的。

如人类中位于X染色体上的基因，G6PD（葡萄糖-6磷酸脱氢酶）、AHF（抗溶血第Ⅷ因子）等是非失活的，而Xg血型基因是失活的。

巴氏小体的生物学观察，对于优生学中鉴别性别和预防性连锁疾病的发生，以及作为癌细胞核异常主要形态学特征之一鉴定癌细胞，有重要价值[1]。