脂代谢相关检测
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脂代谢相关基因siRNA沉默的实验步骤第一部分:siRNA转染条件的优化及靶点筛选。
写文章所需要的数据:1. 三对siRNA序列;2. 转染效率及图片;3. 对mRNA的抑制率及图片(非常重要)4. 对蛋白质的抑制率及图片(非常重要)实验步骤:1. 准备工作(1)培养瓶、玻璃吸管和枪头消毒;分装培养液、青霉素-链霉素和胰酶的管子消毒及分装;PBS配置及消毒。
(2)培养液分装100ml/瓶,使用100ml玻璃瓶分装;青霉素-链霉素分装1ml/管,使用冻存管分装;胰酶分装1ml/管,使用冻存管分装。
(3)培养液的配置,每100ml细胞培养液(美国Hyclone)中加入10ml血清(成都哈里生物)和1ml青霉素(10000U/mL)-链霉素(10000ug/mL)(美国Hyclone)。
2. HepG2细胞复苏(1)从液氮罐中取出冻存管,塞入一次性手套(保护以免进水),直接浸入37℃温水浴中,并不时摇动使其尽快融化。
(2)冰晶完全溶解后,取出冻存管。
在超净工作台上打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到10ml离心管并滴加10倍以上的培养液,混匀。
(3)800rpm离心5min。
(4)弃去上清液,加入培养液重悬细胞,接种装有新鲜培养液的培养瓶,接种量以1:1进行复苏(1冻存管分为1培养瓶进行培养)。
(5)37℃、5%CO2培养箱(Thermo)中静置培养。
(6)次日更换培养液一次,除去残留的二甲亚砜,继续培养。
(7)根据情况传代三次后即可进行实验。
3. 转染条件的优化(1)HepG2细胞的胰酶消化。
弃去培养液,加入PBS洗去残存的培养液和死亡细胞,洗三次。
加入适量的0.25%胰酶溶液(Hyclone),以刚好能盖住瓶底细胞层为宜,一般0.5-1ml。
在显微镜下观察消化过程,细胞间出现细小空隙时,去掉胰酶溶液。
轻轻拍打瓶底,如果细胞全部漂浮于液体中,立即加入含有血清的培养液终止消化,并用吸管反复吹打分散细胞;如果部分细胞消化还不充分,仍贴于壁上,可放入37℃培养箱中继续消化30-60秒后再轻轻拍打,直到全部细胞漂浮于液体中。
2024代谢相关(非酒精性)脂肪性肝病防治指南(全文)《代谢相关(非酒精性)脂肪性肝病防治指南(2024年版)》是对《非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018更新版)》进行的修订,主要针对代谢相关脂肪性肝病的筛查和监测、诊断和评估、治疗和随访等临床问题提出了指导性建议。
指南推荐意见一览推荐意见1:代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)是我国最常见的慢性进展性肝病,应该加强筛查和防治(B,1)。
推荐意见2:肥胖、2型糖尿病(T2DM)、代谢综合征(MetS)组分、过量饮酒、无症状性转氨酶增高等高风险人群应该筛查脂肪肝和纤维化(B,1)。
推荐意见3:MAFLD 患者应该筛查并监测肝纤维化(B,1)。
推荐意见4:合并进展期纤维化的MAFLD 患者应该筛查肝细胞癌( HCC),明确诊断肝硬化时还应筛查食管静脉曲张和肝脏失代偿事件(B,1)。
推荐意见5:MAFLD 患者应该筛查并监测MetS 组分和T2DM(B,1)。
推荐意见6:MAFLD 患者应该筛查慢性肾脏病(CKD)和亚临床动脉硬化,并评估心血管病(CVD)风险(B,1)。
推荐意见7:MAFLD 患者应该坚持参加基于年龄分层的各种常见恶性肿瘤的筛查(C,1)推荐意见8:诊断MAFLD 基于以下 3 个标准:(1)影像学诊断脂肪肝和/ 或肝活检发现≥5% 肝细胞大泡性脂肪变性;(2)存在 1 项及以上MetS 组分;(3)排除过量饮酒、营养不良、肝豆状核变性等可能导致脂肪肝的其他原因(B,1)。
推荐意见9:酒精性肝病(ALD)和其他原因脂肪肝患者有肥胖和/或T2DM、MetS 时需要考虑合并MAFLD(C,1)。
推荐意见10:MAFLD 可以与慢性病毒性肝炎等其他类型肝病合并存在(B,1)。
推荐意见11:超声显像是影像学诊断脂肪肝以及筛查和监测HCC 的首选方法(B,1)。
推荐意见12:瞬时弹性成像检测的受控衰减参数/超声衰减参数( CAP/ UAP)和肝硬度值(LSM)可以用于慢性肝病患者脂肪肝和肝纤维化的无创诊断与评估(B,1)。
简述生物化学检验项目在脂代谢紊乱诊治中的应用。
生物化学检验项目在脂代谢紊乱诊治中具有重要的应用价值。
其中包括血脂类指标的检测,如总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯等;血糖类指标的检测,如空腹血糖和糖化血红蛋白等;以及炎症类指标的检测,如超敏C反应蛋白等。
这些检验项目可以帮助医生了解患者的血脂代谢情况,进而制定相应的诊治方案。
例如,在高胆固醇血症患者中,可通过药物治疗和改变生活方式来降低胆固醇水平;在糖尿病患者中,可通过控制血糖水平和饮食习惯来改善患者的病情;在炎症反应明显的患者中,可通过抗炎治疗来缓解症状。
总之,生物化学检验项目在脂代谢紊乱的诊治中具有不可替代的作用,可以帮助医生更准确地了解患者的病情,制定更有效的治疗方案,提高患者的治疗效果和生活质量。
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血脂和脂蛋白检测是评估血液中脂质代谢状况的常见方法。
下面是几种常用的检测方法:
1. 血液样本采集:在进行血脂和脂蛋白检测之前,需要抽取一定量的静脉血液样本。
常用的采血方法是在手腕、手臂或手背处使用安全针针头进行采血。
2. 总胆固醇(TC):血液中的总胆固醇含量是评估脂质代谢的一个重要指标。
总胆固醇检测常常通过血液生化分析仪器来测定,这些仪器可以测量血液中胆固醇的浓度。
3. 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C):LDL-C 是致动脉粥样硬化的主要因素之一。
测量LDL-C 的常见方法是使用直接法或间接法。
直接法通过将血液样本中的LDL-C 直接测量出来。
间接法通常使用血液生化分析仪器,计算得出LDL-C 的浓度。
4. 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):HDL-C 被认为是“好胆固醇”,具有保护心血管健康的作用。
测量HDL-C 通常使用血液生化分析仪器,通过测定血液样本中HDL-C 的浓度来进行评估。
5. 三酰甘油(TG):三酰甘油是血液中最常见的脂质之一,它通常与胆固醇一起进行检测。
血液生化分析仪器可以测量血液中TG 的浓度。
6. 脂蛋白:脂蛋白是一种将脂质从一个部位输送到另一个部位的复合物。
脂蛋白检测通过血液生化分析仪器,可以评估血液中不同类型脂蛋白的浓度和比例,如低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等。
这些是常见的血脂和脂蛋白检测方法,具体的检测项目和方法可根据医生或实验室的要求进行选择。
在进行检测之前,建议咨询医生或专业人员,以了解具体的检测方法和准备事项。
2022-2023年检验类《临床医学检验技术(中级)》预测试题(答案解析)全文为Word可编辑,若为PDF皆为盗版,请谨慎购买!第壹卷一.综合考点题库(共50题)1.有关脂代谢实验室检查中,推荐的常规检查项目不包括()。
A.ApoEB.TC.TGD.Lp(a)E.LDL-C正确答案:A本题解析:脂代谢常规检查项目包括TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAⅠ、ApoB。
2.患者男,22岁。
头昏乏力,鼻黏膜及牙龈出血1周。
化验:WBC 42×109/L,Hb 85g/L,PLT 23×109/L,血片中有幼稚细胞。
骨髓增生极度活跃,原始细胞50%,早幼粒细胞21%,POX染色阳性,α-NAE染色部分呈阳性反应,不被NaF抑制,确诊为急非淋巴细胞白血病,FAB分型是()。
A.AML-M1B.AML-M2C.AML-M3D.AML-M4E.AML-M5正确答案:B本题解析:M2(急性粒细胞白血病部分分化型)主要特征如下:原粒细胞(Ⅰ型+Ⅰ型)占骨髓非红系细胞的30%~89%,单核细胞<20%,其他粒细胞>10%。
POX染色阳性,α-NAE染色可呈阳性反应,不被NaF抑制。
本病例符合M2特征。
3.t(15:17)见于哪种疾病?()A.慢性粒细胞白血病B.AML-M3白血病C.AML-M2b白血病D.急性淋巴细胞白血病E.骨髓增生异常综合征正确答案:B本题解析:t(9:22)见于慢性粒细胞白血病;t(8:21)多见于M2患者;t(15;17)(q22;q12)主要见急性早幼粒细胞白血病(AML-M3白血病)。
急髓白血病在FAB分型标准中分为八个亚型:①M0:急性髓细胞白血病微小分化型;②M1:急性粒细胞未分化型;③M2:急性粒细胞部分分化型白血病;④M3:急性早幼粒细胞白血病;⑤M4:急性粒-单核细胞白血病;⑥M5:急性单核细胞白血病;⑦M6:急性红白血病;⑧M7:急性巨核细胞白血病。
代谢疾病的实验诊断—血脂脂蛋白血脂和脂蛋白异常血症脂类代谢紊乱的疾病可以由遗传因素引起,可因环境因素导致,也可继发于其他疾病。
目前对脂质代谢紊乱与疾病关系的研究已从脂质和脂蛋白水平进入载脂蛋白、脂蛋白受体、相关酶、基因等的研究。
多数血脂和脂蛋白异常与动脉粥样硬化有关,是动脉粥样硬化性心脑血管病的危险因子。
1、血脂测定与动脉粥样硬化血脂、脂蛋白、载脂蛋白等测定已广泛用于动脉粥样硬化引起的心血脑血管疾病的流行病学和临床医学领域,但是必须了解这些项目只能用于评估发生动脉粥样硬化和由其引起的心脑血管疾病的危险程度,而不能对这类疾病如CHD作出诊断;但是对于遗传性异常脂蛋白血症等类疾病,则必须用这些试验作为诊断指标。
⑴危险因素的概念:人体的某些生理特征对某些疾病的发生有一定程度的相关性,人们就称这些特征为某种疾病的危险因素。
现在都很重视血脂水平和发生动脉粥样硬化的关系,实际上血脂就是发生动脉粥样硬化的危险因素,但只能用于估计发生动脉粥样硬化的危险性,而不能用做特异性的诊断指标。
以冠心病(CHD)为例,CHD是一种多因素疾病,血脂异常只是CHD的发病因素之一,不是所有CHD患者血脂都增高,也不是所有血脂增高者都必然患CHD,所以它对CHD来说不能做为一个诊断指标,只能作为一个危险因素看待。
其它脂质和脂蛋白测定如HDL-C、LDL-C、apoA、ApoB等也都是属于危险因素而非诊断指标。
⑵血脂检查的临床应用血脂检测是临床常用的检验指标之一,血脂代谢异常与许多疾病的发生关系密切,临床血脂检测主要用于:①作为健康普查指标,预防和早期发现高脂蛋白血症,起监控作用;②协助判断动脉粥样硬化,进行病情观察和指导治疗;③评价冠心病,脑梗塞等动脉粥样硬化疾患的危险度;④对少见的遗传性脂蛋白异常性疾病进行诊断;⑤对继发性血脂异常的疾病进行监测和评估;⑥监测和评价饮食和药物治疗效果;⑦其他。
⑶血脂试验项目的选择:血清中主要的脂质有TG、TC,脂蛋白有HDL、LDL、VLDL、Lp(a),临床上可以分别选择测定这几种脂蛋白。
代谢综合征实验室检测方法
代谢综合征是一种包括高血压、高血糖、高血脂和肥胖等多种疾病的综合征。
以下是代谢综合征实验室检测方法:
1. 血糖水平检测:采用静脉血测定血糖水平,经常应用的有空腹血糖和随机血糖。
2. 血脂相关指标检测:包括总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯等,也是通过采集静脉血进行检测。
3. 血压检测:可以通过自动血压计或者手动测量进行检测,通常采集手臂部位的血压数据。
4. 体脂检测:包括B超、DEXA、生物电阻抗等多种检测手段,通过对身体的成分分析,得出体脂率和肌肉量等数据。
以上是代谢综合征实验室检测方法的介绍,建议在医生指导下进行检测以及后续的处理。
脂肪的检测原理是什么
脂肪的检测原理主要通过测量脂肪组织的含量、分布以及代谢等指标来进行。
1. 脂肪含量测量:常见的方法是通过测量体重和身体脂肪百分比来计算身体脂肪含量。
常用的测量方法包括体重指数(BMI)、皮褶厚度测量法和双能X射线吸收法(DEXA)。
其中,皮褶厚度测量法通过测量标准部位的皮肤皱褶厚度来估算身体脂肪含量,而DEXA则是一种通过测量X射线对骨骼和软组织吸收情况来估算体脂肪含量的方法。
2. 脂肪分布测量:脂肪分布通常指的是Visceral Fat Area(内脏脂肪面积)和Subcutaneous Fat Area(皮下脂肪面积)等指标。
这些指标可以通过医学影像技术(如MRI和CT扫描)来测量。
此外,通常认为腰围、腰臀比等指标也可以反映脂肪分布。
3. 脂肪代谢测量:脂肪代谢通常通过测量相关脂肪代谢产物(如甘油三酯、游离脂肪酸)的含量来进行。
这一类测量方法主要应用于临床和研究中,包括生物化学方法、质谱法和放射性同位素示踪法等。
以上所述是脂肪的常见检测原理,但具体的检测方法和技术在实际应用中可能会有差异。
因此,在进行脂肪检测时,应根据具体情况选择合适的方法和指标来进行测量。