TEM-操作规范
- 格式：doc
- 大小：1.96 MB
- 文档页数：10
下载文档原格式
合集下载
TEM操作步骤及注意事项
精品文档FEI TECNAI20透射电镜目录电镜操作面板................. - 2 - 使用步骤：................... - 4 -一.放置样品................ - 4 -二.合轴.................... - 4 -三.拍形貌.................. - 5 -四.踩带轴.................. - 6 -五、拍衍射................. - 6 -六、能谱分析............... - 7 -七、高分辨................. - 7 -八、拔样品杆及关机......... - 8 -电镜操作面板镜筒注意事项1. 使用电镜时，首先要观察电镜的状态。
2. 有黄色背景的按钮，要谨慎。
3. 观察一系列数值，包括：最佳电流值、Spot size 、样品各坐标是否都归零等。
使用步骤：一.放置样品1.放样品时，夹子不能碰到银环，放置后，用手振动玻璃管，使样品至中间状态，然后用螺丝帽压紧（不可过紧，固定住即可）2.插入样品杆时，要使杆上小柱的位置对准左上角螺丝，插至凹槽完全进入，然后连上数据线。
确认在双束（双倾台不是双束）下，点两下回车。
打开抽真空示意图→Vacuum Overview，开始抽真空。
3.两次抽真空完毕后，逆时针旋转小柱对准Close，插入。
抽真空共分成两段时间，第二个倒计时结束后，即红灯一灭，必须在20秒内将样品杆逆时旋入。
旋入样品杆时，要一手拿着，一手托着，放置进入过快。
然后点Tube on。
然后点Col Values Closed。
检查4．关灯，取下蒙皮。
5.点击→Search，即可看到样品所在位置。
开始找样品中心空洞。
二.合轴1.在Spot size为1，低倍（6200X或8700X）下找到薄区（朝着光亮处找）。
然后调焦。
选择最佳物镜电流值92.5854（按Eucentric focus）。
TEM简明操作程序
TEM 简明操作程序：
1．确认Column真空值小于20，开启阀门。
点击Col. Valves Closed 按钮，使其变灰。
2．缩放样品，寻找自己感兴趣的观察区域。
缩小样品（Magnification）的同时，应放大光斑照明面积（Intensity）。
Magnification钮：顺时针放大，逆时针缩小；
Intensity钮：顺时针扩散，逆时针汇聚。
3．找到需要拍摄的区域后，将光发散至满屏，插入CCD相机，按R1，将大荧光屏抬起。
4．细调Focus，至正焦略微欠焦的最佳聚焦值。
Focus钮：顺时针过焦，逆时针欠焦；
Focus Step钮：越大，粗调，越小，细调。
5．进行拍照，获取照片。
保存图片： File →Save As →*.dm3
File →Save Display As →*.tif，*.gif，*.jpeg等
6．拍照完毕，按R1，关闭大荧光屏；退出CCD相机；关闭阀门，点击Col. Valves Closed 按钮，使其变黄。
TEM操作流程
JEM-2100透射电子显微镜操作流程⏹冷阱、高压以及LENSE分两次加液氮，分两步升高压总计1h开LENSE，聚光镜光阑1档⏹安放样品使用样品杆前，请仔细检查样品杆是否完好、是否需要维护：销钉是否松动、高度感应端是否脱落）载物铜网正面朝上，压片压好载物铜网后轻轻旋紧螺钉洗耳球吹气确保样品杆关键部位没有杂物用样品杆中部轻击左手手掌，确保压片压好载物铜网⏹装样品杆预抽过程销钉对准卡槽，水平垂直推入样品杆（不得旋转）,开泵预抽（PUMP），听到噗的声音后松手，等样品杆旁边绿灯变亮后开始进杆；进杆紧握样品杆把手分两次向里均匀旋进（顺时针），直至样品杆进入样品室（该过程不得松手并有向外拉力、不得产生轴向力）拔杆确保关闭灯丝与CCD的前提下，用均匀的外力将样品杆向外拔（该过程较长），当样品杆受到阻力时，即可向外旋转（逆时针），旋转受到助力时，停止旋转，再用均匀力向外拔（该过程较短），当样品杆再次受到阻力时，即可向外旋转（逆时针），听到气门“噗”的声音时，停止拔杆。
手挡住样品杆尾部，放气（AIR）直至气门再次发出“噗”的声音时，将样品杆拔出样品室外。
测试步骤电压中心STD FOCUS低倍找样LOW MAG SPOTSIZE 1高倍照相MAG 1双中心调节聚光（BRIGHTNESS）看光斑是否在中心，不在中心采用电子束（SHIFT X Y）平移至中心粗聚焦利用IMAGE WOBB X Y、Z ⇑，Z ⇓调至样品不动为止1—5合轴在双中心的基础上（30 K），SPOTSIZE 5 光斑不在中心，采用电子束（SHIFT X Y）平移到中心，SPOTSIZE 1光斑不在中心，采用电子枪（F4+SHIFT X Y）平移到中心，调完点去F4，继调SPOTSIZE 1，反复多次，直至光斑中心不因SPOTSIZE的变化而偏移荧光屏中心注意：SPOTSIZE 5时不得采用F4键盘调像散100 K 将样品移开，用红线框选住碳膜，配合OBJ FOCUS 的FINE 或COARSE调出傅里叶椭球后，采用OBJ STIG+STIG X Y将椭球调节为圆形120 K 将样品移开，用红线框选住碳膜，先采用OBJ STIG+NTRL调出傅里叶椭球，再配合OBJ FOCUS 的FINE 或COARSE，采用OBJ STIG+STIG X Y将椭球调节为圆形。
TEM标准操作规程
TEM标准操作规程一. 换样品：1. 关闭FILAMENT2. 抽出样品杆后逆时针方向旋转；在当前位置继续抽出样品杆后逆时针旋转（样品杆此位置严禁旋转或抽动）。
3. 保持当前样品杆状态，打开放气开关，轻轻扶住样品杆，待放气结束后取出样品杆。
4. 利用弯镊子和专用工具，轻轻取下样品杆头，放在样品支架上。
5. 用相应尺寸的钟表螺丝刀，松开紧固螺丝(注意不要把螺丝全部拧下)，拨开压簧将欲观察之样品放入。
拨回压簧，紧固螺丝后将样品杆头装回样品杆。
6. 插入样品杆并压紧，(此处严禁旋转样品杆！)打开真空电源，待真空泵启动后手方可离开。
7. 等高真空指示灯（绿灯）亮后，顺时针旋转样品杆并推入，到达第一固定位置后，继续顺时针旋转样品杆后推入样品杆。
二. 观察1. 到达高真空后，等FILAMENT指示灯亮，按下相应的开关ON，等待20秒左右监视器上将出现光斑。
2. 调节SHIFT—X、SHIFT—Y、BRIGHTNESS旋钮，使光斑大小合适，位置适中。
利用轨迹球，调整样品位置，得到所需结构。
利用SELECTOR、SHIFT—X、SHIFT—Y、BRIGHTNESS、IMAGE—X、IMAGE—Y、Z∧、Z∨旋钮的协调，相互配合调节得到所需要的样品结构。
三. 抓图或照相1. 抓图：打开CCD相机的拨动开关，点击观察键。
出现对话框后输入相应的放大倍数回车。
在此窗口可对样品的焦距、位置信号强度等进行调整，得到一幅好的图象。
2. 存图：点击抓图输入相应的放大倍数回车。
按照电脑的存储方式存图。
（该存图方式适用于低倍图象的存储）。
3. 找到一个好的结构后，点击面板上的PHOTO键，待PHOTO 灯亮后，盖上观察窗口，再次点击PHOTO，TEM自动拍照。
拍照后记录显示器上相应的底片号码。
TEM-2010操作步骤总结,可借鉴
透射电镜培训‐操作步骤总结先看冷却水水箱温度。
设定值是18℃。
正常在27℃以下都可以，高于27℃的时候，最好灭灯丝关lens，等一段时间，等到水箱温度降低之后，再接着做，以免电镜过热停机。
记录初始真空值以及各种附件。
上样品准备工作：样品杆分为单倾和双倾。
使用V栅样品时，要保证在电镜中V栅正面朝上。
单倾台上V栅的时候，正面朝上；双倾台上V栅的时候，反面朝上。
V栅反面边缘是亮的。
操作步骤：先用洗耳球将工作台面吹干净，将电镜纸摊开，放在合适的位置（离桌面边缘15厘米左右），左手按住纸的中心下部边缘，用洗耳球吹净。
将样品盒拿到合适的位置，打开，左手拿出样品杆，右手将支架取出，注意支架放的位置，支架右端位于电镜纸偏右3/4处，下边缘压住电镜纸的上边缘。
然后将样品杆放在支架上。
注意密封圈要在右边支架外面。
左手拿样品杆尾部，右手抬着样品杆中部，左手放手之后，攀到右手右边，左手抬着样品杆，然后右手扶住托盘，调整位置。
注意事项：样品杆上的帽要拔，不要转，拔的时候右手虎口冲向样品杆，以免拔掉帽之后手碰到样品杆，造成污染。
样品杆放在架子上的时候，不要碰到密封圈。
样品杆的盒子要锁好，移动之前先检查是否锁上。
上下样品的时候要坐着，坐稳。
每做一步都要将用完的东西整理好再做下一步。
怎么稳当怎么做，不要怕麻烦。
样品杆的帽拔掉之后，手不要再从样品杆上面过，要从旁边绕。
上样品杆：条件：1.看零；2.6灯OK；3.各个皮拉尼规的示数位于平衡值；4.离子泵运行指示灯亮。
动作即相应变化：第1步：将测角台上的开关置于pump，真空表置于SPEC 位置，准备好倒计时。
将样品杆上的销与测角台上的槽对好位，缓慢将样品杆送入预抽室，等销进去之后，用右手手掌将样品杆推进去，推到黄灯指示灯亮。
然后等到听到机械泵工作的响声之后，放手。
这时看真空表读数，指针从右向左移动，开始计时20分钟，看绿色指示灯是否亮，这两个条件都满足后，进行下一步。
这一步阀门变化：首先是机械泵抽预抽室，V2,V5B,V13关闭，V14,V12,V21开，之后扩散泵抽预抽室，V14，V12关，V8，V13开。
TEM透射电子显微镜教程
TEM透射电子显微镜一、制样二、开机1.开循环水：先按下下面的黑色按钮，再按下上面的黑色按钮；2.主机开Col键,开机（软件自启）；三、放样1.出样品杆：向外拉部分杆，顺时针旋转15°，再向外拉部分杆，逆时针旋转30°,红灯亮，松手，拨下Air开关，等红灯灭，完全拉出杆。
（黑色圈以后的部分不能碰到，注意不要碰到杆尖端的钻石）；2.放样：铜网放到四、进样1.杆上的螺丝对准进样孔的凹槽插入，等红灯亮，往上拨Air杆，绿灯亮，顺时针30°推进，然后逆时针15°推进，完成进样。
五、软件操作1.加压：点击右侧第四个HV图标，弹出一个框，在框内选择HV ON,等高压上升到100；2.点亮灯丝：点框内的Filame on(显示为10μA为正常)；3.按下操作键盘的lens reset钮，旋转Brightness钮调整亮度。
右击左侧工具栏Stage,弹出一个框，点击Holder,下拉菜单，选择样品序号。
关掉此框，移动轨迹球，调整倍数寻找样品；4.旋转M钮，放大倍数，若变暗，逆时针旋转Brightness旋钮；5.按下WOB按钮，进行辅助对焦。
如果样品在视野内晃动剧烈，调整样品杆下方的银色金属旋钮（Z轴），直到样品不在晃动；6.右击左侧工具栏CCD，又出来一个框，这个时候要进行调整亮度，使框中最下方的screen density调为-12.点击Run。
7.调节亮度使长方框里的最右侧的红色峰位于框中间位置，然后用Focus聚焦。
准备拍的时候要按灭WOB辅助聚焦按钮，点击Freeze,点save保存图片。
8.如果要在同一倍数下拍，点击Run,继续拍摄。
如果要缩小倍数大范围找样，点Stop,缩小倍数，调节亮度找到合适样品。
六、出样1.点击左侧工具栏HV，在框里点击beam off。
2.出样品杆：向外拉部分杆，顺时针旋转15°，再向外拉部分杆，逆时针旋转30°,红灯亮，松手，拨下Air开关，等红灯灭，完全拉出杆。
TEM-操作规范
查看仪器控制面板上的指示灯（正常情况为On 灯灭，Of 、Vac 和 HT 灯亮）。
A 口口查看样品台的指示灯（正常情况指示灯不亮）检查空调、冷却水机、空气压缩机、不间断电源及其他相关设备仪表的工作状况，确保 其正常运行。
检查实验器材（样品杆、镊子、杜瓦瓶、投影室视窗）是否有损坏。
检查仪器使用日志。
二、登陆用户界面（User In terface ）在登陆界面输入用户名和密码（直接进入，现在没设）。
启动主程序 Tec nai User In terface （一般是开启状态）。
再次检查仪器是否处于正常状况。
确认Column Valves Closed 按钮处于关闭状态（黄色）。
查看真空和高压值是否正常：真空：在Tec nai User In terface 软件中，在 Setup Vacuum 控制面板中：Gun ⑴，Column （6）, Camera （30-32）的压力指示条都应该是绿色的才为正常。
高压：在 TecnaiUser In terface 软件中，在 Setup HighTe nsio n 控制面板中：在正常情况 下，High Tension 指示条为黄色，高压指示值为 200kV （高压平时一直加到 200kV ）。
FEG Control 控制面板中，Op erate 是黄色的（灯丝开启状态）。
查看样品台位置是否正常。
＜注意事项＞1. TEM 操作程序（笔记）检查仪器是否运行正常1. 2. 3.① ② ③d I --I T和 心 1代 ■■ Vrm ■上二^—-3*5 1 石.I I -J 1 I I . r1 绘I I ・■■* . ■■ ▼JnT£M Bn^nt AridSA 逊B[ it 宙.a 二a. 皿*曲 _1. 2. 3. 4. 5. 6. Vacuum 中，Status 显示为COL.V ALVES , Gun 的真空值必须为 1, Column 值必须为6, camera值小于40。
tem样品制备以及浓度要求
tem样品制备以及浓度要求tem样品制备以及浓度要求是生物、化学等领域实验室常见的操作步骤。
为了获得高质量的tem样品，制备过程和浓度控制至关重要。
本文将详细介绍tem样品制备的流程与方法，以及各种溶液的浓度要求。
一、tem样品制备概述tem样品制备主要包括样品处理、固定、切片、染色、洗涤与脱水、透明化与包埋、切片染色、观察与分析等环节。
在实际操作中，每个环节都需要严格把控，以保证样品的质量和制备效果。
二、制备流程与方法1.样品处理：首先从实验动物或植物中获取所需的组织样品，将其浸泡在生理盐水或PBS缓冲液中，以保持细胞形态。
2.样品固定：将处理好的样品转移到固定液中，常用的固定液有戊二醛、多聚甲醛等，固定液浓度为4%。
固定过程中，应确保样品充分浸泡，以达到良好的固定效果。
3.切片：将固定好的样品进行切片，常用的切片设备有旋转切片机和冷冻切片机。
切片厚度根据实际需求和观察仪器而定，一般为50-70μm。
4.染色：将切片转移到染色液中，染色液可以是Goat Solution、抗兔/鼠IgG等，浓度为1:50-1:100。
染色过程中，需注意温度和时间控制，以保证染色效果。
5.洗涤与脱水：染色后，用PBS缓冲液轻轻洗涤切片，去除多余的染色剂。
然后进行脱水，脱水液可以采用系列酒精（70%、80%、90%、100%），每个浓度停留3-5分钟。
6.透明化与包埋：将脱水后的切片转移到透明液中，常用的透明液有丙酮、乙酸乙酯等，浓度为1:1。
透明化后，将切片转移到包埋液中，包埋液可以选择丙烯酸、环氧树脂等，浓度为1:1。
7.切片染色：将包埋好的切片进行切片染色，染色液可以是Envision、DAB等，浓度为1:50-1:100。
染色过程中，注意控制温度和时间。
8.观察与分析：将染色后的切片放置在显微镜下观察，采集图像并进行分析。
观察指标包括细胞形态、组织结构、染色深度等。
三、浓度要求1.固定液浓度：4%2.染色液浓度：1:50-1:1003.洗涤液浓度：PBS缓冲液4.脱水液浓度：系列酒精（70%、80%、90%、100%）5.透明液浓度：1:16.包埋液浓度：1:1通过以上详细的tem样品制备流程和浓度要求，可以确保获得高质量的tem样品。
透射电子显微镜系列安全操作及保养规程
透射电子显微镜系列安全操作及保养规程1. 前言透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope, TEM）是一种用于观察物质微观结构和成分的高级仪器。
为了确保人身安全和设备正常运行，我们制定了以下安全操作和保养规程。
2. 安全操作规程2.1 个人安全•在操作透射电子显微镜前，必须穿戴实验室指定的个人防护装备，包括实验服、安全眼镜和手套。
•操作过程中要注意个人卫生，避免将手指直接接触样品或仪器，以免造成交叉污染。
•避免长时间暴露在电子束下，以免对皮肤和眼睛造成伤害。
2.2 仪器安全•严禁未经授权的人员操作透射电子显微镜。
•在开机前，确保所有仪器零部件处于正确位置并稳固，以避免意外事故发生。
•运行结束后，必须切断电源并确保仪器处于安全状态，同时关掉相应设备的压缩空气供应。
2.3 样品操作•操作时要严格按照操作手册或经验规范操作，确保样品的质量和可靠性。
•避免将尖锐物体或易燃物品放置在电子束和样品之间，以防止样品损坏或设备故障。
•操作过程中，避免使用手指直接接触样品，应使用相应工具进行操作。
3. 保养规程3.1 日常清洁•在日常使用中，对透射电子显微镜进行定期清洁是必要的。
使用干燥的软布轻轻擦拭仪器表面，确保仪器表面干净无尘。
•避免使用有腐蚀性的化学品清洁仪器，以免对仪器表面和零部件造成损害。
3.2 仪器维护•定期检查透射电子显微镜的各个零部件是否正常运作，如有异常现象应及时报修。
•每三个月更换一次电子枪的发射丝，并对电子束进行校准，以确保仪器的正常工作。
•遵循操作手册中的维护指南，定期对透射电子显微镜进行维护保养。
3.3 样品保养•在样品操作过程中，应遵循样品制备和处理规程，避免对样品造成损害。
•注意样品的贮存方法，尽量避免样品受潮或受到污染。
•镜片和样品架在长期不使用时要妥善保管，避免损坏或丢失。
4. 总结透射电子显微镜是一台复杂的仪器，为了确保使用安全和仪器的正常运行，我们必须遵守安全操作规程和保养规程。
TEM操作步骤及注意事项
FEI TECNAI 20透射电镜目录电镜操作面板...................................... - 2 - 使用步骤：.......................................... - 4 -一.放置样品 ..................................... - 4 -二.合轴 ............................................. - 4 -三.拍形貌 ......................................... - 5 -四.踩带轴 ......................................... - 6 -五、拍衍射 ...................................... - 6 -六、能谱分析 .................................. - 7 -七、高分辨 ...................................... - 7 -八、拔样品杆及关机 ...................... - 8 -电镜操作面板镜筒注意事项1. 使用电镜时，首先要观察电镜的状态。
2. 有黄色背景的按钮，要谨慎。
3. 观察一系列数值，包括：最佳电流值、Spot size 、样品各坐标是否都归零等。
使用步骤：一.放置样品1.放样品时，夹子不能碰到银环，放置后，用手振动玻璃管，使样品至中间状态，然后用螺丝帽压紧（不可过紧，固定住即可）2.插入样品杆时，要使杆上小柱的位置对准左上角螺丝，插至凹槽完全进入，然后连上数据线。
确认在双束（双倾台不是双束）下，点两下回车。
打开抽真空示意图→Vacuum Overview ，开始抽真空。
3.两次抽真空完毕后，逆时针旋转小柱对准Close ，插入。
抽真空共分成两段时间，第二个倒计时结束后，即红灯一灭，必须在20秒内将样品杆逆时旋入。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
TEM 操作程序 （笔记）1. 检查仪器是否运行正常① 查看仪器控制面板上的指示灯（正常情况为On 灯灭，Off 、Vac 和HT 灯亮）。
②查看样品台的指示灯（正常情况指示灯不亮）。
③检查空调、冷却水机、空气压缩机、不间断电源及其他相关设备仪表的工作状况，确保其正常运行。
④检查实验器材（样品杆、镊子、杜瓦瓶、投影室视窗）是否有损坏。
⑤ 检查仪器使用日志。
二、登陆用户界面（User Interface ）1.在登陆界面输入用户名和密码（直接进入，现在没设）。
2.启动主程序Tecnai User Interface （一般是开启状态）。
3.再次检查仪器是否处于正常状况。
①确认Column Valves Closed 按钮处于关闭状态（黄色）。
② 查看真空和高压值是否正常：真空：在Tecnai User Interface 软件中，在Setup→Vacuum 控制面板中：Gun(1), Column(6), Camera(30-32)的压力指示条都应该是绿色的才为正常。
高压：在TecnaiUser Interface 软件中，在Setup→HighTension 控制面板中：在正常情况下，High Tension 指示条为黄色，高压指示值为200kV （高压平时一直加到200kV ）。
FEG Control 控制面板中，Operate 是黄色的（灯丝开启状态）。
③ 查看样品台位置是否正常。
<注意事项>62001.Vacuum中，Status显示为COL.V ALVES，Gun的真空值必须为1，Column值必须为6，camera值小于40。
2.如果出现红色，数值为99，说明仪器真空破坏，不得进行实验。
3.High Tention必须为黄色，数值为200kV。
4.FEG中Operate必须为黄色。
5.无报警符号出现。
6.若样品位置X，Y，Z，A，B不为0，需要进行归零。
三、装液氮1.将投影室视窗用挡板挡住。
2.戴上手套，将液氮小心地倒入杜瓦瓶中（不要装满），慢慢将铜辫伸入杜瓦瓶中，并将杜瓦瓶安置在支架上。
3.将瓶中的液氮装满，并盖上盖子。
4.往能谱罐中加满液氮（一般不用此操作）。
<注意事项>1.操作前应将投影室视窗用挡板挡住，以确保液氮不会溅落到上面。
如果液氮溅落到视窗上，可能引起玻璃破裂，将会对实验者造成巨大的危害。
2.操作中，杜瓦瓶中的液氮遇热沸腾，所以刚开始液氮不要装得太满，以免液氮溅出伤人。
3.应确保杜瓦瓶中有足够的液氮，因此每隔3-4个小时应该加满液氮一次，一般为8：00，11：30，14：30，17：30，21：00。
4.装好液氮后，等上30分钟左右，保证冷阱充分作用样品室，这样进样后的真空度会很快降低。
四、装样品将待测样品装入样品杆，样品正面需朝下。
样品杆有两种类型：单倾：只能在A方向倾转；双倾：在A，B两个方向都能倾转（我们的双倾是Be双倾，做EDAX时可以直接去Be）如不需倾转样品，请选择单倾样品杆。
单倾样品杆1.选择单倾样品杆，取下前端套筒。
2.检查样品杆尖端以及夹具是清洁干燥的。
3.保持一只手顶在样品杆的末端，确保它不会移出套管。
4.将（套管支持架上其中一个孔中的）工具插入到夹子前面的孔中，然后提起夹子到最大可能的角度。
5.将样品正面朝下，放在样品杆尖端圆形的凹槽处。
6.用工具把夹子小心地降到样品之上，并确保样品保持在正确位置。
样品安全夹子必须小心地放低，否则，样品和夹子会被损伤。
7.将样品杆旋转180o，轻敲套管，确保样品不会掉落。
双倾样品杆1.选择双倾样品杆，取下前端套筒。
2.检查样品杆O圈是清洁干燥的。
3.保持一只手顶在样品杆的末端，确保它不会移出套管。
4.用六角棒将样品固定螺母旋下，并取出垫圈（垫圈可以不用）。
5.将样品正面朝下，放在样品杆O圈内，并确保样品保持在正确位置。
6.小心的将垫圈放在样品上，然后用六角棒将固定螺母旋上。
7.将样品杆旋转180o，轻敲套管，确保样品不会掉落。
<注意事项>1.样品杆属于仪器中极为精细的部件，需要小心操作，动作要轻，不要野蛮操作；绝对不能用手触摸样品杆O圈至样品杆顶端的任何部位。
2.绝对不要在单倾样品杆上安装磁性样品。
通常夹子力量不够大，不足以防止样品在受到物镜磁场作用下飞出并粘在物镜极靴上。
3.样品杆的夹子应小心提起和放下，否则容易损坏样品杆。
4.装好样品一定要确定样品在凹槽处，并且不会掉落。
5.装卸样品所用工具在使用后需及时放回原位。
6.制备好的样品要等充分晾干后再装入电镜。
7.样品杆如果时间长了，需要清洁：用酒精棉轻轻擦拭样品杆O圈至样品杆顶端，对杆中部的O圈可以取下进行清洁，安装时涂抹少许真空酯。
五、进样1.再次确认样品的x，y，z，A，B五个坐标近似为零。
如果不为零，点击Holder进行归零。
2.确认样品台的红灯熄灭（如果红灯是亮的，应点击Holder，这时红灯就会熄灭）。
3.手拿样品杆，将限位突针对准Close标线（约5点钟方向），沿轴线平行将样品杆小心插入，向内滑动样品杆直到遇到阻挡。
样品预抽室开始预抽，样品台的红灯亮，预抽开始。
4.此时，样品杆不能旋转。
若样品杆能够旋转，说明样品杆没有进到位，应慢慢把样品杆向左、右稍微转动直到完全进到位。
5.此时在User Interface 界面中，Turbo On按钮变为橙色，Column Valves Closed 不可点击，Vacuum Overview中显示出预抽时间。
6.如果是单倾杆，选择Single tilt样品杆类型，点击回车符确认；若是双倾杆，则在TecnaiUser Interface软件中需要选择Double tilt样品杆类型并确认，然后连接B方向倾转控制电缆并确认。
7.大约3分钟以后，预抽时间结束后，样品台红灯熄灭，就可以进样（注意预抽结束后20s内必须插入样品杆）。
8.手握样品杆末端，绕轴逆时针旋转样品杆120o，将样品杆的销钉对准样品台的圆孔。
9.然后必须握紧样品杆末端（此时真空对样品杆有较强的吸力作用），使样品杆在真空吸力作用下慢慢滑入电镜，要送到底（要轻拿轻送，不要用力扭转，避免样品杆撞击样品台，装好后轻敲样品杆后座，确保到位）。
进样同时注意观察真空值（本机一般不会降到10以下）<注意事项>1.如果进样过程红灯一直亮着，并且不出现单倾和双倾杆选项，则需要在Search的Stage右拉菜单的Setting中点击Enabled，让样品室重置，直到红灯熄灭和Enabled黄灯灭。
2.如果对样品杆或全自动样品台的任何手动操作需要相当的力，则表明某些地方出了问题。
永远不需要使过大的力来操作，否则将导致样品杆或全自动样品台的损坏。
3.一旦样品杆完全进入，小心地用一个手指轻敲几下样品杆的帽帮助样品杆嵌入位置从而提高其稳定性。
4.样品台的红灯亮起的时候不能够进样，必须等红灯熄灭后才能操作。
5.如果在进样的过程中，发现column的真空值突然变为99，说明真空被破坏。
6.注意进样口下面的小拨阀，如果是上拨，则只能装单倾杆，并且不会出现单双倾的选择，如果是下拨，则单双倾都可以用。
（一般拨下来）六、启动场发射枪电流（一直是开启状态）开始操作之前，在TecnaiUser Interface软件→Setup中，确定FEG Control的Operate钮为黄色（灯丝一直出于启动状态）。
Extraction=3950V，FEG Emission=78 A（随使用上升）七、启动软件1.在电脑快速启动栏中，有三个图标分别为Tecnai User Interface、DigitalMicrograph、TemImaging & Analysis。
2.Tecnai User Interface为主程序，通常已经启动。
3.DigitalMicrograph为拍摄软件（配合Gatan的CCD相机）进行形貌观测时必须打开此软件。
4.Tem Imaging & Analysis为图片编辑软件，不做EDX时可以不用。
八、图片的保存设置1.点击Digital Micrograph 窗口中的图标12.在Save Numbered（图标2）中点击Browse（图标3）选择目录3.将Next Index（图标4）中的序号改为1，点击OK。
4.分别点击Image Info（图标5）、Global Info（图标7）修改文件名称。
九、开启阀门1.等待系统真空Column真空值小于20，可开启阀门。
2.开启阀门：点击Col. Valves Closed 按钮，使其变灰。
此时Status显示Ready。
3.若在软件右下方，选择Vacuum Overview视窗，可以发现，该操作可以使V7和V4阀门同时开启, 它们分别是隔离镜筒与电子枪及镜筒与照相室。
<注意事项>1.Column真空没有到规定的数值（20以下）时，打开Col. Valves将使电子枪的真空急剧恶化，从而损坏灯丝寿命。
2.如果不幸破坏了体系的真空，等到离子泵停止后，重新启动真空。
3.阀门打开之后，就可以在投影室视窗中看到光斑。
4.如果没有看到光斑，可以按顺序进行如下操作找到光斑：①将放大倍数（Magnification）缩小至5200x。
②将光路（Intensity）发散。
③移动样品。
十、设置共心高度1.移动轨迹球找到样品观察区域。
2.在10kx以上的放大倍数下（~1850x）。
3.按右操作面板上的Eucentric Focus按钮（保证样品中心轴位置不变）。
4.调节Intensity(逆时针聚光，顺时针散光)，使光斑汇聚到屏幕中心一点，调Z-axis使影象聚焦到衬度最小（即中心光斑点没有光晕，一般情况此操作使Z轴数值为负值）。
<注意事项>1.点Eucentric Focus和调节Z-axis一般是相继进行，如果中间调节了Focus，则需要重新做两者。
2.一般在调光的最开始进行共心高度调节，只需做一次，后面不用做，即使高倍下时Z仍有晕，可以通过调节focus调好。
十一、调节聚光镜像散和光阑1.用Intensity调节光强度。
2.若发现光斑不是同心收缩（即光斑不圆），则需要调节聚光镜像散。
3.点<Tune>---<Stigmator>----<Condenser>按钮，使之变为黄色。
4.用多功能键（MF）将光斑调圆。
5.调好后点击None确定。
6.若发现光斑不是沿中心发散，需要调节聚光镜光阑。
7.分别调节镜筒的Cond. 2上的两个螺圈，使光斑沿中心扩散。
<注意事项>1.聚光镜像散和光阑要配合调节，并且是在10kx倍（SA级别）下调节的。
2.在Stigmator下，存有调好的不同Spot Size(1,2,3)的聚光镜位置，一般不用重新调，选择即可。