色氨酸残基荧光猝灭法

1，3，5-三羟基苯与BSA相互作用的荧光光谱研究冯建华;吴刚;汪丽;徐婷婷【摘要】在模拟生理条件下，运用荧光光谱法研究了1，3，5‐三羟基苯与牛血清蛋白（BSA ）分子间的相互作用，确定了二者之间的结合常数、结合位点数及其猝灭常数。

二者之间相互作用导致的荧光猝灭是一种动态猝灭机理，与BSA的结合位点数近似等于0．6。

利用同步荧光光谱研究了1，3，5‐三羟基苯与BSA作用产生的蛋白质构象，结果表明，二者之间的相互作用导致了在白蛋白内部产生了局部结构的伸展，同时在色氨酸和酪氨酸残基的局部两极方向上产生了结构的变化。

%The interactions between bovine serum albumin (BSA) and 1 ,3 ,5‐Trihydroxybenzene under simulated physiological conditions were experimented by fluorescence spectroscopy . The binding parameters (binding constants and number of binding sites) and quenching constants were determined . The quenching mechanism was assigned to a dynamic quenching interaction .Number of binding is approximately about 0 .6 for BSA .The effect of 1 ,3 ,5‐Trihydroxybenzene on the protein conformation was investigated by using synchronous fluorescence spectroscopy .The results revealed partial unfolding in the albumins upon interaction ,as well as changes in the local polarity around the tryptophan (Trp) and tyrosine(Tyr) residues .【期刊名称】《滁州学院学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P52-56)【关键词】1 ,3 ,5-三羟基苯;牛血清蛋白(BSA);相互作用;荧光光谱;猝灭【作者】冯建华;吴刚;汪丽;徐婷婷【作者单位】滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000;滁州学院材料与化学工程学院安徽滁州239000【正文语种】中文【中图分类】O657.3蛋白质就像由分子组成的机器，它是细胞的基本组成模块和生命控制中心，蛋白质所具有的功能是非常多样化的，如物质酶的活性和输送就是在相关蛋白质的控制作用下基于对目标分子的高度特定的一种识别。

二氢杨梅素锌与牛血清白蛋白的相互作用严赞开;陈冬丹【摘要】运用荧光光谱法研究了二氢杨梅素锌(DMY-Zn)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明, 激发波长为288 nm 时, BSA的发射峰位于341 nm, DMY-Zn对BSA有较强的荧光猝灭作用.由Stern-Volmer 方程计算出DMY-Zn与BSA 体系荧光动态猝灭常数(KSV)可知, DMY-Zn对BSA内源荧光的猝灭机制属于静态猝灭,由Lineweaver-Burk方程计算出静态猝灭常数为3.180×104 L·mol-1; 且在BSA分子上荧光敏感部位有1个结合位点, 结合常数为9.60×105 L·mol-1.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2010(027)003【总页数】3页(P60-62)【关键词】二氢杨梅素锌;牛血清白蛋白;荧光光谱【作者】严赞开;陈冬丹【作者单位】韩山师范学院化学系,广东,潮州,521041;韩山师范学院化学系,广东,潮州,521041【正文语种】中文【中图分类】O657.3有机小分子与蛋白质等生物大分子结合反应热力学特征的研究,是生命科学研究的重要组成部分[1]。

血清白蛋白是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白，它能与许多内源性和外源性物质广泛结合。

二氢杨梅素(Dihydromyricetin, DMY)是藤茶的主要活性成分，属双氢黄酮醇类化合物，在抗菌、降血脂、降血糖、保肝、抗氧化、抗癌、增强免疫等方面具有显著的生理活性[2],其分子结构有较高的超离域度、完整的大π键共轭结构、强配位氧原子和合适的空间构型，可作为金属离子良好的螯合配体。

锌离子是体内许多重要反应酶活性中心的组成部分，许多含锌酶参与碳水化合物、脂肪、蛋白质和核酸的代谢[3]。

黄酮类活性物质与金属形成的配合物，往往具有优于黄酮类化合物的生物活性，二氢杨梅素与金属的络合物的合成及抗氧活性研究已有少量报道[4]，而与生物分子相互作用的研究鲜见报道。

::.,.浙江工业大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。

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作者签名:王婧日期珈侈年月矽日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。

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本学位论文属于、保密口,在年解密后适用本授权书。

、不保密口。

请在以上相应方框内打“√”作者签名:工靖日期:≯了年月为日日期:必,;年‘月, 日导师签名:毛麦屯岳浙江工业大学硕士论文多酚类化合物与牛血清蛋白相互作用的研究摘要本论文采用光谱技术包括荧光光谱法、同步荧光法、圆二色谱法和紫外.可见光谱法和分子模拟技术相结合的方法,研究了多酚类化合物与牛血清白蛋白的相互作用。

实验结果表明,矢车菊素..葡萄糖苷..及异甘草素对的猝灭类型均为静态猝灭。

.及与的结合位点数约为,形成: 结合物。

时,与..和的结合常数分别为.×和.×。

由与.和结合过程中热力学参数测定结果表明,与、的结合过程是一个自发过程。

而且,焓变△和熵变均为负值,表明了与.及结合过程中的主要作用力是氢键和范德华力。

从圆二色谱及同步荧光结果可知,..与结合后,对的二级结构影响较小。

而与结合后,二级结构及色氨酸和酪氨酸附近的微环境可能发生了改变。

分子模拟结果表明,一结合在的’位上,且.与上的,,,残基形成了氢键。

而结合在的位上,与上的,,,残基形成了氢键。

色氨酸残基荧光猝灭法色氨酸残基荧光猝灭法（Trp fluorescence quenching）是一种用于研究生物大分子的结构和功能的方法，尤其适用于蛋白质的研究。

在这种方法中，以色氨酸残基为荧光探针，探究蛋白质的结构和环境对其荧光强度的影响，进而探讨蛋白质的性质和功能。

在Trp fluorescence quenching方法中，荧光信号的猝灭是通过某些分子与色氨酸残基之间的电子转移过程实现的。

这些分子可能是溶液中存在的分子，如氧分子、甲醇分子等，也可能是蛋白质分子中的某些残基，如半胱氨酸、酪氨酸等。

这些分子与色氨酸残基之间的相互作用产生的荧光猝灭效应可以用来测量蛋白质的结构和环境等参数。

Trp fluorescence quenching的应用范围十分广泛，既可以应用于生物大分子的研究，也可以用于药物分子的筛选和研究。

在生物大分子的研究中，Trp fluorescence quenching可以用来研究蛋白质的构象和某些特定位点的环境。

同时，它还可以用来研究蛋白质与其他分子之间的相互作用，如蛋白质和DNA、 RNA之间的相互作用等。

在药物分子研究方面，Trp fluorescence quenching可以用来筛选和研究潜在的药物分子。

这是因为药物分子可能会与蛋白质中的某些残基发生特定的相互作用，从而导致荧光强度的变化。

利用这种现象，可以用Trp fluorescence quenching来筛选出对某种蛋白质具有特异性的药物分子。

总之，Trp fluorescence quenching是一种非常重要的生物物理学方法。

它不仅可以用来探究生物大分子的结构和性质，也可以用来筛选和研究潜在的药物分子。

在未来的研究中，Trp fluorescence quenching还有广阔的应用前景，有望为生物医学研究和药物开发提供更多有用的信息。

L-瓜氨酸与牛血清白蛋白相互作用的研究屈冉;张骁;张鹏【摘要】采用荧光猝灭法以及紫外吸收差谱法研究了L-瓜氨酸与牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用机制,初步了解到L-瓜氨酸对牛血清白蛋白有猝灭作用,其猝灭机制为静态猝灭.利用Stern-Volmer方程求解出的各种参数表明pH值对两者的结合能力影响较大.同步荧光分析发现L-瓜氨酸的存在没有改变牛血清白蛋白的分子构象,依据F(o)rster非辐射能量转移理论,确定了给体-受体间的结合距离和能量转移效率.%Fluorescence quenching and ultraviolet absorption subtraction have been employed to study the mechanism of interaction between L-citrulline and bovine serum albumin (BSA) at different pH. The preliminary results show that L-citrulline has the function of quenching BSA, and the quenching mechanism is static. Relevant parameters were obtained using the Stern-Volmer equation. The results showed that pH has a large impact on the binding ability of L-citrulline and BSA. Synchronous fluorescence analysis showed that the conformation of BSA was not changed in the presence of L-citrulline. The combination distance and the efficiency of energy transfer in the donor-acceptor pair were obtained using the non-radiative energy transfer theory of F(o)rster.【期刊名称】《北京化工大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(039)001【总页数】6页(P77-82)【关键词】L-瓜氨酸;牛血清白蛋白;相互作用;紫外光谱;荧光猝灭【作者】屈冉;张骁;张鹏【作者单位】北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029【正文语种】中文【中图分类】O657.3L-瓜氨酸是一种非蛋白质氨基酸，具有很多重要的生理功能。

L-色氨酸与四氯苯醌(TCBQ)荷移荧光光谱法的研究摘要本文使用荧光光谱法研究了L-色氨酸与四氯苯醌（TCBQ）的荷移反应。

通过实验可得知，L-色氨酸与TCBQ在水中，以pH=10.9溶液，活性剂为代十六烷基吡啶溶液，在20℃的室温下加热10min以后，可生成稳定的荷移络合物。

此荷移络合物的最大激发波长λmax=284，最大发射波长λF =0.32857+25.48571c (µg/mL）(R=0.99902),浓度在0~2.0μg/mL的范围内符合比尔定max=364，△律，回收率在98.59～103.4%之内，相对标准偏差在0.96%以内, 该方法最低检测限为0.037µg/mL。

关键词荧光猝灭法 L-色氨酸四氯苯醌（TCBQ）荷移反应1 引言L-色氨酸(L-trytophan)是人类和动物必需的八种氨基酸之一，化学名称为L-氨基吲哚基丙酸，别名L-胰化蛋白氨基酸、L-β-（3-吲哚基）-α-丙氨酸，它是含有吲哚基的芳香族氨基酸，呈白色或略带黄色的叶片状结晶或粉末，无臭有甜味，溶于热吡啶，微溶于乙醇，不溶于氯仿、乙醚，在稀酸或稀碱中溶解。

L-色氨酸有促进机体生长发育，修补组织细胞的作用；有为肌体提供营养的作用；对肌体内各种酶、激素的分泌起调节的作用；提高肌体的免疫抵抗能力的作用；运输其它营养物质和解毒的作用。

L-色氨酸系氨基酸类药物，对抑郁症、失眠症、高血压、及止痛等有良效，在欧美一些国家已广泛应用于临床[1]。

目前定量测定L-色氨酸的方法主要有高效液相色谱法[2-4]、电位滴定法[5]、原子吸收光谱法[6]、荧光光谱法[7,8]、分光光度法[9-11]、毛细管电泳分析法[12]、阻抑速差催化光度法[13]、线扫伏安法[14]、化学发光法[15-17]等。

利用与四氯苯醌（TCBQ）发生荷移反应测定L-色氨酸含量的方法还未见报道。

本文选用TCBQ 为电子接受体，研究了L-色氨酸与TCBQ形成荷移络合物的条件，探讨了反应机理，并对药物样品进行了含量测定，结果令人满意。

荧光光谱法探索多巴酚丁胺与BSA的相互作用倪永年;朱瑞瑞【摘要】用荧光光谱法研究在人体生理pH条件下药物多巴酚丁胺与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明,多巴酚丁胺对BSA内源性荧光有较强的猝灭作用,且猝灭类型为静态猝灭.根据猝灭结果求得了298、301、304 K3个不同温度下多巴酚丁胺与牛血清白蛋白结合作用的结合位点数、结合常数以及反应的热力学参数,由此确定出2者之间的主要作用力为疏水作用力.而应用竞争实验确定了多巴酚丁胺在BSA上的结合位点为II位;用同步荧光光谱法探讨多巴酚丁胺对BSA构象的影响.【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷),期】2010(034)004【总页数】5页(P353-357)【关键词】多巴酚丁胺;牛血清白蛋白;荧光光谱法;相互作用【作者】倪永年;朱瑞瑞【作者单位】南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,化学系,江西,南昌,330031;南昌大学,化学系,江西,南昌,330031【正文语种】中文【中图分类】O657.39多巴酚丁胺(Dobutrex)是多巴胺类新合成的类同系物(结构见图1),能选择性地兴奋β1受体,对β2受体和a受体作用较弱,对多巴胺受体则无作用。

临床用于心肌梗死后或心脏外科手术时心排出量低的休克患者和心力衰竭患者。

血清白蛋白是人体血浆中含量最为丰富的蛋白质,其在药物的药代动力学特别是药物的分布中起重要作用[1]。

大部分的药物运转是通过与血清白蛋白的结合,然后到达靶标组织。

药物与血清白蛋白的结合强度是决定药物利用率和药物从循环系统向靶标组织扩散的一个重要因素,这就导致了几乎所有的药物药代动力学特性EADM/T(吸收、分布、代谢、排泄和毒性)都要受到血清白蛋白的显著影响与控制[2]。

它是处于生命科学、药学与化学之间的一个边缘性研究内容。

近年引起广大研究者的兴趣[3-5]。

而多巴酚丁胺与血清白蛋白之间的作用尚未见报道。