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专题13.2 现代生物科技专题综合提升卷1.(2014·重庆高考)下面为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是()A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异【答案】D【解析】构建重组质粒需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶；含重组Ti质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒的T-DNA整合到受体细胞的染色体上，而不是重组Ti质粒整合到受体细胞的染色体上；导入受体细胞的目的基因表达后，转基因植株方能表现出相应性状，若目的基因在受体细胞中不表达，转基因植株不能表现出相应性状；⑤表现出抗虫性状则表明该植株细胞发生了基因重组，基因重组是可遗传变异。
2.(2015·西城区调研)下列技术或方法与原理不相符的是()A．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖B．植物组织培养和制备单克隆抗体——细胞的全能性C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性D．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性【答案】B【解析】制备单克隆抗体是将骨髓瘤细胞和免疫过的B淋巴细胞融合，形成杂交瘤细胞，利用的是细胞膜的流动性和细胞增殖的原理。
3.(2015·东城区诊断)下列有关细胞工程的说法正确的是()A．在愈伤组织形成的过程中，除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要有植物激素进行调节B．植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生质体，然后再用灭活的病毒促进融合C．利用动物体细胞核移植的方法得到克隆动物是培育新物种的一种方式D．动物细胞应在含5%CO2的恒温箱中培养，CO2的作用是为细胞提供碳源【答案】A【解析】在愈伤组织形成的过程中，需添加生长素和细胞分裂素等植物激素进行调节；灭活的病毒是促进动物细胞融合特有的方法；核移植属于克隆，为无性生殖，不会产生新物种；动物细胞应在含5%CO2的恒温箱中培养，CO2的作用是维持培养液中的pH。
2013高考生物二轮复习精品资料专题14 现代生物科技（教学案，学生版）【2013考纲解读】基因工程(1)基因工程的诞生 I(2)基因工程的原理及技术Ⅱ(3)基因工程的应用Ⅱ(4)蛋白质工程 I克隆技术(1)植物的组织培养Ⅱ(2)动物的细胞培养与体细胞克隆 I(3)细胞融合与单克隆抗体Ⅱ胚胎工程(1)动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 I(2)胚胎干细胞的移植 I(3)胚胎工程的应用Ⅱ生物技术的安全性和伦理问题(1)转基因生物的安全性 I(2)生物武器对人类的威胁 I(3)生物技术中的伦理问题 I生态工程(山东考纲不要求)(1)简述生态工程的原理Ⅱ(2)生态工程的实例 IDNA的粗提取与鉴定【知识网络构建】【重点知识整合】一、基因工程1．基因工程的基本工具2．基因工程的操作步骤(1) 目的基因的获取：①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增。
③用化学方法直接人工合成。
(2) 基因表达载体的构建：①基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。
②基因表达载体的构建方法：(3)将目的基因导入受体细胞：(4)目的基因的检测与鉴定： ①目的基因插入检测：DNA 分子杂交。
②目的基因转录检测：(核酸)分子杂交。
③目的基因翻译检测：抗原—抗体杂交。
④个体生物学水平检测：根据目的基因表达出的性状判断。
二 细胞工程1．动物细胞培养与植物组织培养的比较2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较3．动物细胞核移植和单克隆抗体 (1)动物细胞核移植：供体体细胞→细胞培养→体细胞(核) ↓注入卵母细胞→减Ⅱ中期去核→无核卵母细胞→重组细胞→ 重组胚胎→代孕母牛→生出与供体遗传性状相同的个体。
(2)单克隆抗体：①单克隆抗体的制备过程：⎭⎪⎬⎪⎫培养骨髓瘤细胞免疫小鼠→B淋巴细胞――→融合多种杂交细胞→在具有筛选作用的培养基上培养→克隆筛选出的杂交细胞→将不同种杂交细胞分开，并克隆专一抗体，检验阳性细胞→注射到小鼠体内或体外培养→获得单克隆抗体。
整合训练(十四) 生态系统和人与环境全员必做题1.[2022·广东省梅州市丰顺县和五华县高三一模]助力“美丽乡村”建设，科研人员对某地富营养化水体实施生态恢复，先后向水体引入以藻类为食的某些贝类，引种芦苇、香蒲等挺水植物，以及放养植食性鱼类等。
经过一段时间，水体基本实现了“水清”“景美”“鱼肥”的治理目标。
下列相关叙述错误的是( )A．治理前的水体不能实现自我净化，说明生态系统的自我调节能力有一定限度B．引进的芦苇、香蒲在与藻类竞争光照过程中具有一定的优势，从而抑制藻类生长繁殖C．“美丽乡村”建设过程中涉及生物多样性的直接价值和间接价值D．放养的植食性鱼类在食物链中处于第二营养级，属于次级消费者2．[2022·山东省聊城市高三一模] 中国传统文化中有很多农牧业生产的现象描述和规律总结，下列有关说法错误的是( )A．“地虽瘠薄，常加粪沃，皆可化为良田”描述的是通过施肥改良农田的做法，表明生态系统具有物质循环功能B．“无田甫田，维莠骄骄”描述的是农田中狗尾草的生长现象，狗尾草等杂草与农作物之间是种间竞争关系C．“毋覆巢，毋杀胎夭飞鸟，毋麝卵”描述了对动物资源利用时，应避免捕杀幼年个体，这样有利于维持种群正常的性别比例，提高出生率D．“去其螟螣，及其蟊贼，无害我田稚”描述了农业生产应避免虫害，体现了合理调整能量流动关系，使能量持续流向对人最有益的部分3．[2022·广东省汕尾市高三期末调研]生态农庄是集种植、养殖、旅游观光于一体的新兴农业模式，如图是某农庄生态系统结构图。
下列有关叙述错误的是( )A.该农庄生态系统的能量来源包括太阳能和饲料中的有机物中的化学能B．碳元素在生物群落与无机环境之间的循环主要是以CO2的形式进行的C．该生态农庄可以提高能量的利用率，使能量高效流向对人类最有益的部分D．据图分析，蚯蚓从粪便中获得的能量属于鸡和牛的同化量4．[2022·山东省济宁市高三模拟](不定项选择)净初级生产量(NP)指生产者光合作用制造的有机物量(GP)和生产者呼吸消耗有机物量(R)的差值。
2020届人教版高考生物一轮复习专题10《现代生物科技专题 (选考)》测试卷本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分，共100分，考试时间150分钟。
第Ⅰ卷一、单选题(共16小题,每小题3.0分,共48分)1.已知限制性核酸内切酶XmaⅠ和SmaⅠ的识别序列分别为C ↓ CCGGG和CCC↓ GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是 ()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB． DNA中出现这两种酶识别序列的概率不同C．XmaⅠ切割DNA形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等2.下列有关胚胎工程及其应用的叙述中，错误的是()A．体外受精和胚胎发育的研究为胚胎工程提供了理论基础B．胚胎移植技术可在畜牧业生产中加速育种进程C．桑椹胚、囊胚是进行胚胎分割的最佳时期D．促进动物超数排卵的激素主要是垂体产生的促性腺激素3.下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是()A．动物细胞培养过程中，可用胃蛋白酶处理使细胞分散开B．通过动物细胞培养获得大量细胞，可证明动物细胞具有全能性C．动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础D．动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵4.干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血中只能提取0.5 μg，所以价格昂贵。
美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法生产干扰素。
如图所示：从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是()A．个体间的杂交B．基因工程C．细胞融合D．器官移植5.分析下面图解，判断以下哪一项不是精子、卵细胞发生的区别()A．初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间B． MⅠ和MⅡ的时间连续性C．成熟生殖细胞是否经过变形D．成熟生殖细胞中染色体的数目6.质粒是基因工程中最常用的运载体，下列与质粒有关的叙述正确的是() A．目的基因与质粒在DNA连接酶作用下结合的过程属于DNA分子杂交B．质粒上至少要有一个抗生素抗性基因，以有利于检测重组质粒是否导入C．没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞D．质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解7.下图表示高等动物的个体发育过程，下列说法正确的是()A．图中①过程表示胚胎发育，②过程表示胚后发育B．受精卵卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大C．兔子、雄鹰和眼镜蛇在个体发育过程中会出现羊膜D．原肠胚是进行胚胎移植的最好时期8.下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是()①利用花药离体培养得到单倍体植株②利用秋水仙素处理单倍体试管苗，获得正常纯合植株③利用基因工程培育抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株⑤马铃薯的脱毒A．①②③B．③④⑤C．①②④⑤D．①③④⑤9.某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是()A．过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变B．丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体C．过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养D．过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇10.用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。
现代生物科技类专项突破1．(2019·山东济南高三模拟)蓝藻兼具微生物和植物的优点，是一种独特的基因工程受体系统。
很多蓝藻含有质粒，但其质粒不能直接作为运载体，需要构建成穿梭质粒表达载体，才能使目的基因在蓝藻中有效的复制和表达。
回答下列问题：(1)据图1推测，与普通基因表达载体相比，穿梭质粒表达载体既能在________中复制，也能在________中复制。
为了筛选转入了穿梭质粒表达载体的蓝藻，应在选择性培养基中添加________。
(2)若大肠杆菌作为受体细胞，应选用________处理使其成为感受态细胞。
采用基因枪法将目的基因导入蓝藻前，可使用________(填“纤维素酶和果胶酶”“溶菌酶”或“胶原蛋白酶”)去除蓝藻的细胞壁。
(3)已知DNA复制时，子链的延伸方向是5′→3′。
使用PCR技术检测转基因蓝藻中是否存在人胸腺素基因可选择图2中1、2、3、4四种单链DNA片段中的________作为引物，此过程还需要______________酶。
答案(1)大肠杆菌蓝藻卡那霉素(2)Ca2＋溶菌酶(3)2和3 热稳定的DNA聚合(或Taq)解析(1)据图1推测，与普通基因表达载体相比，穿梭质粒表达载体既有大肠杆菌质粒复制原点，也有蓝藻质粒复制起点，因此既能在大肠杆菌中复制，也能在蓝藻中复制。
为了筛选转入了穿梭质粒表达载体的蓝藻，应在选择性培养基中添加卡那霉素。
(2)若大肠杆菌作为受体细胞，应选用CaCl2处理使其成为感受态细胞。
采用基因枪法将目的基因导入蓝藻前，要去掉其细胞壁，纤维素酶和果胶酶用于去除植物细胞壁，胶原蛋白酶用于动物细胞培养中使细胞分散开，因此去除蓝藻的细胞壁可用溶菌酶。
(3)据图2分析，由于DNA复制时，子链的延伸方向是5′→3′，因此设计引物时应选择2、3，PCR还需要热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)。
2．(2019·安徽省A10联盟高三试题)真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
2020年高考生物二轮专题复习15：现代生物技术专题（附解析）考纲指导1．近五年的全国卷高考试题中对于基因工程的考查频度较高，侧重考查基因工程的工具，操作程序与应用等。
植物细胞工程的应用以及动物细胞工程技术中的核移植技术、单克隆抗体的制备也有所考查。
胚胎移植的概念及移植胚胎的来源也会涉及。
2．本专题以非选择题的形式考查。
题目常借助简洁的文字材料或流程图、结构图等考查有关基因工程、动物细胞工程的原理、技术手段等，尤为注重对教材中一些关键词的填充及对结论性语句的准确表述等。
3．2020年备考时应注意：(1)限制酶、DNA连接酶和载体的作用及PCR技术。
(2)动物的细胞培养与体细胞克隆。
(3)单克隆抗体制备过程。
(4)图解分析法理解胚胎发育的过程和胚胎移植的程序。
思维导图知识梳理考点1基因工程1．几种获取目的基因方法的比较2．比较DNA复制和PCR技术3．与DNA有关的酶的归纳与比较4．将目的基因导入受体细胞的方法比较5．DNA的粗提取与鉴定的方法步骤技巧方法(1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。
(2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。
(3)在切割目的基因和运载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。
(4)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。
(5)不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
(6)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便于进行检测。
(7)基因工程中的运载体与细胞膜上物质运输的载体不同。
基因工程中的运载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。
(8)基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。
考点2细胞工程6．植物组织培养的关键点(1)植物组织培养的关键①条件：离体、一定的营养物质、激素(生长素、细胞分裂素)等。
专题十四发酵工程1.进行微生物的分离和培养。
2.测定某种微生物的数量。
3.研究培养基对微生物的选择作用。
4.探讨微生物的利用。
5.掌握运用发酵技术制作食品的基本方法。
6.活动：(1)用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
(2)分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。
(3)利用酵母菌、醋酸菌分别制作果酒和果醋。
(4)利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜。
►[疏漏诊断]1．微生物利用的相关判断(1)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，接种后的培养皿需放在光照培养箱中培养(×)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(√)(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(×)(4)在检测土壤中细菌总数的实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(×)(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(×)2．传统发酵技术的相关判断(6)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(×)(7)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(√)(8)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(√)►[长句冲关]1．概述性知识(1)无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
(2)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
2．程序性诱问(3)如果用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中分解尿素的细菌数，统计的菌落数往往比活菌实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上看到的只是一个菌落。
(4)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，分析其原因是加入陈泡菜液的作用是增加乳酸菌数量，加速乳酸的产生。
微专题1 微生物的培养、分离与计数[学生用书P68]1．微生物培养中的无菌操作技术2．培养基制备与微生物纯化技术3．筛选目的微生物的原理与实例(1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
专题13.1 现代生物科技专题疑难突破1．(2019·全国Ⅰ，38)基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。
回答下列问题：(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。
基因文库包括____________________和______________。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是____________。
在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________________。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的________。
(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是__________________________________________________________________________________________。
【答案】(1)基因组文库cDNA文库(2)解旋酶加热至90～95 ℃氢键(3)Taq酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活【解析】(1)基因文库包括基因组文库和cDNA文库。
(2)生物体细胞内DNA复制开始时是利用解旋酶进行解旋的，而在体外利用PCR技术扩增目的基因时，则是通过加热至90～95 ℃进行解旋的，二者都破坏了碱基对之间的氢键。
(3)在PCR过程中，要加热至90～95 ℃，所以使用热稳定性高的Taq酶，而不使用在高温下会失活的大肠杆菌DNA聚合酶。
2.(2019·全国Ⅱ，38)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。
回答下列问题：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。
与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有__________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2点即可)。
专题限时集训(十四)[专题十四高考开放性生物实验应试分析](时间：40分钟)1．为探究主动运输的特点，科研人员利用图6－14－1中图1装臵进行实验(HgCl2能抑制ATP水解)，实验得到如图2所示的结果。
据实验判断下列说法错误的是( )图1图2图6－14－1A．本实验是探究HgCl2和细胞成熟程度对细胞主动运输(吸收磷酸盐)的影响B．温度、pH、溶解氧、胡萝卜片的量是需要控制的无关变量C．科研人员在实验前后需测定溶液中磷酸盐的浓度D．比较乙组和丙组结果，可知细胞主动运输(吸收磷酸盐)需要消耗能量2．切除老鼠的甲状腺后，其物质代谢能力大大下降；若切除甲状腺后，连续给老鼠注射一定量溶于某种溶剂中的甲状腺激素，其物质代谢能力与切除前相比没有下降。
由此可以推测，甲状腺激素能增强物质代谢能力。
为了证明这一推论，有必要再进行其他对照实验，用以观察比较。
下列最适宜作为对照实验组的是( )A．既不切除体内的甲状腺，又不注射甲状腺激素B．增加甲状腺激素的注射量后进行切除手术，一段时间后再移植甲状腺C．切除老鼠体内的甲状腺后，只注射用于该实验的溶剂D．切除老鼠体内的甲状腺后，注射溶解于另一种溶剂的甲状腺激素3．下列对有关实验的变量的叙述，正确的是( )A．在探究温度对酶活性影响的实验中，温度和pH是自变量B．在模拟探究细胞大小与物质运输关系的实验中，正方体琼脂块的体积是无关变量C．在探究植物生长调节剂对扦插枝条生根作用的实验中，插条生根数是因变量D．在探究酵母菌呼吸方式的实验中，酒精是无关变量4．不同种植物种植在一起时，有些会分泌化学亲和物质，使生长相互促进；有些会分泌毒素或防御素对邻近植物产生毒害。
为了研究洋葱和甜菜之间能否混种，下列相关设计思路不正确的是( )A．应用洋葱、甜菜单独种植和混合种植进行对照B．各组植物生长的温度、光照、土壤条件应相同C．通过重复实验可减少实验结果的偶然性D．用洋葱与甜菜的株高差作为实验结果的观察指标5．(双选)为了比较不同清洁剂的抗菌效果，某学生用2种清洁剂在2种不同的家具上进行实验。
专题14 现代生物科技专题(30分钟100分)1.(15分)(2017·全国卷Ⅰ)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。
回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是____________________________________________________________________________________________________________________。
(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用________作为载体,其原因是__________________________________________ ___________________________________。
(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。
因为与家蚕相比,大肠杆菌具有____________________________________________(答出两点即可)等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是______________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导。
如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是______________________________________________ ________________________________。
【解析】本题主要考查基因工程的相关知识。
(1)人体基因A有内含子,将获得的基因A导入大肠杆菌中,经过转录得到含有内含子的mRNA,因为大肠杆菌没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
内含子部分对应的mRNA序列阻断了蛋白A的合成。
(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,选用昆虫病毒作为载体,不选用噬菌体作为载体的原因是噬菌体的宿主细胞是细菌,噬菌体不能侵染家蚕。
(3)大肠杆菌是原核生物,原核生物作为受体细胞,有以下优点:结构简单、繁殖速度快、容易培养等。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,最准确的方法是利用蛋白A的抗体,因抗体具有特异性,一种抗体只能与特定的蛋白质结合,可根据蛋白A抗体的杂交情况来判断是否合成了蛋白A。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验中将一种生物个体的DNA转移到了另一种生物个体中,并表达合成了相应的蛋白质。
答案:(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A(2)噬菌体噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕(3)繁殖快,容易培养(4)蛋白A的抗体(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体【加固训练】甘蔗黄叶综合症是一种由甘蔗黄叶病毒所引起的禾本科植物病症,科学家通过甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因(简称CP蛋白基因)转化植物来获得抗病转基因新品种。
(1)首先从甘蔗黄叶综合症的病叶中提取RNA,此过程中为了防止RNA被分解,需加入________________抑制剂,以提取的RNA为模板通过__________获得cDNA。
(2)对获取的cDNA进行PCR扩增,在此反应体系中,除了模板DNA、dNTP外,还需加入______________,获得的大量cDNA需要在4 ℃的低温下保存备用,原因是_________________________________________________________。
(3)将cDNA和质粒用同一种限制酶切割,产生相同的平末端,再用____________ ___________将二者进行连接(填“E·coli DNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)。
在培养基上接种培养大肠杆菌作为受体细胞,同时加入一定量的CaCl2低温冷却液,目的是制备________________细胞,其具有的特殊功能是______________。
(4)为检测大肠杆菌是否产生CP蛋白,需要将病毒颗粒注射入兔子体内,并从血清中分离获得________________作为检测剂。
【解析】(1)RNA易被RNA酶水解,加入RNA酶抑制剂可防止RNA被分解;RNA逆转录可以得到cDNA。
(2)PCR反应体系中应包含模板DNA、dNTP、引物、Taq酶;高温条件下,易使DNA分子中的氢键断裂,双螺旋结构打开而发生变性,需要在4 ℃的低温下保存。
(3)T4DNA连接酶可连接平末端;常用一定浓度CaCl2溶液制备大肠杆菌感受态细胞,感受态细胞能吸收周围环境中的DNA分子。
(4)将病毒颗粒注射入兔子体内,从血清中分离获得CP蛋白抗体,用抗原-抗体杂交技术来检测大肠杆菌是否产生CP蛋白。
答案:(1)RNA酶逆转录(2)引物、Taq酶(热稳定DNA聚合酶) 高温条件下,易使DNA分子中的氢键断裂,双螺旋结构打开而发生变性(3)T4DNA连接酶感受态能吸收周围环境中的DNA分子(4)CP蛋白抗体(甘蔗黄叶病毒外壳蛋白抗体)2.(15分)(2018·湖南六校联考)《战狼2》创造了中国电影史的多个最高,电影中的“拉曼拉病毒”学名埃博拉病毒,冷锋注射的疫苗是具有抗埃博拉病毒功能的血清。
下图中,甲、乙是两种方法制备单克隆抗体的流程图。
请回答下列问题:(1)甲图中从产生免疫反应的小鼠体内得到了抗________________的抗体,说明小鼠体内已形成了相应的B淋巴细胞。
设法将B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合,常用的诱导因素有聚乙二醇、________________、电激等。
(2)甲图中经选择性培养的①________________细胞,还需进行克隆化培养和________________检测,经多次筛选,就可获得足够数量的②细胞。
(3)乙图中将烟草细胞培养成转基因烟草植株涉及的最基本技术是_________ _____________,为了诱导烟草细胞生根,应设置培养基中生长素与细胞分裂素的比____________(填“大于”“等于”或“小于”)1。
【解析】(1)据甲图中显示,对小鼠注射埃博拉病毒诱导小鼠产生抗埃博拉病毒的抗体;细胞融合的诱导因素有化学因素(如聚乙二醇),生物因素(如灭活病毒),物理因素(如电激)。
(2)甲图中经选择性培养获得的①杂交瘤细胞,还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量的②细胞。
(3)将细胞培养成植株的技术是植物组织培养,该过程中诱导细胞生根时,培养基中的生长素与细胞分裂素的比应该大于1。
答案:(1)埃博拉病毒灭活的病毒(2)杂交瘤抗体(3)植物组织培养大于3.(15分)科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入羊体内,得到转基因“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域,生产流程如图。
请回答:(1)将蛛丝蛋白基因和载体通过甲过程形成的X为________________,甲过程通常用相同的限制酶进行切割,原因是_____________________________________ ___________________________________________________。
(2)为了获得蛛丝蛋白,图中的受体细胞应该选择__________(填性别)羊的ES细胞,选择ES细胞进行核移植与体细胞相比________________。
(3)受体细胞在体外培养时,采用的培养基是______________(填“固体”或“液体”)培养基,并在培养环境中添加5%的CO2,目的是________________。
(4)转基因羊除能产生蛛丝蛋白外,其性状与提供ES细胞的个体不完全相同的原因有_______________________________________________________________________________________________________________________________________。
(答出两点即可)【解析】(1)由题图可知,通过甲过程形成X,然后直接导入受体细胞,所以X应为基因表达载体;甲过程为构建基因表达载体过程,用相同的限制酶进行切割是为了使目的基因和载体有相同的黏性末端,便于连接。
(2)想要从羊的乳汁中获得蛛丝蛋白,则受体细胞为雌性,选择ES细胞进行核移植与体细胞相比恢复其全能性相对容易。
(3)体外培养动物细胞时,采用液体培养基;培养环境中添加5%的CO2是为了维持培养液的pH。
(4)性状是基因与环境共同作用的结果,转基因羊除能产生蛛丝蛋白外,其性状与提供ES细胞的个体不完全相同有可能是发育过程中发生了基因突变;转基因羊的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞,也会使个体产生性状差异。
答案:(1)基因表达载体使目的基因和载体有相同的黏性末端,便于连接(2)雌性恢复其全能性相对容易(3)液体维持培养液的pH(4)转基因山羊的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞、性状是基因与环境共同作用的结果(或个体发育过程中有可能发生基因突变)4.(15分)(2018·天水二模)某基因研究院培育出了转基因克隆绵羊,该绵羊能合成深海鱼体内富含的不饱和脂肪酸omega-3。
(1)在培育转基因克隆绵羊过程中,运用________________方法除去卵母细胞的细胞核,通过化学试剂________________使该细胞与供体细胞融合,进而构建重组胚胎。
(2)为保证胚胎移植顺利进行,需要在合适的季节对供、受体母羊进行________ ___________处理,培育过程中,科研人员同时将omega-3合成酶的基因片段转移到了该羊基因组中,使目的基因进入受体细胞并维持稳定和表达的过程,称为________________。
利用PCR技术进行扩增目的基因的前提是__________________________________________________________。
(3)目前,人们主要通过食用深海鱼肉摄取omega-3,人们过度捕杀深海鱼而严重破坏了海洋生态系统,使生态系统的________________稳定性下降。
(4)建造海底人工鱼礁,其目的是改善海洋环境,是实现海洋渔业可持续发展的举措之一,这体现了生态工程所遵循的______________________原理。
十九大提出“绿水青山就是金山银山”,要实现这一目标不仅需要对破坏的生态环境进行恢复,还要考虑当地人的经济发展和生活需要,这主要遵循了生态工程的______ ________________原理。
