浅谈菌落总数(cfu)和大肠菌群(mpn)

菌落总数(c f u)和大肠菌群(m p n)的区别摘要：菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，针对食品微生物检测中茵落总数结果很高但大肠菌群很低进行分析。

关键词：菌落总数；大肠菌群；食品我国的国家标准绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定，菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，常常受到生产企业和消费者的高度父注，菌落总数的报告单位是cfu／g (ml )，大肠菌群的报告位是mpn／100g ( ml)，那么cfu，mpn 是什么含义呢，有的食品微生物检测中菌落总数结果很高但大肠菌群很低，有关企业对此不太理解，现在将做一下解释说明。

L菌落总数(cfu)菌落总数是用来判定食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标，食品的生产加工过程叶中，卫生质量的高低首先决定食品原料的来源．原料的卫生与否，是否被污染过，这是根本原因，其次是环境卫生水平的高低，再次就是加工人员和加工工具的卫生状况，要保证食品卫生安全就必须保证所加工的原料来源，环境，加工工具和人员符合卫生标准，但是如何判定食品生产加工过程中是否符合卫生要求，以便对被检产品做出一个科学的评价，菌落总数的多少在一定程度上反映出卫生质量的优劣，也可以用这一方法观察出食品中细菌的繁殖动态，以便于对被捡样品进行卫生评价时提供科学依据。

菌落总数中的菌落英文意思是(colony)，定义为细菌和其他几种做微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。

各种细菌的菌落各自具有一定的特征，按其特征的不同可以在某种程度上鉴别某种细菌，为卫生检验提供依据，菌落总数是指在被检样品的单位重量( g )．体积(m1) 或表面积(clni) 内所含能于某种固体培养基上在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。

其培养的原理是以检样在被稀释到一定体积后，吸取一定量的检样，检样中的细菌细胞和培养基混合后，每个细菌细胞部形成一个肉眼可见的菌落的假设为基础的．由于检验中采用的是37℃有氧条件下培养。

关键词：菌落总数；大肠菌群；食品我国的国家标准绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定，菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，常常受到生产企业和消费者的高度父注，菌落总数的报告单位是cfu／g (ml )，大肠菌群的报告位是mpn／100g ( ml)，那么cfu，mpn是什么含义呢，有的食品微生物检测中菌落总数结果很高但大肠菌群很低，有关企业对此不太理解，现在将做一下解释说明。

L菌落总数(cfu)菌落总数是用来判定食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标，食品的生产加工过程叶中，卫生质量的高低首先决定食品原料的来源．原料的卫生与否，是否被污染过，这是根本原因，其次是环境卫生水平的高低，再次就是加工人员和加工工具的卫生状况，要保证食品卫生安全就必须保证所加工的原料来源，环境，加工工具和人员符合卫生标准，但是如何判定食品生产加工过程中是否符合卫生要求，以便对被检产品做出一个科学的评价，菌落总数的多少在一定程度上反映出卫生质量的优劣，也可以用这一方法观察出食品中细菌的繁殖动态，以便于对被捡样品进行卫生评价时提供科学依据。

菌落总数中的菌落英文意思是(colony)，定义为细菌和其他几种做微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。

各种细菌的菌落各自具有一定的特征，按其特征的不同可以在某种程度上鉴别某种细菌，为卫生检验提供依据，菌落总数是指在被检样品的单位重量( g )．体积(m1) 或表面积(clni) 内所含能于某种固体培养基上在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。

其培养的原理是以检样在被稀释到一定体积后，吸取一定量的检样，检样中的细菌细胞和培养基混合后，每个细菌细胞部形成一个肉眼可见的菌落的假设为基础的．由于检验中采用的是37℃有氧条件下培养。

因而并不能测出每克或每毫升样品内的实际活菌数，其中的微嗜氧菌，厌氧菌，冷营养菌在此条件下都不能生长，有特殊营养要求的一些细菌的生长也受到了限制，因此培养的只是一群能在普通营养琼脂中发育中发育的嗜中温的需氧兼性厌氧的细菌总数，只有具备每种细菌生长要求的特定的环境条件，才能将所有细菌全部培养出来，因此要的到全部的茼落总数应将检样接种到不同的培养基上，但国家的食品卫生标准对食品中菌落总数的规定并不需要接种不同的非选择性培养基，原因就是标准所规定的数值全部是在37℃有氧条件下测定得出的。

摘要：菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，针对食品微生物检测中茵落总数结果很高但大肠菌群很低进行分析。

关键词：菌落总数；大肠菌群；食品我国的国家标准绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定，菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，常常受到生产企业和消费者的高度父注，菌落总数的报告单位是cfu／g (ml )，大肠菌群的报告位是mpn／100g ( ml)，那么cfu，mpn是什么含义呢，有的食品微生物检测中菌落总数结果很高但大肠菌群很低，有关企业对此不太理解，现在将做一下解释说明。

L菌落总数(cfu)菌落总数是用来判定食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标，食品的生产加工过程叶中，卫生质量的高低首先决定食品原料的来源．原料的卫生与否，是否被污染过，这是根本原因，其次是环境卫生水平的高低，再次就是加工人员和加工工具的卫生状况，要保证食品卫生安全就必须保证所加工的原料来源，环境，加工工具和人员符合卫生标准，但是如何判定食品生产加工过程中是否符合卫生要求，以便对被检产品做出一个科学的评价，菌落总数的多少在一定程度上反映出卫生质量的优劣，也可以用这一方法观察出食品中细菌的繁殖动态，以便于对被捡样品进行卫生评价时提供科学依据。

菌落总数中的菌落英文意思是(colony)，定义为细菌和其他几种做微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。

各种细菌的菌落各自具有一定的特征，按其特征的不同可以在某种程度上鉴别某种细菌，为卫生检验提供依据，菌落总数是指在被检样品的单位重量( g )．体积(m1) 或表面积(clni) 内所含能于某种固体培养基上在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。

其培养的原理是以检样在被稀释到一定体积后，吸取一定量的检样，检样中的细菌细胞和培养基混合后，每个细菌细胞部形成一个肉眼可见的菌落的假设为基础的．由于检验中采用的是37℃有氧条件下培养。

菌落计数
菌落总数测定几点说明
• 由于检样中采用30/35℃有氧条件下培养，一些特殊营 养要求的细菌、厌氧菌、微需氧菌、以及非嗜中温细 菌，均难以反映出来。
• 鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、 葡萄状或成堆的形式存在，因而在平板上出现的菌落 可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因而平 板上所得菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重 量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位 （colony forming units，CFU）报告。
根据进一步的生化试验，可将这群细菌再分为大肠艾希氏菌（俗称大肠杆菌）、弗氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
近年来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。 3、大肠菌群是肠道最普遍存在和数量最多的一群细菌、常将其作为人畜粪便污染的标志。
大肠菌群
大肠菌群简介
• 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼 性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
• 大肠菌群不是细菌学上的分类命名，而是根据卫生学 方面的要求，提出的与粪便污染有关的细菌，即作为 食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌，这些 细菌在生化及血清学方面并非完全一致。根据进一步 的生化试验，可将这群细菌再分为大肠艾希氏菌（俗 称大肠杆菌）、弗氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌和 阴沟肠杆菌等。
一、目的要求
1.了解食品卫生微生物学的重要性及其原理 2.学会食品中细菌菌落总数的测定方法和平
板活菌计数法 3.学会食品中大肠菌群数的测定方法
二、基本原理
1、食品卫生微生物学指标包括细菌菌落总数、大肠 菌群数和致病菌数量。前两者在日常检测中是必检项 目。
2、细菌菌落总数是指水中或食品检样经处理后，在 一定条件培养后，所得1 g或1 mL检样中所含细菌菌 落的总数，其主要作为判定食品被污染程度的标志。

国际上常见的取样方案
一、国际食品微生物规范委员会取样方案 1、采样原则 - 各类微生物对人的危害程度不同 - 食品经不同条件处理后，危害度变化情况：降 低、未变、增加 2、采样方法 - 三种危害度： 1）老人和婴幼儿 2）可立即食用的食品，在食用前危害基本不变 3）食用前经过加热处理
ICMSF取样方案：分为二级法和三级法 解释四个代号： n：系指一批产品采样个数。 c：系指该批产品的检样菌数中，超过限量的 检样数，即结果超过合格菌数限量的最大允许数。 m：系指合格菌数限量，将可接受与不可接 受的数量区别开。 M：系指附加条件，判定为合格的菌数限量， 表示边缘的可接受数与边缘的不可接受数之间的 界限。 它是从统计学原理来考虑，对一批产品，检查多 少检样，才能够有代表性，才能客观地反映出该 产品的质量而设定的
12.3 大肠菌群测定操作流程 （任务一）
梯度稀释样品
大肠菌群测定操作注意事项
1、检验步序：三步法（乳糖发酵、分离培养、证 实实验），也可称（初发酵、平板分离、复发酵） 2、抑菌剂 3、挑选菌落 4、产气量
大肠菌群测定操作注意事项
5、接种量是指实际接入试管中的、相当于原样品 的量 例如： 稀释度1：10 接种10ml，取液量是10ml，但接 种量就是1ml(g)，即相当于原样品的1ml(g) 6、接种量若是大于１ml的话全部用双料管，等于 或小于１ml用单料管

乳糖胆盐发酵管
配方： 蛋白胨 2 % 猪胆盐（或牛胆盐）0. 5 % 乳糖 1 % 溴甲酚紫酒精液 0 . 06ml pH 7.4
• 双料乳糖胆盐发酵管：除蒸馏水外其他成分加倍
原理 •溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸 性时呈黄色 •如果颜色不变（呈蓝紫色），说 明无产酸的大肠菌群 •如果颜色变黄色，说明可能出现 能分解乳糖产酸的大肠菌群 •胆盐可以抑制G+细菌生长繁殖 分解乳糖产酸产气的大肠菌群， 看杜氏管中的气体

表1 水质常规指标及限值指标限值一、微生物指标①1、总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出2、耐热大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出3、大肠埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出4、菌落总数(CFU/mL)100二、毒理指标5、砷(mg/L)0.016、镉(mg/L)0.0057、铬(六价,mg/L)0.058、铅(mg/L)0.019、汞(mg/L)0.00110、硒(mg/L)0.0111、氰化物(mg/L)0.0512、氟化物(mg/L)1.013、硝酸盐(以N计,mg/L)10,地下水源限制时为2014、三氯甲烷(mg/L)0.0615、四氯化碳(mg/L)0.00216、溴酸盐(使用臭氧时,mg/L)0.0117、甲醛(使用臭氧时,mg/L)0.918、亚氯酸盐(使用二氧化氯消毒时,mg/L)0.719、氯酸盐(使用复合二氧化氯消毒时,mg/L)0.7三、感官性状和一般化学指标20、色度(铂钴色度单位)1521、浑浊度(NTU-散射浊度单位)1水源与净水技术条件限制时为322、臭和味无异臭、异味23、肉眼可见物无24、pH (pH单位)不小于6.5且不大于8.525、铝(mg/L)0.226、铁(mg/L)0.327、锰(mg/L)0.128、铜(mg/L)1.029、锌(mg/L)1.030、氯化物(mg/L)25031、硫酸盐(mg/L)25032、溶解性总固体(mg/L)100033、总硬度(以CaCO3计,mg/L)45034、耗氧量(CODMn法,以O2计,mg/L)3水源限制,原水耗氧量>6mg/L时为535、挥发酚类(以苯酚计,mg/L)0.00236、阴离子合成洗涤剂(mg/L)0.3四、放射性指标②指导值37、总α放射性(Bq/L)0.538、总β放射性(Bq/L)1①MPN表示最可能数;CFU表示菌落形成单位。

摘要：菌落总数和‎大肠菌群是‎食品中安全‎性指标，针对食品微‎生物检测中‎茵落总数结‎果很高但大‎肠菌群很低‎进行分析。

关键词：菌落总数；大肠菌群；食品我国的国家‎标准绝大多‎数食品都制‎订了菌落总‎数和大肠菌‎群的指标，并对其数量‎做了详细的‎规定，菌落总数和‎大肠菌群是‎食品中安全‎性指标，是影响产品‎质量问题的‎常见指标，常常受到生‎产企业和消‎费者的高度‎父注，菌落总数的‎报告单位是‎c fu／g (ml )，大肠菌群的‎报告位是m‎p n／100g ( ml)，那么cfu‎，mpn是什‎么含义呢，有的食品微‎生物检测中‎菌落总数结‎果很高但大‎肠菌群很低‎，有关企业对‎此不太理解‎，现在将做一‎下解释说明‎。

L菌落总数‎(cfu)菌落总数是‎用来判定食‎品在被加工‎过程中被污‎染的程度及‎卫生质量的‎重要指标，食品的生产‎加工过程叶‎中，卫生质量的‎高低首先决‎定食品原料‎的来源．原料的卫生‎与否，是否被污染‎过，这是根本原‎因，其次是环境‎卫生水平的‎高低，再次就是加‎工人员和加‎工工具的卫‎生状况，要保证食品‎卫生安全就‎必须保证所‎加工的原料‎来源，环境，加工工具和‎人员符合卫‎生标准，但是如何判‎定食品生产‎加工过程中‎是否符合卫‎生要求，以便对被检‎产品做出一‎个科学的评‎价，菌落总数的‎多少在一定‎程度上反映‎出卫生质量‎的优劣，也可以用这‎一方法观察‎出食品中细‎菌的繁殖动‎态，以便于对被‎捡样品进行‎卫生评价时‎提供科学依‎据。

菌落总数中‎的菌落英文‎意思是(colon‎y)，定义为细菌‎和其他几种‎做微生物在‎固体培养基‎上生长繁殖‎而形成的能‎被肉眼所识‎别的生长物‎，它是由数以‎万计的相同‎细菌聚集而‎成的，故又有细菌‎集落之称。

各种细菌的‎菌落各自具‎有一定的特‎征，按其特征的‎不同可以在‎某种程度上‎鉴别某种细‎菌，为卫生检验‎提供依据，菌落总数是‎指在被检样‎品的单位重‎量( g )．体积(m1) 或表面积(clni) 内所含能于‎某种固体培‎养基上在一‎定条件下培‎养后所生成‎的细菌集落‎的总数。

试验九食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测［试验目的］1、了解我国规定的食品质量与细菌菌落总数和大肠菌群数量的重要关系。

2、把握食品细中细菌菌落总数及大肠菌群的检测方法。

［试验原理］菌落总数依据稀释平板技术法检测每mL/g检样在牛肉音蛋白陈琼脂培育基上，经373 24h 培育后，所生长的细菌菌落的总数。

它所反映的是检样中的活菌数，细菌数越多，说明污染程度越大，这项指标可作为判定待测样品被污染的程度。

大肠菌群数是在lOOmL（g）食品中（或1000 mL水中）大肠菌群最近似值。

它是指肠杆菌科中的4个属，即埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。

这一菌群致病力不强，具有共同特点：好氧和兼性厌氧、革兰氏染色阴性反应、无芽抱杆菌、37℃培育24-48h能发酵乳糖产酸产气。

大肠菌群在人畜肠道内含最最多，可随排泄物进入水源或污染食品。

国际公认以大肠菌群的存在作为粪便污染指标。

这项指标可判定待测样品有无被粪便污染及污染的程度。

［试验材料］1、检样牛乳（饮料、酱油）2、培育基一般养分琼脂平板、单料乳糖胆盐发酵培育基、乳糖发酵培育基、EMB平板3、仪器和其他物品恒温箱、水浴锅、无菌培育皿、无菌吸管、无菌盐水瓶（内装225 mL无菌生理盐水）、无菌试管（内装9 mL无菌生理盐水）、灭菌剪刀、镜子等［试验内容］1、细菌菌落总数的测定（1）制备样品及样品稀释取待测样品（牛乳、酱油）一瓶，用点燃的酒精棉球烧灼瓶口，若是塑料瓶则用75%的酒精棉球擦拭灭菌。

在无菌条件下取样25 mL放入内装225 mL生理盐水的瓶中，充分混匀，制成10-1的稀释液。

用1 mL无菌吸管吸取10-1稀释液1mL,沿管壁缓缓注入装有9mL无菌生理盐水的试管中（留意，吸管尖端不要触及管内稀释液），振物试管，混合匀称，制成10-2的稀释液。

另取1mL无菌吸管，按上述操作方法做成10-3稀释液。

每次稀释，换用一支无菌吸管，共做10-1、10-2、10-3三个稀释度，分别含样品0.1mL, 0.01mL, 0.001 mLo（2）培育将上面已做好的样品稀释液充分振荡，然后分别吸取该稀释度的稀释液1mL至标有相应稀释度的无菌培育皿中，每个稀释度做2个培育皿。

如何理解微生物检测中的CFU？CFU的全称是Colony-Forming Units，中文翻译过来的意思是“菌落形成单位”。

之所以在食品检疫检验中采用CFU来计量菌落的数量，是因为我们生活中很容易因为菌落超标而产生食品安全事件。

CFU计量下。

菌落种类主要包括细菌和真菌两大类。

细菌和真菌是我们生活中常见的菌种，对于细菌来说，主要包括沙门菌，葡萄球菌等等形式。

对于真菌类型危害，主要包括酵母和霉菌等等形式。

不过，虽然这些细菌、真菌可以被检测到，但是不通过CFU培养基进行可视化培养的话，显微镜会把活的菌体跟死的菌体都算进去，这样很难估算它的数量，如果不能估算数量，就很难进行健康评估。

所以，需要采用生物学的方式，进行菌落数量计量。

一、CFU概述我们先来看一下，菌落中的细菌。

就拿沙门菌来说，属于一种动物细菌。

在很多动物的肠道中存在此类细菌，比如屠宰的猪，牛，羊等等，家畜平均会含有1%-4%的沙门菌，如果对这一部分细菌无法做到有效处理，那么就会危害人类的饮食健康。

特别是患病的家畜，其携带沙门菌的数量会高于健康家畜。

在选用猪、牛、羊等肉食产品过程中，一定要检测沙门菌的含金量。

这其中还有葡萄球菌，葡萄球菌是存在于空气，土壤，物品，水分之中的一种细菌类型，主要是，因为陆生系统的与人类生活环境密切相关，所以很容易。

所以葡萄球菌很容易附着在人体的鼻腔、皮肤、咽喉和肠道之内，一旦食物携带沙门菌超标，便会引起食物食物中毒，包括恶心、腹泻、呕吐等等症状，而葡萄球菌携带超标。

可能会引起各种化脓性炎症，比如说水泡、脓肿、皮肤疹、败血症等等，严重的情况会引起休克综合症。

在真菌类型中，酵母超标60倍以上会对人体产生不良负担，可能会引起肠胃负担，造成恶心、食欲下降、胃肠功能紊乱、胀气、腹泻等等。

我们在制作面食的过程中会经常用到酵母，酵母适量的情况下不会对人体产生危害危害，而且它能使面食制品更加松软，风味发生改善。

众所周知，如果我们买一袋面包，存放超过一个星期以上，就会产生酒精的味道，这就是因为其中的酵母在长时间的放置下产生了发酵现象，导致酒精浓度超标，这时候再使用可能会引起人体的不适感，所以在CfU检测中，一般会针对食品的存放周期进行酵母超标检测。

食品微生物学检验大肠菌群计数和菌落总数的测定摘要：菌落总数和大肠菌群超标是食品产品卫生指标中常见的质量问题,我国的国家标准对绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定。

菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，在对食品进行检测的时候菌落总数以及大肠菌群两项指标容易出现相应的检测问题[1]，为了熟悉和掌握大肠菌群计数和菌落总数测定的方法和技术，本次实验以未经清洗的生菜为实验对象，用MPN计数法对大肠菌群进行计数，用平板倾注的方法培养微生物后观察获得的单菌落来测定菌落总数。

关键词：生菜；大肠菌群 MPN计数法；菌落总数；平板倾注一、前言：食品中菌落总数是指食品样检经过处理，在一定条件下（如培养基成分、培养温度和时间、PH值、需氧性质等）培养后，所得1mL(或1g) 检样中形成菌落的总数。

菌落总数测定通常是用来判定食品被微生物污染的程度及卫生质量，测定结果反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。

大肠菌群是一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。

该菌群主要来源于人、畜粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。

食品中大肠菌群数系以每1mL(g) 检样内大肠菌群最可能数（the most probable number,MPN）表示。

[2]二、实验材料与方法（一）实验材料1、实验器材高压灭菌锅恒温培养箱电子天平2、实验材料及试剂未经清洗的生菜无菌生理盐水3、菌落总数测定所用培养基及其配方平板计数琼脂（PCA）培养基胰蛋白胨5.0g 酵母浸膏2.5g 葡萄糖1.0g 琼脂15.0g 蒸馏水1000mL PH7.0±0.2 4、大肠菌群计数所用培养基及其配方4.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤胰蛋白胨20.0g 氯化钠5.0g 乳糖5.0g 磷酸氢二钾（K2HPO4）2.75g磷酸二氢钾（KH2PO4）2.75g 月桂基硫酸钠0.1g 蒸馏水1000mL PH6.8±0.24.2煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤蛋白胨10.0g 乳糖10.0g 牛胆粉（oxgall或oxbile）溶液200mL1％煌绿水溶液13.3mL 蒸馏水800mL PH7.2±0.1（二）实验方法（1）培养基、生理盐水的配制及灭菌1、生理盐水称取NaCl8g溶于1000mL蒸馏水中,配成0.8%的生理盐水，NaCl溶解完全后，取90ml 分装到250ml带玻璃珠的三角瓶中。

附录表1指标限值1、微生物指标①总大肠菌群（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出耐热大肠菌群（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出大肠埃希氏菌（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出菌落总数（CFU/mL）1002、毒理指标砷（mg/L）0.01镉（mg/L）0.005铬（六价，mg/L）0.05铅（mg/L）0.01汞（mg/L）0.001硒（mg/L）0.01氰化物（mg/L）0.05氟化物（mg/L）1.0硝酸盐（以N计，mg/L）10地下水源限制时为20三氯甲烷（mg/L）0.06四氯化碳（mg/L）0.002溴酸盐（使用臭氧时，mg/L）0.01 甲醛（使用臭氧时，mg/L）0.9亚氯酸盐（使用二氧化氯消毒时，mg/L）0.7氯酸盐（使用复合二氧化氯消毒时，mg/L）0.73、性状和化学指标色度（铂钴色度单位）15浑浊度（NTU-散射浊度单位）1水源与净水技术条件限制时为3臭和味无异臭、异味肉眼可见物无pH （pH单位）不小于6.5且不大于8.5铝（mg/L）0.2铁（mg/L）0.3锰（mg/L）0.1铜（mg/L）1.0锌（mg/L）1.0氯化物（mg/L）250硫酸盐（mg/L）250溶解性总固体（mg/L）1000总硬度(以CaCO3计，mg/L）450耗氧量（CODMn法，以O2计，mg/L）3水源限制，原水耗氧量>6mg/L时为5挥发酚类（以苯酚计，mg/L）0.002阴离子合成洗涤剂（mg/L）0.34、指导值总α放射性（Bq/L）0.5总β放射性（Bq/L）1①MPN表示最可能数；CFU表示菌落形成单位。

当水样检出总大肠菌群时，应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群；水样未检出总大肠菌群，不必检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。

②放射性指标超过指导值，应进行核素分析和评价，判定能否饮用。

附录表2消毒剂名称与水接触时间出厂水中限值出厂水中余量管网末梢水中余量氯气及游离氯制剂（游离氯，mg/L）至少30min 4 ≥0.3 ≥0.05一氯胺（总氯，mg/L）至少120min 3 ≥0.5 ≥0.05臭氧（O3，mg/L）至少12min 0.3 0.02如加氯，总氯≥0.05二氧化氯（ClO2，mg/L）至少30min 0.8 ≥0.1 ≥0.02水质非常规指标及限值附录表3 水质非常规指标及限值指标限值1、微生物指标贾第鞭毛虫（个/10L）<1 隐孢子虫（个/10L）<1 2、毒理指标锑（mg/L）0.005钡（mg/L）0.7铍（mg/L）0.002硼（mg/L）0.5钼（mg/L）0.07 镍（mg/L）0.02银（mg/L）0.05铊（mg/L）0.0001氯化氰（以CN-计，mg/L）0.07 一氯二溴甲烷（mg/L）0.1二氯一溴甲烷（mg/L）0.06二氯乙酸（mg/L）0.051,2-二氯乙烷（mg/L）0.03二氯甲烷（mg/L）0.02三卤甲烷（三氯甲烷、一氯二溴甲烷、二氯一溴甲烷、三溴甲烷的总和）该类化合物中各种化合物的实测浓度与其各自限值的比值之和不超过11,1,1-三氯乙烷（mg/L）2三氯乙酸（mg/L）0.1三氯乙醛（mg/L）0.012,4,6-三氯酚（mg/L）0.2 三溴甲烷（mg/L）0.1七氯（mg/L）0.0004马拉硫磷（mg/L）0.25五氯酚（mg/L）0.009六六六（总量，mg/L）0.005 六氯苯（mg/L）0.001乐果（mg/L）0.08对硫磷（mg/L）0.003 灭草松（mg/L）0.3甲基对硫磷（mg/L）0.02 百菌清（mg/L）0.01呋喃丹（mg/L）0.007林丹（mg/L）0.002毒死蜱（mg/L）0.03草甘膦（mg/L）0.7敌敌畏（mg/L）0.001莠去津（mg/L）0.002溴氰菊酯（mg/L）0.02 2,4-滴（mg/L）0.03滴滴涕（mg/L）0.001乙苯（mg/L）0.3二甲苯（mg/L）0.51,1-二氯乙烯（mg/L）0.03 1,2-二氯乙烯（mg/L）0.05 1,2-二氯苯（mg/L）11,4-二氯苯（mg/L）0.3三氯乙烯（mg/L）0.07三氯苯（总量，mg/L）0.02 六氯丁二烯（mg/L）0.0006 丙烯酰胺（mg/L）0.0005四氯乙烯（mg/L）0.04甲苯（mg/L）0.7邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（mg/L）0.008环氧氯丙烷（mg/L）0.0004苯（mg/L）0.01苯乙烯（mg/L）0.02苯并(a)芘（mg/L）0.00001氯乙烯（mg/L）0.005氯苯（mg/L）0.3微囊藻毒素-LR（mg/L）0.0013、感官性状和一般化学指标氨氮（以N计，mg/L）0.5硫化物（mg/L）0.02钠（mg/L）200附录表41、微生物指标菌落总数（CFU/mL）5002、毒理指标砷（mg/L）0.05氟化物（mg/L）1.2硝酸盐（以N计，mg/L）203、化学指标色度（铂钴色度单位）20浑浊度（NTU-散射浊度单位）3水源与净水技术条件限制时为5pH（pH单位）不小于6.5且不大于9.5溶解性总固体（mg/L）1500总硬度(以CaCO3计，mg/L) 550耗氧量（CODMn法，以O2计，mg/L）5铁（mg/L）0.5锰（mg/L）0.3氯化物（mg/L）300硫酸盐（mg/L）300。

如大于100时，则报告前面两位有效数字，第 三位数按四舍五入计算。
固体检样以克（g)为单位报告，液体检样以毫升 （ml）为单位报告，表面涂擦则以平方厘米 （cm2）报告。
-----大-大肠肠菌菌群群
粪便污染指示菌之一
一、大肠菌群的定义
二、大肠菌群MPN值（大肠菌群数）所指示的 卫生意义 三、大肠菌群计数方法：
当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明 显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则 每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开 计数。如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不 到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘 2代表全平板的菌落数。
如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘 以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情 况计算出的菌落数按估算值报告。
不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平 板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍 数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（ 有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检 样计数报告的依据。
大肠菌群MPN值
指每1g或1ml食品检样中大肠菌群最可能数。
大肠菌群MPN值（大肠菌群数）所指示 的卫生意义：
1.它可作为粪便污染食品的指示菌。 2.它可作为肠道致病菌污染食品可能性的指示菌。
大肠菌群的检测：旧国家标准 GB/T4789.3-2003三步法
乳糖发酵试验 分离培养 证实试验
大 肠 菌 群 检 测 程 序
GB/T4789.3-2003版食品卫生微生物学检验 大 肠菌群测定
大肠大菌肠群菌的群定义
具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。 指在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需 氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢的杆菌。 包括埃希氏菌属、柠檬酸菌属、肠杆菌属和克雷 伯氏菌属等的一些菌种。

高温之所以能杀死微生物，主要是因为微生物细胞的基本组成是蛋白质，蛋白质遇热会凝固变性。

而启动一切生命活动的生物催化剂-酶，其主要成分也是蛋白质，也具有不耐热性。

湿热比干热容易杀死微生物，原因是蛋白质的含水量越多，加热时愈容易凝固，而且湿热所用的水蒸气的传导力与穿透力都比较强，更容易破坏蛋白质。

微生物在其最低生长温度下代谢活动减弱，处于休眠状态，维持生命而不发育。

实验室常用冰箱保存菌种，反复冻融会使细胞收到破坏，微生物死亡。

实验细菌总数的测定一、测定方法平皿计数法二、方法依据《生活饮用水卫生规范》三、测定范围生活饮用水及其水源水中的细菌总数的测定四、测定原理细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分，培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1mL水样所含菌落的总数。

按本作业指导书所得结果只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。

五、试剂营养琼脂1、成分A蛋白胨10gB牛肉膏3gC氯化钠5gD琼脂10～20gE蒸馏水 1000mL2、制法：将上述成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4～7.6，分装于玻璃容器中（如用国产含杂质较多的琼脂时，应先过滤），经121℃灭菌20min，储存于冷暗处备用。

六、仪器设备1、高压蒸汽灭菌器2、干热灭菌箱3、培养箱36±1℃4、电炉5、天平6、冰箱7、放大镜或菌落计数器8、pH计或精密pH试纸9、灭菌试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管、采样瓶等七、分析步骤1、生活饮用水1.1以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。

每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

1.2待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36±1℃培养箱内培养24h，进行菌落计数，即为水样1mL中的细菌总数。

2、水源水2.1以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样，注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液。

水质检测42项常规指标所需仪器试剂一、42项检测指标根据农村饮水水质特点和现行国家饮用水水质卫生标准以及《全国农村饮水安全工程“十二五”规划》、《农村饮水安全水质中心建设导则》，水质检测指标为《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)中的42项水质常规指标。

水质检测中心检测指标即：1、感官性状4项：色度（度）、浑浊度（NTU）、臭和味（描述）、肉眼可见物。

2、一般化学指标13项：pH、铝（mg/L）、铁（mg/L）、锰（mg/L）、铜（mg/L）、锌（mg/L）、氯化物（mg/L）、硫酸盐（mg/L）、溶解性总固体、总硬度（mg/L以CaCO3计）、耗氧量（mg/L）、挥发酚类（以苯酚计，mg/L）、阴离子合成洗涤剂（mg/L）。

3、毒理指标15项：砷（mg/L）、镉（mg/L）、铬（六价，mg/L）、铅（mg/L）、汞（mg/L）、硒（mg/L）、氰化物、氟化物（mg/L）、硝酸盐（以N计）（mg/L）、三氯甲烷（mg/L）、四氯化碳（mg/L）、溴酸盐（使用臭氧时，mg/L）、甲醛（使用臭氧时，mg/L）、亚氯酸盐（使用二氧化氯消毒时，mg/L）、氯酸盐（使用复合二氧化氯消毒时，mg/L）。

4、微生物学指标4项：菌落总数（CFU/mL）、总大肠菌群（MPN /100mL）、耐热大肠菌群（MPN /100mL）、大肠埃希氏菌（MPN /100mL）。

5、与消毒有关的指标4项：应根据水消毒所用消毒剂的种类选择检测指标，游离余氯（mg/L）、臭氧（mg/L）、二氧化氯（mg/L）、一氯胺（总氯，mg/L）。

6、放射性指标2项：总α放射性、总β放射性。

说明：根据卫生部、国家发展改革委、水利部关于加强农村饮水安全工程卫生学评价和水质卫生监测工作的通知（卫疾控发〔2008〕3号）附件内容要求监测指标包括：1.感官性状4项：色度（度）、浑浊度（NTU）、臭和味（描述）、肉眼可见物。

2.一般化学指标9项：pH、铁（mg/L）、锰（mg/L）、氯化物（mg/L）、硫酸盐（mg/L）、溶解性总固体、总硬度（mg/L以CaCO3计）、耗氧量（mg/L）、氨氮（mg/L）。

菌落总数,微生物指标
菌落总数（Total Colony Count）是用于评估环境中微生物数量的指标之一。

它通常是通过将样品培养在适当的培养基上，在一定条件下进行培养，并统计培养基上的可见菌落形成单位（CFU）的数量来计算的。

菌落总数是一种简单而常用的微生物指标，可用来评估环境中微生物的细菌、真菌和酵母等有机体的总体数量。

它可以用来判断环境的卫生状况，监测食品和水源的卫生质量，以及评估医疗设备、制药设备等器械的清洁程度。

菌落总数的测试方法一般为将样品溶解在适当的缓冲液中，然后按照一定的稀释倍数进行连续稀释。

将稀释液均匀分布在培养基上，将培养基培养在适宜的温度和湿度条件下，经过一定的培养时间后，统计菌落的数量，并以CFU/g（菌落形成单位/克）或CFU/mL（菌落形成单位/毫升）的单位表示。

菌落总数并不能确定培养基上的每一个菌落都是病原菌，但它可以作为一种初步的指标来评估环境中微生物的质量和数量。

所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(mL)。

它反映的是检样中活菌的数量。

所谓大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。

水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。

多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。

滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。

(三)实验器材(1) 菌落总数的测定：1)培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3.0 g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g 水1000mL pH7.4～7.6 将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。

也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。

在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。

将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。

在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH，直至PH达7.6。

反之，用1mol/LHCL 进行调节。

无菌生理盐水：需用生理盐水浓度是0.9%：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。

2)器材试剂：牛肉膏蛋白胨 NaCl 1moL/LNaOH 1moL/LHCL 灭菌水高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶带玻璃塞瓶天平试管牛角匙pH试纸（pH5.5-9.0）棉花记号笔纱布吸管麻绳牛皮纸量筒玻璃棒电热炉称量杯灭菌三角瓶灭菌的具塞三角瓶灭菌平皿灭菌吸管灭菌试管高压蒸气灭菌：1.将内层锅去处，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。