实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
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第1篇一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法;2. 熟悉血糖仪、试纸等实验器材的使用;3. 了解血糖测定的临床意义;4. 培养实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖含量,它是人体能量代谢的重要物质。
血糖法测定血糖是通过检测血液中的葡萄糖含量来确定血糖水平的方法。
常用的血糖测定方法有血糖仪法、试纸法和化学法等。
本实验采用血糖仪法测定血糖,其原理为葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在色原性氧受体存在下与还原剂反应,产生颜色变化,通过比色法测定吸光度,从而计算出血糖浓度。
三、实验器材与试剂1. 实验器材:- 血糖仪- 试纸- 采血针- 空白试管- 移液器- 吸管- 离心机- 分光光度计2. 实验试剂:- 葡萄糖标准溶液- 葡萄糖氧化酶试剂盒- 还原剂- 色原性氧受体- 洗涤剂四、实验步骤1. 标准曲线绘制:- 将葡萄糖标准溶液按照说明书进行稀释,得到一系列浓度的标准溶液; - 取空白试管,加入相应体积的还原剂和色原性氧受体;- 将标准溶液分别加入各试管,混匀;- 在一定波长下,用分光光度计测定吸光度;- 以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖测定:- 采集受试者空腹静脉血,加入抗凝剂,混匀;- 吸取一定量的血液,加入血糖氧化酶试剂盒,混匀;- 在一定波长下,用分光光度计测定吸光度;- 根据标准曲线,计算出血糖浓度。
3. 数据处理:- 将实验数据整理成表格;- 计算血糖浓度的平均值、标准差等指标;- 对实验结果进行分析和讨论。
五、实验结果1. 标准曲线绘制结果:- 标准曲线线性良好,相关系数R²>0.99。
2. 血糖测定结果:- 受试者空腹血糖浓度为4.8mmol/L。
六、实验讨论1. 本实验采用血糖仪法测定血糖,具有操作简便、快速、准确等优点。
2. 实验结果与受试者空腹血糖的正常范围相符,说明实验方法可靠。
血糖试验实验报告一、实验目的本实验旨在通过血糖测试,了解个体的血糖水平,评估其糖尿病风险以及监测糖尿病的治疗效果。
同时,通过实验操作,加深对血糖测定原理和方法的理解。
二、实验原理血糖的测定通常采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)或葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)。
葡萄糖氧化酶法是一种常用的快速检测方法,原理是利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化酶的作用下与色原底物反应,产生有色产物,其颜色深浅与血糖浓度成正比。
三、实验材料- 新鲜血液样本- 葡萄糖氧化酶试剂盒- 微量移液管- 试管- 离心机- 恒温水浴- 色度计四、实验步骤1. 收集受试者的新鲜血液样本,并立即进行离心分离血清。
2. 按照试剂盒说明书,将血清样本与试剂混合,进行孵育。
3. 孵育结束后,将混合物置于离心机中离心,去除沉淀物。
4. 取上清液,使用色度计测定其吸光度值。
5. 根据标准曲线,将吸光度值转换为血糖浓度。
五、实验结果实验结果显示,受试者的血糖浓度为5.8 mmol/L,处于正常范围内(正常血糖浓度为3.9-6.1 mmol/L)。
六、实验讨论本次实验中,血糖浓度的测定结果与受试者的实际健康状况相符。
实验过程中,操作的准确性对结果的影响较大,因此,实验操作的标准化和精确性至关重要。
此外,血糖水平受多种因素影响,包括饮食、运动、药物等,因此在评估血糖水平时,需要综合考虑这些因素。
七、结论通过本次血糖试验,我们成功地测定了受试者的血糖水平,并与正常血糖范围进行了比较。
实验结果表明,受试者目前没有糖尿病风险。
然而,为了持续监测血糖水平,建议定期进行血糖检测,并注意健康的生活方式。
八、建议1. 定期进行血糖检测,尤其是对于有糖尿病家族史的个体。
2. 保持健康的饮食习惯,减少高糖、高脂食物的摄入。
3. 增加体育锻炼,提高身体对血糖的调节能力。
4. 对于糖尿病患者,应严格遵循医嘱,定期监测血糖,并调整治疗方案。
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖的步骤和操作技巧。
3. 学会分析实验数据,并得出结论。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖含量,是人体重要的能量来源。
血糖浓度的高低直接关系到人体的健康。
葡萄糖氧化酶法是测定血糖的一种常用方法,其原理是葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水和新生态氧,新生态氧与色原性物质反应,产生颜色变化,通过比色法测定葡萄糖浓度。
三、实验器材与试剂1. 器材:葡萄糖氧化酶法血糖测定试剂盒、离心机、移液器、移液管、比色杯、水浴锅、恒温水浴箱、电子天平、白瓷板等。
2. 试剂:葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、缓冲液、氧化剂、还原剂等。
四、实验步骤1. 标准曲线的制作(1)取6个比色杯,分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5毫升的葡萄糖标准溶液,用缓冲液定容至1毫升。
(2)在每个比色杯中加入相应的酶试剂,混匀。
(3)将比色杯放入水浴锅中,恒温反应10分钟。
(4)取出比色杯,用移液器加入还原剂,混匀。
(5)在波长540nm下,用比色杯测定吸光度,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖测定(1)取5个比色杯,分别加入0.1毫升待测血清或血浆,用缓冲液定容至1毫升。
(2)在每个比色杯中加入相应的酶试剂,混匀。
(3)将比色杯放入水浴锅中,恒温反应10分钟。
(4)取出比色杯,用移液器加入还原剂,混匀。
(5)在波长540nm下,用比色杯测定吸光度。
(6)根据标准曲线,计算待测血清或血浆中的葡萄糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作根据实验数据,绘制标准曲线,得出线性方程:y = 0.0245x + 0.0043,相关系数R² = 0.9987。
2. 血糖测定根据实验数据,计算待测血清或血浆中的葡萄糖浓度,结果如下:- 血清A:5.2 mmol/L- 血清B:4.8 mmol/L- 血清C:6.0 mmol/L- 血浆D:5.5 mmol/L- 血浆E:4.9 mmol/L六、实验结论通过本次实验,我们成功掌握了葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理和步骤。
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖水平与人体健康的关系。
3. 培养实验操作技能,提高实验数据分析能力。
二、实验原理血糖是指在血液中葡萄糖的浓度。
正常人体血糖水平相对稳定,维持在一定范围内。
血糖的测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶法是一种测定血糖的常用方法,其原理是葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,使色原物质氧化产生颜色变化,根据颜色变化程度,可以计算出样品中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 试剂:葡萄糖标准溶液、显色剂、显色剂储备液、反应缓冲液、显色剂工作液、空白试剂、待测血液样品。
2. 仪器:微量移液器、移液管、移液器、酶标仪、试管、水浴锅、吸管、滤纸等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)取6支试管,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml葡萄糖标准溶液,加入0.5ml反应缓冲液。
(2)将各试管充分混匀,置于水浴锅中,恒温30分钟。
(3)取出试管,加入0.5ml显色剂,充分混匀,室温放置10分钟。
(4)以空白试剂为参比,用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
(5)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 待测样品测定(1)取6支试管,分别加入0.5ml反应缓冲液、0.5ml显色剂、0.5ml待测血液样品。
(2)将各试管充分混匀,置于水浴锅中,恒温30分钟。
(3)取出试管,加入0.5ml显色剂,充分混匀,室温放置10分钟。
(4)以空白试剂为参比,用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
(5)根据标准曲线,计算待测样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:根据实验数据绘制标准曲线,线性范围为0-2.5mmol/L。
2. 待测样品测定:根据标准曲线计算,待测样品的血糖浓度为3.8mmol/L。
六、实验结论本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度,实验结果准确可靠。
血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)血糖是指血液中葡萄糖的含量。
葡萄糖是人体主要的能量来源,血糖的测定是检查人体内部能量代谢状态的重要项目之一。
这篇文章将介绍血糖定量测定的实验原理、方法以及实验注意事项。
一、实验原理血糖的定量测定方法主要是利用葡萄糖氧化酶将血液中的葡萄糖在催化反应下转化为过氧化氢和D-酮糖酸,利用过氧化氢的比色法来测定血糖的含量。
具体反应式为:(1)葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖氧化酶 D-酮糖酸+H2O2(2)2H2O2+Fe2+→2H2O+Fe3++O2(3)Fe3++TSC(三硝基苯胺)→FeTSC3(红色化合物)其中,TSC(三硝基苯胺)为过氧化氢的比色试剂,用Fe2+作催化剂促进反应进行,所生成的红色化合物FeTSC3与过氧化氢的浓度呈线性关系。
二、实验材料1.血糖标准品:10mmol/L2.葡萄糖氧化酶3.三硝基苯胺(TSC)、醋酸钠、乙二胺四醋酸盐二水合物(EDTA•2H2O)、氢氧化钠(NaOH)4.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)5.准确量杯、试管、离心管、吸光度计、恒温水浴器、移液管三、实验步骤1.制备血清样品:将血液放置静置后离心取血清,制成5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L的葡萄糖标准品。
2.实验组织:3个组别,每组3个试管。
A组:加1mL的10mmol/L葡萄糖标准品;B 组:加1mL的血清标本;C组:加入1mL的磷酸盐缓冲液作为对照组。
注意,每组要做三个平行实验。
3.反应体系准备:①将实验组织中的标准品、血清样本和磷酸盐缓冲液分别加入3毫升离心管中。
②分别加入1mL葡萄糖氧化酶。
③分别加入1mL EDTA全部气泡排除。
⑤每组混合后放置在37℃下反应20分钟。
⑥在上述反应过程中,加入2毫升0.1mol/L的NaOH溶液使溶液呈碱性,使催化反应更为稳定。
4.吸光测定:将反应充分混合后,吸取适量的样品,放到吸光度计槽,设定波长为505nm,用对照组值进行比较,计算出各组的吸光度,并根据标准曲线计算出各样本的葡萄糖含量。
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握血糖仪的使用方法。
3. 通过实验,学会如何测量血糖。
二、实验原理血糖测定是通过检测血液中的葡萄糖浓度来评估人体的糖代谢状况。
目前,常用的血糖测定方法有氧化还原法、酶法、葡萄糖氧化酶法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定。
葡萄糖氧化酶法是利用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,然后通过过氧化氢酶催化过氧化氢分解产生水和新生态氧,新生态氧与色原反应,生成有色物质,通过比色法测定吸光度,从而计算出血糖浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:血糖仪、采血笔、酒精棉球、棉签、采血管、吸管、比色皿等。
2. 试剂:葡萄糖标准溶液、缓冲液、色原等。
四、实验步骤1. 标准曲线的制作(1)取6个比色皿,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL葡萄糖标准溶液,用缓冲液定容至5 mL。
(2)将比色皿放入血糖仪中,进行测定,记录吸光度值。
(3)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖测定(1)用采血笔采集指尖血液,滴入采血管中。
(2)将采血管插入血糖仪,进行测定,记录血糖值。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作根据实验数据,绘制标准曲线,并计算线性回归方程:y = 0.066x + 0.001。
2. 血糖测定实验组血糖值为5.8 mmol/L,对照组血糖值为4.2 mmol/L。
六、实验结论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定,实验结果准确可靠。
2. 血糖仪的使用方便快捷,能够快速测定血糖值。
3. 实验结果表明,实验组血糖值高于对照组,可能与实验组饮食、运动等因素有关。
七、实验注意事项1. 在实验过程中,要注意血糖仪的校准,确保实验结果的准确性。
2. 在采集血液时,要保证采血笔的消毒,避免感染。
3. 在测定血糖时,要保证血液的充足,避免因血液不足而影响测定结果。
八、实验拓展1. 研究不同饮食、运动等因素对血糖的影响。
一、实验目的1. 掌握葡萄糖氧化酶法的原理及操作步骤。
2. 学会使用葡萄糖氧化酶试剂盒进行血糖检测。
3. 了解血糖测定的临床意义。
二、实验原理葡萄糖氧化酶法是一种检测葡萄糖浓度的方法,其原理是葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下被氧化为葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质。
此有色物质在625nm波长下与葡萄糖浓度成正比,通过测定蓝色物质的吸光度可计算样品中葡萄糖的含量。
三、实验材料1. 试剂:葡萄糖氧化酶试剂盒、邻联甲苯胺、过氧化物酶、缓冲液、蒸馏水。
2. 仪器:紫外可见分光光度计、移液器、试管、吸管、试管架。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)取6支试管,编号为1-6,分别加入0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL的标准葡萄糖溶液。
(2)向各试管中加入1mL的缓冲液,混匀。
(3)向各试管中加入100μL的葡萄糖氧化酶,混匀。
(4)室温下反应10分钟。
(5)向各试管中加入100μL的过氧化物酶,混匀。
(6)室温下反应10分钟。
(7)向各试管中加入100μL的邻联甲苯胺,混匀。
(8)室温下反应10分钟。
(9)以蒸馏水为空白,在625nm波长下测定各管的吸光度。
(10)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖检测(1)取血清样本2mL,加入2mL的缓冲液,混匀。
(2)按照标准曲线绘制步骤中的(3)-(9)操作,测定吸光度。
(3)根据标准曲线计算血清样本中葡萄糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制结果:以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,曲线线性良好。
2. 血糖检测结果:根据标准曲线计算血清样本中葡萄糖的浓度为X mmol/L。
六、实验讨论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法检测血糖,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点。
2. 在实验过程中,需要注意以下几点:(1)严格控制反应时间,避免反应时间过长或过短影响检测结果。
葡萄糖氧化酶法测定血糖实验报告
本工作基于丰田EM200诊断仪,对血液样本进行糖尿病诊断,利用葡萄糖氧化酶法测定血糖实验,以检测患者每日的血糖水平,从而校正患者的血糖变化。
本文研究了本实验过程并对结果进行分析,从而为临床支持提供证据。
本实验为采用葡萄糖氧化酶法测定的血糖实验,此实验使用到的试剂以及设备如下:试剂盒,浓硫酸,醋酸,葡萄糖试剂,酶标记物,和控制糖性质标准样品;设备为丰田EM200诊断仪。
实验步骤:
(1)实验材料准备:标准样品、空白反应液以及待测血液样本分离准备。
(2)实验设备调整:设置丰田EM200诊断仪参数,检查诊断仪内置条件是否符合标准实验要求,准备其他相关仪器和设备(如称量瓶、移液管等)确保设备完好无损。
(3)测试:将待测血液样本与酶和空白反应液混合,加入丰田EM200诊断仪,按设定的参数进行测定,直至测试结束。
(4)结果计算:实验完成后把测试结果放入电脑中,根据实验结果进行计算,最后得到血糖检测结果。
根据实验结果,常规血糖浓度(6.1 mmol/L)转换成用于EM200诊断仪的测试值为11.5±0.3 mmol/L。
此外,重复实验两次的结果显示,血糖浓度的标准差小于0.2,从而表明葡萄糖氧化酶法有效可靠。
最后,本文通过对葡萄糖氧化酶法测定血糖实验过程的研究,表明该诊断仪在临床检测血糖时结果可靠、准确、且可重复,同时理论上,诊断仪根据不同血糖浓度值可快速准确测量,能够满足临床检测要求,为临床血糖检测提供数据支持。
实验血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
【目的】
体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】
葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。
通常在查找这些病症的起因时,还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。
葡萄糖含量增高见于:糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。
葡萄糖含量减少见于:胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】
样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】
紫外分光光度计,恒温水浴箱,移液器(枪),枪头,试管
【药品】
葡萄糖测定试剂盒,试剂盒主要成分与浓度:
【样本】
新鲜无溶血血清。
【步骤】
将10ml R1与90ml R2混合均匀,即为工作液。
空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml
蒸馏水0.01 ml ————
校准液——0.01 ml ——
样品————0.01 ml
分别混合均匀,37℃水浴10~15分钟(避免太阳光直射),用波长505nm、比色杯光径1.0cm,用空白管调“零”点测定各管的吸光度(A)值。
【计算】
【参考值】
血清/血浆:3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考,各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】
1.全国临床检验操作规程(第二版),主编:叶应妩,王敏三,1997,P616.
2.Trinder P. Ann Clin Biochem,1969,6: 24-27.
血糖测定实验所需器材:
1.紫外分光光度计(比色杯光径1.0cm),
2.恒温水浴箱(能调温度的,37℃),
3.移液器(枪)(规格1.0ml 6个,20µl 6个),枪头各100个
4.试管50支,6个试管架
5.烧杯100ml一个,50ml(或25ml)6个
6.记号笔6支
7.蒸馏水1瓶。