血培养检验问与答

SO3- H+ SO3- H+ CH CH2
阳离子交换树脂
CH CH2 CH CH2 CH CH2
CH2
CH
CH2
CH
CH2
多价吸附树脂
Gram stain readings Charcoal based systems
Meta-分析BACTEC树脂培养瓶的性能
• 43份临床评估 • 1982－1996 • 评估130503份血培养
从独立的外周静脉无菌采集2套血培养
无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近 心端交付实验室进行Maki半定量平板滚动培养 或者定量培养
Qestion
• 血培养对CAP、HAP的检出率如何？
Answer
CAP菌血症发生率


住院患者：4 % - 14%
重症患者：18% 大多数CAP的指南推荐住院的患者进行血培养
广东省人民医院3－4月ICU1/2/13区血培共分离出50株可疑致病 菌株（不含CNS） 菌株检出与采血套数的关系：
ICU1区 1瓶 1
ICU2区 1
ICU保13区 0
％ 4%
1套
3瓶 2套及以上
0
1 4（66％）
3
1 5（50％）
6
0 28（82.4%)
18%
4% 74%
CNS:凝固酶阴性葡萄球菌
者，儿童患者出现低体温者
送检方法：
首先判断导管是否有保留的必要性，按导管保留与否分别采取不 同的送检方法
送检方法：保留情况
采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉 ，并做好标志，另外的1套则从导管中心或硅酮 隔膜无菌采获，两个来源的采血时间必须接近（ ≯5min），各自做好标记。
送检方法：不保留情况
更好地分离出真菌、绿脓杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌。
Qestion
• 儿童的血培养应如何采集? (用何种类的瓶子,采集多少血液,需要采几套)
Answer
• 儿童厌氧菌感染极少 ，建议只采用儿童瓶 • 厌氧培养只考虑针对特殊的高危儿童 • 对于婴幼儿患者，采血量不超过患者总血量的1％ < 1 月: ≥ 0.5 mL 1 月 – 36月: ≥ 1.0 mL ≥ 36 月: ≥ 4.0 mL
血培养 Q & A
CLSI血培养的原则和操作程序 推荐（Approved）指南
英国HPA 的血培养的研究 及操作程序
•
Proposed Guideline 2006年10月出
版：M47-P
• 2005-09-08出版：BSOP 37 第5版
• http://www.hpastandards.org.uk/pdf_sops.asp 参编单位： • 医学微生物协会, 临床微生物协会 苏格 兰微生物协会, IBMS, Welsh微生物协 会 统一由卫生防护署 （Health Protection Agency）领导
Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219
储从家数据（2000年） 591份血培养，81份阳性，阳性率为13.17％
组别 需氧瓶厌氧瓶均报阳 仅需氧瓶报阳 仅厌氧瓶报阳 阳性率 50份 7份 23份
中华检验医学杂志，2000，23：285
O’Donnel试验 8620份血培养，704株
Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 217-219
结论
如果血培养只做需氧瓶培养，漏检的不仅 是严格厌氧菌,也会影响兼性厌氧菌的分离 率及报告阳性结果的时间
首先确定静脉穿刺点，首选70％异丙醇消毒并待干，然后用主要 消毒剂（洗必泰、碘酊、碘伏）消毒并待干，使之作用足够的时 间，整个过程要求严格无菌操作
血培养瓶的消毒方法： 弃去瓶顶塑料帽，用75％乙醇消毒瓶顶橡皮塞，待干60秒
Qestion
• 每次采集血培养的间隔时间？
Answer
每份血培养间隔应不超过30分钟，因为网状内皮系统 对于一过性菌血症和间歇性菌血症在15～30分钟内可 清除（CLSI规定每份血培养应同时获得，或尽可能短 的时间内）
儿童专用培养瓶：
• • • •
领取时注意：粉红色标签 专门为儿童设计，采血量仅为1-3 ml 添加特殊促进细菌生长因子，采用树脂专利技术 低SPS浓度可提高儿童特征性病原菌（如耐瑟氏菌） 的检出率
树脂颗粒能 中和抗生素
Qestion
• 皮肤和血培养瓶的消毒方法?
Answer
美国CLSI推荐皮肤的消毒方法为：
Question
• 一套血培养为何选择1个需氧+1个厌氧的组合?
Answer
• 研究表明：用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球 菌，肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。
2001年Khanna数据 7072份血培养，640份阳性，阳性率为9％
组别 需氧瓶厌氧瓶均报阳 仅需氧瓶报阳 仅厌氧瓶报阳 阳性率 55％ 26％ 19％
HAP菌血症发生率：10%-31%

所有怀疑VAP的患者均应行血培养
Qestion
• 如何解读血培养报告？
Answer

一般超过72小时报警的往往为污染菌
单纯一次的凝固酶阴性表皮葡萄球菌阳性往往为污染 可能 一次的肺炎链球菌或金黄色葡萄球菌或真菌药警惕致 病原可能 多次血培养为同一种菌或和其他体液培养结果一致可 排除污染可能 不能仅凭血培养报告定义血流感染，要密切结合临床 排除污染
采血套数
99％
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 1套 2套 3套 4套
Cockerill, CID 2004
96％ 80％ 65％
血培养套数
血培养套数与阳性检出率（％）
采血套数
Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548
• 树脂对非树脂
• 结果
• 总计：提高18.3% • 治疗患者：提高35.4%
Qestion
• 怀疑导管相关的血流感染(CRBSI)时应如何送 检?
CLSI对非隧道式和隧道式的中心静脉导管和输液港 (Venous Access Ports, VAP) 推荐的培养方法
目标人群:
携带深静脉导管超过48小时,出现原因不明的发热、低血压的患
Qestion
• 如何采集第二套血培养?
Answer
• 一个静脉穿刺点只能采集1套血培养，采集第2套血培 养应该选择第2个静脉穿刺点
Qestion
• 患者应采集多少血液?
Answer
• 即寒战—升温之间采血20ml，分装两个瓶内，各分配10ml,当采血
量不足20ml,应先注入需氧瓶,这样首先满足需氧瓶的采血量可以
组别 2组均报阳 2个需氧瓶组均报阳 1个需氧瓶1个厌氧瓶组 阳性菌株数 487株 86株 131株 阳性率 69.2% 12.2% 18.6%
Clin Infect Dis, 1999,29:1309-1311
报告时间提前
出现阳性时间： 需氧瓶有9%比厌氧瓶早1天报告结果 厌氧瓶有5%比需氧瓶早1天报告结果 因此,只做需氧菌不做厌氧菌培养,将有19%的菌 株不能发现,另有5%的血培养延迟1天报告阳性 结果
Connell TG. Pediatrics 2007;119(5):891.
新生儿败血症
最低的采血量不确定，通常0.75-1.0ml的血量是推荐的。
文献证实只采一套血培养大约10％－15％的败血症不能检出 即使血培养阴性，根据临床症状败血症仍然可以被怀疑
Long:Principles and Practice of Pediatric infectious Diseases,2nd ed.,2003
我院常用血培养瓶
采集标本前：于室温保存，切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使用。 采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室温，不能置 于冰箱或温箱，以免影响检出。
Question
• 血培养应该采几套?每套包括几个瓶子?
Answer
• CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个 需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶 • 成年病人不能只采1瓶血培养标本，采血量不 足和只做1套血培养所得得结果是很难正确解 释的
Βιβλιοθήκη Baidu
Qestion
• 血培养最佳的采血时机?
Answer
最佳采血时机
• 尽可能在抗菌药物使用前
• 尽可能在寒颤和发热初起时
Chills 寒战 Blood Cultures 血培养
Temp
体温
BACTEREMIA LEVEL 菌血症的水平
0
30 Time (min)
60
Question
• 血培养瓶的种类?
局部感染：肺炎、尿路感染、脑膜炎、 …
突发精神萎靡的儿童或老年人 虚弱、精神状态错乱、体重突然下降的老年人 肾功能不全、无法解释的白细胞增多及精神状态改变
免疫功能低下的患者
CRP PCT
CUMITECH Blood Cultures IV, ASM Press 2005 Mylotte and Tayara EJCMID 2000
关于采血的一些问题：
• 1、血培养采血建议从外周静脉采，不建议采动脉血，为什么？ ——对检出结果无明显差异，但动脉穿刺危险性较大 2、常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血，为什么？ ——污染菌或定植菌的可能性较大，除非怀疑CRBSI 3、如果需要从导管处取血，初段血或导管内的补液是否需要弃去？为什么 ？ ——不能弃去，以便于判断污染菌、定植菌或病原菌 4、如果用注射器采血，采好后注入血培养瓶之前是否需要更换针头？为什 么？ ——无需更换，对提升阳性率无统计差异，增加了针刺伤的几率
•
•
•
Qestion
• 已接受抗菌药物治疗的患者，使用含树脂培养 瓶是否有助于提高检出率？
BD BACTECTM Resin树脂技术
CH CH2 CH CH2
树脂包含有非离子树脂和阳离子交换树脂，能患 者在（预）治疗过程中，可能存在的中和各种抗 菌药物和其它可能的抑制细菌生长的物质。 有助于溶解血细胞，以便释放被吞噬的细菌，使 其更为快速生长 为细菌生长提供生长中心（growth-centres）， 以提高生长速度，提高检出率（高达40%多）。 一个BACTEC血培养瓶的树脂作用表面相当于5 个标准足球场的面积... 革兰氏染色镜检不受干扰
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Approved Guideline 2007年5月出版 : M47-A
•
Question
• 血培养的适应症是什么?
Answer
（血培养适应症）
发热(> 38°C)
体温过低 (< 36°C)
白细胞增多 (> 10.000/µl) 粒细胞减少(< 1.000/µl) 低血压