外周血细胞形态学检验及技巧

外周血细胞形态分析标准操作程序1 检验目的规范外周血细胞形态学检查，对各仪器达到复检规则的样本进行复片检查，给临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果提供重要的参考依据。

2 用于检验程序的原理把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞氏-姬姆萨染料染色，观察各种细胞数量、形态和质量的变化。

3 性能参数不适用。

4 原始样品系统血液标本详见《血常规标本的采集与处理程序》。

5 容器和添加剂类型血液标本采集的容器是一次性含 EDTA-K2 抗凝剂的真空采血管；添加剂是EDTA-K2 抗凝剂。

采集方法：准确采集静脉血 2.0ml 于上述容器中，轻轻颠倒混匀或直接取手指血 20μl。

要求量准，采血顺利，不能出现凝块。

取手指血或抗凝血于洁净的玻片上制片。

6 所需设备和试剂6.1 仪器、器材：显微镜或 DM96 自动阅片机、玻片6.2 试剂6.2.1 瑞氏-姬姆萨染色液6.2.2 磷酸盐缓冲液（自配）：称取 10 克 KH2PO4，用 1000ml 蒸馏水溶解为 1%浓度的 KH2PO4 溶液，称取 7 克 NaHPO4，用 700ml 蒸馏水溶解为 1%浓度的2Na2HPO4 溶液，取 900 毫升 1%浓度的 KH2PO4溶液和 600 毫升 1%浓度的Na2HPO4 溶液混匀，再用蒸馏水加至 3000 毫升，充分混匀。

配制的缓冲液的 pH 值范围应该在 6.4-6.8。

7 程序步骤仪器器材/试剂准备→样本编号→制片→染色→镜检→分析测定结果→结果审核签发。

应在取血后4小时内完成血涂片制作。

7.1 样本编号按顺序将样本编号，认真核对检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液质量，如有疑问应及时与临床联系。

如采血量不够、有凝块或有溶血现象等，须申请重留标本。

7.2 制片采用 SP1000I 自动推片机或手工制片。

将样本混匀后取 5～10ul 滴于玻片上，并在玻片上注明患者姓名、样本编号，推制厚薄适宜的血膜片。

外周血细胞形态学检验及技巧卫生部北京医院血液科郑天林卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红五．血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：( 一) 采样、制片及染色，三道工序至关重要，是细胞形态学检查的成败关键。

要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求：1. 采样、制片：(1) 玻片要求：国内1.0mm × 26mm × 76mm ± 0.5 ，美国NCCLS 规定1.0mm × 25mm × 75mm ± 0.5 ，要严格清洁，接近中性.(2) 推片：选择优质推片，推片两端边缘整齐、平滑。

也可选用有机玻璃，其大小、厚度与坡片相同，两端之边缘应加工光滑，以利推片用。

(3) 采外周血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小，具有一定推片技术，推片倾斜45 °±，推成血膜长度25mm ～35mm ，宽度18 ～20mm ，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少10mm ，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。

此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC 或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。

(4) 如若采用静脉血推片，用K 3 -EDTA 或肝素抗凝，推制血片应尽早进行（最迟在1 ～2 小时内）。

（二）染色：是识别细胞形态的重要标记工序：常规瑞氏- 姬姆萨染色要点：1 ．要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。

2 ．染色液配制要合格；3 ．涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；4 ．染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持玻片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。

染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（1:2 ），其量要充足、混均，染色时间要30 分钟以上。

5 ．细胞着色的观察：(1) 当染液与缓冲液混合后，甲醛吸水液温升高，发生剧烈反应，直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布，随染色时间的推延，“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”，逐渐由外缘向内缘推进至染色面中心（此过程需要20-30 分钟以上），则表明细胞着色已完成，(2) 再用自来水缓流冲洗，使染色液沉渣及染色粒浮去，使其充分起分色作用，去除细胞染色中浮色，显示出胞核结构及细胞清晰形态，待干，镜检。

外周血细胞形态学检验及诊断技巧病理性形态学改变：①中性粒细胞●中性粒细胞分叶分化程度，○被认为从干细胞至粒细胞生成是否正常及与粒细胞年龄相关；如核分叶不良，Pelger-huet现象；○核仅一叶或二叶，其百分率增加时谓之"左移"，反之，多数细胞四叶以上谓之右移，○一般认为正常中性粒细胞胞核分叶情况：--4叶者为15~25%3叶者为40~50%--2叶者为20~40%1叶者为5%--5叶以上者提示有巨幼细胞性贫血的可能。

○右移现象：-多见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾患，并可以5叶与4叶所占比例计算，得出简单实用的分叶指数：分叶指数=5叶/4叶100%正常核分叶指数：0~17%还见于缺铁性贫血、类风湿性关节炎、遗传性高分叶症(显性遗传)及某些败血症(以左移多见)。

○左移现象-见于感染、败血症、出血、小儿慢性中性粒细胞减少症等。

●中性粒细胞毒性颗粒及空泡改变：中性粒细胞由于受到外来刺激(包括感染及应激反应)引起颗粒变性，粗大着色深染及浆内空泡等病理性改变。

上述改变及白细胞数增多和出现幼稚及原始细胞则为类白血病反应。

○慢性粒细胞白血病(CGL)的中性成熟粒细胞一般胞浆颗粒较正常稀少，但无空泡及毒性颗粒，而慢性中性粒细胞白血病(CNL)的中性成熟粒细胞则与类白血病反应形态相似。

○假性嗜酸性颗粒形态异常：类似嗜酸性样颗粒的出现。

-在某些干细胞疾病如MDS、粒细胞缺乏症、肾性贫血某些患者中性粒细胞的颗粒增多○遗传性白细胞异常疾病：是先天性白细胞异常疾病，临床上虽罕见，但为了提高辨别的能力，应有所认识。

○Pelger-Huer白细胞异常：属于显性遗传，其白细胞形态特点：核分叶不良，不分叶，核呈花生形、亚铃形等形状，无核丝形成，胞浆正常，此外，还有假性(即继发性)Pelger-huet白细胞异常应加以鉴别，后者常见于急性肠炎、伤寒、疟疾、流感，无家族史，但在原发病得到治疗后白细胞形态恢复正常。

○Alder-Reilly颗粒异常：常染色体隐性遗传性多糖代谢障碍性疾病，常伴有软骨畸形、肝、脾肿大等，中性、嗜酸性及嗜碱性粒细胞含有多量嗜天青颗粒遮盖整个细胞，单核细胞亦有类似改变。

外周血形态学报告的内容前言外周血形态学报告是通过对患者血液样本的显微镜检查，观察和描述外周血涂片中各种不同类型细胞的数量、形态和功能状态，以协助诊断和监测疾病的一种常规实验室检查方法。

本篇报告将详细介绍外周血涂片中不同类型细胞的观察结果和意义。

方法为确保准确的形态学观察，本次检查采用了以下标准的方法：1. 采集标本：采用无抗凝剂或EDTA抗凝剂管收集患者外周血样本。

2. 制备涂片：将外周血样本滴在玻璃片上，用另一块玻璃片将之间的血液涂开。

3. 固定和染色：将涂片加入甲醇中进行5-10秒固定，然后使用Wright染料和尤那染料染色。

4. 显微镜观察：在高倍镜下观察和记录各类细胞的数量、形态和染色特征。

观察结果1. 红细胞（RBC）：红细胞是外周血液中数量最多的细胞，具有边缘光滑、无核、呈圆盘状的特征。

此次观察发现患者红细胞数量在正常范围内，无明显异常。

2. 白细胞（WBC）：白细胞是外周血液免疫系统的核心细胞。

本次观察发现患者白细胞总量为5600/μL，处于正常范围。

各类白细胞计数如下：- 嗜中性粒细胞（NEU）：占总白细胞数的60%，此次患者嗜中性粒细胞计数为3360/μL，正常范围内。

- 淋巴细胞（LYM）：占总白细胞数的30%，此次患者淋巴细胞计数为1680/μL，正常范围内。

- 单核细胞（MONO）：占总白细胞数的5%，此次患者单核细胞计数为280/μL，正常范围内。

- 嗜酸性粒细胞（EOS）：占总白细胞数的3%，此次患者嗜酸性粒细胞计数为168/μL，正常范围内。

- 嗜碱性粒细胞（BASO）：占总白细胞数的2%，此次患者嗜碱性粒细胞计数为112/μL，正常范围内。

3. 血小板（PLT）：本次观察发现患者血小板计数为180×10^3/μL，处于正常范围。

4. 其他细胞类型：除了上述主要的细胞类型外，外周血涂片还观察到了红细胞和白细胞之外的其他细胞，如巨核细胞和浆细胞等。

在本次观察中，这些细胞未见异常。

外周血细胞形态学检验
外周血细胞形态学检验是通过对患者的外周血液样本进行显微镜检查，观察和描述各类血细胞（红细胞、白细胞和血小板）的形态结构，以了解患者的血液情况。

这种检验通常由临床实验室的医学实验室专业人员进行。

具体步骤包括：
一、采集外周血样本：通过采血针抽取一小量患者外周血。

二、制备血涂片：将采集的外周血涂抹在载玻片上，通过专用的技术制备出薄而均匀的血涂片。

三、染色：对血涂片进行染色，常用的染色方法包括Wright染色或Giemsa染色。

这些染色方法能够突出血细胞的核和胞浆结构，使其在显微镜下更容易观察。

四、显微镜观察：将染好色的血涂片放在显微镜下观察。

实验室技术人员会仔细检查红细胞、白细胞和血小板的数量、形状、大小、颜色、核形态等方面的特征。

五、形态学描述：根据观察结果，进行详细的形态学描述。

这可能包括有关红细胞形态（比如贫血、红细胞异常）、白细胞形态（比如感染、白血病）和血小板形态（比如凝血功能异常）的信息。

外周血细胞形态分析报告摘要外周血细胞形态分析是一种常见的临床检查方法，通过观察和描述血液中各类细胞的形态特征，可以为医生提供诊断和治疗患者的参考依据。

本文将详细介绍外周血细胞形态分析的步骤和注意事项。

1. 准备样本在进行外周血细胞形态分析之前，首先需要采集患者的外周血样本。

通常，医生会在患者的肘部内侧或手背的静脉附近进行采血。

采血时，需要使用无菌技术，以避免样本污染。

采集到的外周血样本通常需尽快送至实验室进行分析。

2. 细胞涂片制备将外周血样本送至实验室后，需要制备细胞涂片以供观察。

制备细胞涂片的步骤包括：取一滴外周血样本，将其均匀涂布于玻璃载玻片上，然后用另一片载玻片将其横向涂开。

制备完毕后，将载玻片晾干。

3. 染色制备好的细胞涂片需要进行染色，以增强细胞形态的对比度。

常用的染色方法有Wright染色、Giemsa染色等。

染色液可以根据实验室的标准制备或购买。

将细胞涂片浸入染色液中，一般需要几分钟至十几分钟的时间，然后取出并用水冲洗。

4. 镜检观察经过染色的细胞涂片可以放置在显微镜下进行观察。

观察时，可以使用低倍镜（如10倍或20倍）进行初步扫描，然后再切换到高倍镜（如50倍或100倍）进行详细观察。

通过观察细胞的形态特征，可以识别出红细胞、白细胞和血小板等不同类型的细胞。

5. 形态分析在观察细胞时，需要注意细胞的大小、形状、颜色、核形态等特征。

例如，红细胞的正常直径约为6-8微米，呈双凸形，中间凹陷，颜色为淡红色；而白细胞的大小和形状则因类型不同而有所差异。

通过比对细胞的形态特征与正常值的对比，可以判断患者是否存在异常情况。

6. 结果分析根据细胞形态分析的结果，可以得出相应的结论。

例如，红细胞形态异常、白细胞数量增多或减少、血小板形态异常等都可能与某些疾病相关。

医生可以根据分析结果判断患者是否存在潜在的疾病风险，并制定相应的治疗方案。

7. 注意事项在进行外周血细胞形态分析时，需要注意以下几点： - 采血时要严格遵守无菌技术，以防止样本污染。