微生物标本的处理1.尿液样品采集和处理通常留取晨起第一次尿液（此时尿液在膀胱内储存4h以上）；尿液采集后要及时送检，并保证2h内接种；不能及时送检和接种时，尿液应置4~8℃冰箱保存；冷藏样品应于8h内接种；怀疑沙门氏菌时，应于发病2w左右采集尿液，怀疑钩端螺旋体感染时，应于发病后2w 采集尿液，上述时间此时阳性率高。
尿液微生物学检验样品采集方法如下：（1）中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水或1:1000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，无菌生理盐水冲去消毒液，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5~10ml盛于带盖的无菌容器内送检。
（2）导尿法：用导尿管导取10`15ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检（不可采集尿液收集袋中的尿液送检）。
（3）集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁容器中留取24h尿液，取其沉渣10~15ml 送检。
（4）耻骨上膀胱穿刺法：培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用。
（5）肾盂尿采集法：必须由临床医生采集。
注意事项：正常人的尿液是无菌的，除外尿道有正常菌群外，还有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌，故应该注意无菌采集。
2.粪便样品采集和处理(1)采集时间：①腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；②伤寒患者于发病2w以后采集粪便；③怀疑霍乱时立即采集粪便送检。
(2)采集方法：①自然排便法：取新鲜粪便的粘液、脓血、或絮状物等有意义成分，2~3g或1~2ml，生物菌容器内或置于保存液或増茵液内送检；或疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中（ph8.6）。
②直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难者及幼儿可采用此法，将拭子前段用无菌甘油或生理盐水湿润，然后插入肛门约4~5cm（幼儿2~3cm），轻轻在直肠内旋转。
擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。
3.痰及下呼吸道样品采集和处理（1）自然咳痰法：①晨痰为佳；②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿；③再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；④痰量不得少于1ml：⑤痰咳出困难时可先雾化吸入Nacl溶液（100g/L，加温到45℃）使痰容易咳出。
查结核分枝杆菌，应留取24h痰。
（2）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。
（3）支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。
①气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液。
②气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或用支气管刷直接取得。
（4）呼吸道样品采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次，立即放入无菌试管中。
注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。
痰液样品要求涂片镜检：达到低倍镜视野中≤10个鳞状上皮细胞，以及≥25个白细胞方可送检。
4.血液及骨髓培养样品（1）学培养样品采集指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征：①发热（≥38℃）或低热（≤36℃）②寒热③白细胞增多（＞10×109/L，特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时）④粒细胞减少（未成熟的多核白细胞＜1×109/L）⑤血小板减少⑥皮肤黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭（2）最常用的方法为血液赠菌培养法。
培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。
每瓶需要8~10ml。
儿童瓶为需痒瓶每瓶需血液1~3ml,另外，脑积液和胸腹水也可用血液赠菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，样品量与血液相同。
①抗生素治疗前，严格无菌静脉采血8~10ml（儿童1~4ml）；不同时间或不同部位采取2~3份血液样品；②无菌注入专用培养瓶（成人、儿童、需氧瓶、厌氧瓶、L型菌需要不同培养瓶）中送检；③如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取不同时间的3份血液样品送检；④必要时可需氧菌、厌氧菌（占10％）和L型菌同时培养；⑤疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养；⑥必要时可取骨髓1~2ml，无菌注入专业培养瓶中送检。
注意事项：血液在正常情况下为无菌样品，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。
一般病人在发病初期1~2天或发热高峰时采集血液样品，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。
对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。
5.脑脊液（1）采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好在应于抗生素之前采集脑脊液。
（2）采集方法：无菌腰穿采集脑脊液3~5ml分装到3个无菌小瓶中（各1~2ml）。
用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。
6.穿刺液培养样品（1）穿刺液培养样品包括胸水、腹水、心包液、关节腔、鞘膜液等。
（2）采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后2~3d采集样品。
（3）采集方法：①无菌操作穿刺抽取样品或外科手术采集样品；②样品采集量应＞1ml（结核分枝杆菌培养时应为1~5ml）;③样品采集后注入无菌小瓶或无菌试管中立即送检；④可在盛器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml样品）。
7.胃液及胆汁培养样品抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检；胆汁培养样品由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5ml，置无菌管内送检；胃液和胆汁采集后必须立即送检。
8.脓汁和病灶分泌物培养样品采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。
样品采集后立即置无菌管内送检。
9.眼、耳、鼻、咽拭子培养样品（1）采集眼分泌物：先用无菌生理盐水冲洗盐步，然后用棉拭于拭干，再用无菌棉拭于采集分泌物。
（2）采集咽分泌物：先用清水漱口。
用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹数次。
切勿接触口腔和舌粘膜。
（3）采集耳、鼻或鼻咽分泌物：直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接触周围粘膜或皮肤。
样品采集过程中应注意避免粘膜上的正常菌群污染，样品采集后联通拭子一起置于无菌管内送检。
10.泌尿生殖道培养样品(1)尿道分泌物：清洗尿道、采取尿道、溢出的脓性等分泌物，或用无菌拭子插入尿道2-4cm处轻轻转动后取出，置无菌试管中送检。
(2)阴道、宫颈分泌物：通过阴道扩张器，用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管1-2cm处分泌物，置无菌试管中送检。
避免阴道分泌物污染拭子。
(3)宫颈分泌物：在必要时用外套保护膜的灭菌导管抽取。
(4)前列腺液|：清洗尿道、冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于无菌容器内送检。
(5)精液：受检者应5d未排精，清洗尿道后手淫或体外排精法，射精于无菌容器内送检。
(6)溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处，用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物，置无菌试管中送检。
13.真菌感染培养样品（1）浅部真菌感染样品采集①皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；②指（趾）指甲消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片5~6片置无菌容器内送检；③毛发：采集根部断折处，至少5~6根送检。
（2）深部真菌感染样品采集①血液：无菌采血8~10ml，注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过8~9h；②脑脊液采样量不少于3~5ml，分别注入两支无菌试管中送检（一般做真菌培养和墨汁染色一管测隐球菌抗原和其他培养）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染样品采集同一般菌培养样品。
14.皮肤（主要指伤口、创面脓液等）样品采集方法（1）对采集样品部位应首先清除污垢，再用碘酒或酒精消毒，防止皮肤表面污染菌混入影响检验结果，盛放样品器皿应无菌。
（2）封闭性脓肿：病灶局部消毒后，以无菌干燥注射器穿刺抽取，将采集的脓液注入灭菌试管，对疑似厌氧菌的脓液，抽取脓液后立即派出注射器内的空气，同时将针头插入灭菌橡皮塞，防止空气进入。
（3）开放性脓肿及脓性分泌物：先做局部消毒再用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部分泌物，并置无菌容器内送检。
（4）大面积烧伤的创面分泌物因创面的部位不同，细菌种类不同，故应用无菌棉拭子多部位采集脓液及分泌物，置于无菌试管。
注意事项：烧伤12h内的创面及分泌物中细菌检出率较低。
15.空气培养样品采集方法（1）采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
（2）采样高度：与地面垂直高度80~150cm。
（3）布点方法：室内面积≤30㎡，设一条对角线是哪个取三点，即公司一点，两端各距墙1m处取一点；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北距墙1m。
（4）采样方法：用9cm直径普通培养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。
（5）样品保存：①采样后必须尽快送检。
②在平皿上注明各采自哪个室，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检中平皿和平皿盖子分离而造成污染。
③将封好的平皿装入自封袋，并将自封袋封好后送检。
申请项目包括：血培养及鉴定+药敏试验尿培养及鉴定+药敏试验一般细菌培养及鉴定+药敏试验真菌培养及鉴定+药敏试验。
