还原糖含量检测试剂盒说明书 微量法

植物组织果糖（FT）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC2455规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：5mg/mL标准液1mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存；试剂四：粉剂0.5g×1瓶，常温保存。

产品说明：果糖是一种最为常见的己酮糖，是葡萄糖的同分异构体，以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中，能与葡萄糖结合生成蔗糖。

果糖是最甜的单糖，广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

在酸性条件下果糖与间苯二酚反应，生成有色物质，在480nm下有特征吸收峰。

所需的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。

操作步骤：一、果糖提取：称取约0.1g样本，常温研碎；加入1mL提取液，适当研磨后快速转移到有盖离心管中；置于80℃水浴锅中10min（盖紧，以防止水分散失），振荡3~5次，冷却后，4000g，常温离心10min，取上清；加入少量（约2mg）试剂四，80℃脱色30min（盖紧，以防止水分散失）；再加入1mL提取液，4000g，常温离心10min，取上清液测定。

二、测定步骤第1页，共2页1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。

2、样本测定，（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：试剂（μL）空白管标准管测定管样本30试剂一30蒸馏水30试剂二210210210试剂三606060混匀，80℃水浴内反应10min（盖紧，以防止水分散失），冷却后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中测定480nm处光吸收值,记为A空白管、A标准管、A测定管，并计算△A测定=A测定管-A空白管、△A 标准=A标准管-A空白管。

三、果糖含量计算：1、果糖含量（mg/mg prot）＝C标×△A测定÷△A标准×V样总÷（Cpr×V样总）＝5×△A测定÷△A标准÷Cpr2、果糖含量（mg/g鲜重）＝C标×△A测定÷△A标准×V样总÷W＝10×△A测定÷△A标准÷WC标准管：标准管浓度，5mg/mL；V样总：加入提取液体积，2mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。

氧化型谷胱甘肽（GSSG微量法货号：BC1185规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体100 mL×1瓶4℃保存试剂二液体130 μL×1支4℃保存试剂三液体20 mL×1瓶4℃保存试剂四液体2.5 mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六液体12.5 μL×1瓶4℃保存标准品粉剂10 mg×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：有毒易挥发试剂，涉及该试剂的步骤建议在通风橱内操作。

2、试剂五：临用前加入2.5 mL蒸馏水，溶解后-20℃分装保存；3、试剂六：液体置于试剂瓶内EP管中。

临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按1:20（V:V）的比例配制备用，现用现配；4、标准品：用1 mL蒸馏水溶解，浓度为10 mg/mL，4℃保存。

产品说明：氧化型谷胱甘肽（GSSG）是谷胱甘肽（GSH）的氧化形式，又称为二硫代谷胱甘肽，是两分子的谷胱甘肽氧化而成。

GSSG会被谷胱甘肽还原酶还原成GSH，因此机体中大多数是以还原型形式存在。

测定细胞内GSH 和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

本试剂盒利用谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm处具有最大光吸收的特点，通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽还原酶将GSSG还原为GSH，借此测定氧化型谷胱甘肽的含量。

技术指标：最低检出限：3.211 μg/mL线性范围：3.9-125 μg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

货号：MS2503 规格：100管/48样植物蔗糖酶（sucrase）试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的关键酶之一，能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。

测定原理：本试剂盒采用3.5－二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。

其原理是3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。

此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体2mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，4℃保存，用时加入1mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；试剂三：液体3mL×1瓶，常温保存；样品测定的准备：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。

2、样本测定，（在EP管中依次加入下列试剂）：测定-A对照，每个测定管需设一个对照管。

第1页，共2页蔗糖酶活力计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.1296x -0.12；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

2、按照蛋白浓度计算单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化水解1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。

蔗糖酶活力(μg/min/mgprot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。

糖化酶活性检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4240100T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体70mL×2瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二液体18mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前取1瓶加入10mL提取液，充分混匀后沸水浴直至溶解（约10min），2-8℃保存4周；2、标准品：10mg无水葡萄糖，临用前加1mL提取液溶解为10mg/mL的葡萄糖标准品备用，2-8℃保存两周；糖化酶，即葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3），又称γ-淀粉酶。

糖化酶是由一系列微生物分泌的，具有外切酶活性的胞外酶，主要作用是从淀粉、糊精、糖原等碳链上的非还原性末端依次水解α-1,4糖苷键，切下一个个葡萄糖单元，对于支链淀粉，当遇到分支点时，它也可以水解α-1,6糖苷键由此将支链淀粉全部水解成葡萄糖。

多应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸，甘油，淀粉糖等工业中，是我国重要的工业酶制剂之一。

糖化酶将可溶性淀粉生成葡萄糖，碱性条件下，葡萄糖与3,5-二硝基水杨酸共热后生成红棕色化合物，在540nm 处有最大光吸收，在一定范围内葡萄糖的量与反应液颜色深浅成正比，以此测定糖化酶的活力。

Soluble Starch Glycosylase GlucoseGlucose+3,5-Dinitrosalicylic Acid3-Amino-5-Nitrosalicylate（540nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、研钵/匀浆器，超声破碎仪、冰和蒸馏水。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。

还原糖检测的操作步骤还原糖检测的操作步骤1. 引言还原糖是指具有还原性的单糖和部分还原性的多糖，其检测是一种常用的分析方法，用于确定食品、饮料等样品中的糖含量。

本文将详细介绍还原糖检测的操作步骤，希望能帮助读者更全面地理解和掌握这个过程。

2. 实验所需材料在进行还原糖检测前，我们需要准备以下实验所需材料：- 还原糖检测试剂盒- 待测样品- 蒸馏水- 试管- 移液器- 离心管- 离心机- 恒温水浴器- 显色板3. 操作步骤3.1 样品制备将待测样品称取适量，加入适量的蒸馏水，充分混合均匀。

如需测定饮料或其他高浓度的样品，可以适当稀释，确保待测溶液的浓度在检测范围内。

3.2 样品处理将制备好的样品离心10分钟，以除去悬浮物。

借助移液器，小心地取出上清液转移至试管中。

3.3 加标处理在处理前期，可以加入一定浓度的加标溶液作为内标，以提高结果的准确度和可靠性。

3.4 消解处理将取自样品的上清液放入恒温水浴器中，使其保持在指定温度下。

加入相应的还原糖检测试剂盒中的消解剂，并严格按照试剂盒说明书的操作方法进行消解处理。

消解时间和温度会根据不同的试剂盒和样品要求而有所不同。

3.5 检测操作将消解后的样品均匀摇匀，并按照试剂盒的要求加入相应的试剂，一般是加入试剂A和试剂B。

摇匀后，放入恒温水浴器中反应一段时间。

3.6 显色反应将反应后的溶液转移到显色板上，并将显色板放入离心机中离心。

根据试剂盒的要求进行离心转速和离心时间的设置。

3.7 光度测定将离心后的显色板放入光度计中，选择合适的波长进行测定。

根据试剂盒的说明，可以设定合适的样品数量来进行测定。

3.8 结果分析根据光度计测得的吸光度值，结合试剂盒提供的标准曲线，计算出样品中还原糖的含量。

4. 本文观点和理解作为一种常见的定量分析方法，还原糖检测在食品、医药等领域具有广泛的应用。

在具体操作时，需要严格按照试剂盒的要求进行操作，并注意样品的制备、处理和消解等步骤。

还原糖的测定方法还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质，通常用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖等在食品和生物样品中的含量。

测定还原糖的方法有很多种，其中包括费林试剂法、硫酸铜比色法、硼酸硫酸铜比色法等。

本文将介绍硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法两种测定还原糖的方法。

硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。

2. 配制硫酸铜溶液，取一定容量的硫酸铜溶液，通常浓度为0.1mol/L。

3. 反应，将样品溶液与硫酸铜溶液混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成红色的氧化铜沉淀。

4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。

5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。

硼酸硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。

2. 配制硼酸硫酸铜试剂，将一定量的硼酸溶液与硫酸铜溶液混合制备硼酸硫酸铜试剂。

3. 反应，将样品溶液与硼酸硫酸铜试剂混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成蓝色的氧化铜沉淀。

4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。

5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。

以上两种方法均是通过还原糖与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。

在具体操作时，需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制以及仪器的使用等细节，以确保测定结果的准确性和可靠性。

总结，硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法是常用的测定还原糖的方法，通过与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。

在实际操作中，需要严格按照方法步骤进行操作，以获得准确可靠的测定结果。

硝酸还原酶（NR）活性检测试剂盒说明书微量法货号：BC0085规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件诱导剂储备液液体100 mL×1瓶4℃保存提取液液体120 mL×1瓶4℃保存试剂一液体15 mL×1瓶-20℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存溶液的配制：1、诱导剂储备液：用蒸馏水10倍稀释后使用，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。

现配现用。

2、试剂二：临用前加入2 mL提取液溶解，可分装后-20℃保存，避免反复冻融。

-20℃保存2周。

产品说明：NR（EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。

NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋+H2O，NADH在340nm下有特征吸收峰，340nm下吸光值的变化即可表示酶活。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可）避光，浸泡2h，取出样本，滤纸吸干后，-20℃冷冻30min，取出样本，滤纸吸干。

（一般不需要诱导处理，预实验结果没有活性则需要进行诱导处理）2、称取约0.1g样本，加入1mL提取液，冰浴研磨，4000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（μL）测定管空白管样本12-提取液6880试剂一108108试剂二1212充分混匀后测定340nm下的初始值A1，25℃（其他物种）或37℃（哺乳动物）反应30min后再次测定吸光值A2，计算ΔA测定管=A1测定管-A2测定管，ΔA空白管= A1空白管-A2空白管，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管。

一氧化氮（NO）含量检测试剂盒说明书(货号：NM-W-0132 微量法100T/96S)一、产品简介：一氧化氮（Nitric Oxide，NO）是一种气态分子自由基，在生物体内作为重要的信使分子和效应分子，参与调节血管形成、神经传递、免疫调控及肿瘤生长等多种生理及病理过程。

此外，NO是植物的主要生物活性分子，在植物的生长发育和对胁迫的反应过程中参与了多种生理活动，如种子萌发、叶扩展、根生长、花器官发生、气孔运动的调节以及植物的抗逆反应等。

NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-。

在酸性条件下，NO2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、超声细胞破碎仪、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、冰和蒸馏水。

四、操作步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、预实验样本制备℃ 组织样本：称取0.2g样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆后，10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为2~5：10的比例进行提取。

℃ 细菌/细胞样本：建议1000万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔7s，总时间5min），10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为1000~2000：1的比例进行提取。

℃ 血清（浆）等液体样本：直接测定。

若液体有浑浊则离心取上清测定。

2、标准溶液的配制：把10μmol/mL标准品母液用蒸馏水稀释成1.25μmol/mL的标准溶3、预实验上机操作：℃ 酶标仪预热30min以上，调节波长至550nm。

4、正式实验：℃ 若预实验∆A 测定小于0.005，可以增加样本量后再进行测定；如果∆A测定大于1.5，建议将样本上清用稀释液适当稀释后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；℃ 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；℃ 正式实验按照预实验操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

SGD-Ⅳ型全自动还原糖测定仪使用说明书山东省科学院生物中心（生物研究所） 山东省生物传感器重点实验室一、基本原理全自动还原糖测定仪（SGD-Ⅳ型）是根据费林试剂测定原理设计而成的，其原理与目前国家标准一致；费林试剂是一种氧化剂，由甲、乙液组成。

测定时一定量的甲乙液混合，首先形成氢氧化铜，然后形成酒石酸钾铜络合物。

次甲基蓝作为滴定终点指示剂，在氧化溶液中呈蓝色，被还原后呈无色。

用标准还原糖滴定时，还原糖首先使铜还原，至铜被还原完毕，才使次甲基蓝还原成无色，即为滴定终点。

在滴定过程中，溶液颜色逐渐变化：蓝色→深蓝色→浅蓝色→紫红色→淡紫红色→在终点时突然变化至无色透明。

采用光电转换装置，检测滴定过程中透光率的变化（见图一）；根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点；根据达到滴定终点时消耗的标准还原糖量，由控制系统自动计算出样品中还原糖含量，并显示和打印结果。

滴定过程电信号变化及控制原理（见图二）如下：图一滴定电压的变化曲线图二全自动还原糖测定仪控制原理图二、仪器结构仪器由反应系统、自动控制系统和机壳三部分组成。

1、反应系统核心部件为反应池，其剖面结构如图三所示。

图三 全自动还原糖测定仪反应池结构图反应系统由滴定池主体构成；滴定池左右两侧有入射光源和光电转换器，滴定池前后两侧有液体进出管道，滴定池内侧有温度传感器和液体加热电极，根据需要调整液体温度；滴定池底部有电磁搅拌器，使滴定液体均匀混合；上部是进样口，可用移液器将被测样品注入滴定池。

2、自动控制系统包括电源电路、控制电路、控制面板、微型打印机；按设定程序控制滴定池液体的进出、液体温度、搅拌、光电反应信息的收集和转换、计算、测定结果显示及打印。

注射泵自动加入标准液、滴定液、两个蠕动泵可自动完成清洗和排空。

全自动还原糖测定仪泵系统如图四所示。

图四全自动还原糖测定仪泵系统结构图泵管连接：（1）清洗泵右端口连接硅胶管接蒸馏水瓶（需将该连接硅胶管置于蒸馏水中），左端口连接硅胶管接反应池最上面不锈钢管道（出厂时已连接上）。