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《医学微生物学》第11章弧菌属练习题及答案【知识要点】1.掌握：霍乱弧菌的生物学性状、致病性。
2.熟悉：（1）霍乱弧菌的微生物学检查法与防治原则。
（2）副溶血性弧菌的致病性3.了解：副溶血性弧菌诊断与防治。
【课程内容】第一节霍乱弧菌一、生物学性状（一）形态与染色（二）培养特性与生化反应（三）抗原构造与分型（四）抵抗力二、致病性与免疫性（一）致病物质（二）所致疾病（三）免疫性三、微生物学检查法（一）标本（二）直接镜检（三）分离培养（四）血清学诊断四、防治原则第二节副溶血性弧菌一、生物学性状（一）形态与染色（二）培养特性与生化反应（三）抗原结构与分型（四）抵抗力二、致病性（一）致病物质（二）所致疾病三、诊断与防治【应试习题】一、名词解释1．霍乱肠毒素（CT）2．O139群霍乱弧菌3．O1群霍乱弧菌4．非O1群霍乱弧菌5．神奈川现象二、填空题1．霍乱弧菌可分为O1群霍乱弧菌、_______和_______，前者包括_______和_______两个生物型。
2．霍乱弧菌耐_______不耐酸，其选择性增菌培养基是_______。
3．霍乱肠毒素的A1肽链作用于腺苷酸环化酶，使_______不断转化为_______，引起肠液大量分泌，导致严重腹泻。
4．霍乱肠毒素的毒性中心是_______，结合中心是_______，后者与肠上皮细胞的_______结合，使毒素分子变构。
5．霍乱弧菌根据O抗原不同可分为_______个血清群，其中_______和_______引起霍乱。
6．副溶血性弧菌是一种嗜_______性弧菌，能引起_______。
7．O1群霍乱弧菌有两个生物型分别是__________和__________。
三、单选题（一）A型题1．霍乱弧菌的主要致病物质不包括A．鞭毛 B．菌毛 C．毒素共调菌毛D．外毒素 E．内毒素2．关于霍乱弧菌的生物学性状，叙述错误的是A．革兰阴性弧菌，有单鞭毛B．霍乱弧菌耐碱不耐酸C．在霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”现象D．E1Tor生物型霍乱弧菌抵抗力强，是因为有芽胞形成E．有菌毛和荚膜3．关于霍乱肠毒素，叙述正确的是A．A亚单位与细胞受体结合B．B亚单位进入细胞发挥毒性作用C．激活鸟苷酸环化酶，使cGMP升高D．其受体是糖蛋白 E．不耐热外毒素致病4．霍乱病人排泄物的特点A．脓血便 B．水样便 C．米泔水样便D．果酱样便 E．柏油样便5．关于霍乱的叙述错误的是A．属于烈性传染病B．人类是霍乱弧菌的唯一易感者C．病愈后，少数病人可长期带菌D．病后的免疫力短暂E．接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力6．弧菌主要分布于A．空气 B．水 C．土壤 D．人体肠道 E．动物肠道7．关于ElTor生物型霍乱弧菌与古典生物型霍乱弧菌所致疾病的叙述，下列错误的是A．两者感染后，机体免疫力有强弱之别B．两者所致疾病的临床表现轻重不一C．人类是唯一易感者D．传染源均为病人或带菌者E．传播途径均为污染水源或食物经摄入8．对可疑病人的“米泔水”样大便作细菌培养，应接种于A．S．S琼脂平板B．巧克力色琼脂平板C．血清肉汤培养基D．血琼脂平板E．碱性蛋白胨水培养基9．副溶血性弧菌引起的食物中毒经哪一途径传播A．污染用水 B．病畜肉C．病鼠尿污染食物 D．苍蝇污染食物 E．海产品或盐渍制品10．一男性病人，43岁，头晕，腹胀，剧烈腹泻呈水样便伴呕吐l天。
弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、弯曲菌属、螺杆菌属●共性：G-直或微弯杆菌，氧化酶+,分属不同科。
●第一节弧菌属●定义：一群菌体短小、弯曲成弧形或直杆状G-菌，端单H，运动迅速；兼性厌氧，葡F，多需2~3%盐；氧+；●弧菌科: 弧菌属、异单胞菌属（气、邻单胞菌、发光杆菌属、利斯顿菌属、许旺菌属......弧菌属霍乱、副霍乱：O-1群霍乱弧菌、O139群霍乱弧菌胃肠炎：非O-1群霍乱弧菌食物中毒：副溶血性弧菌胃肠炎、伤口感染菌血症：其他弧菌：拟态弧菌、河弧菌、溶藻弧菌、霍利斯弧菌、创伤弧菌、麦契尼可夫弧菌、......等）鉴别要点●弧菌：氧化酶+（区别于肠菌科）葡F（区别于假单胞菌和其他非发酵菌）霍乱弧菌临床意义一、致霍乱——烈性肠道传染病依O抗原（至少）分155个血清型O1群：生物型分古典生物型（霍乱）、ElTor生物型（副霍乱）血清型分小川型（AB）稻叶型（AC）彦岛型（ABC）O139（1992年分离）遗传及毒力基因与O1群似。
发病机制：过程：1、不洁饮食，粪-口途径传播胃酸易感2、菌毛（定植于肠粘膜上皮细胞）3、霍乱毒素（CT，属肠毒素）4、细胞分泌水、电解质；肠腔内水、钠潴留5、剧烈吐泻（“米泔水”样粪便）6、继而体液丢失、缺水、水电解质紊乱、休克、死亡微生物检查：（一）标本的采集和运送——早期用药前，肛拭或棉拭粘取患者或疑似患者大便、呕吐物以及外环境样品；采得的标本应立即接种于培养基（床边接种，置于灭菌带棉塞试管或碱性胨水中），尽早送检;较远则应放卡-布运送培养基（旧时为“文─腊氏”保存液内1:2),严密不易碎容器,室温专人送检。
需增菌的标本一般要在18小时内完成。
检验程序：步骤：见标本（呕吐物，米泔水样粪便）分别进行1、直接革兰染色Gˉ弧菌，运动活跃；2、分离培养碱性胨水、凝集反应；3、PCR肠毒各培养上的生长特征：●碱性胨水（APW，PH8.5）: （增菌液）迅速,6～9h（El：2~3h）,大量生长, 薄菌膜;●碱性琼脂: 中等大圆齐透或半无色或带青砖色如水滴状；●TCBS: 大、黄(蔗+）、轻凸;●双─洗: 大、圆、扁、齐、透或半；●亚─洗：中心呈浅灰褐色；●SS：不长;●血琼脂：古典——草绿色环；ElTor——透明溶血环生化特性：cb+明胶+“漏斗状”生长,霍乱红反应+,LOA++-,U-C+ONPG+葡乳麦甘蔗阿+-+++-，DNA酶+，0%~6%盐+羊RBC溶血、鸡RBC凝集、V-P、多B敏感、IV组Ф裂解、V组Ф裂解古典生物型/ El-Tor生物型：---++-/D++--+废弃物处理：1．污染饮用水须严格消毒处理；2．污水需经消毒处理后才能排放；3．被污染食物就地封存，消毒处理；4．粪便消毒处理达到无害化；5．污染物品须严格消毒或焚烧；6．病人尸体由治疗病人的医疗单位负责消毒处理，处理后应当立即火化。
第10章弧菌与气单胞菌弧菌属（Vibrio）是一大群氧化酶试验阳性，菌体短小，弯曲成弧形动力活泼的革兰阴性菌。
在自然界中分布广泛，以水中最多。
目前已知本菌属有56个种，至少有12个种与人类疾病有关，其中以霍乱弧菌、副溶血性弧菌最为重要。
气单胞菌属（Aeromonas）广泛分布于自然界中的淡水、海水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中。
原隶属于弧菌属，后发现其与弧菌的基因并不紧密相关，1956年Collweil等将气单胞菌属从弧菌科分出，隶属于新建的气单胞菌。
分为四个种，即亲水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、温和气单胞菌及杀鲑气单胞菌。
有致病性菌株和非致病性菌株之分，致病性菌株可引起人类腹泻等多种感染。
第一节霍乱弧菌霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是烈性传染病霍乱的病原菌，霍乱已在全球发生七次世界性大流行，死亡率甚高，为国际检疫的重要传染病之一，为我国甲类法定传染病。
一、生物学性状（一）形态与染色革兰染色阴性，长0.8~3μm、宽0.5~1.5μm，弯曲呈弧型或逗点状菌，从病人新分离的细菌形态典型（图9-1），人工培养后常呈杆状而不易与其他肠道菌区别。
取病人米泔水样粪便直接涂片染色镜检，可见其相互排列如“鱼群”状。
无芽胞和荚膜，有菌毛，菌体一端有一根单鞭毛，运动非常活泼。
悬滴观察，可见其呈穿梭或流星样运动。
有的有荚膜（O139）。
图10-1霍乱弧菌（扫描电镜，单位长度＝1μm）（箭头所指可见霍乱弧菌极端单鞭毛）（二）基因组特征霍乱弧菌基因组由2条环状染色体组成。
大染色体约2.91Mb，G+C占46.9%；小染色体约1.072Mb，G+C占47.7%。
总共有3885个ORF。
霍乱毒素基因位于大染色体上整合的温和丝状噬菌体CTXΦ基因组内。
（三）培养及生化反应兼性厌氧，生长繁殖温度范围广（18-37℃），营养要求不高，在普通蛋白胨水中即可生长，于pH8.0~9.0的碱性环境中生长更佳，因其他细菌在此环境中不易生长，故常用pH8.8-9.2的碱性蛋白胨作为选择培养基。
弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。
前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。
一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。
世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型01群霍乱弧菌；③非01群霍乱弧菌；④其他弧菌（副溶血性弧菌）。
对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
（一）霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。
1.生物学特性（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，无芽胞，有菌毛，有些菌株有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。
耐碱不耐酸。
可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水中，经35℃培养6～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。
碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板上，因还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。
（3）生化反应：能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。
迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。
（4）抗原结构与分型：霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。
H抗原为弧菌属所共有，特异性低。
O抗原特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。
