血清甘油三酯与胆固醇的测定ppt课件

生化分析相关概念 准确度为一次测量结果与被测量的真值之间的一致程度。 准确度是一个定性的概念，用于定性描述，如谈准确度高、低，是否合格。
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测量误差:是测量结果减真值之差。 误差和准确度属于不同概念，两者之间不能划等号。
2
不准确度的数字表达是不确定度 (标准差和置信区间的半宽度表示)。 可以理解为测量结果与约定真值之差的范围。
妊娠、口服避孕药、酗酒等。
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临床意义 富含TG的脂蛋白是CHD的独立危险因子，TG增加表明患者存在代谢综合症，
需进行治疗。 TG降低比较少见，甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能减退和肝功能严重损
伤时可见。
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磺酸盐 Mg2+
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计算TG的含量 甘油三酯浓度（mmol/L)=A样/A标×标准液浓度
(2.26mmol/L) 单位换算：
甘油三酯mmol/L×88.5=甘油三酯mg/dL
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实验操作(自动分析）
空白管 校准管 质控管 样本管
试剂1 （ul） 240
240
240
240
蒸馏水（ul） 3
—— ——
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TG的生物化学 二 TG又称中性脂肪，由3分子脂肪酸和1分子甘油酯化而成，是体内能量的主要
来源。TG处于脂蛋白的核心，在血中以脂蛋白形式运输。
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除TG外，外周血中还存在甘油二酯、甘油一酯（两者总和不足TG的3%）和游离 甘油（FG）。各种脂蛋白中，乳糜微粒（CM）、极低密度脂蛋白（VLDL） 及其残粒中，TG含量高，被统称为富含TG脂蛋白（TRL），也称残粒样脂蛋 白（RLP）
3
生化分析相关概念 正确度 大量测量的均值与真值的接近程度。用偏倚表示不正确度 。 偏倚值(Bias=Xi-x),

工作液（ml） 1.5
1.5
1.5
甘油三酯测定
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2 、 将 样 品 混 匀 后 ， 置 于 37℃ 水 浴 箱 中 水 浴 10min。
3、用分光光度计在波长546nm处，以空白管O 调零，分别读取两管吸光度值，记录测定管T、标 准管S的吸光度值AT、AS 。
甘油三酯测定
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五、实验结果计算及分析
A=K·C·L
(K为吸收系数，对同一物质来说为一常数)
甘油三酯测定
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使用方法：
1.检查 ：指针位于“0”。 2.打开电源，打开比色皿暗箱盖，预热20分钟。
3.加样：夹毛面，擦干。 4.放置好比色皿，选择波长、调灵敏度。
甘油三酯测定
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5.反复调0、调100至稳定。 6.合盖，读数，记录，取样，清洗，关闭仪器。
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微量五档可 调移液器 使用方法：
1.将吸嘴套在移液器头上轻轻转动，以保证密封。
No Image
2.使用前应先将移液器吸液和排液几次，润洗吸嘴和保持 腔内外气压一致。
3.选择量程。
4.垂直地握住移液器，将按钮按到第一停止点，然后把吸 嘴浸入到液面下2～3mm，再缓慢放松按钮，使之复位，等 待1～2秒后，从液体中取出，并避免碰撞任何物体。
（二）实验试剂
1、血清（样本） 2、蒸馏水 3、工作液 4、甘油三酯标准液（标本）：2.26 mmol/L
甘油三酯测定
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四、实验内容和操作过程
1、取3支干净试管，分别标明测定（T）、标准（S） 和空白管（O），然后按表加入试剂：
加入物
测定管T 标准管S 空白管O
血清（ml）
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标准液（ml）
15
计算公式： 甘油三酯（mmol/L）= 测定管吸光度AT

谢谢！
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临床意义：
只有伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情况 时才有病理意义。 通常将高脂蛋白血症 分为Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等6型， 除Ⅱa型以外都有高TG：①Ⅰ型是极为罕 见的高CM血症，原因有二，一为家族性 LPL缺乏症，一为遗传性的apoCⅡ缺乏症。 ②最常见的是Ⅳ型，其次是Ⅱb型，后者 同时
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临床意义：
)，但无乳糜微粒血症。诊断还有赖于： 脂蛋白电泳示宽β带;血清在密度 1.006g/ml下超速离心后，其顶部(VLDL) 作电泳分析证明有漂浮的β脂蛋白或电泳 迁移在β位的VLDL存在，化学分析示 VLDL-C/血清TG>0.3或VLDL-C/VLDLTG>0.35;apoE分型多为E2
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临床意义：
高TG血症也有原发的与继发的两类， 其中包括家族性高TG血症与家族性混合型 高脂(蛋白)血症等。继发的见于糖尿病、 糖原累积病、甲状腺功能不足、肾病综合 征、妊娠、口服避孕药、酗酒等，但不易 分辨原发或继发。高血压、脑血管病、冠 心病、糖尿病、肥胖与高脂蛋白血症等往 往有家族性集聚现象，其
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临床意义：
间可能有因果关系，但也可能仅仅是伴发 现象;例如糖尿病患者胰岛素与糖代谢异 常可继发TG(或同时有TC)升高，但也可能 同时有糖尿病与高TG两种遗传因素。冠心 病患者TG偏高的比一般人群中多见，但这 种患者LDL-C偏高与HDL-C偏低也多见。一 般认为单独有高TG不是冠心病的独立危险 因素，
医学检验·各论 血清甘油三脂 内容课件模板

增加膳食纤维摄入
多食用富含可溶性膳食纤维的 食物，如燕麦、豆类、蔬菜、 水果等，有助于降低血脂。
控制饱和脂肪酸和反式脂 肪酸的摄入
减少动物性脂肪和油炸食品的 摄入，以降低血浆中低密度脂 蛋白胆固醇（LDL-C）水平。
适量增加不饱和脂肪酸的 摄入
适量食用富含n-3和n-6多不饱 和脂肪酸的食物，如深海鱼、 坚果等，有助于改善血脂谱。
长期坚持
鼓励患者长期坚持规律运动，以维持良好 的血脂水平。
戒烟限酒对改善血脂水平影响
戒烟
吸烟可导致血浆中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低，戒烟有助于升高HDLC水平。
限酒
适量饮酒可提高HDL-C水平，但过量饮酒可导致甘油三酯水平升高。建议男性每日 饮酒量不应超过25克酒精，女性不应超过15克酒精。
血脂异常判断标准
总胆固醇（TC）
甘油三酯（TG）
正常值范围为<5.2mmol/L，超过此范围可 视为异常。
正常值范围为<1.7mmol/L，超过此范围可 视为异常。
高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）
低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）
正常值范围为>1.0mmol/L，低于此范围可 视为异常。
正常值范围为<3.4mmol/L，超过此范围可 视为异常。
心理干预和睡眠管理
心理干预
通过心理咨询、认知行为疗法等方式，帮助患者缓解焦虑、抑郁等负面情绪，改善心理健康状况。
睡眠管理
保持良好的睡眠习惯和质量对于血脂管理至关重要。建议每晚保持7-8小时的充足睡眠时间，并尽量避免 熬夜和不足的睡眠时间。同时，创造一个舒适、安静的睡眠环境也有助于提高睡眠质量。
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烟酸类药物
通过抑制脂肪组织中的甘油三酯分解和减少肝脏中极低密度 脂蛋白的合成降低甘油三酯和胆固醇，适用于高甘油三酯血 症和高胆固醇血症。

CE＋H2O → （CE) FC＋FFA FC＋O2 → (COD) △4-胆甾烯酮＋H2O2 H2O2＋4-AAP＋酚 → (POD)醌亚胺＋H2O
二、试剂与器材
1、胆固醇液体酶试剂
胆固醇液体酶试剂由GOODS缓冲溶液 （pH=6.7）、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧 化物酶、4-AAP、苯酚组成。
TG明显升高还可使血液凝固性增强，并抑制纤
维蛋白溶解，促进血栓形成，使冠心病诱发心 肌梗死的危险因素，约有80%的心肌梗死患者 TG升高。TG增高同时伴有总胆固醇、低密度脂
蛋白胆固醇增高、高密度脂蛋白胆固醇降低对 动脉粥样硬化和冠心病诊断更有意义。
TG降低：TG小于0.56mmol/L为低脂血症，原发 性TG降低见于遗传性原发性无β脂蛋白或低β 脂蛋白血症；继发性TG降低见于内分泌紊乱 （甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能减退症， 垂体功能减退症）和营养状态不良(如吸收不 良综合征）
7标本密闭保存时，在4℃下可稳定一周，-20℃下可稳定半年以上。
血清甘油三酯(TG)测定
目标： 1.掌握酶法测血清甘油三
酯的基本原理及注意事项。 2.熟练进行实验操作 3.了解甘油三酯测定主
要临床意义
原理：
血清中甘油三酯(TG)经脂蛋白 酶作用，可以水解为甘油和游离脂肪 酸，甘油在ATP和甘油激酶的作用下。 生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化 酶作用氧化生成碳酸二氢丙酮和过氧 化氢,过氧化氢与4-氨基安替比林(4AAP)及4-氯酚在过氧化物酶的作用下 ，生成红色醌类化合物，其显色程度 与TG的浓度成正比。
2、TC降低
TC降低常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲亢、肝脏 疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和在药物治疗 中溶血性黄疸及慢性消耗性疾病，如癌症晚期等。

（mmol/L）
测定管������������−空白管������������ 标准管������������−空白管������������
*标准液浓度
（标准液浓度=2.26mmol/L）
正常参考值：0.56~~1.7mmol/L，老年约为：2.26mmol/L。 美国国家胆固醇教育计划对空腹TG水平分解线的修订意见为（1993年）： TG正常：<2.3mmol/L
吸收部位：
十二指肠下段及空肠上段。
吸收方式：
中链及短链脂酸构成的TG 甘油 + FFA 门静脉 乳化 吸收 脂肪酶 肠粘膜 细胞
血循环
七．临床意义
（一）甘油三酯是脂酸的主要储存形式
消化吸收和内源性合成的脂酸，以游离的形式存在较少， 大多数以酯化的形式存在于甘油三酯之中而存在于体内。
（二）甘油三酯的主要作用是为机体提供能量
试剂（ul） 蒸馏水 5.17mmol/L标准品 样本 酶试剂（工作液） 空白孔 3 － — 300 标准孔 － 3 — 300 测定孔 － － 3 300
37℃保温5min，空白调零，550nm处测定各孔A值。
五．计算
血清胆固醇=
（mmol/L）
测定管������������−空白管������������ 标准管������������−空白管������������
维生素D
六．相关知识与临床意义
8．血清胆固醇测定的临床意义
(1) 血清胆固醇浓度可作为酯类代谢的标志，对糖尿病患者的预后 有重要意义。糖尿病昏迷患者几乎都伴有血清胆固醇浓度的增加。 胆固醇增加还见于动脉粥样硬化、肾病综合征、总胆管阻塞及粘液 性水肿。其他如肥大性骨关节炎、老年性白内障、牛皮癣等，血清 胆固醇浓度间或也有增加。 （2）在恶性贫血、溶血性贫血以及甲状腺功能亢进时，血清胆固醇 含量降低，其他如感染、营养不良等情况下，胆固醇总量常见减低。 （3）胆固醇酯系由胆固醇与脂肪酸结合而成，此反应主要在肝脏内 进行。肝脏有实质性病变时，胆固醇的含量可显著地减少，同时在 胆固醇总量内所占的比例亦明显减低，故其测定有助于肝脏疾病诊 断。胆固醇酯的含量与比例日渐减低是预后不良的征兆。

实验结果准确可靠
在本实验中，我们采用了标准的测定方法，严格控制实验条件， 确保了实验结果的准确性和可靠性。
结果具有代表性
本实验的样本量较大，具有代表性，能够反映一定人群的血脂水平。
结果分析不足
虽然我们得到了准确的实验结果，但在结果分析方面还有待加强， 需要结合更多的临床资料和流行病学数据进行分析。
对实验过程的反思和改进建议
03 实验步骤
血清甘油三酯测定步骤
样本处理
将待测血清样本进行离心分离， 去除其中的颗粒物和杂质。
测定
将处理后的血清样本加入试剂 中，按照仪器操作说明进行测 定。
准备试剂和仪器
准备好需要的试剂和仪器，如 甘油三酯试剂盒、生化分析仪 等。
校准
使用标准品对仪器进行校准， 确保测量准确性。
结果计算
根据仪器读数和试剂盒说明书 的公式，计算出血清甘油三酯 的浓度。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
要点二
实例
某患者血清甘油三酯为2.80mmol/L，血清胆固醇为 6.20mmol/L，均高于正常参考值，提示患者可能存在高甘 油三酯血症和高胆固醇血症，需要进一步检查和治疗。
05 结论
本实验的意义和价值
了解血清甘油三酯与胆固醇的测定方法
通过本实验，我们学习了如何使用实验室仪器和试剂来测定血清甘油三酯与胆固醇的含量 ，为后续的医学研究和临床诊断提供了基础。
实验6 血清甘油三酯与胆固醇的测 定
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01 实验目的
了解血清甘油三酯与胆固醇的测定方法
01
了解血清甘油三酯与胆固醇的测定方法，包括化学 法、酶法等。

• 酶法始于20世纪70年代初，80年代开始普及全酶法。曾 经应用过偶联丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶的紫外分光光度法， 甘油脱氢酶法，磷酸甘油氧化酶法，甘油磷酸脱氢酶法等 多种。以GPO-PAP法较为常用 。
第4页
化学法基本步骤：
1. 抽提 抽提的关键是选用合适的抽提 剂，既要使甘油三酯提取完全，又要 消除磷脂、游离甘油和葡萄糖等干扰 物质的影响。
第6页
化学法基本步骤：
②甲醛与乙酰丙酮在铵离子(NH4+)存在下生成 黄色的二乙酰二氢二甲基吡啶，吸收峰为 412nm。（亦可用荧光法测定。）
第7页
【方法学评价】
• 目前TG测定尚无公认的参考方法，美国 CDC将Van-Handel方法修改后作为内部参 考方法。此法抽提完全，去除了磷脂与甘 油干扰，以变色酸作显色剂，具有灵敏度 高，呈色稳定等优点，但操作步骤多，不 适合于日常工作中应用。
于棕色瓶内. • 甘油三酯校准品:1.15mmol/L
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【操作步骤】
表2-3 乙酰丙酮显色法测定甘油三酯
加入物（ml）
空白管
标准管×2 测定管×2
血清——源自0.2标准液—0.2
—
蒸馏水
0.2
-
—
抽提剂
2.5
2.5
2.5
40mmol/L H2SO4
0.4
0.4
0.4
边加边摇，使之充分混匀，静置分层后，分别准确吸取上清液于另外3支
• 用正壬烷、异丙醇和稀硫酸混合溶剂 选择性提取甘油三酯。抽提后，下层 异丙醇中主要是化学极性大的磷脂和 游离甘油，上层正壬烷中主要是甘油 三酯，约占总量的99％。正壬烷可以 用正庚烷代替。
第5页
化学法基本步骤：

CⅠ激活 LCAT及LPL CⅡ激活LPL CⅢ抑帛LPL 受体识别 HDL形成
Ⅱ型高脂血症 V型高脂血症 IV型高脂血症
血浆脂蛋白代谢
高甘油三脂颗粒(CM、VLDL、β-VLDL) LDL颗粒 HDL颗粒
血浆脂蛋白代谢
1．乳糜微粒(CM) CM是运输外源性甘油三酯的
主要形式，呈球形，直径在80-500nm。CM有强烈的 光散射作用，餐后大量CM进入血液可使血浆产生混 浊，称为乳糜血。CM可飘浮到血浆表面形成一“奶 油”层。
跨膜糖蛋白 两个功能区（结合区和内吞区） 反复使用，群居凹陷小窝 识别LDL的Apo-B和HDL的Apo-E，亦称
Apo-B、E受体 LDL颗粒+ LDL受体 = 1 ：1
HDL颗粒+ LDL受体 = 4 ：1
4．高密度脂蛋白(HDL) HDL的蛋白质含量最
高，所以密度最大，为1.063--1.210。外形呈 球状，胆固醇酯在球的核心部位，而磷脂和载 脂蛋白主要位于球的表面。
外源性TG 肠
CM代谢
新生CM（TG Apo-B48 Apo-A ）
血HDL交换 成熟CM（TG Apo-B48 Apo-C Apo-E）
毛细血管内皮细胞LPL水解 再合成或氧化利用
核心残基（CE Apo-E） 肝受体结合 肝细胞
CM残基
表面残基（PL FC Apo-C） HDL
2．极低密度脂蛋白(VLDL) VLDL是血液中第二
6—10
18—22
45—
50—65
4—8
2—7
4—8 16—22
6—8 45—50
3—5 15—
载脂蛋白
载脂蛋白(Apolipoprotein，Apo)是指血浆脂蛋白中 的蛋白质部分。