细胞工程复习

细胞工程专题复习【知识梳理】一、细胞工程的概念指应用和的原理和方法，通过水平或水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的或获得的一门综合科学技术。

根据操作对象的不同，可分为和两大领域。

1.理论基础（原理）：具有某种生物的任何一个细胞，都具有发育成的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有的特点。

但是，在生物的生长发育过程中，细胞并不会表现出，而是。

这是因为在特定的时间和空间条件下，基因的结果。

2.植物组织培养技术（生殖）愈伤组织：脱分化实质：。

再分化：愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基（分化培养基）上继续培养，重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。

（1）植物组织培养时应注意的问题：①培养基的成分：水、有机营养、，。

②保证操作③光照：脱分化培养愈伤组织时要，否则不利于愈伤组织的分化，再分化时要，这样有利于诱导形成叶绿素。

（2）植物组织培养的过程：（用箭头和文字表示）3.植物体细胞杂交技术（生殖）（1）概念：就是将不同种的植物，在一定条件下融合成，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。

（2）原理：；。

（3）过程:①去掉植物细胞细胞壁用酶。

方法叫：植物体细胞去壁是因为。

②诱导融合的方法：物理法包括等；化学法一般是用（）。

③杂种细胞形成的标志，与（细胞器）有关。

④形成的杂种细胞经过和的过程，形成杂种植株。

⑤二倍体与二倍体植物体细胞杂交后代是；二倍体与四倍体植物体细胞杂交后代是。

（4）意义：。

全能性表达的难易程度：受精卵＞干细胞＞生殖细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞植物细胞工程的实际应用一、植物繁殖的新途径1．微型繁殖(1)概念：用于__________优良品种的______________技术。

(2)特点：属于______繁殖，能够保持____________的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的____________。

2．作物脱毒(1)选材部位：植物的____________。

1.细细胞工程:细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。

2.细细胞工程包含的技术：细胞与组织培养、细胞融合、细胞核移植、染色体操作、胚胎工程、干细胞与组织工程、转基因生物与生物反应器细胞培养和组织培养都属于体外培养，指生物细胞和组织在立体条件下的生长和增殖。

3.细胞核移植：利用限位操作技术将细胞核与细胞质分离然后再讲来源不懂的核与质充足，形成杂合细胞。

4.染色体工程：把单个的染色体或染色体组转入或移除受体细胞，从而形成新的染色体组合和遗传构成。

5.胚胎工程：以生殖细胞和胚胎细胞为对象进行的细胞构成操作。

主要包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割技术、胚胎冷冻保存技术和性别控制技术6.接触抑制：由细胞接触而抑制细胞运动的现象。

7.体外培养细胞的分型：1、贴壁型细胞（包括细胞与细胞之间的相互接触与细胞基质之间的相互接触两种方式）2、悬浮型细胞8.培养细胞生长特点：贴附、接触抑制、密度抑制9.培养细胞的生长与增殖过程：1、单细胞生长过程：1）G1期2）S期3）G2期4）M期；2、细胞学生长过程：1）原代培养2）传代培养3）衰退期；3、每代细胞生长过程：1）潜伏期2）指数生长期3）停止期10.细胞培养常用液体：1.水、2.平衡盐溶液、3.消化液、4.消化酶抑制夜、5.pH调整夜（碳酸氢钠溶液和HEPES溶液）、6.抗生素夜、7.谷氨酰胺补充液11.培养基培养基的基本要求：（1）营养成分：1）氨基酸2）单糖3）维生素4）其他成分；（2）促生长因子及激素（3）pH（4）渗透压天然培养基：主要来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养液（1）血清（2）鼠尾胶原（3）鸡胚浸出夜（4）水解乳蛋白合成培养基（1）基本培养基（2）无血清培养基：1）基础培养基2）添加成分12.细胞的基本培养技术（1）原代培养：1.组织取材；2.组织细胞分离；3.培养方法：组织块培养法、单层细胞培养、悬浮细胞培养。

《细胞工程》复习题一、选择题：1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ) A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同2。

单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( C ）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．②④ B．①③⑤C．①②③④ D．②③3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞4.单克隆抗体是指（ C )A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体D．单个抗体通过克隆化,产生大量抗体5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选）(AC ）A．B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群.其原因是（ D ）A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体7。

关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是(D ）A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产8。

以下不属于生长素的是（D)A IAAB NAAC 2，4—D D 6—BA9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是（D）A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体10。

细胞工程复习题及答案细胞工程复题一、名词解释1.细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。

2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料3.植物组织培养：将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。

4.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。

5．离体无性繁殖:简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。

6．继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。

7.体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。

8细胞分化：即由于细胞的分工而招致的细胞结构和功用的改变，或发育方式改变的过程。

9细胞脱分化：造就前提下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。

10细胞再分化：即脱分化后的分生细胞在特定的前提下，从头恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完全植物体，这一过程成为细胞再分化。

11人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。

12植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。

13胚状体：在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。

14单倍体植物：单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体(植物个体)。

具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养，使其单性发育成植物体。

这种具有单套染色体的植物称为单倍体植物。

15离体受精：（离体授粉）在无菌前提下造就未受精脂肪或胚珠和花粉，使花粉萌发进入胚珠，完成受精作用。

细胞工程复习资料细胞工程复习资料细胞工程是一门研究利用生物技术手段改造和利用细胞的学科，是生物工程领域的重要分支之一。

它涉及到细胞的培养、分离、操纵和应用等方面，对于生物医学、药物研发、农业和环境保护等领域都具有重要意义。

本文将从细胞工程的基本原理、技术方法和应用领域等方面进行综述。

一、细胞工程的基本原理细胞工程的基本原理是通过改变细胞的遗传物质和表达谱，使其具备特定的功能或性状。

其中，基因工程技术是细胞工程中最常用的手段之一。

通过基因工程技术，可以将外源基因导入到目标细胞中，使其产生特定的蛋白质或表现出特定的性状。

例如，利用基因工程技术，可以将人类生长激素基因导入到大肠杆菌中，使其产生人类生长激素。

除了基因工程技术外，细胞工程还包括细胞培养、细胞分离和细胞操纵等技术。

细胞培养是指将细胞放置在适宜的培养基中，提供适当的营养物质和环境条件，使其在体外继续生长和繁殖。

细胞分离是指将混合的细胞群体分离成单个的细胞或纯化的细胞群体。

细胞操纵是指通过物理或化学手段对细胞进行操作，如细胞融合、细胞转染等。

二、细胞工程的技术方法细胞工程的技术方法主要包括基因工程技术、细胞培养技术和细胞操纵技术等。

基因工程技术是细胞工程中最重要的技术之一，它包括基因克隆、基因转染、基因敲除等多种方法。

基因克隆是指将特定的基因从一个生物体中复制出来，并导入到另一个生物体中。

基因转染是指将外源基因导入到目标细胞中，使其产生特定的蛋白质或表现出特定的性状。

基因敲除是指通过基因编辑技术，将目标基因从细胞中删除或失活。

细胞培养技术是细胞工程中最基础的技术之一，它包括细胞培养基的配制、细胞培养条件的优化和细胞培养设备的选择等方面。

细胞培养基是细胞培养的基础，它包含了细胞所需的营养物质和生长因子等。

细胞培养条件的优化是指通过调节培养基的成分和培养条件的控制，使细胞在体外获得最佳的生长和繁殖条件。

细胞培养设备的选择是指选择适合细胞培养的培养器具和设备，如细胞培养箱、生物反应器等。

第一章简介1.生物工程（bioengineering）（生物技术）：是以生物科学为基础，利用生物个体或生物器官、组织、细胞的特性和功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系（包括细胞系），以及与工程原理相结合进行产品加工生产的综合性技术体系。

2.传统生物工程：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程（各个定义见书）后来：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程以及生化工程。

3.细胞工程（cell engineering ）是以细胞为研究对象，应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的原理或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。

广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。

思考题：1．细胞工程的概念、研究范畴、在生物工程中与其它工程的关系。

2．动物细胞工程发展的主要标志性成就。

3．植物细胞工程技术的主要标志性成就。

4．细胞工程的作用与应用领域。

第二章细胞工程基础1、组成细胞的基本元素有哪些？O、C、H、N、Si、K、Ca、P、Mg，其中O、C、H、N占90%以上。

细胞化学物质分为：有机物和无机物。

2、原核细胞与真核细胞有哪些区别？原核细胞真核细胞DNA区域没有被摸包被DNA区域有被摸包被没有典型的细胞核和细胞器（只有核糖体）有细胞核（染色体、核仁、核液）和细胞器（核糖体、内质网、叶绿体、高尔基体等）结构简单结构比原核细胞复杂例：细菌、蓝藻例：动植物细胞3、染色体与染色质有什么区别？染色质是指细胞分裂间期遗传物质的存在形式。

染色体是指细胞有丝分裂或减数分裂过程中，由染色质聚成的棒状结构。

（染色质由DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA组成）4、什么叫细胞周期？也称细胞分裂周期，是指一个细胞经生长、分裂增殖成两个细胞所经历的全过程。

包括分裂期（M期）与间期，间期由G1、S、G2三个阶段组成。

细胞工程学复习题细胞工程学是一门综合性学科，涉及到细胞生物学、生物工程学和材料科学等多个领域的知识。

通过利用工程原理和技术手段，细胞工程学致力于研究和应用细胞的生物功能以及与之相关的工程应用。

以下是一些关于细胞工程学的复习题，希望能帮助你回顾和巩固相关知识。

1. 什么是细胞工程学？2. 细胞工程学的研究对象主要是哪些细胞类型？3. 请列举细胞工程学的主要应用领域。

4. 细胞工程学中常用的细胞培养技术有哪些？5. 什么是细胞培养基？它对细胞的生长和分化有什么影响？6. 细胞工程学中常用的细胞筛选技术有哪些？7. 请简要介绍细胞工程学中常用的细胞培养槽和生物反应器。

8. 什么是细胞培养的规模化生产？有哪些常用的规模化生产方法？9. 细胞工程学在组织工程和再生医学中的应用有哪些？10. 细胞工程学在药物筛选和药物递送系统中的应用有哪些？11. 请简要介绍细胞工程学在生物传感和生物芯片领域的应用。

12. 细胞工程学中常用的细胞植入技术有哪些？它们在治疗方面有何作用？13. 请简要介绍细胞工程学中常用的干细胞技术和基因工程技术。

14. 细胞工程学中的质量控制和质量保证措施有哪些？15. 细胞工程学的发展趋势和前景如何？以上是关于细胞工程学的一些复习题，希望能够帮助你进行知识回顾和巩固。

细胞工程学作为一门新兴的学科，其在医学、生物技术和生物工程领域的应用前景广阔，相信随着科学技术的不断进步，细胞工程学将会取得更加重要的突破和进展，为人类健康和福祉做出更大的贡献。

希望大家能够认真复习，掌握细胞工程学的基本理论和技术方法，为将来的学习和科研打下坚实的基础。

细胞工程Cell Engineering1、细胞用途：大量培养→生产有用物质（药物、蛋白质、酶、有用化合物）调控分化→生产组织和器官（用于医学修复）个体再生→优良个体繁殖，用于良种推广遗传改良→新细胞系、新组织、新器官、新个体（细胞融合、细胞器移植、核质移植、转基因）2、细胞工程(Cell Engineering)：在体外培养生物细胞，并对细胞进行生长与分化调控、遗传改良，用其生产人类所需要的产品。

细胞工程以高等植物和动物为研究对象。

技术：细胞培养、细胞分化调控、细胞改良（如融合重组、细胞器移植、转基因等）产品：（1）细胞、组织、器官、个体；（2）有用物质：天然药物、色素、香精等；抗体、多肽药物、蛋白质、酶等。

3、植物组织培养：在人工培养基上无菌培养整株植物或植物的器官、组织、细胞或原生质体（植物材料）。

又称为无菌培养（aseptic culture）、离体培养（in vitro culture）。

植物组织培养=培养植物组织4、植物组织培养的类型：（1）植株培养（Plant Culture）——在容器中无菌培养完整的植株。

植株来源：由种子无菌萌发而来；通过再生而来。

在植物克隆时，后期的成苗和壮苗阶段属植株培养。

（2）胚培养（Embryo culture）——无菌培养植物的成熟胚或未成熟胚，使其形成正常的植株。

目的：促进胚的提早萌发，缩短育苗时间；克服远源杂种胚的夭折，以获得新的育种材料；在科学研究中，用胚培养所得到的幼苗作为其它试验的材料。

（3）器官培养（Organ Culture）——无菌培养植物的根、茎、叶、芽、花、果等器官,使其增殖或形成其它的组织或器官等。

（4）组织培养（Tissue culture）——指无菌培养植物各种组织或由外植体分化形成的愈伤组织（callus，具有旺盛分裂能力，但没有组织和器官分化的细胞群），使其增殖或者分化。

（5）花药与花粉培养——无菌培养植物的花药（带花粉）或花粉，形成单倍体植株。

生物工程复习第一讲一、模块：动植物人工繁殖技术、新品种培育技术、生物制品技术、干细胞与组织工程。

二、细胞工程（Cell engineering）是指主要以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。

三、研究对象：动植物细胞（原生质体），也包括细胞器、染色体、细胞核、胚胎。

四、细胞工程研究内容：a)动植物快速繁殖：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物等。

b)细胞重组与新品种培育：细胞水平上的原生质体诱变、细胞融合技术；细胞器水平上的细胞重组；染色体水平上的多倍体、单倍体育种等。

c)细胞工程生物制品：：以杂交瘤细胞培养大量制备单克隆抗体、动物细胞培养生产疫苗、转基因动植物生物反应器等。

d)细胞疗法与组织修复：利用培养的细胞或者离体再造的组织修复受损细胞、组织或器官的技术，属于细胞工程最新发展领域之一。

植物人工繁殖一、1.植物组织培养的理论基础是什么？a)细胞全能性。

二、2.植物经组织培养的再生途径有哪两种？a)器官发生途径：成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。

b)体细胞胚发生途径：成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。

c)概念：•体细胞胚（Somatic embryo）又叫胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。

体细胞胚发生途径：是指体细胞在离体培养过程中经过了胚胎发育过程。

体细胞胚起源于非合子细胞，因此不同于合子胚。

三、3.激素在细胞分化中是如何调节器官分化？a)生长素主要用来刺激细胞分裂和诱导根的分化。

b)分裂素的生理作用主要是诱导芽的分化促进侧芽萌发生长、促进细胞分裂与扩大。

多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖，而在生根培养时使用较少或用量较低。

c)四、1。

细胞全能性、细胞分化与脱分化a)细胞全能性(totipotency)：是指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

细胞工程第一章论绪1、细胞工程：按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。

(1)分类a.按生物类型分为：动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞工程b.按实验操作对象分为：细胞与组织培养、细胞融合、细胞核移植、染色体操作、转基因工程。

(2)操作水平：细胞整体水平或细胞器水平(3)目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品(4)理论基础：细胞全能性(5)依据：生物体的每一个干细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。

2、植物细胞工程包括：植物体细胞杂交、植物组织培养。

3、动物细胞工程包括：动物细胞融合、动物细胞培养、单克隆抗体技术、核移植、胚胎移植。

4、细胞工程研究内容(1)细胞与组织培养（离体培养）：是细胞工程的最基本技术。

(2)细胞融合（细胞杂交）：自然融合、人工诱导融合。

试管婴儿 单克隆抗体技术(3)细胞核移植：克隆羊多莉(4)染色体工程：多倍体育种(5)胚胎工程：以生殖细胞和胚胎细胞为对象，包括体外受精、胚胎移植、胚胎切割。

(6)干细胞与组织工程：胚胎干细胞、组织细胞。

人工培养的肌肉、器官。

5、细胞工程的应用：a.快速繁殖b.种苗脱毒c.动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种d.利用动植物细胞培养生产活性产物、药品（生物反应器工程），如利用动物细胞融合形成单克隆抗体，利用植物细胞培养次生代谢产物。

e.新型动植物品种的培育f.供医学器官修复或移植的组织工程g.珍稀动植物资源的保存与保护h.在遗传学、发育生物学领域的理论研究第二章细胞全能性与形态发生1、名词解释：◆细胞全能性：细胞经分裂和分化后仍具有形成完整个体的潜能或特性。

❖极性：指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。

♦离体器官发生：培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。

⌧细胞分化：导致细胞形成不同结构或引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

细胞工程期末复习（必考）细胞工程：研究真核细胞的核—质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。

组织工程：研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。

染色体工程：是按照一定的设计，有计划的消减添加或替换同种或异种染色体从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。

细胞连接：使细胞间的联系结构。

细胞表面的特化结构或特化区域，是细胞间建立长期组织上联系的结构基础。

涉及细胞外基质蛋白、跨膜蛋白、胞质溶胶蛋白、细胞骨架蛋白等。

细胞全能性：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体成长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。

包括时间和空间上的分化。

脱分化：又称去分化，指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。

即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。

再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。

细胞培养：指从体内组织分离细胞，模拟体内环境，在无菌适当的条件使其生长繁殖的技术。

人工种子：又称合成种子或体细胞种子，指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。

植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。

试管受精：指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉萌发产生的花粉管进入胚珠从而完成受精过程。

细胞核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

体外受精：指使哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。

胚胎移植:指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵但为配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。

人工受精：指将采集的精子注入人发情处理的母体内完成受精过程。

试管婴儿：指将卵子与精子取出在体外受精，培养发育成早期胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿，也就是采用体外受惊联合胚胎移植技术培育的婴儿。

第一讲细胞体外培养细胞培养的概念：通过离体培养使活细胞发育、分化、分裂并维持其代谢和遗传性状。

一、细胞体外培养的对实验室的要求。

（5项）细胞培养室、细胞培养缓冲室、实验准备室、细胞贮存室和洗涤室。

二、细胞体外培养的主要仪器、设备和器具。

超净工作台（细胞转移操作）、二氧化碳培养箱（细胞培养）、倒置显微镜（细胞常规检查）、冰箱（培养基或其它试剂贮藏）、天平（药品配制）、高压灭菌锅（实验器皿的灭菌）、滤器（培养基除菌）、液氮罐（细胞贮藏）、培养器皿（细胞培养器皿）、移液器（培养基和细胞的转移）。

三、细胞体外培养用液（一）缓冲液。

1、细胞培养用缓冲液必须符合以下特性：①能持续维持培养液的pH恒定；②不干扰细胞在培养液中进行化学或生物化学反应；③不影响实验和观察。

④细胞体外培养使用的缓冲液pH范围在7.2~7.4之间。

⑤细胞体外培养使用最多的缓冲液是碳酸氢钠缓冲液。

⑥HEPES有调节pH的作用，但不属于缓冲液。

（二）平衡盐溶液（BSS）1、作用：具有缓冲液功能、维持细胞渗透压功能、供给细胞生存所需要的能量物质和无机离子。

2、平衡盐溶液中加入少量的酚红用作酸碱度变化的指示剂，溶液变酸时呈黄色，变碱时呈紫红色，中性时呈粉红色，因此可以根据颜色判断BSS的酸碱度变化。

3、几种常用的平衡盐溶液：Ringer液、PBS、Earle’s BSS、Hank’s BSS、D-Hank’s BSS、Dulebcco’s BSS等。

4、BSS的pH值通常采用HCl和NaHCO3调节。

5、BSS液通常采用过滤方法除菌（小于0.2 μ的滤膜）（三）培养基天然培养基：模拟细胞生长的生理环境1、血清（1）血清的前处理市售血清主要是小牛血清或胎牛血清。

商品血清一般只做灭菌处理，因此购买血清后还应在56℃热灭活30分钟。

加热灭活可破坏血清中的补体及一些微生物。

灭活处理的血清促生长能力可能有所下降，但它可以安全地贮存于4℃。

未加热的血清不稳定，应保存于-20℃。

细胞工程复习题细胞工程复习题一、名词解释（每小题3分，共21分） 1．酶工程：2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体：10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合：14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术：二、简答题1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面？12．何为植物细胞两相培养技术？建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么？3．动物细胞体外培养有哪些特点？4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些？5．什么是细胞核移植技术？以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面？ 6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别？7．何为细胞悬浮培养？怎样做到悬浮培养细胞的同步化？ 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类？ 9．什么是试管动物？试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节？ 10．何为体细胞克隆技术？多莉羊是怎样培育出的？11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株？ 12．人工种子利用有何优势？13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求？ 14．何为胚胎移植？主要包括哪些关键技术？ 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面？三、论述题1．请阐述单克隆抗体的制备过程？2．植物组织培养技术主要包括哪些环节？各环节的主要工作内容有哪些？3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程？四、计算题1．有一培养基的IAA浓度是1.5mg/L，问其?mol/L和ppm浓度各是什么？（分子量175.18）2．培养基的配方是MS?BA2.0mg/L?NAA0.5mg/L?水解酪蛋白500mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂粉。

MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度0.5mg/ml，NAA母液浓度0.1mg/ml。

一、名词解释1、接触抑制：细胞汇合相互接触后失去运动的现象。

2、原代培养：从体内取出细胞或组织的第一次培养。

3、传代：也称再培养，无论是否稀释，将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养。

4、细胞系：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。

5、密度抑制：细胞数量到一定数量后引起抑制增殖的现象。

6、细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称细胞株。

7、无血清培养基：又称化学限定性培养基或化学成分明确的培养基。

指不需要添加血清就可维持细胞在体外较长时间生长和繁殖的合成培养基。

8、天然培养基：来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基。

如血浆、血清、组织浸出液、淋巴液等。

9、合成培养基：人们用各种化学物质设计出的用于细胞培养的培养基。

10、细胞工程：是按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。

11、细胞融合又称细胞杂交，是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。

12、体外活细胞染色：在体外培养条件下，用某种染料对活细胞或组织进行染色，而不影响活细胞生命活动的一种方法。

利用这种方法，可以对培养物进行染色观察，经染色的培养物还可以继续进行培养。

13、体外受精（IVF）：人为操作使成熟的卵子与精子在合适的体外环境中完成受精过程。

14、发育阻滞：体外受精的早期胚胎在体外发育中往往会停滞在某一阶段不再发育，即发育阻滞。

15、胚胎移植：也称受精卵移植，是将良种母畜配种后的受精卵或早期胚胎取出，移植到具同种生理状态的母畜体内，使之继续发育成新个体，所以也成“借腹怀胎”。

16、细胞脱分化：一定培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。

17、细胞再分化：脱分化后的分生细胞（愈伤组织）在一定条件下，重新分化为各种类型的细胞，并进一步发育成完整植株。

细胞工程复习题
1. 细胞工程的定义是什么？
2. 细胞工程在生物技术领域中的主要应用有哪些？
3. 描述细胞培养的基本步骤。

4. 什么是原代细胞培养和传代细胞培养？
5. 解释细胞株和细胞系的区别。

6. 什么是细胞融合技术，它在哪些领域有应用？
7. 列举细胞工程中常用的几种细胞标记技术。

8. 简述动物细胞培养中常用的培养基成分及其作用。

9. 描述细胞工程中细胞的遗传操作过程。

10. 什么是基因工程，它与细胞工程有何关联？
11. 阐述植物细胞工程中的组织培养技术。

12. 描述植物细胞工程在作物改良中的应用。

13. 解释细胞工程中细胞的冷冻保存技术及其重要性。

14. 什么是细胞的遗传稳定性，为什么在细胞工程中重要？
15. 简述细胞工程在医学领域的应用，例如干细胞治疗。

16. 讨论细胞工程在环境保护方面的潜在应用。

17. 描述细胞工程中细胞的大规模培养技术。

18. 阐述细胞工程在生物制药领域的应用。

19. 什么是基因编辑技术，它在细胞工程中如何应用？
20. 讨论细胞工程面临的伦理和法律问题。

细胞工程复习资料一．细胞工程：是在细胞水平研究、开发、和利用各类细胞的一门技术。

主要内容就是通过无菌操作，大量培养细胞、组织乃至完整个体或者应用细胞生物学和分子生物学等方法进行细胞水平的遗传操作，以快速繁殖生物个体、改良品种、生产生物产品或活性成份。

二．植物细胞培养与动物细胞培养的区别？答：由于植物和动物在细胞结构、生长方式和营养要求等方面有很大的差别，尤其在全能性表现上存在差异。

1）虽然植物细胞和动物细胞的离休培养有一定的相似性，如基本上都是模拟体内的生长环境，提供良好的营养条件和物理环境，使组织细胞在体外无菌条件下继续生长发育的过程；2）培养的结果都是培养物在一定程度上表现出与体内相似的生长行为，如细胞生长、分裂、分化、代谢等。

但是二者在培养技术、研究内容及深度等方面存在一些差异：1）能进行离休培养的材料范围不同。

植物范围广，器官和组织、细胞、原生质体等；动物则主要是分散的细胞、组织块、一些小的不太成熟的器官或器官外植块。

2）所需的培养条件不同。

植物的组织和细胞培养大多在一定光照条件下进行，而动物细胞是异养的，完全依赖外界提供的营养才能生长，营养更全面，更复杂，对环境也更严格要求。

3）生长形式不同。

总的来说，植物材料在离休培养的条件下有较强的生长、分裂、及分化能力，而且由各种外植体分化成完整植株人全过程都可在体外进行；而动物组织在体外培养条件下的生长形式主要以细胞的存活生长、有限增殖以及一定程度的分化为特征。

四．一）．植物细胞全能性的概念？由谁提出？怎么实现全能性？答：植物细胞全能性：即一个植物细胞具有产生一个植株的潜能，也就是说，植物细胞具有本物种的全部遗传信息，不论是生殖细胞还是体细胞，在特定环境下都可能进行表达，产生一个独立完整个体。

由德国植物生理学家Haberlandt在1902年提出。

二）．植物细胞培养基的成分？答：（1）无机营养物（2）糖类（3）维生素类（4）氨基酸及有机附加物（5）植物生长调节物质此外，培养基中如加入0．5～1％的琼脂即为静止培养的固体培养基，否则为悬浮培养的液体培养基。

绪论1、细胞工程：按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。

2、体外培养：指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。

3、细胞融合或细胞杂交：指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。

（单克隆抗体技术）4、细胞核移植：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂合细胞。

（克隆羊“多利”）5、染色体工程：把单个的染色体或染色体组转入或移出受体细胞，从而形成新的染色体组合和遗传构成。

（植物育种）6、胚胎工程：指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。

包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。

（畜牧优良品种繁殖技术）7、组织工程：将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体组织的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育形成具有特定形态及功能的工程组织。

（人工软骨）8、转基因动物：通过基因工程技术将外源的目的基因导入生殖细胞或早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，经发育形成所有细胞都包含目的基因的动物个体。

9、动物生物反应器：将目的基因在器官或组织中进行特异性高表达的转基因动物称为动物生物反应器。

（乳腺生物反应器）10、转基因植物：通过基因工程技术将外源的目的基因导入植物细胞直接进行诱导培养所形成的再生植株。

11、植物生物反应器：能够生产某些重要蛋白质和次生代谢产物的转基因植物。

第一章细胞培养的设施与基本条件1、细胞工程实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏2、超净工作台分为侧流式（垂直式）和外流式（水平式）：原理：将室内空气经粗过滤器初滤，由离心机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的、均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁度工作环境。