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石榴花色素中黄酮类化合物的分离及初步鉴定一、研究背景石榴是一种常见的水果，其含有丰富的营养成分和生物活性物质。
其中，石榴花色素是一类重要的黄酮类化合物，在医药、保健品等领域具有广泛应用前景。
因此，对于石榴花色素中黄酮类化合物进行分离及初步鉴定具有重要意义。
二、实验方法1. 实验材料：新鲜石榴花；甲醇、乙腈、正己烷等试剂。
2. 确定提取条件：将新鲜石榴花粉碎后加入甲醇中浸泡，并在不同时间（30min, 60min, 120min）下超声提取，比较各个时间点下提取效果并确定最佳提取时间。
3. 分离纯化：采用硅胶柱层析法对提取液进行分离纯化，并通过TLC检测各组分的相对含量。
4. 鉴定结构：利用紫外-可见光谱（UV-vis）、高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术（HPLC-ESI/MS）等手段进行初步结构解析和确认。
三、实验结果1. 提取条件优选：经过比较发现，在60分钟超声处理下得到了最好的提取效果。
因此，在后续实验中均采用该条件进行样品处理。
2. 分离纯化：采用硅胶柱层析法成功地从甲醇提取液中得到了多个组分，并通过TLC检测证明其为黄酮类化合物。
其中主要组分Rf值为0.45左右，占总面积约50%以上。
3. 结构解析与确认：利用UV-vis和HPLC-ESI/MS技术进一步确定主要组分为山奈黄素（Kaempferol），其特征峰位于360nm处；同时还检测到少量异山奈黄素（Isorhamnetin）和杂多环苷（Quercetin glycoside）。
这些结果表明所制备出来的样品主要由山奈黄素及其衍生物组成，并且可以作为进一步开展相关功能性评价或药理学机制探索工作的基础材料之一。
四、结论与展望本次实验成功地从新鲜石榴花中提取出了多种黄酮类化合物，并以山奈黄素为代表进行了初步结构解析和确认。
未来可以考虑进一步深入挖掘这些天然产物在抗氧化、抗肿瘤等方面可能存在的生理活性及机制，以期更好地发挥它们在医药保健领域内的应用价值。
石榴果皮提取物抑菌活性研究一、本文概述本文旨在深入研究石榴果皮提取物的抑菌活性，探讨其潜在的抗菌作用和应用价值。
石榴作为一种常见的水果，不仅口感鲜美，营养丰富，其果皮中也含有丰富的生物活性成分。
近年来，随着人们对天然抗菌剂的关注度日益提高，石榴果皮提取物因其独特的抗菌性能而备受关注。
本研究将通过实验验证石榴果皮提取物的抑菌效果，分析其作用机理，并为其在食品、医药等领域的应用提供理论依据。
在本文中，我们首先将对石榴果皮提取物的成分进行详细分析，以确定其主要抗菌成分。
随后，通过体外抑菌实验，评估石榴果皮提取物对常见食品致病菌的抑制效果，并探讨其抑菌机理。
我们还将研究石榴果皮提取物在不同条件下的稳定性，以及其对不同菌种的广谱抗菌作用。
我们将对石榴果皮提取物的安全性进行评估，为其在实际应用中提供安全保障。
本研究不仅有助于深入了解石榴果皮提取物的抑菌活性，还为其在食品防腐、医药抗菌等领域的应用提供有力支持。
本研究也为开发新型天然抗菌剂提供了新的思路和方向。
二、文献综述石榴作为一种古老而多功能的果树，其在食品、医药和化妆品等多个领域的应用历史悠久。
近年来，随着人们对天然产物的深入研究，石榴果皮作为石榴加工过程中的副产物，其潜在的经济价值和生物活性逐渐受到关注。
特别是石榴果皮中提取的多种生物活性成分，如多酚、黄酮类化合物等，展现出显著的抑菌活性，为开发新型天然抗菌剂提供了可能。
在已有的研究中，石榴果皮提取物被广泛研究其对多种食品腐败菌和病原菌的抑制作用。
例如，石榴果皮中的鞣花酸和没食子酸等酚类物质已被证实对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等常见食品污染菌具有显著的抑菌效果。
石榴果皮提取物中的黄酮类化合物也被报道对多种真菌具有抑制作用，如白色念珠菌等。
然而，尽管石榴果皮提取物的抑菌活性已被初步证实，但其具体的抑菌机制仍不十分明确。
现有的研究表明，石榴果皮中的多酚和黄酮类化合物可能通过与微生物细胞膜上的蛋白质相互作用，破坏细胞膜的完整性，从而达到抑菌的目的。
研究与开发Research and Development化工设计通讯Chemical Engineering Design Communications第45卷第7期2019年7月石榴皮中化学成分及其生物学活性研究进展稼建雯1,扬创兵2,昊双鼠3,郭亚东3(1.红河卫生职业学院，云南红河661199;2.红河州第一人民医院，云南红河661199；3.昆明医科大学，云南昆明650031)摘要：目的：探讨不同石榴品种石榴皮中的化学成分及生物学活性；方法：查阅文献进行研究分析和总结；结果：不同石榴品种石榴皮中化学成分包括：黄酮类、单宁类、没食子酸、揉质、生物碱类、酚类物质及其他类化学成分，生物学活性：抗氧化、抗癌、抗菌、抗病毒、抗菌、抗衰老、抗炎和减脂作用；结论：促进研究者不断挖掘石榴的潜在医药价值，促进我国医药产业的发展。
关键词：石榴品种；石榴皮；化学成分；生物学活性中图分类号：R927文献标志码：B文章编号：1003-6490(2019)07-0144-02Advances in Chemical Constituents and Biological Activities of Pomegranate Peel Chen Jian-wen,Yang Jian-bing,Wu Shuang-feng,Guo Ya-dongAbstract:Objective:To investigate the chemical constituents and biological activities of different pomegranate varieties in pomegranate skin.Methods:The literature was reviewed and analyzed.Methods The literature was reviewed and analyzed.Results:The chemical constituents of different pomegranate varieties were:flavonoids,tannins,Gallic acid,tannins,alkaloids,phenols and other chemical constituents.Biological activities:anti-oxidation,anti-cancer,antibacterial,antiviral,antibacterial,anti-aging,antiinflammatory and lipid-reducing effects；Conclusion:To promote the researchers to continuously excavate the potential medical value of pomegranate and promote the development of Chinese medicine industry.Key words:different breeds of pomegranate rind；pomegranate skin；chemical composition；biological activity在我国，石榴品种较多，大量研究表明，石榴皮所含的化学成分非常多，临床疗效好，对人体有预防和保健作用。
２００９年９月第１１卷第９期中国现代中药Ｍ（＇ｄｅｍｃｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓｅｐ．２００９Ｖ０１．１１Ｎｏ．９综遮石榴的生物活性成分及其药理作用研究进展△李婕姝，贾冬英＋，姚开，张茜（四川大学轻纺与食品学院，四川成都６１００６５）［摘要］对石榴的主要生物活性成分及其抗氧化、抗癌、保护心血管和雌激素样活性等药理作用研究进展进行综述。
［关键词］石榴；活性成分；药理作用石榴果肉色泽艳丽，昧美汁多，营养丰富，其既可直接食用，又可加工成果汁、果酒或果酱等。
中医认为，石榴味甘、酸、涩，性温，归肺、肾和大肠经，具有生津止渴、收敛止泻、止血、杀虫和解酒等功效¨Ｊ。
然而，石榴坚韧厚实的外皮和多籽的结构造成其食用不便和加工时原料利用率较低，这影响了其直接食用和深加工利用。
近年来，大量研究显示，石榴含有多种生理活性成分，具有抗氧化、清除自由基、预防心脑血管疾病、改善妇女更年期综合症等多种药理功能，因此有必要对石榴的活性成分及药理作用进行综述，以利于这一药食两用资源得到更为有效的开发利用。
１石榴的生物活性成分近年来，欧美、日本、土耳其等国十分关注石榴全果各部位中的生理活性成分的研究，研究结果显示石榴含有的生理活性成分包括多酚类化合物、黄酮类化合物、生物碱、有机酸和类雌激素样成分等，主要为多酚类化合物和黄酮类化合物。
１．１多酚类化合物多酚是一类具有较强抗氧化活性的物质，能有效地清除各种氧自由基，保护机体免受氧化应激的损害，因此可防治与自由基氧化损伤相关的多种疾病。
石榴皮富含多酚，其含量约为其干重的１０．４％～２１．３％，包括安石榴苷、安石榴林、石榴皮亭Ａ、石榴皮亭Ｂ、鞣云实精、鞣花酸、没食子酸、英国栎鞣花酸等，其中安石榴苷占多酚总量的８０％～８５％旧…。
石榴汁中多酚的含量约２．１９・Ｌ１。
，包括没食子酸、槲皮苷、绿原酸、根皮苷、咖啡酸、原儿茶酸、儿茶素、鞣花酸和香豆酸等，其中没食子酸和儿茶素的含量较高”引。
石榴化学成分及其生物活性研究进展摘要:综述了石榴中对人体有益的化学成分、石榴的保键作用和生物活性,介绍了国内外对石榴的开发利用现状,展望了石榴研究方向。
关键词:石榴;化学成分;生物活性;研究进展石榴(Punica granatum L)属石榴科(Pu-nicaceae)石榴属(Punica L,)植物,别名安石榴、甘石榴、丹若、天浆、若榴等。
石榴原产于伊朗、阿富汗等中亚地区,西汉时引入中国,至今己有2000多年栽培历史。
据不完全资料统计,我国石榴栽培面积达11万余hm2,居世界第1位,主要集中在陕西临潼、山东枣庄、安徽怀远、四川会理、云南蒙自和会泽、新疆叶城等6大主产地。
石榴果实外形似灯笼,皮内百籽同房,籽粒晶莹,酸甜可口,营养丰富,且果汁、果籽、果皮、花等皆有较好的保健和食疗效果,可谓全身是宝。
1石榴的化学成分石榴的化学成分及含量根据植物体的部位不同而不同。
果汁、果皮、叶及树皮中以鞣质类、黄酮类、生物碱、有机酸等为主;石榴籽及其他部位则多含甾类、磷脂、甘油三酯等。
这些物质是石榴具有多种生物活性的物质基础。
此外,果实中还含有丰富的碳水化合物、蛋白质、人体所需的各种氨基酸、微量元素及维生索等营养成分。
石榴各部分的化学成分如表。
1.1鞣质类化合物石榴中含有丰富的鞣质类化合物,以可水解鞣质类为主,在不同部位分布有所不同。
石榴汁中的鞣质成分主要为没食子酸、安石榴林和安石榴苷;石榴皮中的鞣质含量较其他部位高,主要为安石榴林和安石榴苷,还有没食子酸、没食子酰双内酯、鞣花酸、石榴皮亭A、石榴皮亭B、鞣云实精、木麻黄宁、英国栎鞣花酸、特里马素、鞣花酸鼠李糖苷、2,3-(S)一六羟基联苯二酰基-D-葡萄糖等;石榴叶中的鞣质类成分主要为石榴皮亭A、石榴皮亭B、鞣云实精、鞣花酸及没食子酰葡萄糖;石榴根中的鞣质主要为安石榴林和安石榴苷。
1.2黄酮类化合物目前从石榴中分离得到的黄酮类成分主要有黄酮、黄酮醇、花色素、黄烷-3-醇类等10多种化合物。
石榴皮中总黄酮含量(以干物质计算)为5.804%,石榴叶中为4.622%,石榴籽中为1.056%。
石榴籽中还含有芦丁和山奈素,含量分别为每千克鲜重1936.24mg和0.211mg,不含槲皮素。
石榴果汁、果皮因含有较多的花色素类成分而呈黄、红等颜色。
果汁中6种花色素(天竺癸素、矢车菊素、飞燕草素的单糖苷和二糖苷)的含量随果实成熟度增加而上升,在成熟早期,3,5一二葡萄糖苷是主要的花色素,飞燕草素衍生物成为其主要成分,在成熟后期,单糖苷的含量不断增加,达到甚至超过二糖苷,矢车菊素衍生物成为其主要成分。
果汁中除了6种花色素类成分外,还含有芦丁、原花青素、儿茶酚和儿茶素等化合物,果皮中含有天竺葵素和矢车菊素衍生物、原花青素、异槲皮苷等化合物,石榴籽种皮中则含有飞燕草素和矢车菊素的单糖苷和二糖苷。
石榴各个部位含有黄酮类化合物的情况如表2所示,可以看出,石榴汁中含有的黄酮种类最多,有10种。
果皮中含有5种黄酮类物质,果汁和果皮中有4种相同的黄酮。
树叶中有4种黄酮,与果汁、果皮中的黄酮不同,在石榴树皮中未发现含有黄酮类化合物。
表2黄酮类化合物在石榴各部位中的分布1.3有机酸类化合物石榴汁中含有机酸类成分较多,其中柠檬酸含量最高,平均含量达 4.85g/L,其次为L一苹果酸,平均含量1.75g/L,另外还有草酸、酒石酸、奎宁酸和琥珀酸等。
酚酸类化合物有咖啡酸、原儿茶酸、阿魏酸、邻一香豆酸、绿原酸、新绿原酸和对一香豆酸。
石榴果皮中的有机酸有奎宁酸、熊果酸、桦木酸和苹果酸。
石榴籽中富含脂肪酸类化合物,其中饱和脂肪酸占 4.43%,其余为不饱和脂肪酸。
石榴酸(9Z,11E,13E一十八碳三烯酸)为不饱和脂肪酸的主要成分(含量31.8%～86.6%),其次还有亚油酸(0.7%～24.4%)、油酸(0.4%～17.7%)、棕榈酸(0.3%～9.9%)、硬脂酸(2.8%～16.7%)、二十碳烯酸、花生酸等,各成分含量因产地和品种而有所不同。
1.4生物碱类化合物石榴中主要含哌啶类和吡咯烷类生物碱,果实中的生物碱主要存在于果皮内,包括石榴碱、伪石榴碱、N-甲基石榴碱、N-乙酰石榴碱、2-(2’-羟丙基)-△1-哌啶等。
在根皮、枝皮和果皮中均有生物碱分布。
1.5其它化合物石榴中还含有苯丙素类化合物、甾类化合物以及三萜类化合物,甾类、磷脂主要分布于石榴籽中。
甾类有雌甾酮、雌二醇、睾丸激素、雌甾三醇、胆甾醇以及非甾类雌激素拟雌内酯等,磷脂包括卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酸酰和溶血磷脂酰乙醇胺等。
此外,石榴籽中还含有豆甾醇。
2石榴的医疗保健功效2.1传统医疗保健作用石榴被称为“九州神果”,除食用外,其果皮、根皮、果实、花、叶均可入药,对多种疾病都有预防和治疗作用。
《名医别录》中提及,石榴能“疗下痢,止漏精”。
《普济方》中载有,“治久痢不癔,陈石榴焙干,为细末,米汤调下。
”《罗氏会约医境》写到,“石榴果皮,性酸涩,有断下之功,止泻痢、下血、崩带、脱肛、漏精。
”《图经本草》中记载,“榴叶者,主治咽喉燥渴、止下痢精、止血之功能。
《本草纲目》记述,酸石榴果皮酸、温、涩、无毒,可治疗赤白痢下、久痢久泻、疗肿恶毒、肚子生疮。
石榴花可止鼻阻、吐血及外伤出血,外用则可治中耳炎,石榴花泡水洗眼,有明目之功效。
2010版中国药典载录,石榴果皮具有涩肠止泻、止血、驱虫的功能,用于久泻、久痢、便血、脱肛、崩漏、白带、虫积腹痛。
石榴的花、果实、果皮、树皮在维医、蒙医和藏医中也作为传统药物得到广泛应用。
2.2现代化学成分与生物活性研究近年来,国内外在开发研究石榴医疗保健功能的化学成分方面开展了大量的工作,研究发现最具医疗特性的化学成分是鞣花酸、鞣花单宁(包括安石榴苷)、石榴酸、类黄酮、花青素和黄酮类物质。
关于石榴各部分在抗氧化、消炎、抗癌、抗菌、调节血脂、预防动脉粥样硬化等方面的积极作用逐步得到证实。
众多的研究工作使石榴在传统医学中的应用功效得以科学地验证,并进一步拓展了其在防病治病方面的应用范围。
2.2.1抗氧化活性石榴多酚中的鞣质类具有较强的抗氧化作用,鞣花酸能与金属离子螯合、与自由基反应,从而具有抗氧化功能。
鞣花酸和它的衍生物对线粒体、微粒体中的类脂化合物的过氧化作用有很好的抑制活性。
郭长江等比较了66种蔬菜、水果的抗氧化活性,发现水果中石榴的抗氧化力较为突出,比苹果、梨、桃高出3.5～10倍。
石榴皮提取物可通过清除多种自由基(O2-、-OH、R00-)、提高抗氧化相关酶(GSH-Px、SOD、PON)活性来提高血抗氧化防御体系功能、减少氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)产生的氧化应激损伤,同时通过促进一氧化氮(NO)合成来降低血小板及单核细胞的粘附、平滑肌细胞的迁移和增殖;此外,对血脂也有潜在的调节作用。
石榴叶和石榴皮的提取物对二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的清除率分别为93.35%和80.65%,对猪油也有较好的抗氧化作用。
对比茶研究发现,石榴叶茶的茶多酚含量是绿茶的1.594倍,榴叶茶对DPPH自由基的清除力是绿茶的1.70倍,对2.2连氮基双(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6一磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除力是龙井茶的1.56倍,充分说明榴叶茶的抗氧化能力显著强于绿茶。
Sudheesh等用石榴提取物以每日10mg对大鼠口服用,结果表明,大鼠肝脏中丙二醛、氢过氧化物和共轭二烯烃含量显著降低,而过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶的活性显著增大,且组织中谷胱甘肽含量增大,证明石榴提取物具有显著的抑制过氧化作用。
Seemm等对从石榴汁中提取的石榴鞣花素、石榴单宁、鞣花单宁、鞣花酸与石榴汁提取物的抗氧化性做比较得出,石榴汁提取物的抗氧化性最强,其次是石榴单宁、石榴鞣花素,最弱的是鞣花酸。
说明石榴汁总提取物比单个成分具有更强的生物活性,也说明石榴汁所具有的生物活性是多个成分的化学协同作用。
2.2.2消炎、抗肿瘤活性石榴果皮提取物具有防治人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的作用,对细胞一氧化氮合成和一氧化氮合酶(NOS)的基因表达也有抑制作用。
Lee等研究表明,石榴皮亭B是石榴具有消炎作用的特性成分。
石榴及其产品中含有延缓衰老、预防心脏病及减缓癌变进程的高水平抗氧化剂。
石榴提取物在8mg/ml浓度下作用MCF-7乳腺肿瘤细胞,抑制率在65.95%～99.34%之间,具有明显抑制MCF～7细胞生长的作用。
国外对大量植物研究发现鞣花酸具有强大的抗癌和抗氧化活性,且主要集中在对石榴中鞣花酸的研究。
Lansky等发现,石榴提取物有抑制前列腺癌的作用,并证实几种石榴化学成分协同作用抑制前列腺癌的效果要优于鞣花酸。
2.2.3抗菌与抗病毒活性石榴果皮提取物在体外对志贺、施氏、福氏、宋氏等4种痢疾杆菌及伤寒杆菌、结核杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌等多种细菌均有抑制作用,对堇氏毛癣菌、同心性毛癣菌等多种皮肤真菌也有不同程度的抑制作用。
以上抗菌作用可能与所含大量鞣质有关。
鸡胚法试验证明,石榴皮煎剂稀释1～10万倍仍有抑制流感病毒(甲型PR8)的作用。
近几年发现石榴皮水煎液在体外试验中能明显抗生殖器疱疹病毒(HSV-2),还可抑制淋球菌生长,并证实鞣质是其抗HSV-2的活性成分。
石榴皮水提液在体外对乙型肝炎病毒(HBV)也有灭活作用。
2.2.4其它活性石榴果皮因含大量鞣质,能调节人体凝血酶含量,有助于局部创面愈合或保护其免受刺激,因而有涩肠、止血的功能。
石榴果皮驱除肠道寄生虫的机制可能是作用于其肌肉,使之持续收缩,达到驱虫目的。
动物试验表明石榴果皮、叶提取物对大鼠胃具显著保护作用,并可加强小鼠小肠蠕动。
石榴果皮多酚提取物还具有降低血脂和肝脂的作用。
叫。
近年来,石榴广泛用于预防和治疗心血管疾病、糖尿病、牙齿疾病、男性功能障碍等疾病和防止紫外线辐射,除此之外,还对婴幼儿脑部缺血、阿尔茨海默病、关节炎和肥胖症等具有一定疗效。
3开发利用现状石榴可谓全身是宝,石榴的叶、花、果皮、根皮、种子等均含有丰富的生物活性物质,是食品、药品、保健品、护肤品等的天然活性成分的可靠来源。
石榴特别是石榴皮中含有丰富的多酚、花青素及黄酮,可用做天然抗氧化剂应用于食品。
植物多酚具有独特的化学和生理活性,在护肤品中可起多重保护作用,如抗氧化、抗衰老、抗紫外线、增白和保湿等,对多种因素造成的皮肤衰老(皱纹和色素沉着)有独到的功效,具有很高的开发利用价值。
随着人们对石榴价值认识的深入,国内外众多学者也对石榴的栽培、开发利用等方面给予了更多的关注,使更加广泛地开展石榴深加工成为可能。
国外已利用石榴籽的提取物加工为香精,将石榴皮的提取物加工为用于预防糖尿病的保健品,用石榴提取物治疗皮肤疾病,以及从石榴中分离提取了一种核酸尿素酶来重组不饱和脂肪酸等。
