离子色谱法对食品中亚硝酸盐检测的研究和讨论

ICS67．050B 04N Y 中华人民共禾口国农业行业标准NY／T 1 375—2007植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定离子色谱法Determination of N i tr i te an d N i tr a te in Pl ant Pro duc tsIo n Chromatography Method2007-06一{4发布2007-09—01实施中华人民共和国农业部发布NY／T 1375—2007刚旨本标准的附录A为资料性附录。

本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。

本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、浙江大地农作物产品质量安全检测中心。

本标准的主要起草人：徐霞、陈能、王敏、朱智伟、段彬伍、郑床木、闵捷、于永红。

NY／T 1375—2007植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定离子色谱法1范围本标准规定了采用离子色谱测定粮食、蔬菜、水果等植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的方法。

本标准适用于粮食、蔬菜、水果等植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定。

本方法的线性范围：亚硝酸盐为0．05 mg／L--20rag／L(以N02-计)、硝酸盐为0．05 rag／L--50 rn g／L(以N03计)。

本方法的检出限：亚硝酸盐为0．1m g／k g(以N a N02计)、硝酸盐为0．2m g／k g(以N o N03计)。

2原理在弱碱性条件下，用热水提取样品中亚硝酸根离子(N02)和硝酸根离子(N03-)，经净化后，用离子交换色谱一电导检测器(或紫外检测器于波长210 rim处)测定，外标法定量。

3试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，所用的水为电导率小于1”S／em的去离子水。

3．1亚硝酸钠(NaN02)，基准试剂。

3．2硝酸钾(KNOs)，基准试剂。

3．3氢氧化钾溶液[C(K OH)=1m ol／L]：称取6 g氢氧化钾，加入新煮沸过的冷水溶解，并稀释至100 mL，混匀。

3 4亚硝酸根离子标准贮备液(1 000 mg／L)：称取1．500 0 g于115"C±5"C烘至恒重的亚硝酸钠(3．1)，溶于水，置于1 000mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。

离子色谱法测定大白菜中的亚硝酸盐含量变化作者：李舒李艳丽骆强来源：《科技创新导报》2011年第05期摘要:本文利用ICS-2000离子色谱法对大白菜中的亚硝酸盐在不同状态下含量变化的研究。

结果表明白菜中亚硝酸盐随时间增加而增加,加热后能够较大程度上降低蔬菜中亚硝酸的浓度,且该方法检测的NO2-浓度在0～2mg/L范围内有良好的线性关系(r=0.9999),最小检测值为0.0001mg/L,实样加标回收率在98.55%～101.61%之间。

关键词:离子色谱法白菜亚硝酸盐中图分类号:O657.75 文献标识码:Ａ文章编号:1674-098X(2011)02(b)-0213-01亚硝酸盐是致癌物质亚硝胺的前体物,广泛存在人类的生活环境中,威胁着人们的身体健康。

蔬菜中富含硝酸盐,在适当的环境下硝酸盐能被转变为亚硝酸盐[1,2]。

上海市地方标准《安全卫生优质蔬菜》(DB31/T258.1-2001)中就规定,蔬菜中亚硝酸盐限量卫生标准为≤4mg/kg[3]。

为了了解亚硝酸盐在蔬菜中的变化,本文采用ICS-2000离子色谱/电导检测器方式,对大白菜中的亚硝酸盐在不同条件下含量进行检测、分析,具有精密度高,操作简便,易推广的特性。

1 材料与方法1.1 仪器和试剂ICS-2000离子色谱仪(Dionex)配EG40电导检测器和Chromeleon色谱工作站,C18柱;层析柱:0.8cm内径×10cm高层析管;732#强酸型阳离子交换树脂(中号),分析和测定用水均为超纯水(电阻率≥18.2MΩ·cm)。

1.2 离子色谱分析方法分析条件:DionexIonPacAS19分析柱+AG19保护柱;抑制器:ASRS ULTRA Ⅱ,4mm;抑制模式:自循环再生;流速:1mL/min;进样体积(定量环):500μL;检测器:Dionex电导检测器;淋洗液:氢氧化钾,淋洗梯度淋洗见表1。

1.3 样品实验从郑州市某菜市场购得白菜,把样品分为两份,一份不添加食盐作为对照,另一份添加食用盐,分别将白菜设置为放置0、6、24h和放置24后加热至沸腾4个处理,每个样品测定2次平行进样,取平均值计算。

发色剂亚硝酸盐的检测技术及研究进展后附《火腿、香肠中亚硝酸盐含量测定》摘要：亚硝酸盐是一种典型的发色剂，广泛存在于水体和食品中，可在人体内与仲胺、叔胺和氨基化合物反应形成强致癌物亚硝胺化合物，因此对亚硝酸的检测是十分必要的。

本文综述了近年来国内外亚硝酸盐检测方法研究现状，主要包括光度法、电化学法、色谱法，并对未来检测方法提出了展望。

关键字：亚硝酸盐；检测技术；发色剂1 引言发色剂又称护色剂，是能以肉及肉制品中呈色物质作用，使食品加加工、保藏等过程中不被分解和破坏，呈现良好色泽的物质。

常用的发色剂有硝酸盐或亚硝酸盐。

由于研究发现腌肉中的亚硝酸盐能生成致癌物质亚硝胺，因而硝酸盐和亚硝酸盐的使用引起争议，但一般认为只要控制好使用量，就不会达到中毒员的程度，相反还能达到抑制微生物和产生特殊风味的作用，因而认为是人可取代也无须取代的物质，甚至认为在人的唾液、胃液中，也存在亚硝基物质，许多天然植物(如菠菜)也存在亚硝基物质，只要不达到足够的量，对人体应该是安全的。

然而很多不法分子为改善食品的色泽，恢复食物原来的颜色，而在腌肉等食品中加入过量的亚硝酸盐、硝酸盐等发色剂，严重地危害了消费者的人生安全。

因此寻找一种快速，准确测定食品中亚硝酸盐含量的检测技术势在必行。

2 亚硝酸盐的发色原理亚硝酸盐本身并无着色能力，但其与肉中的乳酸发生复分解反应而生成亚硝酸，亚硝酸很不稳定容易分解产生氧化氮，氧化氮与肌肉纤维细胞中的肌红蛋白结合而产生鲜红色的亚硝基肌红蛋白，也可与血红蛋白形成亚硝基血红蛋白，使肉制品保持稳定鲜艳的红色。

3 亚硝酸盐的检测技术3.1 光学分析法光学分析法主要是根据物质发射、吸收电磁辐射以及物质与电磁辐射的互相作用来进行分析的在亚硝酸盐的测定中主要有：可见光分光光度法、催化光度法、荧光光度法。

3.1.1 可见光分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定量分析的方法利用苯胺作重氮化试剂、α-萘酚为偶联剂对分光光度法测定肉制食品亚硝酸盐含量进行了研究。

提高样品低浓度区亚硝酸盐检测准确度的方法为了提高食品样品在低浓度区亚硝酸盐的检测准确度，文章以椰果样品为例，进行亚硫酸盐的检测方法的优化试验。

这就要求在国际检测方法的应用过程中进行传统椰果样品检测方法的改变，进行样品稀释度的调整，分光光度计精度的控制。

针对所分析样品的浓度，进行标准曲线浓度的降低，得到另一种标准曲线。

实践证明，通过对该检测方法的应用，可以有效提升试验的整体灵敏度，具备良好的操作稳定性，操作比较简单，能够取得不错的工作效益。

标签：椰果；亚硝酸盐；检测模式；检验流程；检测精度1 椰果样品亚硝酸盐的相关应用材料与方法（1）椰果样品亚硝酸盐检测应用过程中，需要满足我国相关的食品检测规定要求，积极做好样品的处理工作。

实验证明，如果分光光度计的应用不恰当，就不能确保标准曲线的良好线性，从而导致检测结果的不准确。

为了提升椰果样品亚硫酸盐的整体精密度，做好亚硫酸盐值的反复检测工作是必要的，积极进行相关试验的积累，保证整体检测工作精度的提升。

在椰果样品检验过程中，其样品是市场上抽取的普通商品，准确好不同型号的蛋白沉淀剂、显色剂，进行亚铁氰化钾溶液、乙酸锌溶液的配置。

（2）在椰果样品的制备过程中，首先需要进行椰果样品的均匀搅拌，将大约二百克的椰果放入食品粉碎机中进行搅碎。

搅碎的标准是椰果内的固液混合物呈现细腻及其黏糊状。

在监测应用过程中，需要注意到椰果样品内部不含脂肪，其内部含有一定量的蛋白质。

需要抽取不同重量的样品，进行不同编号比色管的放入。

再进行不同型号的蛋白沉淀剂的放入，进行不同浓度的样品混合液的制作，并且将这些样品放入一百毫升的比色管中进行定容。

在做好定量滤纸的过滤工作，保证足够滤液量的使用。

除了要做好椰果样品的制备工作，也需要进行亚硝酸钠标准曲线的制备工作，完成这两个步骤后，就可以进行样品测定工作。

进行一定温度干燥后的亚硫酸钠的选取，加入水进行溶解，将其定容到一百毫升，它的浓度为每毫升一百毫克，将其作为标准原液，将这些原液进行储存，贮存温度为恒温4摄氏度。

离子色谱法测定燕窝中亚硝酸盐的含量黄艳梅;孙春蕾【摘要】@@ 燕窝因其含有人体必需的多种高级蛋白质,一直有着"东方珍品"的美誉.就在燕窝系列产品消费日渐升温之时,燕窝的安全和质量问题也日益突显.基于利益驱动,许多商家通过改变燕窝的形状、颜色,如染色、漂白、沾胶等尽可能将燕窝做得"漂亮"以吸引消费者.亚硝酸盐与硝酸盐的功能是护色剂和防腐剂,它们不仅使燕窝制品呈现良好的色泽,还可以防止肉毒杆菌等微乍物对燕窝的破坏.但是亚硝酸钠是食品添加剂中急性毒性较强的物质之一.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2011(020)002【总页数】3页(P79-81)【作者】黄艳梅;孙春蕾【作者单位】安徽亳州市产品质量监督检验所,亳州,236800;安徽亳州市产品质量监督检验所,亳州,236800【正文语种】中文燕窝因其含有人体必需的多种高级蛋白质，一直有着“东方珍品”的美誉。

就在燕窝系列产品消费日渐升温之时，燕窝的安全和质量问题也日益突显。

基于利益驱动，许多商家通过改变燕窝的形状、颜色，如染色、漂白、沾胶等尽可能将燕窝做得“漂亮”以吸引消费者。

亚硝酸盐与硝酸盐的功能是护色剂和防腐剂，它们不仅使燕窝制品呈现良好的色泽，还可以防止肉毒杆菌等微生物对燕窝的破坏。

但是亚硝酸钠是食品添加剂中急性毒性较强的物质之一。

近两年，笔者在测定白燕、血燕及燕窝制品中的亚硝酸盐时发现大部分燕窝含有亚硝酸盐。

按照使用量说明来计算，其中部分产品的含量满足亚硝酸盐在肉类中使用限量的国家标准[1]，但也有的产品大大超标，如有的血燕中以亚硝酸盐计的含量高达3 000 mg/kg，而国家对熟肉制品中亚硝酸盐残留量不超过30 mg/kg。

因此加强对燕窝中亚硝酸盐的检验监督十分必要。

目前燕窝行业没有相应的国家标准，燕窝中亚硝酸盐的检测也未见报道。

GB 5009.33-2010[2]规定采用氢氧根体系梯度淋洗，30 min完成分析。

食品中亚硝酸盐检测方法对比分析摘要：亚硝酸盐是一种食品添加剂，在食品添加剂的标准中，针对亚硝酸盐的添加标准进行了明确规定，避免过量的亚硝酸盐造成对人体的伤害，因此在食品生产中，常常会借助检测方法来对亚硝酸盐的含量进行检测，来获取准确的亚硝酸盐含量数据，更好的保障食品的安全生产。

在科技的支持下，我国的亚硝酸盐检测技术水平也得到了很大的提升，进一步将检测的准确度得到了有效控制。

本文在研究中将进一步围绕当前常见的食品亚硝酸盐的检测方法进行分析，并且针对分光光度法、离子色谱法两种常见的检测方法结果进行对比分析，进而更好的为食品亚硝酸盐的检测带来参考，提升检测方法应用的合理性。

关键词：食品；亚硝酸盐；检测方法；对比分析一、引言亚硝酸盐是是一种含氮无机化合物，是一种食品标准允许的添加剂，但是这种添加剂自身也具有一定的致癌危害，人体一旦摄入大量的亚硝酸盐会造成中毒等危害的产生，目前在食品当中常见的亚硝酸盐主要是亚硝酸钠，由于该类食物添加剂的危害很大，在食品的生产中就需要借助科学的检测方法，来实现对亚硝酸盐含量的科学控制。

针对亚硝酸盐的检测会借助一些专业的检测方法和设备进行，在近几年我国信息化和科技的发展中，亚硝酸盐的检测技术也得到了快速发展，更好的在检测的准确度上得到了提升[1]。

目前常见的亚硝酸盐检测方法有分光光度法、滴定法、离子色谱法以及电化学法等，不同的检测方法在检测的灵敏度、准确性等方面也存在一定的差异，为了更好的给食品亚硝酸盐检测方法的合理应用带来参考，针对不同检测方法的对比分析是十分有必要的，更好的为食品的安全生产带来保障。

二、食品中亚硝酸盐常见检测方法（一）分光光度法分光光度法利用被测物质在一定波长范围内对光的吸收情况，实现定性和定量分析，在当前食品亚硝酸盐的检测中得到了广泛应用。

在具体的检测中，可以借助不同的波长光照，结合溶液对光的吸收强度，来分析在检测物中待测定物质的含量[2]。

分光光度法可以氛围紫外分光光度、荧光光度和可见分光光度等方法，利用分光光度法对食品中亚硝酸盐的检测，充分发挥了该检测方法精密度良好的特征，呈现出了更高的稳定性，更加准确的实现了对亚硝酸盐含量的测定，并且减少了对环境造成的污染。

基于离子色谱分析的剩菜中亚硝酸盐含量变化研究作者：康勇康恺宁来源：《食品界》2017年第10期提出问题相关研究文献表明，人体食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒，3克导致死亡。

文章拟采用离子色谱分析的创新性研究方法，通过对剩菜中的亚硝酸盐含量变化进行动态监测，提取相关数据，以便对剩菜的食用安全性进行评估。

实验准备实验器材准备。

实验直接相关的重要器材（见表1）。

实验样品准备。

要验证剩菜到底能不能吃，必须准备一些相应的食物。

笔者选取一家昆明西市区生意火爆的大排档餐馆，请他们做三道菜。

其中一道是肉蛋类（青椒炒火腿），一道是混合材（番茄炒鸡蛋），一道是纯蔬菜（干椒炒白菜）。

这样选材的目的是通过对不同菜肴的检测来取得对不同材质中亚硝酸盐变化的实验结果。

研究过程样品前处理。

准备好菜肴，用食品粉碎机打碎样品，再取出需要的份量装入离心冻存管。

向离心冻存管中加入纯净水（去离子水），并放入超声波清洗器超声混匀30分钟。

将混合液冷冻离心15分钟（4℃，10000 转/分钟），去上清液，用定量分析滤纸粗滤。

用除油试剂出去样品溶液中的脂肪酸类成分后，冷冻离心15分钟（4℃，10000 转/分钟），分离出所需水溶液层。

定量吸取水溶液层，稀释定容后依次通过炭黑柱、C18 柱、Ag 柱和Na 柱等4种固相萃取柱，分别出去色素、疏水性化合物、卤素阴离子和重金属等杂质，得到待测样品溶液。

样品检验分析。

1.将待测样品溶液装入测定管放入离子色谱仪，与提前配制好的亚硝酸盐对照品溶液共同进样，开始第一次分析，得到数据为3种样品的亚硝酸盐含量初始值。

2.为了模拟日常家庭剩菜的保存方式，比较剩菜密封保存在冰箱和密封保存在常温情况下（23℃），亚硝酸盐含量的变化。

将3种样品都分成6份，3份密封保存放在4℃±0.5℃的冰箱中；3份密封保存在23℃控温的空调房间实验台上。

定时取相应数量样品，前处理后分组采集数据。

3.6小时后，重复上述样品前处理步骤，采集第二组数据（模拟当天剩菜）。

FOOD INDUSTRY ·137表１毛兰珍 义乌市产品（商品）质量监督检验研究院离子色谱法测定火腿中亚硝酸盐含量量瓶中，加水稀释至刻度,混匀。

溶液经滤纸过滤后，取50ml溶液于10000r/min离心15min，上清液备用，待净化。

净化：取上清液约10mL，通过0.22μm 水性滤膜针头滤器、再依次过活化好的串联一起的RP柱、Ag柱和Na柱，弃去前面3mL，收集后面洗脱液，过0.22μm 水性滤膜针头滤器，待测。

固相萃取柱其活化过程为：R P 柱（1.0mL）使用前依次用10mL甲醇、15mL 水通过，静置活化30min；Ag柱（1.0mL）和Na柱（1.0mL）用10mL水通过，静置活化30min。

仪器条件。

（1）色谱柱:高容量阴离子交换柱，IonPac AS19（4mm×250mm）；保护柱，IonPac AG19 （4mm×50mm），柱温设置为30℃。

（2）淋洗液：Dionex EGC Ⅲ KOH。

（3）抑制器：ASRS 300 4-mm。

（4）检测器：电导检测器，检测池温度为35℃。

（5）进样体积：30μL。

（6）色谱分离条件：流速：1.0m L /min；淋洗液为氢氧化钾溶液，浓度为5mM ～60mM；洗脱梯度为5mM运行20min， 5mM～60mM运行10min ，60mM运行5min 5min，5mM再运行5min。

结果将亚硝酸钠标准使用溶液依次进样，得到0.02~0.20mg/L浓度亚硝酸溶液的峰面积。

以此峰面积为纵坐标y，标准溶液浓度为横坐标x，绘制标准曲线，得到线性相关系数R为0.9995，线性良好。

检出限为0.10mg/kg。

腿作为中国腌腊肉制品中的精华，具有独特的芳香，悦人的风味，深受百姓的喜欢。

火腿经数月腌制后，为保证肉质色泽鲜红和特有的口味，不腐败变质，易于储存和运输，往往在腌制过程中添加防腐剂及护色剂—亚硝酸盐。

在2015年10月，世界卫生组织将加工肉制品列为“一类致癌物”，主要是因为加工肉制品中会添加亚硝酸盐，它在机体内能转化成亚硝胺，亚硝胺是一种强致癌物质。

离子色谱检测全血中的亚硝酸盐及其代谢产物李晓莹【摘要】目的:探讨离子色谱法在亚硝酸盐和代谢产物中的应用价值.方法:取全血和水的混合液体为样本,选乙腈沉淀血蛋白,经过C18柱、Na柱、Ag柱去除有机物与Cl-,将所得制备品使用离子色谱仪进行检测,评价离子色谱的检测效果、分析样品的准备和处理所应具备的条件.结果:以空白全血为对照,亚硝酸盐和代谢产物在色谱图上的保留时间分别为9.87min、18.69min.全血中NO2-的检出限为0.16μg/mL,总回收率为96.3％～104.5％.结论:乙腈是很好的血蛋白沉淀剂、C18柱很好地去除有机物、Na柱很好地去除银离子、Ag柱很好地去除Cl-;离子色谱检测重现性好,灵敏度高.【期刊名称】《中国医疗器械信息》【年(卷),期】2018(024)005【总页数】2页(P11,19)【关键词】离子色谱;全血;亚硝酸盐;代谢产物【作者】李晓莹【作者单位】辽阳市疾病预防控制中心检验科辽宁辽阳 111000【正文语种】中文【中图分类】TH776亚硝酸盐是一种致毒性、致死性很强的物质，它进入人体在血中代谢的游离与血红蛋白高效结合夺取血液中的氧，使中毒者很快窒息死亡[1]。

亚硝酸盐的致死剂量一般为3g，而可引起中毒症状的最低剂量为0.3g。

血液是检测亚硝酸盐及其代谢产物最为敏感的指标，对于血液亚硝酸盐含量检测方法也有很多种，常见的一般使用的是化学分光光度、极谱法以及离子色谱法[2]。

本文主要探究离子色谱法检测全血中的亚硝酸盐以及代谢产物浓度的实验效力，评价这种方法的灵敏度和准确性是否可用于临床辅助诊断，现报告如下。

1.资料与方法1.1 临床资料ICS-5000+型离子色谱仪（配备KOH淋洗液自动发生器、AS自动进样器，美国ThermoFisher公司），entrifuge 5430型高速离心机（德国艾本德公司）[3]，SK-1型快速混匀器（金坛市顺华仪器有限公司），Milli-pore Direct Q-5超纯水仪（美国密理博公司）。