血细胞形态学

外周血细胞形态学分析　

李悦　

（黑龙江省七台河市红旗医院　黑龙江七台河　１　５４６０３）　交流园地　

【摘要】近年来，全自动血液计数仪已能提供愈来愈丰富的血细胞计数和形态学方面的信息，但对于血液自动计数仪不能发现的细微的　

血液形态学改变，仍然要求对血涂片进行全面．仔细地观察和分析。　【关键词ｌ血细胞　血涂片　

【中图分类号ｌ　Ｒ４４６．１　【文献标识码Ｊ　Ａ　【文章编号ｌ　１６７４—０７４２（２００９）０３（ａ）一０１７４—０１　

常规工作中外周血的血细胞形态学检查主要是指对染色的血　

涂片中的血细胞的大小、形态等所进行的检查，在造血系统疾病　

时，最常出现血细胞数量、形态和功能的改变。一张良好的血涂片　

要求厚薄适宜、头体尾明显、血膜边缘整齐，染色良好。仅用少量　

的外周血，做成合格的外周血涂片，做显微镜观察，有以下优点：　

可排除一些疾病；大致明确甚至肯定一些疾病，尤其是某些血液　

疾病；由于人为因素或某些外因变化，化验结果与实际出入较大　

时，外周血涂片对三系细胞数量的认定有修正作用。观察一张血　

涂片，要观察红细胞系统、粒细胞系统的改变。观察红细胞系统要　

注意到有无有核红细胞，成熟红细胞的大小、形态及着色等有无　

异常，是否出现异常结构。观察粒细胞应该观察各种粒细胞所占　

比例，有无幼稚细胞、有无病理形态学改变。对于血小板的观察，　

应该注意其数量、形态和聚集性等。　

１　红胞形态学分析　

红细胞呈双凹圆盘状，直径７．２ｕｍ，经瑞氏染色后，呈淡橙红　

色，中心区的１／３着色浅淡，为生理性中心浅染。血涂片中的红细　

胞以小细胞低色素为主，中心淡染区扩大，考虑缺铁性贫血，典型　

改变者，根据血清铁明显低下，总铁结合力明显升高等检查，即可　

诊断。血涂片中红细胞以高色素大细胞主，过多伴有分叶的中性　

粒细胞，甚至伴有巨大晚幼粒细胞或巨大杆状细胞，可考虑到巨　

幼细胞贫血。应进行叶酸和维生素Ｂ。，的测定和骨髓像检查，以排　

除骨髓增生异常综合征的诊断。　

血常规中血细胞的形态学观察

摘要： 近年来随着血液分析仪在国内检验科的迅速普及使血常规检验的参数逐渐增多，这不仅提高了工作效率和工作质量，而且为临床医生提供了更广泛的参考数据。血液分析仪的白细胞分类计数先后推出了两分类，三分类，四分类和五分类的仪器。应该说血液分析仪的飞速发展使血常规检验进入了新阶段，这是医学检验的一大进步，但是在血液分析仪使用过程中也出现了一些影响检验质量的问题，应引起高度重视。

关键词: 血细胞；镜检

1 血液分析仪使用过程中存在的问题

血液分析仪的白细胞分类虽然达到了比较完善的程度，但是不能发现异常血细胞及血液寄生虫，而染色的血涂片可以弥补这些不足。目前国内普遍使用的两分类和三分类仪存在的问题如下:

有些检验人员对血液分析仪原理缺乏了解，过分依赖仪器，只看打印数据，对异常结果未作全面分析，盲目发报告。

部分检验人员不会分析白细胞直方图，不了解异常报警的含义，对于是否需要作镜检不能正确判断，造成漏检。

有的检验科自从使用血液分析仪后只要临床医生未注明就不再作镜检，仅凭血液分析仪发出白细胞计数的报告，从而造成漏诊过误诊，如仪器报告淋巴细胞增多，镜检为大量幼红细胞，仪器报告小白细胞增多，镜检为异常淋巴细胞等，有的漏检疟原虫。

有的厂家或产品销售人员对产品宣传不符合实际情况，如“该血液分析仪可减少人工分类的工作量”等造成检验人员忽视血细胞形态学观察。

2 典型误诊的病例分析

例 王某某，男，12 岁，咳嗽发热，曾诊断为上感，systemXF-800

血细胞计数仪检查 血红蛋白120 g/L 血小板150×109/L 白细胞×109/L中性

淋巴 涂片镜检嗜酸性粒细胞。诊断为嗜酸性粒细胞增多症。

目前国内使用的三分类仪器大多是根据白细胞体积的大小分类，不能区分幼稚，嗜酸性嗜碱性及单核细胞，更不能识别异淋和有核红细胞以及中性粒细胞异常改变，甚至一些小粒细胞当作中间细胞，一些大淋巴细胞当作粒细胞计数。 3 几点建议

第 1 页 共 4 页 血细胞形态学检验操作规程

1 检验目的

保证血细胞检查结果准确性，提供正确的细胞形态学信息，提高工作效率，为临床诊断提供依据，为临床治疗方案提供依据，以2005年国际血液学复检专家组推荐的41条规则为基础，建立适合本实验室使用血细胞分析仪器的复片规则

2 标本采集

2.1 毛细血管采血法：选用手指采血，采用WHO推荐采血部位以左手中指或无名指尖内侧为宜；采血时轻轻按摩采血部位，使中指或无指尖自然充血，消毒局部皮肤后，操作者用左手拇指和食指适度捏紧刺血部位，右手持消毒采血针自指尖内侧迅速刺入2-3mm，以稍加挤压血液能流出为宜，采血至事先配好的以EDTA-K2抗凝的小试管（约含EDTA-K21.0mg）中或直接推血片检查。

2.3 静脉采血：采用进口专供医学检验使用的真空采血管，真空管色泽为紫色，抗凝剂选用EDTA-K2，要求血中EDTA-K2终浓度为1.5～2.2mg/ml。

3 血涂片的制备和处理

3.1 血涂片的制作

a) 将血标本一滴置载玻片的一端，以推片一端从血滴前沿方向接触血液，使血液沿推片散开，推片与载玻片保持25°～30°的平面夹角，平稳地将血向前推动使血液即在载玻片上形成一薄层血膜，将制成的血膜在空气中挥动，使迅速干燥，以免血细胞皱缩；

b) 手工血涂片要求厚薄适宜，头体尾分明，边缘整齐，两侧应留有空隙；

c) 血涂片标本迅速干燥后用瑞氏-姬姆萨（Wright-Giemsa）复合染液进行染色，要求染液和缓冲液比例合适；所加染液不能过少；冲洗时不可先倒染液，应以流水从一端缓缓冲去；染色过深或过浅应进行复染。

3.2 血涂片的染色

3.2.1染色试剂

染液名称：瑞氏-姬姆萨（Wright-Giemsa）

主要成分

( a ) 瑞氏-姬姆萨A溶液：瑞氏染料、姬姆萨染料 2vials×250ml

( b) 瑞氏-姬姆萨B溶液：磷酸盐缓冲液 2vials×250ml

血形态识别参考文献

血细胞中包含红细胞、白细胞和血小板等，而白细胞的形态学检验是临床诊断提供有力的依据，具有广阔应用前景。目前，利用人工镜检的方式观察血细胞载玻片是普遍现状，但是人工对白细胞进行分类是枯燥和低效的，通过图像处理和模式识别等技术实现白细胞检测的自动化和智能化是当前的发展趋势。本文基于运动控制平台、彩色CCD相机、光学显微镜和高性能计算机搭建全自动血细胞检测系统，采用高效的图像采集方案并结合自动聚焦技术，获取高质量的白细胞显微图像，通过图像分割分类算法实现白细胞图像在线识别。采集图像方面，在低倍镜下利用二维离散小波定位单细胞层区域，并利用斑点检测的方法定位白细胞，然后在油镜下对定位的白细胞进行图像采集。

图像分割算法方面，针对计算机显微视觉图片的特点，通过筛选图像颜色模型，选取符合人眼观察的HSI颜色模型进行白细胞与背景图像的精确剥离。对比研究多种图像分割算法，区域生长算法在HSI模型的H通道上表现出良好的分割性能，满足下一步分割需求。在细胞核和细胞浆的提取方面，在白细胞背景剥离的基础上，对RGB模型B通道白细胞图像利用大津法(otsu)实现白细胞核和白细胞浆的提取。分类识别方面，建立了白细胞形态、颜色及纹理的特征库。基于数量少、可靠、独立和可区分的特征提取原则，筛选出表征白细胞形态学特征参数。

采用支持向量机和人工神经网络来对特征参数进行训练，在比较支持向量机的三个核函数和人工神经网络的分类精度之后，设计了BP神经网络白细胞形态学分类器，实现白细胞的高精度识别。基于以上研究，开发出一种基于计算机显微视觉平台的血细胞图像白细胞分类识别系统，实现了白细胞图像的高质量扫描采集、定位和分割、分类识别等功能，并在临床中替代了人工显微镜，提高了效率，降低了劳动强度，可以满足临床医学显微视觉中白细胞形态自动检测的需要。