ABO、Rh血型血清学

1例ABO血型系统抗体合并Rh血型系统抗体所致新生儿溶血病的试验诊断目的对出生30min出现黄疸并伴有贫血症状的新生儿进行血型血清学试验，为临床进一步的诊断、治疗提供依据。

方法对患儿血液标本进行ABO、Rh血型鉴定，红细胞直接抗人球蛋白试验，血清游离抗体鉴定，红细胞抗体放散试验；对患儿母亲血液标本进行ABO、Rh血型鉴定，血清抗体特异性鉴定。

结果患儿ABO血型为A型，Rh表型为DccEE，红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，血清和红细胞放散液中均检出IgG抗-E抗体和IgG抗-A抗体；母亲ABO 血型为O型，Rh表型为DCCee，血清中检出IgG抗-E抗体和IgG抗-A抗体。

结论该患儿血清及红细胞放散液中均检出IgG抗-E和IgG抗-A抗体，与母亲血清中检出的抗体相同，故可确诊为免疫性抗-E 抗体合并抗-A抗体引起的新生儿溶血病。

标签：HDN；ABO血型；Rh血型；免疫性抗体新生儿溶血病（hemolytic disease of the newborn，HDN）是因母婴红细胞血型不合，母体的免疫系统被胎儿红细胞致敏而产生IgG类抗体，这种抗体通过胎盘进入胎儿血液循环，引起同种免疫性新生儿（胎儿）红细胞破坏增加导致贫血，是儿科最常见的急性溶血性疾病之一，严重者可危及患儿生命或合并核黄疸等后遗症。

既往报道的HDN多数为ABO或Rh血型系统抗体引发所致[1-5]。

近日，我们发现1例由ABO血型系统抗体合并Rh血型系统抗体导致的HDN，报道如下。

1 资料与方法1.1 病例资料患儿母亲，35岁，汉族，无输血史，孕4产2，第1胎正常，第2、3胎都是在孕12周左右发生不明原因流产，第4胎足月顺产。

患儿出生后30min皮肤出现黄染，且呈进行性加重。

血样检查：总胆红素305.3μmol/L，间接胆红素198.7μmol/L，Hb102g/L。

为明确诊断，本研究对患儿及母亲血样进行了一系列血型血清学检测。

1.2 试剂与仪器抗-A、抗-B、抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-e、木瓜酶、抗人球蛋白试剂、谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）；聚凝胺试剂盒（珠海贝索生物技术有限公司）；ABO反定型红细胞由笔者自制。

新生儿溶血病血清学检查标准操作规程(一)检验目的检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。

(二)检验原理新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。

新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。

(三)适用范围适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。

(四)设备性能参数参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书。

(五)器材与试剂1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。

2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。

(六)标本要求1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。

2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。

检验科ABO及RH血型标准操作规程1.【目的】确保红细胞ABO及RH(D)血型鉴定试验的准确性，防止误定型，特制定本规程。

2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：EDTA -K2抗凝管采集血液2ml (标本应新鲜，注意避免污染)3.2患者准备：患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。

3.3容器添加剂类型：EDTA -K2抗凝管3.4实验试剂：1.ABO： 1. 1抗A、抗B和抗AB血型定型试剂。

1.25%A、B及O型试剂红细胞悬液。

1.3受检者血清。

1.4受检者5%红细胞盐水悬液。

2.RH 2.1IgG型抗D标准血清。

2.25%D阳性红细胞生理悬液。

2.3 5%D阴性红细胞生理悬液。

4.【测定原理】ABO血型鉴定：生理盐水凝集法一试管法常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。

常用的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。

②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体。

结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。

RH鉴定：红细胞RH表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清来鉴定。

虽然Rh血型系不能在盐水介不能在盐水介质中与红统中有许多种抗原，但常规只用抗D血清检查有无D抗原。

Rh(D)抗体属于IgG类，细胞发生凝集，因此必须采用低离子强度盐水试验或酶介质法。

5.【操作步骤】ABO鉴定步骤：1.试管架每一竖排准备2只试管，分别为抗A，抗B试管。

2.标本接收后进行标号，对应相应的试管标号。

3.分别加入A，B型标准血清和受试者的红细胞悬液各两滴，混匀后离心2分钟。

4.取出试管后用手指轻弹试管底，若沉淀物成团漂起，表示发生凝聚现象；若试管内沉淀物恢复悬液状态，表示无凝集现象。

试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程一、目的为规范ABO和RhD血型鉴定的技术操作，保证鉴定结果准确及临床输血安全有效。

二、适用范围适用于试管法进行ABO和RhD血型鉴定。

三、原理1、单克隆抗-A、抗-B试剂与受检者红细胞反应作为正定型，A、B、O型试剂红细胞与受检者血清（血浆）反应作为反定型，以检测受检者红细胞上的A、B抗原及血清（血浆）中抗-A、抗-B。

根据受检者红细胞表达的A、B抗原及血清（血浆）中抗-A、抗-B情况判断ABO血型。

2、单克隆抗-D试剂与受检者红细胞反应，检测受检者红细胞是否表达D抗原，根据结果判断RhD血型。

四、设备与试剂设备：普通离心机，血型血清学专用离心机，显微镜试剂：单克隆抗A抗B抗D试剂，3%-5%的A、B、O红细胞五、环境条件室温控制在18-27℃，湿度保持在30%-70%。

六、步骤和方法1、将受检者血标本离心分离血清（血浆）及压积红细胞，取压积红细胞30—50微升加生理盐水1毫升稀释成3%—5%红细胞悬液。

2、取干净试管6支，正定型分别标记为抗-A、抗-B，反定型分别标记Ac、Bc、Oc另标记抗-D，在标记为抗-A、抗-B、抗-D的3支试管中分别加入相应的单克隆试剂2滴约100微升，再各加入受检者3%—5%红细胞悬液1滴约50微升；在标记为Ac、Bc、Oc的3支试管中各加入受检者血清（血浆）2滴约100微升，再分别加入相应的A、B、O型试剂红细胞1滴约50微升，轻摇使试管内反应物混匀。

用血型血清学专用离心机120g离心1 min后观察结果。

3、首先观察有无溶血现象，然后轻轻转动试管，边转动边观察有无凝集，使沉于管底的红细胞全部悬浮。

如肉眼观察不能确定有无凝集时须在显微镜下观察确定。

4、结果判断4.2 ABO血型鉴定结果判定规则，如下表：4.3 RhD血型判定：红细胞与单克隆-D试剂凝集为RhD阳性，无凝集为RhD阴性。

七、质量控制单克隆抗-A、抗-B、抗-D试剂在有效期内使用，每批次在使用前应检测特异性和效价。

ABO＼RhD血型3种鉴定方法的比较目的:探讨进行ABO、RhD正反定型手工微柱法在血型鉴定中的应用。

方法:对门诊送检血样同时采用手工微柱凝胶法及手工盐水试管和玻片法进行ABO、RhD正反对比定型鉴定。

结果:一次性正确率,手工微柱凝胶法正定型为100%、反定型为99.92%;试管法分别达到99.92%、99.83%;玻片法正定型率正确率为98.91%。

结论:手工微柱凝胶法操作简单、快速,易于观察。

其灵敏度高于试管法与玻片法。

血型标本便于保存,利于事后复查,值得在二甲以上医院推广。

标签：微柱凝胶法;试管法;玻片法在做ABO血型鉴定时,临床广泛应用的玻片法虽操作简单、方便快捷,但在临床实际工作中却时有发生血型鉴定错误现象,而且往往是在患者需要输血治疗申请配血时被发现错定血型,导致临床科室对检验科产生不良印象,认为检验质量差,检验结果不准确、不可靠。

对检验科工作会产生很大的负面影响。

试管法是传统经典的ABO、RhD血型鉴定方法,其结果准确可靠,但与微柱凝胶法相比,敏感性较差,操作难以规范化、自动化、检测结果不易保存,而微柱凝胶法用于ABO、RhD血型鉴定易于自动化、标准化、结果准确可靠,特异性强等优点被许多大医院所采用。

笔者在湘雅三院输血科进修学习期间,对于门诊每天送检血型鉴定标本同时采用手工微柱凝胶法鉴定ABO、RhD血型结果与试管和玻片法进行ABO、RhD血型鉴定结果进行比较。

1材料与方法1.1材料湖南省湘雅三院输血科2009年1月~2009年6月门诊血型鉴定1 193例,抽取静脉血1 ml用EDTA-K2抗凝,年龄1 d～90岁。

1.2试剂ABO、RhD血型定型微柱凝胶试剂卡(单克隆抗体)(长春博迅生物技术有限责任公司提供)反定型用的A型标准试剂细胞、B型标准试剂细胞由本实验室自制2%~5%试剂红细胞,按第一版《临床输血手册》[1]操作。

1.3设备TD-3A型血型血清学专用离心机(长春博研科学仪器有限责任公司生产)1.4 方法对门诊送检血样同时采用手工微柱凝胶法及手工盐水试管法进行ABO、RhD正反定型鉴定。

什么是ABO血型系统和Rh血型系统
ABO血型系统是根据红细胞表面所含有的抗原类型将血液分为A型、B型、AB型和O型。

红细胞上仅有抗原A者为A型血，只有抗原B者为B型血，若同时存在A和B抗原则为AB型血，这两种抗原俱无者为O型血。

ABO血型系统是临床上使用最为广泛的血型系统，输血时需要鉴定和区分ABO血型系统内的供血者和受血者的血型，以防止发生溶血反应。

Rh血型系统是根据红细胞表面是否存在D抗原来规定的，含有D抗原的是Rh阳性，不含有D抗原的是Rh阴性。

Rh阳性人群占全球大部分人口，Rh阴性人群则相对较少。

由于Rh阴性血型在汉族人口中仅占3‰左右，因此又被称为“熊猫血”。

ABO血型系统和Rh血型系统是两种主要的血型系统，它们的存在和应用对于确保输血安全和拯救生命具有重要意义。

鉴定血型的实验报告一、实验目的本实验旨在通过血清学方法鉴定一个人的血型，以便了解其红细胞的抗原和抗体特性，以及输血或接受器官移植时的兼容性。

二、实验原理血型鉴定是基于抗原和抗体的特异性反应。

红细胞表面所携带的抗原与血清中的抗体相互作用，通过观察是否发生凝集反应来判断血型。

本实验将采用经典的ABO血型系统进行鉴定。

三、实验步骤1、准备试剂和器材：抗A抗体、抗B抗体、抗D抗体、生理盐水、微量移液器、离心机、试管、滴管等。

2、采集样本：使用微量移液器从受试者静脉中抽取50微升血液。

3、实验操作：a.将50微升血液分别加入抗A抗体和抗B抗体试管中；b.用生理盐水将试管中的血液稀释至100微升；c.用滴管缓慢加入5滴抗D抗体；d.摇匀后，观察凝集反应；e.用离心机分离血清和红细胞，观察结果。

4、结果记录：记录每个试管中的凝集反应情况，包括凝集颗粒的数量、颜色变化等。

5、结果分析：根据记录的凝集反应情况，判断受试者的血型。

四、实验结果与分析1、实验结果：在加入抗A抗体的试管中，受试者血液呈现凝集反应，形成明显的凝集颗粒；而在加入抗B抗体的试管中，血液未发生凝集反应。

2、结果分析：根据ABO血型系统的特点，受试者的红细胞表面可能携带A抗原，而未携带B抗原。

因此，可以初步判断受试者为A型血。

为了进一步确认血型，可以继续进行Rh血型等其他血型系统的鉴定。

五、结论本实验通过血清学方法成功鉴定了受试者的ABO血型为A型。

这一结果对于了解受试者的红细胞抗原和抗体特性，以及输血或接受器官移植时的兼容性具有重要意义。

在实际应用中，鉴定血型是确保医疗安全和有效治疗的关键环节之一。

红细胞血型系统课件一、引言红细胞血型系统是生物学和医学领域中的一个重要概念。

红细胞血型是指红细胞表面抗原的特异性，这些抗原在个体之间存在差异。

了解红细胞血型系统对于临床输血、器官移植、新生儿溶血病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。

本课件将介绍红细胞血型系统的基本概念、分类和应用。

简述血型的分类
1、冬至短信，收到就行；如果在忙，不回也行；我的祝福，知道就行；每天的你，幸福就行；记得回复，一条就行；冬至祝福看完之后，快乐就行。

根据红细胞表面有无特异性抗原来划分血型系统。

由于选择抗原不同，常见的划分方式为ABO 血型系统、Rh血型系统等。

根据ABO血型系统可划分为A、B、AB、O四种血型。

根据Rh血型系统可划分为Rh阳性、Rh阴性两种血型。

1、ABO血型系统：
（1）A型:血清中红细胞上抗B凝结原，只有A凝结原为A型血。

（2）B型:血清中红细胞上抗A凝结原，只有B凝结原为B型血。

（3）AB型:血清中A、B两种凝结原都具备为AB型血。

（4）O型:血清中无A、B两种凝结原的为O型血。

2、Rh血型系统：
（1）Rh阳性：人体血液红细胞上具有恒河猴同种抗原的为Rh阳性。

（2）Rh阴性：人体血液红细胞上无恒河猴同种抗原的为Rh阴性。

除上述常见类型外，还存在极少数的稀有血型，如：P血型、MNS血型、KIDD血型、LEWIS血型、DUFFY血型等。

ABO和Rh (D）血型鉴定操作规程（盐水法）一．目的规范ABO/Rh （D) 血型鉴定的操作流程;保证临床用血的安全性及有效性。

二．职责血库技术人员负责ABO和Rh (D）血型鉴定。

三．适用范围适用于血库ABO和Rh（D）血型鉴定血标本。

四．所需材料和设备1。

材料抗—A、抗—B、抗—D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。

2.设备普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机。

五．操作步骤1。

将标本2000r/分钟离心2分钟,使标本血浆/血清与红细胞分离，并吸取红细胞配制3％悬液。

2。

取小试管3支，分别标明-A、抗-B、抗-D，用滴管分别加抗—A、抗—B、抗—D试剂各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3％红细胞悬液1滴，混匀。

3.另取小试管3支,分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部,再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细胞悬液1滴，混匀.4。

以1000r/分钟离心1分钟.5。

将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。

6. ABO血型结果判定（见下表)：ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞（正定型）受检者血清+试剂红细胞(反定型）抗-A 抗—B A细胞 B细胞 O细胞血型注:“＋" 凝集；“－" 不凝集7.Rh（D）血型判定: 红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性无凝集为Rh阴性。

8.凝集强度判断标准：4+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明；3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；2+ 红细胞凝块分散成许多小块,背景可见到游离红细胞；1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞；±镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集(Mixed Field， MF）是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布;－（阴性）镜下未见凝集,红细胞均匀分布。